学术投稿

射干内生真菌SRAP-PCR反应条件的优化

罗琴;赵欢;彭正松;刘小红;钟钒;邓迪;谭秀梅

关键词:射干, 内生真菌, 相关序列扩增多态型标记, 单因素优化
摘要:以从射干中分离纯化出的96株内生真菌DNA为研究对象,采用单因素试验设计,对影响SRAP-PCR反应的DNA模板、Mg2+、dNTPs、Taq DNA聚合酶和引物对浓度进行了优化,以确定适合射干内生真菌的SRAP-PCR反应佳反应体系.结果表明,建立的射干内生真菌佳反应体系为20 μL,反应体系中含10×PCR buffer(不合Mg2)2.0 μL,DNA模板50 ng,Mg2+浓度为2.5mmol·L-1,dNTPs为0.5 mmol·L-1,引物1.0μmol·L-1,Taq DNA聚合酶1.5U.利用该反应体系从90对引物中筛选出可扩增清晰、稳定性好条带的引物38对.该体系为今后利用SRAP分子标记技术开展射干内生真菌的分子遗传学研究奠定基础.
时珍国医国药杂志相关文献
  • 《黄帝内经·素问》“精”字词义及英译探析

    《黄帝内经》是中华医药的瑰宝.文章在文献研究基础上归纳了上卷《素问》中138个“精”字的词义,并通过比较李照国和杨明山两位教授的英译本,提出“精”字的具体翻译方法,为在“一带一路”的大倡议下传播中华文化而努力.

    作者:黎金娥;周莉;桂念 刊期: 2018年第06期

  • 白藜芦醇对M1/M2巨噬细胞极化的作用及其机制

    目的 研究白藜芦醇对M1/M2型巨噬细胞极化以及M1/M2型巨噬细胞能量代谢的影响.方法 建立了骨髓来源巨噬细胞(BMDM)的体外培养模型.在BMDM以及Raw264.7细胞中加入白藜芦醇,应用RT-qPCR以及Western blot检测M1、M2型巨噬细胞的标志分子.应用细胞外流量测试仪检测白藜芦醇M1、M2型巨噬细胞能量代谢的影响.结果 白藜芦醇可以促进M2型巨噬细胞极化,抑制M1型巨噬细胞极化.白藜芦醇促进M2型巨噬细胞标志蛋白arginase1的表达,同时也会促进抗炎细胞因子IL-10的表达.LPS具有促进M1型巨噬细胞糖酵解的功能,而白藜芦醇可以抑制LPS引起的巨噬细胞糖酵解增加.结论 白藜芦醇作为天然产物之一,可通过抑制NO生成进而调控M1/M2型巨噬细胞的能量代谢,促进M2型巨噬细胞的极化.

    作者:金美玲;赖奕宏;敖英 刊期: 2018年第06期

  • 补肾抗衰片对动脉粥样硬化模型辅助性T淋巴细胞亚群的干预研究

    目的 研究补肾抗衰片对动脉粥样硬化模型兔辅助性T淋巴细胞亚群Th1、Th2、Th17的干预作用.方法 雄性新西兰兔,适应性喂养1周后,随机分为空白对照组、模型组、补肾抗衰组、阿托伐他汀组,除正常对照组给予普通饲料外,其余各组采用高脂饲料喂养法复制动脉粥样硬化模型.于高脂喂养4周末,补肾抗衰组给予补肾抗衰片1 g/kg,2次/日,阿托伐他汀组给予阿托伐他汀钙片5mg/kg,1次/日,正常对照组和模型组给予等量溶媒1次/日,连续干预8周后取材.采用全自动生化分析仪检测外周血TC、TG、LDL-C、HDL-C水平,HE染色观察主动脉病理形态学变化,Q-PCR法检测脾脏组织T-bet、GATA3、RORγt mRNA的表达;ELISA法检测血浆IFN-γ、IL-4、IL-17的水平.结果 补肾抗衰片可以减轻动脉粥样硬化模型动物粥样硬化病变的程度,可以降低Th1、Th17转录因子T-bet、ROR-γt及下游效应因子IFN-γ、IL-17的表达,而对Th2表达无明显的调节作用.结论 补肾抗衰片具有抗动脉粥样硬化的作用,其机制可能与其调节Th1、Th17的表达有关.

