张健;王中;孙晓欧
目的构建人组织型基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)编码序列基因逆转录病毒表达载体,转染人单核细胞白血病细胞株,为探讨TIMP-2的生物学功能奠定基础.方法根据基因库中已公布的序列设计引物,用PCR方法扩增出人TIMP-2编码序列基因片段,用限制性内切酶及T4连接酶将目的片段插入MSCV逆转录病毒载体中.采用酶切和PCR鉴定及测序后经脂质体介导转染至PT67包装细胞中,以病毒上清感染单核细胞白血病细胞株SHI-1,G418筛选,极限稀释法挑选单克隆细胞株,定量PCR和Western Blotting检测TIMP-2的表达.结果 TIMP-2基因克隆进逆转录病毒载体MSCV中,经酶切、PCR和DNA测序证实重组逆转录病毒载体构建正确,病毒上清感染SHI-1细胞,经G418筛选并挑选出单克隆细胞,经实时定量PCR和Western Blotting检测发现SHI-1细胞中TIMP-2 mRNA及蛋白表达明显上调.结论成功构建了高表达TIMP-2的SHI-1细胞,可对其生物学行为作进一步研究.
作者:李振江;陈子兴;岑建农;何军;邱桥成 刊期: 2006年第02期
目的探讨血清白细胞介素(IL)-10水平的检测在鼻咽癌诊治中的临床价值.方法采用ELISA法,检测60例鼻咽癌患者和20例正常人血清IL-10水平,并对部分患者放疗前后的血清IL-10水平进行动态观察.结果鼻咽癌患者血清IL-10水平明显高于正常对照组(P<0.005);Ⅰ和Ⅱ期患者血清IL-10水平明显低于Ⅲ和Ⅳ期患者(P=0.011);有颈淋巴结转移或远处转移患者的血清IL-10水平稍高于无颈淋巴结转移或远处转移患者,但差异无统计学意义(P>0.05).放疗后获得肿瘤局部控制患者的血清IL-10水平明显低于放疗前(P<0.001).结论血清IL-10水平检测在鼻咽癌的诊断、分期和疗效观察中具有一定的临床价值.
作者:李先明;徐钢;田野;陈亦欣;吴冬;闫茂生 刊期: 2006年第02期
目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血淋T淋巴细胞亚群与病情活动性、肾脏损害的关系.方法采用APAAP法对78例SLE患者T淋巴细胞亚群及NK细胞作检测,分析SLE活动情况、肾脏损害与细胞免疫学指标改变之间的关系.结果活动期组SLE患者与非活动期组相比,CD3+、CD8+细胞数显著降低(P<0.05),而CD4+细胞数、CD4+/CD8+比值无明显差异;伴有肾脏损伤患者,NK细胞数明显降低(P<0.05),而CD8+、CD3+、CD4+/CD8+比值无明显差异.结论 SLE患者外周血CD3+、CD8+细胞数的降低与疾病的活动度有关,CD4+细胞及CD4+/CD8+比值不能反映其病情活动;而NK细胞数量的减少往往与肾脏损害有密切关系.
作者:姚艳华;陈志伟;顾国浩;邓迎苏;高纯;喻云霞 刊期: 2006年第02期
目的探讨TGF-β1和CD105在胰腺癌生长、浸润、转移过程中的作用,为对患者进行预后判断及生物治疗提供理论依据.方法应用免疫组织化学S-P法检测TGF-β1、CD105在52例胰腺癌和10例非肿瘤性胰腺组织中的表达,分析它们与胰腺癌临床病理参数及患者生存率的关系.结果 TGF-β1在非肿瘤性胰腺组织、胰腺癌中的阳性表达率分别为30%和80.77%,两者间的差异具有统计学意义(P<0.01).TGF-β1的表达强度与胰腺癌临床分期及淋巴结有无转移呈正相关(P<0.01).在52例胰腺癌中,CD105标记的微血管密度(Micro Vessel Density,MVD)明显高于非肿瘤性胰腺组织(P<0.01).胰腺癌分化程度越低,CD105标记的MVD值越高,并且TNM分期Ⅲ、Ⅳ期MVD值显著高于Ⅰ、Ⅱ期(P<0.01),淋巴结转移组的MVD值显著高于无淋巴结转移组(P<0.01).此外,生存单因素分析TGF-β1、CD105与胰腺癌的预后有关(P<0.01).结论 TGF-β1和CD105在胰腺癌生长、浸润和转移过程中发挥了一定的作用.
作者:黄文亭;冯一中;顾永平;柴玉海;李峰 刊期: 2006年第02期
采用免疫组织化学SP法检测Ki67在20例卵巢良性肿瘤、10例交界性肿瘤、42例卵巢癌中的表达,并分析它们与卵巢临床病理指标的关系.结果:卵巢良性肿瘤KI指数为2.00±1.22,交界肿瘤为10.20±5.03,卵巢癌为35.20±15.20,三组比较,差异显著(P<0.01);Ⅲ~Ⅳ期卵巢癌KI指数为35.75±12.30,显著高于Ⅰ~Ⅱ期卵巢癌的22.00±11.20(P<0.01);中低分化癌KI指数为34.17±9.08,显著高于高分化癌的22.88±10.02(P<0.01);卵巢癌Ki指数与组织类型、淋巴转移无关(P>0.05).结果表明,卵巢癌中Ki67表达显著高于卵巢良性交界肿瘤,可作为鉴别良恶性肿瘤的指标;其表达与卵巢癌的临床分期、病理分级有关.
