金珉；王东进；左维嵩；陈俊；陈晔；姜杰；张婧
1 临床资料患者,男,29岁,因双眼视物模糊l周,于2012年4月1日来本院眼科就诊.患者近半年易发热、感染,牙龈偶有出血,皮肤不明原因易出现瘀斑.
作者：孙则红；王志学；赵俊华 刊期： 2013年第04期
目的:研究羧基化超顺磁性氧化铁纳米颗粒(SPIO)纳米粒子与anti-EMMPRIN单克隆抗体耦联的有效方法,考察不同pH条件下进行耦联反应的效率及anti-EMMPRIN-SPIO的粒径水平.方法:用EDC/sulfo-NHS法将anti-EMMPRIN单克隆抗体耦联到羧基化SPIO纳米粒子表面,用动态光散射法检测所得anti-EMMPRIN-SPIO的粒径,并用Bradford法和SDS-PAGE法分析不同酰胺化pH条件下的耦联效率.结果:通过EDC/sulfo-NHS的作用,anti-EMMPRIN单克隆抗体有效地耦联到羧基化SPIO表面.pH7.8时酰胺化的anti-EMMPRIN-SPIO纳米粒子的粒径小,为63.15 nm.pH6.8和pH7.3条件下酰胺化所得上清中的抗体含量较低,分别为1.943 2×10-4 g/L和3.511 1 × 10-4 g/L,SDS-PAGE凝胶图谱上可明显观察到pH6.8、pH7.3和pH7.8条件下所制备样品的谱带分别位于55 000和25 000.结论:EDC/sulfo-NHS法是anti-EMMPRIN单克隆抗体耦联于羧基化SPIO表面的有效方法.在pH6.8、pH7.3、pH7.8条件下酰胺化耦联效率较高,所制备的anti-EMMPRIN-SPIO粒径较小.pH值对EDC/sulfo-NHS介导的耦联反应的耦联效率及anti-EMMPRIN-SPIO的粒径有较大影响.
作者：刘琳；张小强；张宇；浦跃朴；尹立红；刘卉；徐靓；杨文倩；徐春雨 刊期： 2013年第04期
目的:研究miR-135a/b对肺癌耐顺铂细胞株A549/CDDP顺铂耐药的影响.方法:运用实时荧光定量PCR检测miR-135a/b在A549和A549/CDDP细胞株中的差异表达;MTT法检测转染后A549及A549/CDDP细胞对CDDP的敏感性;构建MCL1-3'-UTR荧光素酶报告质粒验证miR-135a/b的靶基因；Western blot检测转染前后细胞MCL1蛋白的表达差异；流式细胞术检测转染后耐药细胞对顺铂诱导凋亡的影响.结果:miR-135a/b在A549/CDDP细胞中表达量降低；在耐药株中上调miR-135a/b后显著增加细胞对顺铂的敏感性;荧光素酶实验证实MCL1是miR-135a/b的靶基因；抗凋亡蛋白MCL1在A549/CDDP细胞中呈高表达,上调miR-135a/b明显抑制耐药细胞中MCL1蛋白的表达；miR-135a/b显著增加A549/CDDP细胞对顺铂诱导的凋亡.结论:miR-135a/b通过靶向调控MCL1蛋白表达增加NSCLC细胞对顺铂的敏感性和凋亡.
