学术投稿

肝素微生物生产展望

陈祥娥;凌沛学

关键词:heparosan, 肝素, 微生物发酵
摘要:肝素作为重要的抗凝血药物在临床中广泛应用.近年来,动物来源肝素的质量问题成为人们关注的焦点,研究开发非动物源性肝素的大规模生产方式成为一大热点.采用与肝素生物合成前体具有相似结构的细菌荚膜多糖heparosan作为底物,已成功合成肝素、硫酸乙酰肝素,并获得多种具有肝素相关功能的肝素衍生物,是一种较有希望的非动物源性肝素生产方式.本文对此进行综述.
中国生化药物杂志相关文献
  • 银杏叶提取物对大鼠肺成纤维细胞表达CTGF和α-SMA的影响

    目的 观察银杏叶提取物(GBE)对大鼠肺成纤维细胞表达CTGF和α-SMA的影响.方法 大鼠气管内一次性滴注博来霉素制备肺纤维化模型,原代培养大鼠肺成纤维细胞,分为4组:对照组、GBE 25,50,100 mg/L组,共培养24 h,采用免疫细胞化学法和流式细胞技术检测GBE对各组细胞表达CTGF和α-SMA的影响.结果 与对照组比较,50,100 mg/L组细胞表达CTGF和α-SMA依次降低,各组间比较有统计学意义(P<0.05).结论 银杏叶提取物能部分抑制大鼠肺成纤维细胞的表型转化.

    作者:李铭;袁保东;廖红;程恒辉 刊期: 2012年第04期

  • 龙心素胶囊质量标准提高研究

    目的 研究提高龙心素胶囊的质量标准.方法 用蚓激酶活性测定替代原标准第1项化学显色鉴别.引入蚓激酶标准品,采用生物统计的量反应平行线法统计计算效价,并对效价测定的琼脂糖纤维蛋白平板法进行了方法学研究.结果 新的鉴别方法能反应蚓激酶的活性特征.效价测定的线性范围为8 250 ~33 000 U/mL(r=0.9986),精密度RSD为4.71%;重复性RSD为6.54%;平均回收率(n=9)94.63%,RSD为7.69%;不同的溶剂对效价测定影响较小,阴性对照无干扰;供试品溶液在4℃下72 h内稳定.结论 提高后的质量标准专属性强,准确性高,可控制测定方法的误差,能更有效地控制龙心素胶囊的质量.

    作者:张利;赵军;赵钐妤 刊期: 2012年第04期

  • 辣椒素对高脂血症豚鼠肝脏胆固醇和甘油三脂的影响

    目的 探讨辣椒素对实验性高脂血症豚鼠肝脏胆固醇(TC)和甘油三脂(TG)的影响.方法 48只豚鼠随机分为正常对照组、模型组、辣椒素高剂量组( 10 mg/kg)、中剂量(5 mg/kg组)、低剂量组(2.5 mg/kg)、辛伐他汀组( 1.5 mg/kg).除正常对照组给药予普通饲料外,其余各组给予高脂饲料,造模同时给药,正常对照组每日灌胃给予等体积的生理盐水,其余灌胃给予相应剂量的药物,1次/d,共14周.实验14周末,处死动物,取肝脏检测其中TC、TG含量.结果 模型组豚鼠肝脏TC、TG含量均高于正常对照组(P<0.01),给予辣椒素后,豚鼠肝脏TC、TG含量均有不同程度下降,明显低与模型组(P <0.05或0.01).结论 辣椒素能显著降低实验性高脂血症豚鼠肝脏TC、TG含量,对肝脏有保护作用.

    作者:孟立科;杨思远;刘琳;何映金 刊期: 2012年第04期

  • 板栗中蛋白质的分离鉴定及活性研究

    目的 探讨板栗中蛋白质的分离纯化及其促肾细胞生长作用和抗肿瘤作用及机制.方法 从板栗中提取出的水溶性蛋白质,经鉴定是欧栗球蛋白(CAS).利用MTT法检测该蛋白对正常肾细胞和肝癌细胞HepS,小鼠肉瘤S180腹水型肿瘤细胞增殖的影响;检验其对小鼠T细胞和B细胞增殖作用的影响;用DNA电泳方法检测该蛋白诱导HepS细胞凋亡的作用.结果 CAS在体外对正常肾细胞的增殖有促进作用,对试验的肿瘤细胞的增殖均有抑制作用,对T细胞和B细胞的增殖有促进作用,对HepS细胞具有诱导凋亡的作用.结论 CAS具有促肾细胞生长和抗肿瘤作用,其抗肿瘤作用机制可能通过提高机体免疫力和诱导细胞凋亡来实现.