    作者:仲爱芹;辛颖;熊鑫;许晓敏;李艳阳;张宁;谢盈彧;王爱迪;田立俊;张军平 刊期: 2018年第06期

  • 保妇康栓和雌激素软膏联合治疗老年阴道炎糖尿病对患者阴道症状疗效及安全性的影响

    目的 探究保妇康栓与雌激素软膏联合治疗老年阴道炎糖尿病对患者阴道症状、疗效及安全性的影响.方法 选取2016年8月~2017年8月收治的62例老年阴道炎糖尿病患者临床资料进行分析,将行雌激素软膏单独治疗者作为对照组(31例),与此基础上加以保妇康栓治疗者作为研究组(31例),比较两组阴道症状评分、临床疗效及不良反应率.结果 研究组与对照组治疗4周后阴道症状各项评分均优于治疗前,且以研究组健康状况(16.71±4.13)分、炎症症状(0.77±0.81)分改善幅度更大(P<0.05);研究组治疗总有效率96.77%较对照组显著高(P<0.05);研究组与对照组不良反应总发生率无显著差异(P>0.05).结论 老年阴道炎糖尿病患者经保妇康栓与雌激素软膏联合治疗后可有效改善阴道症状,促进疗效提升,且药物不良反应程度轻,患者安全性得到保障,可推广.

    作者:兰瑞红;龚护民;王焰 刊期: 2018年第06期

  • 血府逐瘀胶囊对人微血管内皮细胞表达Dll4的影响

    目的 探讨血府逐瘀胶囊含药血清对体外培养的人微血管内皮细胞表达Dll4的影响.方法 12只SD大鼠随机分成血府逐瘀胶囊组和空白对照组,每组6只.分别制备血府逐瘀胶囊含药血清和空白血清.以2.5%浓度的血府逐瘀胶囊含药血清和空白血清分别干预人微血管内皮细胞-1(HMEC-1),通过实时定量PCR(Real-time PCR)检测药物处理细胞12,24,36,48 h时Dll4在mRNA水平的表达,通过蛋白免疫印迹(Western blot)检测药物处理细胞24,48,72 h时Dll4在蛋白质水平的表达.结果 血府逐瘀胶囊合药血清干预内皮细胞36 h能上调Dll4在mRNA水平表达(P<0.01),药物干预细胞48 h能同时上调Dll4在mRNA和蛋白水平表达.结论 血府逐瘀胶囊很可能通过调控Dll4表达,影响相关信号通路,从而调控血管新生.

    作者:王一铮;许晓玲;刘如玉;林晓晖;程欲 刊期: 2018年第06期

  • 中医学综合实验课PBL/案例教学的调查报告

    为评估中医学综合实验课程中PBL/案例教学法教学内容改革的成果,在课程结束后,向学生发放调查问卷,了解他们对教学质量的评价情况.结果表明,在收回的23份问卷中,100%的学生认为PBL/案例教学有助于提高批判性阅读的能力,培养对知识融会贯通的能力,培养提出问题、归纳问题、解决问题的能力,同时肯定了导师的引导作用,并对成绩考核方法予以认可;96%的学生认为有助于提高对知识融会贯通的能力及主动获取知识的能力;91%的学生认为有助于激发好奇心、调动主观能动性、培养创新和实验设计能力、培养团队学习的能力,但不认可PBL/案例教学形式,并认为教学条件尚不能很好满足教学的要求;表示喜欢本课程PBL/案例教学内容的学生占总人数87%;83%的学生表示提高了他们对中医药实验研发重要性的认识.