作者：周丽；邱天竹；陈雯姣；朱伟；束永前；刘平 刊期： 2013年第04期
目的:构建含人类疱疹病毒6A亚型DR7基因的慢病毒,研究DR7基因表达对神经胶质瘤细胞U87增殖、迁移、侵袭能力的影响.方法:PCR扩增DR7基大,克隆至慢病毒载体pLenti6.3-MCS-IRES2-EGFP,构建pLenti6.3-DR7-IRES2-EGFP重组慢病毒载体,经293T细胞包装重组病毒转染至神经胶质瘤细胞U87,经blasticidin筛选建立稳定表达株,通过细胞增殖实验、细胞周期实验、细胞划痕及Transwell实验研究稳定表达DR7基因对U87细胞的增殖、迁移及侵袭能力的影响.结果:成功构建了pLenti6.3-DR7-6×His-IRES2-EGFP慢病毒表达载体,筛选了稳定表达DR7基因的U87-DR7-EGFP细胞株,CCK-8细胞增殖实验显示,稳定表达DR7基因的U87-DR7-EGFP细胞与阴性对照细胞U87-NC-EGFP、U87细胞相比,细胞增殖活性明显增高,差异具有统计学意义(P＜ 0.001).细胞周期检测发现U87-DR7-EGFP细胞S、G2/M期细胞所占比例多于U87-NC-EGFP、U87细胞:S期的比例分别为(34.73±1.12)％、(24.89±0.93)％、(25.39±0.96)％,差异具有统计学意义(P＜ 0.001)；G2/M期分别为(17.35±1.61)％、(11.36±1.50)％、(13.17±1.95)％,差异具有统计学意义(P＜0.05).细胞划痕实验表明,U87-DR7-EGFP细胞愈合能力明显强于U87-NC-EGFP、U87细胞,划痕6h愈合率分别为:(33.55±2.83)％、(23.50±3.18)％、(22.03±1.47)％,差异具有统计学意义(P＜ 0.01)；划痕12h愈合率分别为(70.50±5.39)％、(53.60±4.67)％、(55.09±2.83)％,差异具有统计学意义(P＜ 0.001).Transwell实验表明,U87-DR7-EGFP细胞的穿膜数量明显多于U87-NC-EGFP、U87细胞,分别为:(543.00±22.94)、(387.00±15.63)、(412.00±20.30)个,差异具有统计学意义(P＜ 0.001).结论:人类疱疹病毒6A亚型DR7基因表达能在体外促进人神经胶质瘤细胞U87增殖、迁移及侵袭,提示其在神经胶质瘤的发生和发展中可能起一定作用.
作者：李猛；顾斌；王金凤；周锋；李凌云；李俊漾；张国锋；幸标；张寒 刊期： 2013年第04期
目的:评价无支撑回肠造口在低位直肠切除术中应用的安全性和有效性.方法:回顾性分析2007年10月～2010年12月南京中医药大学第三附属医院全国肛肠医疗中心对67例采用无支撑的回肠造口术的临床资料.结果:本组患者平均年龄54岁,14例(20.8％)出现术后并发症.7例(10.4％)患者造口出现水肿,未经特殊处理,约2周后恢复正常；4例(5.9％)患者出现造口周围皮肤炎,经对症治疗后好转；2例(3.0％)患者出现造口旁疝,1例(1.5％)患者于术后4个月时出现造口脱垂,未进行特殊处理；未发生造口回缩.结论:本组较大样本、较长的随访时间证实无支撑回肠造口具有制作简单、安全性好、粪便转流彻底、并发症少、易于护理、易于还纳等优点,具有良好的安全有效性,可较好地应用于低位结肠肛管吻合术中的预防性回肠造口,而且造口还纳后的并发症低于文献报道.
作者：周峰；张春霞；杜永红；王水明；何勇山；周阿成；金黑鹰 刊期： 2013年第04期
目的:探讨膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP/MMP-14)在骨性关节炎(OA)患者膝关节滑膜中的表达和意义.方法:应用免疫组化和Western blot方法检测MT1-MMP蛋白在40例OA与40例非OA患者滑膜中的表达情况.结果:免疫组化结果表明MT1-MMP蛋白在OA与非OA患者滑膜中的表达有显著性差异(x2=29.46,P＜0.01),且阳性表达多定位于滑膜细胞的胞质；Western blot分析结果显示MT1-MMP蛋白在OA患者滑膜(1.042±0.219)中表达显著高于非OA患者滑膜组织(0.256±0.050,F=12.838,P=0.001).结论:MT1-MMP蛋白与骨性关节炎发生发展相关,可能作为诊断及判断骨性关节炎的一项重要指标.