    作者:李艳;张太平;张鹤云 刊期: 2012年第04期

  • 中青年血清高敏C反应蛋白浓度与冠心病相关性分析

    目的 探讨中青年血清高敏C反应蛋白(hs-CRP)浓度与冠心病的关系.方法 来我院体检中心体检的中青年4320名,检测血清hs-CRP及其他生化指标,比较hs-CRP≤3 mg/L和>3 mg/L及联合血脂等生化指标共同检测与冠心病发病的相关性.结果 hs-CRP>3 mg/L的有997例,患冠心病的有31.9%,明显高于hs-CRP≤3 mg/L组的9.4%.hs-CRP与TC同时增高者患冠心病的达52.6%,明显高于单纯hs-CRP增高组(11.2%)及单纯TC增高组(14.0%)(P<0.01).两组问总胆固醇、甘油三脂、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、血糖和尿酸等指标均有显著差异(P<0.01),且随着年龄的增长,除低密度脂蛋白胆固醇降低外,其他指标均增加,与吸烟、饮酒、体质指数等密切相关.结论 中青年hs-CRP升高与冠心病呈正相关,是其独立危险因素.但联合脂类等有关指标,早期预测冠心病更有临床价值.

    作者:张涛;马贺骥;塔方欣;祝春梅 刊期: 2012年第04期

  • 应用中空纤维柱和凝胶色谱纯化鸡胚流感病毒

    目的 研究鸡胚尿囊腔培养流感病毒的纯化方法.方法 采用中空纤维柱超滤、病毒裂解和两次Sepharose 4FF凝胶色谱纯化流感病毒.结果 通过中空纤维柱超滤可去除76.53%~93.66%卵清蛋白,再通过两次Sepharose 4FF凝胶色谱纯化,流感病毒样品总蛋白含量与血凝素含量比值小于4.5,卵清蛋白含量小于500 ng/mL,SDS-PAGE电泳和Western免疫印迹的电泳条带和血凝素特异性条带与英国国家生物制品检定所(NIBSC)的标准品一致.结论 该工艺纯化的流感病毒的纯度符合《中国药典》2010版的要求.

    作者:杨欣;刘杰;刘瑛;吴永林;范凤鸣;刘辉;张鹏艳;李玉华 刊期: 2012年第04期

  • 热疗与阿霉素碘油化疗栓塞对兔VX2肝种植瘤生长及血管生成的影响

    目的 观察热疗联合阿霉素碘油化疗栓塞对兔VX2肝种植瘤生长及血管生成的影响.方法 用日本大耳白兔建立VX2肝种植瘤模型,随机分为5组,每组8只,分别为生理盐水组(A组)、碘油组(B组)、热疗组(C组)、阿霉素加碘油组(D组)、热疗联合阿霉素加碘油组(E组).治疗后1周CT扫描观察各组肿瘤体积;血清生化检测AST、ALT水平;免疫组化检测残存肿瘤区微血管密度(MVD)、血管内皮生长因子(VEGF)表达情况.结果 治疗后1周,各治疗组肿瘤生长均受到限制,E组肿瘤体积及生长率与其他组相比有显著差异(P<0.05).E组血清AST、ALT水平与B、D组相比无显著差异(P>0.05),与A、C组比较有显著差异(P<0.05).E组残存肿瘤区MVD、VEGF表达低,明显低于其他组各组(P<0.05).结论 热疗联合阿霉素碘油栓塞兔VX2肝种植瘤可明显抑制肿瘤生长并抑制残存肿瘤区血管生成.