    作者:张园园;方肇勤;贾冬威 刊期: 2018年第06期

  • 艾叶挥发油-羟丙基-β-环糊精包合物的制备及鉴定

    目的 制备艾叶挥发油-羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)包合物并对其进行鉴定.方法 以挥发油利用率和回收率为指标,采用正交试验考察艾叶挥发油与HP-β-CD的比例、包合温度、包合时间和搅拌速度对包合工艺的影响.采用薄层色谱(TLC)和红外(FIR)对包合物进行鉴定.结果 佳包合工艺:挥发油/HP-β-CD为1∶10;搅拌速度为1000 r/min;包合温度为40℃;包合时间为2h;挥发油的平均利用率为83.1%,包合物收率为89.57%,TLC、FIR检测包合物已经形成.结论 表明该方法简单可行,具有一定的应用价值.

    作者:张志;张大委;高雪梅 刊期: 2018年第06期

  • 复方鹅绒藤巴布贴剂的制备工艺研究

    目的 为了筛选复方鹅绒藤巴布贴剂基质材料的种类、用量和优处方.方法 利用单因素和正交设计实验进行筛选,以剥离强度、剥离性、黏度、涂展性、均匀性、初黏力、黏度值、剥离强度等为评价指标,终筛选出巴布剂基质佳配比;利用Franz扩散池装置以1h、6h、12h的累积渗透率为指标,对透皮促进剂氮酮和丙二醇的比例和用量进行筛选.结果 巴布贴剂基质配比为NP-700:甘羟铝:浸膏:卡波姆=6:0.35:4:0.40;氮酮和丙二醇比例为1:1,总促透剂用量为5%时为佳.结论 以佳配比和透皮促进剂方案制备的复方鹅绒藤巴布贴剂性能良好,制备工艺可行、可靠.

    作者:李强;陈虹;应雪;刘江云;刘斐 刊期: 2018年第06期

  • 中医正骨手法联合康复训练改善颈型颈椎病患者CASCS评分、Berg平衡功能和疼痛程度效果观察

    目的 探讨中医正骨手法联合康复训练改善颈型颈椎病患者的临床价值.方法 选取120例颈型颈椎病患者作为研究对象,采用回顾性分析法分析所有患者的临床资料,根据其资料中其治疗方式不同将其分为对照组和观察组各60例,所有患者均予以颈型颈椎病常规临床对症治疗,对照组患者在此基础上进行康复训练,观察组患者在对照组治疗基础上联合中医正骨法治疗,两组患者均治疗20d,观察颈椎病临床评价量表(CASCS)评分、Berg平衡功能(BBS)以及疼痛情况,并比较两组患者其治疗后的临床疗效.结果 (1)治疗后两组患者其适应能力、临床体征及主观症状得分和总分均较治疗前升高,但观察组患者各方面得分升高程度均显著大于对照组(P<0.05);(2)治疗后两组患者其BBS评分较前均升高,而VAS评分较前均降低,但观察组患者其升高和降低程度均显著大于对照组患者(P<0.05);(3)观察组患者其治疗后的临床总有效率(96.67%)显著高于对照组患者其临床总有效率(80.00%)(P<0.05).结论 中医正骨手法联合康复训练可显著提高颈型颈椎病患者其CASCS和BBS评分,可明显改善患者疼痛状况,具有显著的临床疗效,值得作为临床上治疗颈型颈椎病患者的首选治疗方案.

    作者:盛伟;林敏 刊期: 2018年第06期

  • Ginsenoside Rb1对大鼠缺血海马VEGF及局部脑血流的影响

    目的 探讨人参皂苷Rb1(Ginsenoside Rb1,GS-Rb1)对缺血海马CA1区脑血流量(regional cortical blood flow,rCBF)及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的影响.方法 将72只健康雄性SD大鼠随机分为6组,每组12只.于术后4h腹腔注射不同药物.通过免疫组化法,免疫印迹法和激光多普勒仪检测手术后24h海马CA1区VEGF和rCBF的表达.结果 rCBF:GS-Rb1剂量依赖性的增加缺血后海马rCBF(P <0.05),其中以高剂量GS-Rb1组明显;VEGF免疫组化及Western blotting结果显示GS-Rb1剂量依赖性的增加VEGF的表达(P<0.05),尤其以高剂量GS-Rb1组显著,且与尼莫地平组相似.结论 GS-Rb1作为一种有效的神经保护药,可能是通过增加rCBF,并上调VEGF的表达而发挥作用.