作者：张杰；王维山；董金波；杨坚；阿仁豪；史晨辉 刊期： 2013年第04期
目的:分析原发性开角型青光眼(POAG)患者术前及术后1个月焦虑抑郁情况的影响因素.方法:收集POAG患者83例,分别在抗青光眼手术前采用低视力者生存质量量表(LVQOL)、汉密尔顿焦虑量表(HAMA)及汉密尔顿抑郁量表(HAMD)、家庭支持量表进行测试,术后1个月采用HAMA、HAMD和LVQOL进行测试.正常人83例作为对照组,采用HAMA、HAMD进行测试.评价POAG患者术前及术后1个月焦虑和抑郁的伴发率,并对年龄、性别、家庭支持、文化程度等影响因素进行分析.结果:83例POAG患者,术前焦虑及抑郁的伴发率分别为59.0％和30.1％,术后1个月焦虑及抑郁的伴发率分别为20.5％和15.7％.对照组焦虑及抑郁的伴发率分别为8.4％和4.8％.男性、家庭支持高者,术前HAMA评分低;男性、年龄小、术前生活质量高、家庭支持高者,术前HAMD评分低.Logistic回归分析显示,年龄、生存质量是术后1个月焦虑情绪的影响因素(P=0.027,P=0.009)；生存质量是术后1个月抑郁情绪的影响因素(P=0.047).结论:POAG患者术前、术后1个月发生焦虑、抑郁为多种影响因素共同作用的结果,应引起临床医师重视,尽早给予心理干预.
作者：谢瞻；袁志兰 刊期： 2013年第04期
目的:探讨甲状腺髓样癌(medullary thyroid carcinoma,MTC)高频超声表现特点和病理特征,以期提高对该病的诊断准确性.方法:回顾性分析经临床手术病理证实的20例MTC患者的临床资料,分析其高频超声表现并与病理特点作对照研究.结果:肿块侵及一侧甲状腺16例,位于甲状腺中上极17例.高频超声表现为不均匀回声者8例,病理表现为镜下见囊性变坏死或肿块内部分有正常的甲状腺组织；回声均匀者16例,光镜下见肿瘤细胞呈实性及索状排列.表现为低回声团块者18例,光镜下间质内可见不等的纤维组织增生.内部可见钙化点者18例,镜下多可见淀粉样物在间质内沉着.而伴淋巴结转移的8例患者病理表现转移淋巴结与原发肿瘤呈现“子母瘤”样改变.结论:MTC多位于腺体中上部,多发生于甲状腺1叶,常伴有淋巴结转移.高频超声多表现为圆形或类圆形均匀低回声肿块,边界不清楚,常发生粗大钙化.高频超声可作为甲状腺髓样癌的首选物理诊断方法.
作者：蒋骁；周锋盛；丁炎；吴鹏西 刊期： 2013年第04期
目的:探讨稳定期慢性阻塞性肺病(COPD)患者健康状态与CAT量表(COPD assessment test)的相关性.方法:采用横断面调查的方法,对104例稳定期COPD患者进行一般资料、CAT评分、Charlson合并症指数、mMRC评分的调查及6MWD和肺功能的检查,采用相关分析和回归分析.结果:CAT评分与FEV 1％pred、6MWD、mMRC评分间均呈显著相关性(P＜0.01).逐步回归模型为:CAT评分=30.11+3.00×mMRC呼吸困难评分+0.002×急性加重频率-0.03×6MWD(r2=0.67,P＜0.001).结论:CAT量表可以客观真实地反映COPD患者的健康状态,急性加重频率严重影响患者的健康状态.
作者：陈秀利；孙培莉；尤玲燕；黄茂；殷凯生；刘扣英 刊期： 2013年第04期
目的:探讨sigma-1(σ1)受体对情绪行为的调节作用.方法:采用旷场试验、悬尾试验、强迫游泳试验和Y迷宫的检测方法,分析5月龄雌和雄σ1受体基因敲除(σ1受体-KO)小鼠的抑郁样行为.用放射性免疫技术检测血浆的雌二醇和睾酮水平.结果:与野生型(WT)雄鼠相比,σ1受体-KO雄鼠在旷场中央区的运动时间明显减少,在悬尾试验和强迫游泳中的不动时间显著延长,在Y迷宫Novel臂的时间减少.但是,σ1受体-KO雌鼠的雌二醇水平和σ1受体-KO雄鼠的睾酮水平与对照组相比都没有改变.结论:σ1受体-KO诱发的抑郁样行为是雄鼠特异性的,可能与雌激素的抗抑郁作用有关.