    作者:翟凤馨;郑石磊 刊期: 2012年第04期

  • 骨髓间充质干细胞移植在治疗肝硬化中的临床疗效研究

    目的 探讨骨髓闻充质干细胞移植在肝硬化治疗中的临床应用价值.方法 将我院收治的58例肝硬化患者,随机分为治疗组和对照组,每组29例.比较术后两组肝功能指标及凝血指标、腹水等客观指标及食欲、体力、腹胀等主观指标的差异.结果 术后治疗组血浆白蛋白( ALe)、总胆红素(TBIL)以及凝血酶原时间(PT)与对照组比较差异有统计学意义.术后治疗组腹胀改善、食欲改善、体力改善等情况均优于对照组(P<0.05).结论 采用自体骨髓源性干细胞移植术治疗肝硬化可对患者肝功能、主观感受有一定程度改善作用.

    作者:罗仪;王辉;巫贵成;刘书宏;谭建国 刊期: 2012年第04期

  • HPLC法同时测定二妙丸中黄柏碱、木兰花碱、药根碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的含量

    目的 建立二妙丸中黄柏碱、木兰花碱、药根碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的含量测定方法.方法 采用高效液相色谱法同时测定二妙丸中黄柏碱、木兰花碱、药根碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的含量.色谱柱为phenomenex Luna C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相A:乙腈,流动相B:0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液-0.2%三乙胺溶液(磷酸调pH 3.0),梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,检测波长为284 nm.结果 在一定浓度范围内,黄柏碱、木兰花碱、药根碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱峰面积与浓度呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为98.09%,98.04%,99.75%,102.74%和104.84%,RSD分别为1.04%,1.36%,0.14%,1.83%和0.62%.结论 该方法简便准确,专属性强,可作为二妙丸质量控制方法.

    作者:潘超;张莉;王玉 刊期: 2012年第04期

  • 异甘草酸镁治疗肾综合征出血热肝损害的疗效

    目的 观察异甘草酸镁注射液在伴发肝损害的肾综合征出血热患者中的疗效.方法 100例伴发肝损害的肾综合征出血热患者随机分为两组,对照组予补液、利尿等内科综合治疗;治疗组在内科综合治疗基础上,予异甘草酸镁注射液静脉滴注.常规生化检测肝、肾功能,同时记录两组患者治疗过程中症状、体征变化、出现的不良反应情况以及住院时间等.结果 治疗后,治疗组患者血清丙氨酸氨基转移酶迅速下降,住院时间缩短,与对照组相比差异有统计学意义.结论 异甘草酸镁注射液能够有效的治疗肾综合征出血热的肝脏损害.

    作者:周文兴;吕国良 刊期: 2012年第04期

  • 氯吡格雷与肝素合用抑制大鼠动脉粥样硬化

    目的 研究抗血小板药物氯吡格雷、肝素及两药合用对实验性大鼠动脉粥样硬化的影响.方法 雄性SD大鼠75只随机分为正常对照组、模型对照组、肝素组、氯吡格雷组、氯吡格雷与肝素合用组,每组15只.除正常对照组外,其余4组建立高胆固醇饲料诱发的动脉粥样硬化模型.测血清血脂和C反应蛋白(CRP)浓度.观察主动脉组织病理形态学并定量分析病变程度,免疫组织化学方法测定斑块部位的巨噬细胞百分含量.结果 肝素能够降低总胆固醇、甘油三酯水平,而氯吡格雷对血脂水平影响不大;肝素和氯吡格雷均能明显减轻动脉粥样硬化病变,降低血清CRP浓度,减少巨噬细胞阳性细胞百分率,联合用药作用明显增强(P<0.05),两药之问差异无显著性(P>0.05).结论 氯吡格雷与肝素均对动脉粥样硬化有抑制作用,但联合使用效果更好.

    作者:陈斗仁;杜莉婷 刊期: 2012年第04期

  • 七叶莲不同溶剂提取部分的抗炎镇痛作用

    目的 探讨七叶莲不同溶剂提取部分的抗炎镇痛作用.方法 采用醋酸扭体法、小鼠耳二甲苯致炎法、肿胀法等方法评价七叶莲不同提取部分的抗炎镇痛效果,并明确其抗炎镇痛有效部分.结果 七叶莲叶挥发油可明显减少小鼠醋酸所致的扭体次数,可明显缓解小鼠二甲苯所致的耳廓肿胀;七叶莲茎水提液氯仿部分、正丁醇部分也可减少小鼠醋酸所致扭体次数,有效缓解小鼠二甲笨所致的耳廓肿胀和角叉菜胶所致的足趾肿胀.结论 七叶莲抗炎镇痛药理作用的有效部分主要集中在叶挥发油部分、茎水提液的氯仿部分和正丁醇部分.