    作者:赵丽琴;李晨;熊云霞;陆学海;郭英;杨春艳;罗海芸 刊期: 2018年第06期

  • 川续断种群生物量结构与动态变化特征

    文章对重庆产区分布的野生川续断资源进行了种群生物量结构和种群动态变化特征研究.研究表明:川续断各器官生物量分别是地上部>茎>块根>叶>果,生物量分配是地上部>茎>块根>叶>果,作为药用部分的块根仅占全株生物量的16.2%.用直线、幂函数和对数曲线方程拟合了川续断各器官生物量与株高的回归模型,拟合各个模型均能达到极显著水平.调查的45个样方中川续断资源总体处于不断减少的趋势,当前放牧是造成川续断资源减少的主要原因,同时旅游开发等经济生产活动和人工采挖也是造成川续断资源减少的因素,预计随着川续断价格上涨,川续断野生资源将进一步减少.

    作者:周益权;赵继峰;潘瑞;刘翔;瞿显友;危永胜 刊期: 2018年第06期

  • 基于属性偏序原理分析乌梅类方配伍规律

    目的 分析乌梅类方配伍规律及其特色.方法 以“中国方剂数据库”为数据源,共筛选含有乌梅的方剂186个,生成形式背景,运用属性偏序原理划分不同类型的方剂,得出乌梅类方的基础方剂以及加减方法,分析乌梅类方的用药规律.结果 乌梅类方主病以肺系和消化系疾病多见,配伍药物以入肺、脾、肝经为主.方剂组合分为14组,包含了润肺、敛肺、清肺、宣肺、温肺、止咳、健脾、益气、温中、清热、行气、杀虫、消积、活血化瘀等组合.结论 乌梅类方功效广泛,温、清、补、消俱有优势.

    作者:邓志远;王镘佳;李净;刘敏;罗广波 刊期: 2018年第06期

  • 膏摩结合关节松动术治疗膝关节僵硬的临床疗效观察

    目的 观察膏摩结合关节松动术治疗膝关节僵硬患者的临床疗效.方法 选择符合“膝关节僵硬中医诊疗方案”标准的患者40例,随机分为治疗组(n=20)和对照组(n=20).治疗组采用膏摩疗法结合关节松动术治疗,对照组采用单纯关节松动术治疗.隔天治疗1次,治疗10次后观察治疗后两组组内及组间视觉疼痛模拟评分(VAS)、膝关节功能活动量表评分(LKSS)、膝关节大被动活动度(TPM)、伸膝峰力矩(PT)的变化情况.结果 治疗组和对照组在治疗后的VAS评分均明显降低(P<0.01),LKSS评分均明显提高(P<0.01),且治疗后两组的TPM和伸膝PT与治疗前比较均有显著变化(P<0.01);同时,治疗组的VAS和LKSS改善度均优于对照组,有统计学意义(P<0.05),治疗组的TPM和伸膝PT改善度亦优于对照组,有统计学意义(P<0.05).结论 膏摩结合关节松动术能显著改善膝关节僵硬患者疼痛、膝关节活动范围及膝关节功能,且疗效优于单纯关节松动术治疗.

    作者:陶吉明;马嘉吟;张宏;郭清娟;陶颖 刊期: 2018年第06期

  • 刺血疗法对痛风性关节炎血尿酸及炎症标志物影响的Meta分析

    目的 评价刺血疗法治疗痛风性关节炎的疗效及安全性.方法 检索维普、知网、万方数据库、SinoMed、PubMed、Web of Science、EMBASE中运用刺血疗法治疗痛风性关节炎的文献,使用stata12.1软件利用筛选出的数据进行Meta分析.结果 共检索出17项研究共1232名患者,结果显示刺血疗法在降低血尿酸、红细胞沉降率、超敏C反应蛋白水平等方面明显优于常规西药疗法,差异具有统计学意义.单一的刺血疗法对血尿酸的改变与西医常规疗法疗效相当.刺血疗法在运用过程中不良反应发生率明显低于西医常规疗法.结论 刺血疗法治疗痛风性关节炎疗效明显优于常规西医疗法,作为临床辅助疗法,值得临床推广使用.