作者：瞿伟骏；沙莎；陈玲 刊期： 2013年第04期
目的:探讨京尼平(Genipin)对肾癌是否有治疗作用,该治疗作用是否与线粒体解偶联蛋白2(UCP2)相关.方法:将0、40、80和120 μmol/L 4种浓度的Genipin溶液分别浸染肾癌细胞48 h,MTT法和流式细胞术检测细胞的增殖和凋亡情况;聚合酶链反应和ELISA方法检测UCP2的基因和蛋白表达；使用荧光探针检测细胞内钙离子和活性氧分子(ROS)含量.结果:Genipin在中、高剂量组能明显抑制肾癌细胞的增殖并促进细胞的凋亡,随着给药浓度的增加,细胞增值抑制作用及细胞凋亡率逐渐增高(P＜ 0.005).Genipin能抑制肾癌细胞中UCP2的表达,在中、高剂量给药组,UCP2的基因及蛋白的表达显著抑制(P＜0.05).Genipin能提高细胞内钙离子和ROS的含量,在中、高剂量给药组出现了显著提高(P＜0.05).结论:Genipin能明显抑制肾癌细胞的增殖,促进其凋亡,UCP2可能参与其作用机制.
作者：杨永安；谷江；张永春；王楠；朱致晖；杨清涛；祝庆亮 刊期： 2013年第04期
目的:分析2009～2011年南京医科大学第一附属医院分离的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯杆菌(CRKP)的流行状况及其携带的整合子的特征、基因盒的种类.方法:细菌鉴定用VITEK2compact全自动鉴定系统或API细菌鉴定系统;细菌药敏试验采用纸片扩散法(K-B法)；根据CLSI2012 M100-S22判读结果；聚合酶链反应(PCR)检测Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ类整合酶基因及Ⅰ类整合子可变区基因盒.结果:2009～2011年本院耐碳青霉烯类肺炎克雷伯杆菌的分离率显著增高,从1.6％增至11.2％；分离的菌株中对β-内酰胺类药物耐药率均高于95.0％；整合子阳性率为92.6％,均为Ⅰ类整合子,整合子可变区阳性率为78.7％,检测到的基因盒以aadA2为常见,其次为aacA4-catB8-aadA1及aadA2+ dfrA25.结论:本院CRKP的分离率增长迅速,Ⅰ类整合子在CRKP中普遍存在,有较强的从外周捕获耐药基因的能力;建议采取有效措施控制CRKP的传播.
作者：徐艳玲；顾兵；黄茂；刘海燕；梅亚宁；王彤 刊期： 2013年第04期
目的:分析先天性耻骨前窦道的发病率、病因、临床表现和治疗要点,提高对该病的认识及诊疗水平.方法:回顾分析本院自2008年1月～2012年8月收治的9例先天性耻骨前窦道的男性患儿.患儿均表现为阴茎根部至耻骨前区皮肤瘘口,可探及沿腹壁中线向上内方窦道.6例患者合并有窦道开口处黄白色豆腐渣样分泌物,2例合并阴茎背曲.结果:所有患儿均给予手术完整切除窦道.选择阴茎背侧根部窦道前腹壁纵行切口,给予瘘管内美兰注射显露瘘管走行,证实9例瘘管与膀胱尿道均无相连,3例窦道终止于耻骨联合上,6例终止于耻骨联合下.测得窦道平均长度(4.2±1.3)cm,直径0.3～0.8 cm.手术顺利,术中无阴茎血管神经束损伤,术后无瘘管复发,无反复尿路或皮肤感染.术后病理提示管腔内附复层鳞状上皮者5例,移行上皮者2例,可及管周平滑肌细胞者4例,较多淋巴细胞者3例.结论:先天性耻骨前窦道可能与先天性泌尿系统发育异常相关,手术切除可取得满意效果.