    作者:林小凤;张慧;隋臻;罗格莲;许瑞安 刊期: 2012年第04期

  • 左卡尼汀对维持性透析患者心功能和血C反应蛋白的影响

    目的 探讨左卡尼汀对维持性血液透析患者心功能和C反应蛋白(CRP)的影响.方法 维持性透析患者120例随机分为治疗组和对照组,对照组给予常规血液透析治疗,治疗组在对照组治疗基础上于透析结束后缓慢静脉注射左旋卡尼汀1 g/次,2次/周,疗程3个月.观察2组患者治疗前后心功能改善情况,左心室射血分数(LVEF)、二尖瓣前向血流E峰与A峰比值(E/A)、心排出量(Co);血CRP,并进行比较.结果 治疗组血CRP较治疗前和对照组治疗后明显下降;LVEF、Co、E/A较治疗前和对照组治疗后明显提高.结论 左卡尼汀可以改善维持性透析患者心功能,降低血CRP.

    作者:刘忆;段宝奇;陶静 刊期: 2012年第04期

  • 玻璃酸钠联合复方倍他米松对膝骨关节炎的疗效观察

    目的 观察玻璃酸钠联合复方倍他米松对膝骨关节炎的治疗效果.方法 选择2010年3月-2012年2月就诊于我院的120例膝骨关节炎患者,随机分为2组:观察组和对照组,每组60例.观察组:关节腔内注射玻璃酸钠1次/周,共5周,前2周同时注射复方倍他米松;对照组:每周关节腔内注射玻璃酸钠1次;5周后比较2组患者的疗效.结果 观察组的达优比率(45.0%)和达良比率(28.3%)均明显高于对照组(P<0.05),2组均无明显不良反应.结论 玻璃酸钠联合复方倍他米松关节腔内注射对膝骨关节炎疗效显著,无明显不良反应.

    作者:杨贵生;吴吉元 刊期: 2012年第04期

  • 发酵法生产还原型谷胱甘肽的研究进展

    谷胱甘肽是一种含有巯基的活性三肽化合物,已广泛应用于医药、食品和化妆品行业中.此文从发酵、分子水平和分离纯化三个方面综述了微生物发酵法生产谷胱甘肽的研究概况,并对发酵法生产谷胱甘肽的发展前景进行了展望,旨在为谷胱甘肽在发酵生产方面的研究提供参考.

    作者:董坤;朱希强;王凤山 刊期: 2012年第04期

  • 透明质酸寡糖与肿瘤多药耐药相关性的研究进展

    透明质酸寡糖(o-HA)对不同的肿瘤有不同的作用,其机制也不同.o-HA可以逆转肿瘤细胞的多药耐药性(MDR),抑制糖蛋白的表达,干扰糖蛋白介导的药物外排泵发挥作用,增加抗肿瘤药物在耐药细胞中的蓄积,从而增强疗效.o-HA可以诱导肿瘤细胞发生凋亡,从而使肿瘤细胞恢复对化疗剂的敏感性.o-HA与肿瘤及肿瘤细胞的MDR作用有一定的相关性,且可减弱肿瘤细胞的MDR,具有开发为增敏剂的可能.本文对o-HA肿瘤及肿瘤细胞MDR相关性的进展进行综述.

    作者:郗红娟;靳岚;王凤山;郭学平 刊期: 2012年第04期

  • 高效液相色谱法测定两种岩陀中岩白菜素的含量

    目的 采用高效液相色谱法测定岩陀中岩白菜素的含量.方法 色谱柱为Hypersil C18柱(4.6 mm ×250mm,5μm),流动相为乙腈-水(10∶90),检测波长为274 nm,柱温25℃.结果 岩白菜素的线性范围为0.049 21~3.396 8 μg,r =0.999 8,加样回收率为99.8%,RSD为1.18%(n=9).结论 本文所建立的方法简单、准确、可靠、重复性好,可用于岩陀中岩白菜素的含量测定.