    作者:黄云芳;张云;甘文渊;刘昌璇;胡攀伟 刊期: 2018年第06期

  • 国医大师卢芳运用抑免汤治疗风湿免疫相关性皮损的经验

    卢芳教授认为免疫相关性皮损病位在肌肤,基本病机为荣卫不和,并用自拟抑免汤治之.文章对国医大师卢芳运用自拟抑免汤治疗风湿免疫相关性皮损的心得进行总结和介绍.剖析风湿免疫相关性皮损的荣卫虚实病机,阐述卢芳教授自拟抑免汤的学术根基和智慧渊源,从组方理论上论证抑免汤治疗风湿免疫相关性皮损病机的合理性,并证明其临床的实用性和有效性.

    作者:朴勇洙;王波;苏萌;刘孟瑶;卢芳 刊期: 2018年第06期

  • 穴位贴敷联合西医常规治疗肝硬化腹水疗效和安全性的Meta分析

    目的 系统评价穴位贴敷联合西医常规相较于单纯西医常规治疗肝硬化腹水的有效性和安全性.方法 计算机全面检索CNKI、CBM、VIP、WanFang data 、PubMed、EmBase、The Cochrane library及中国中医药期刊文献数据库,全面收集穴位贴敷联合西医常规与西医常规治疗肝硬化腹水的随机对照试验,检索时间均为建库至2016年12月20日,追溯纳入研究的参考文献,采用RevMan5.3软件进行Meta分析,并对结果进行亚组分析和敏感性分析.结果 终纳入10篇文献,742例患者.Meta分析结果显示穴位贴敷联合西医常规治疗在腹水治疗有效[0R(95% CI)=2.96(1.89,4.62),3.34(1.63,6.82),P≤0.0009]、体重[MD(95% CI)=-3.67(-5.52,-2.12),P<0.00001]、腹围[MD(95% CI)=-5.72(-8.13,-3.31),-12.16(-15.07,-9.24),P<0.00001]方面均优于单纯西医常规治疗,且差异有统计学意义;在改善肝功能指标ALT、AST方面,穴位敷贴组虽优于单纯西医常规组,但敏感性试验结果显示结果不稳定,需进一步研究予以验证.6个研究报告穴位贴敷组发生11次不良反应(发生率为2.62%),以皮肤红肿瘙痒为主.结论 与单纯西医治疗相比,穴位贴敷联合西医常规治疗可明显提高肝硬化腹水患者的治疗有效率,降低体重,减少腹围,明显改善患者的生活质量,但在改善肝功能指标方面尚待进一步的研究验证;穴位贴敷组存在以皮肤过敏反应为主的不良反应发生风险.受纳入研究数量和质量的限制,本研究结论尚需开展更多高质量研究进行验证.

    作者:王向荣;贺安妮;熊振芳;杨芬;徐倩;李圣洁;程艳然 刊期: 2018年第06期

  • 黄芪多糖对小鼠MC-3T3-E1成骨细胞维生素D受体mRNA及蛋白表达的影响

    目的 探讨黄芪多糖对小鼠MC-3T3-E1成骨细胞维生素D受体(VDR)mRNA及蛋白表达的影响.方法 采用Real-Time PCR、Western Blot检测黄芪多糖对小鼠MC-3T3-E1成骨细胞维生素D受体(VDR)mRNA及蛋白表达情况.实验分为5组,正常组、维生素D组(10-5mmol· L-1)、10 μg·ml-1黄芪多糖组、1μg· ml-1L黄芪多糖组、0.1 μg·ml-1黄芪多糖组.结果 Real-Time PCR、Western Blot检测结果显示,与正常组比较,不同剂量的黄芪多糖均可上调小鼠MC-3T3-E1成骨细胞VDR mRNA及蛋白相对表达量,且在黄芪多糖剂量为1μg·ml-1时其表达量显著增高(P<0.05).结论 黄芪多糖治疗骨质疏松症重要机制之一可能与上调VDR mRNA及蛋白表达水平有关.