作者：陈琛君；马耿；郭云飞；陆如纲；葛征 刊期： 2013年第04期
目的:探讨产前超声检查对于胎儿丹迪-沃克综合征的诊断价值.方法:回顾性总结2007年1月～2011年7月在本院行超声检查的15例胎儿丹迪-沃克综合征的超声表现,并将检出的10例病例与病理结果比较.结果:15例胎儿均可见丹迪-沃克综合征的典型超声表现,小脑蚓部全部或部分缺失、第四脑室和后颅窝池增宽.其中11例中伴有:心脏畸形5例,胼胝体缺失6例,单脐动脉4例,手、足发育异常3例,肾脏发育不全2例,脊柱形态异常2例,脐疝1例,唇腭裂2例.10例引产后进行了尸检证实,13例经MRI证实.结论:产前超声检查对早期诊断胎儿丹迪-沃克综合征有重要价值.
作者：吴晶晶；曹荔；郭锡熔 刊期： 2013年第04期
目的:探讨西地那非对慢性心衰大鼠左室功能及对血清中转化生长因子-β1(TGF-β1)和心肌组织中羟脯氨酸(Hyp)含量的影响.方法:雌性SD大鼠随机分为对照组、心衰组、西地那非治疗组,每组7只.对照组大鼠为正常大鼠；心衰组腹腔注射阿霉素制作心衰模型；西地那非治疗组为心衰造模成功后给予西地那非21 mg/(kg·d)灌胃,连续4周；心衰组与对照组大鼠给予安慰剂(1 ml蒸馏水)灌胃,连续4周.造模10周后心脏超声分别测定各组大鼠左室舒张末期内径(LVDd)、左室收缩末期内径(LVDs)、左室射血分数(EF)、左室短轴缩短率(FS)；酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测各组大鼠血清中TGF-β1的水平,Hyp试剂盒检测各组大鼠左室心肌组织中胶原蛋白的含量.结果:心衰组与对照组和西地那非治疗组比较,LVDs、LVDd及血清中TGFβ-1水平明显升高(P＜ 0.01)；EF、FS明显降低(P＜ 0.01)；心衰组大鼠左室心肌组织Hyp含量明显升高,与对照组相比,P＜ 0.01,与治疗组相比,P＜ 0.05.结论:西地那非可改善慢性心衰大鼠的左室舒缩功能,降低血清TGF-β1水平和减少心肌组织中胶原的沉积.
作者：高辉德；邵东华；束微微；杭黎华；陈正 刊期： 2013年第04期
目的:分析肥胖对男性2型糖尿病患者不同部位骨密度的影响.方法:收集199例男性2型糖尿病患者,运用双能X线骨密度仪测量受试者腰椎(L1～4)和股骨部(股骨颈、Ward's 三角、全髋)的骨密度.再根据体质指数、腰围进行分组对比,比较不同的肥胖类型对各部位骨密度的影响,并分析腰围、臀围、腰臀比、腰高比与骨密度的关系.结果:根据体质指数分组,肥胖患者各部位骨密度均显著增高.腰围≥90 cm的腹型肥胖患者腰椎各部位骨密度显著增加,而在股骨(股骨颈和Ward's三角)这种显著性差异消失；根据股骨颈的T值分组,发现骨质疏松组年龄更大、体重更轻、BMI更小、腰围更小、臀围更小.多因素相关分析显示各部位的骨密度均与身高、体重、BMI、腰围、臀围呈显著正相关,而仅股骨部位骨密度与年龄负相关.校正身高和体重后,股骨颈骨密度与腰高比和臀围负相关,Ward's 三角部位的骨密度与腰围、臀围、腰高比负相关.结论:2型糖尿病的男性患者股骨的骨密度与腹型肥胖负相关,提示腹型肥胖可能对2型糖尿病患者股骨骨密度有不良影响.