    作者:彭朝霞;杨朝莲;熊然英;晏祥杰 刊期: 2012年第04期

  • CTB-Aβ42融合蛋白的原核表达条件优化及鉴定

    目的 探索融合基因CTB-Aβ42在大肠杆菌中表达的适条件,并纯化得融合蛋白.方法 设置不同的诱导温度、诱导时间、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)浓度,在大肠杆菌中表达融合基因CTB-Aβ42,SDS-PAGE凝胶电泳鉴定表达产物,GST亲和色谱柱纯化目的蛋白,Western blot鉴定目的蛋白免疫原性.结果 SDS-PAGE结果显示,GST-CTB-Aβ42融合蛋白分子质量约为45 kD,与预期结果一致;Western blot结果表明,纯化得到的目的蛋白具有免疫原性.在诱导条件为30℃,0.1 mmol/L IPTG诱导2h表达的可溶性蛋白所占比例高;在37℃,0.1mmol/L IPTG诱导4h表达的融合蛋白总量高,小部分可溶性表达,大部分以包涵体的形式存在.结论 本实验对CTB-Aβ42融合蛋白的原核表达条件进行了优化,经GST亲和色谱柱纯化获得具有免疫原性的融合蛋白.

    作者:程晶晶;潘斯科;钟云平;张涵铭;王驰;余帅;于威;李司 刊期: 2012年第04期

  • 胞磷胆碱钠的葡萄糖注射液和氯化钠注射液的灭菌稳定性

    目的 研究3种规格胞磷胆碱钠葡萄糖注射液(CG)和4种规格胞磷胆碱钠氯化钠注射液(CS)的灭菌稳定性,为选择适宜灭菌工艺提拱参考.方法 分别测定5种不同灭菌条件下,灭菌前后注射液的pH值、有关物质及340和700 nm波长处吸光度差值,并考察对小鼠的毒性.结果 灭菌后CG的pH值明显降低,吸光度差值增高,规格为0.5 mg/mL的CG在5种灭菌条件下、规格为2.5和2 mg/mL的CG在Fo >12灭菌条件下灭菌后,有关物质超过中国药典规定的限度.灭菌后CS的pH值有一定程度降低,吸光度差值不变,有关物质稍有增加,均未超过中国药典限度.两种输液灭菌后均未引起小鼠急性毒性反应.结论 0.5 mg/mL CG不适合采用终端灭菌法,2.5和2 mg/mL CG不宜选择过度杀灭法(F0 >12),可考虑采用残存概率法(8≤F0< 12)进行灭菌,但应保证产品灭茸后的SAL≤10-6.与CG相比,CS更适合制为大容量注射剂.

    作者:赵明;嵇杨;高锦;刘俊;程洋;赵春杰 刊期: 2012年第04期

  • 重组人转化生长因子β1原核表达及多克隆抗体制备

    目的 克隆人转化生长因子β1( TGF-β1)基因,原核表达TGF-β1蛋白,制备兔抗人TGF-β1多克隆抗体.方法 应用RT-PCR技术扩增人TGF-β1基因序列,构建pET-28a-TGF-β1重组质粒.转化至E.coli BL21( DE3)中,异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达.Western-blot检测目的蛋白的抗原性.免疫新西兰白兔,获得兔抗人TGF-β1多克隆抗血清.饱和硫酸铵盐析法纯化多克隆抗体,间接ELISA法检测多克隆抗体效价,Westernblot技术进行抗体特异性检测.结果 获得了TGF-β1编码序列和表达载体,目的蛋白主要存在于超声破碎后的包涵体中;经Western-blot检测目的蛋白存在抗原性;获得纯化的兔抗人多克隆抗体效价达1:10 000.结论 获得的兔抗人TGF-β1多克隆抗体效价较高,具有良好的特异性.

    作者:郭冉;刘洁婷;吴丹;刘海峰;初彦辉 刊期: 2012年第04期

中国生化药物杂志

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