    作者:柴艺汇;高洁;陈云志;管连城;田兴中;赵威;王焕珍;吴大梅 刊期: 2018年第06期

  • 艾灸对功能性消化不良大鼠SCF、 Cx43表达的影响

    目的 探讨艾灸对功能性消化不良大鼠SCF、足三里穴局部Cx43蛋白表达的影响.方法 建立功能性消化不良大鼠模型,进行艾灸足三里穴和足三里穴旁开对照点,采用免疫印迹法(Western blot)分别检测各组大鼠胃窦SCF及穴位、穴位旁开对照点局部Cx43蛋白的表达水平.结果 与空白组相比,模型组大鼠胃窦SCF及穴区局部Cx43蛋白水平显著降低(P<0.01);与模型组比较,艾灸穴位组SCF及Cx43蛋白表达量高于模型组(P<0.05),艾灸非穴组SCF及Cx43蛋白表达量无显著差异(P>0.05);与艾灸非穴组相比,艾灸穴位组SCF及Cx43蛋白表达量显著升高(P<0.05).结论 艾灸干预能够显著升高FD大鼠胃窦SCF及足三里局部Cx43蛋白表达水平,改善胃动力,调节胃肠道活动.

    作者:韩永丽;陈松;康朝霞;王计雨;潘小丽 刊期: 2018年第06期

  • 葛黄汤对糖尿病小鼠血脂调节和肝脏保护作用

    目的 探讨葛黄汤对糖尿病小鼠血脂代谢和肝脏保护作用.方法 小鼠给予高脂高糖饲养,4周后使用链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病小鼠模型.实验分为空白对照组、损伤组、二甲双胍阳性组和葛黄汤保护组,建模后再灌胃给药4周,检测各组血清甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)及肝脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)含量.结果 与模型组比较葛黄汤保护组血糖明显降低(P<0.01),小鼠体重明显呈上升趋势,肝脏脏器指数降低(P<0.01),血清中TG、TC、LDL水平降低(P<0.01、P<0.05、P<0.05),HDL(P<0.01)水平升高,肝脏中的SOD、CAT(P <0.05)酶活性提高,MDA(P <0.01)含量减少.结论 葛黄汤能改善糖尿病小鼠的血脂代谢,提高小鼠抵抗肝脏脂质过氧化的能力,对肝脏氧化应激反应有一定保护作用.

    作者:王兰;杨薪正;常相娜;龚频;杨文娟;赵天雷;赵鹏 刊期: 2018年第06期

  • 麻辛汤在豚鼠哮喘模型哮喘急性发作期的作用机理研究

    目的 通过利用分子生物学技术,从整体、细胞及细胞因子水平初步探讨麻辛汤在豚鼠哮喘模型哮喘急性发作期的作用机理.方法 取健康豚鼠24只,常规饲养7天后随机分为3组,每组8只,即空白对照组、哮喘模型组、麻辛汤组.除空白对照组,其他两组复制哮喘模型;空白对照组、哮喘模型组以生理盐水灌胃,每次3ml,每日2次;麻辛汤组每次10ml麻辛汤(相当于生药6g/d),每日2次灌胃;检测并记录治疗前后各组BALF和血清中Eos计数、IL-4、TNF-α、IFN-γ.结果 麻辛汤能降低豚鼠哮喘模型中肺泡及血中EOS、IL-4浓度,同时能提高IFN-γ活性,对BALF及血清中TNF-α浓度的改变无统计学差异.结论 麻辛汤通过降低哮喘模型中肺泡及血中EOS数量、IL-4浓度来降低哮喘模型的气道高反应性和气道炎症,从而缓解气道重塑改变;同时,麻辛汤对提高IFN-γ活性,促进IFN-γ的分泌而下调IL-4水平,调节Th1/Th2失衡状态,从而达到抗哮喘的目的;此外,麻辛汤对BALF及血清中TNF-α浓度的改变无统计学差异,说明麻辛汤的抗哮喘作用并不是通过调整TNF-α浓度而实现的.

    作者:冯晓玲;项珊;黄廷荣;王文丽 刊期: 2018年第06期

时珍国医国药杂志

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主管:湖北省黄石市卫生局

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