作者：孙军卫；唐伟；施广德；黄文龙；郭晓珍；郁卫刚；金晖 刊期： 2013年第04期
目的:观察汉黄芩素(wogonin)对人胶质瘤细胞株U87增殖和凋亡的影响,并初步研究miR-128在汉黄芩素影响U87细胞系中的作用机制.方法:汉黄芩素(浓度分别为25、50和100 μmol/L)作用于U87细胞24 h和48 h后,分别用荧光显微镜观察U87细胞形态,MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡.并采用qRT-PCR检测U87细胞中miR-128的表达.结果:汉黄芩素处理24 h和48 h后,U87细胞数量明显减少,细胞核固缩或裂解；MTT检测结果显示U87细胞的增殖受到汉黄芩素的抑制并且与药物的作用时间和剂量有关；流式细胞术检测显示汉黄芩素处理后的细胞其大量停留在S期,汉黄芩素作用胶质瘤细胞24h后活细胞比率下降,细胞死亡率增加.汉黄芩素处理后的U87细胞中miR-128的表达量较对照组明显增高.结论:汉黄芩素能抑制U87细胞的增殖,促进其凋亡,其机制与miR-128的上调可能有密切的相关性.
作者：陈望昊；王慧博；刘宁 刊期： 2013年第04期
目的:观察针灸治疗顽固性呃逆的临床疗效.方法:将60例门诊患者随机分为治疗组和对照组,每组30例,治疗组予以针灸治疗,对照组给予口服西沙必利胶囊治疗,治疗7d后观察疗效.结果:治疗组总有效率为96.67％,对照组总有效率为66.67％,两组疗效差异有统计学意义(P＜0.01).结论:针刺治疗顽固性呃逆的疗效优于口服西沙必利胶囊治疗.
作者：陈静雅；潘华山；冯毅翀；张蕊 刊期： 2013年第04期
目的:研究体外应用不同培养方法对所生成的破骨细胞数量及功能的影响.方法:体外采用3种方法培养破骨细胞:A组小鼠骨髓细胞中加入10 ng/ml巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)培养24 h,未贴壁细胞30 ng/ml M-CSF预诱导3d后,50ng/ml M-CSF+ 100 ng/ml核因子κB受体活化因子配体(RANKL)继续诱导；B组小鼠骨髓细胞与小鼠颅骨成骨细胞以10∶1的比例混合培养,加入1×10-6 mol/L前列腺素E2(PGE2)和1×10-8 mol/L维生素D3(VitD3)；C组小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7中加入100 ng/ml RANKL诱导培养.检测每组细胞抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色情况及牙本质磨片吸收陷窝情况,Real-timePCR检测各组破骨细胞NFATc1 、c-Fos表达情况.结果:各组细胞均有TRAP阳性多核破骨细胞生成,并在牙本质磨片上形成吸收陷窝.B组所形成的破骨细胞数量多,C组次之,A组少；B组骨吸收陷窝数目多,陷窝总面积大,A组其次,C组差；B组NFATc1、c-Fos表达高于C组及A组,A组表达差.结论:3种培养破骨细胞的方法相比较,B组在破骨细胞分化和吸收功能方面优于A、C组.A、C组相比较,A组培养的破骨细胞骨吸收功能更强,C组所培养的破骨细胞分化更佳.
作者：董伟；冯晓洁；戚孟春；梁永强；彭宏峰 刊期： 2013年第04期
目的:探讨缺血预适应(IPC)介导内皮祖细胞(EPCs)归巢对保留肾单位手术(NSS)后肾功能的保护作用.方法:SD大鼠随机分为对照组(sham)、保留肾单位组(NSS)、缺血预适应+保留肾单位组(IPC).术后24 h分别留取大鼠外周血、肾脏组织.采用血生化、病理学观察肾功能改变；免疫荧光观察3组大鼠肾组织中EPCs归巢情况；免疫组化技术检测肾脏微血管新生；QPCR检测血管生成因子mRNA表达.结果:IPC可显著降低大鼠血肌酐水平及肾小管损伤评分(P＜0.05),促进EPCs归巢至损伤肾脏组织.与sham组和NSS组相比,IPC组大鼠肾脏组织微血管新生显著增强(P＜0.05),且基质细胞衍生因子1(SDF-1)mRNA表达升高(P＜0.05).结论:IPC可介导EPCs归巢至损伤肾脏,后者可能通过释放血管生成因子,促进肾脏微血管新生,达保护肾功能之目的.
作者：刘昊；吴然；贾瑞鹏；朱佳庚；于澎；赵炎；葛余正；吴剑平；李文成 刊期： 2013年第04期
南京医科大学学报（自然科学版）杂志
主管:江苏省教育厅
主办：南京医科大学