作者:任琼珍;钱志红;胡建铭 刊期: 2006年第02期
目的将hHCN2基因有效转染到HEK293细胞,建立一种研究心肌离子通道的有效模型.方法采用Lipofactamine2000脂质体将hHCN2基因转染HEK293细胞,运用全细胞膜片钳技术检测克隆hHCN2基因表达的情况.结果 pcDNA3-hHCN4真核表达载体转染HEK293细胞3 d后,记录到转染成功的hHCN2基因编码的通道电流.结论该实验采用的技术稳定可靠,为开展克隆离子通道结构和功能关系的研究奠定了基础.
作者:赵欣;白霞;杨向军;周玲;蒋彬;李红霞;程绪杰;蒋文平 刊期: 2006年第02期
随机抽样调查该院某一天的手术患者术前皮肤准备情况和直接观察外科医生对手术野皮肤的消毒情况.结果发现,术前患者皮肤准备仍以剃毛为主(75%),剃毛的时间多选择在手术前一日(68%);手术野皮肤消毒,各科医生操作程序不统一.认为制定术前规范和操作程序是非常必要的.
作者:吴影秋;刘月秀;冯薇;吴旭琴;吴琛 刊期: 2006年第02期
应用输尿管镜对84例急性肾绞痛患者施行检查及治疗.结果:84例中,71例检查时发现为输尿管结石,同时可以治疗,7例为血块,3例为组织团块,3例进镜未成功,改开放手术.认为输尿管镜为急性肾绞痛的检查与治疗提供了安全、有效的手段.
作者:高鹏;单玉喜;薛波新;阳东荣 刊期: 2006年第02期
采用关节镜下滑膜刨削术加术后放疗联合疗法治疗膝关节弥漫型色素绒毛结节性滑膜炎共19例,结果:19例均无手术并发症,早期恢复良好,经过6~33个月(平均13个月)的随访,3例遗留有不同程度的关节发僵与肿胀,2例复发.认为应用关节镜技术联合放疗治疗弥漫型膝关节色素绒毛结节性滑膜炎是一种行之有效的治疗方法,具有操作简单、疗效显著、损伤少、恢复快、复发率低的优点.
作者:杨小海;董启榕;华锦明;黄智慧;范秋虹 刊期: 2006年第02期
目的比较慢性髓系白血病急变期(CML-BC)与急性白血病(AL)的免疫表型特征.方法采用一组单克隆抗体和四色流式细胞术对58例成人CML-BC及同期420例AL患者骨髓标本进行免疫表型分析.结果 58例CML-BC中,CML-AML占77.6%,CML-ALL占13.8%,CML-MAL(混合性白血病)占5.2%;AL中,AML占66.2%,ALL占32.9%,MAL占1.0%.CML-AML中,CD7及CD34表达高于AML;CML-BC和CML-AML中CD7与CD34共阳性表达分别高于AL和AML(P<0.05).276例AML中,纯型占62.3%,变异型占37.7%;130例ALL中,纯型占44.6%,变异型占55.4%;42例CML-AML中,纯型占59.5%,变异型占40.5%;8例CML-ALL中,纯型与变异型各占50.0%.结论 CML-BC中干祖细胞阶段的抗原较AL高表达,变异型CML-BC与AL比例相当.
作者:朱雨;李建勇;吴雨洁;宋君红;郑文娟;杨慧;张建富 刊期: 2006年第02期
选用小猪中厚皮片(厚0.45~0.55 mm)经戊二醛交联、胰蛋白酶、TritonX-100等处理后制成脱细胞真皮基质并与自体薄层皮片(厚0.075~0.15 mm)复合移植急诊修复软组织缺损16例.结果:术后2周皮片成活率为93.1%±2.7%,术后12周皮片收缩率为89.9%±2.5%,外观平整、质软,但色质深、欠满意.随访1年关节功能恢复令人满意.认为该法为急诊修复软组织缺损的有效方法,且操作方便、复合皮制备简单,同时可对创伤、复杂性损伤的综合处理提供良好平台.
作者:苏卫国;祁强;林伟;李永林 刊期: 2006年第02期
目的研究一种新的凋亡抑制蛋白(Inhibitor of Apoptosis Proten,IAP)livin两种异构体livin-α和livin-β mRNA在膀胱移行细胞癌(Transitional Cell Carcinoma of Bladder,TCC)组织中的表达,及其与TCC的病理分级、临床分期的相关性.方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测30例TCC患者的肿瘤组织、3例良性前列腺增生症(Benign Prostatic Hyperplasia,BPH)和2例外伤所致的膀胱破裂患者的膀胱组织中livin-α和livin-β mRNA的表达.结果 30例TCC组织中livin mRNA表达阳性率为16.7%,其表达阳性的病例病理分级均为Ⅲ级,肿瘤均侵及深肌层.而3例BPH患者和2例膀胱破裂患者的膀胱组织livin mRNA表达均呈阴性.结论 livin可作为 TCC的分子标记物,可成为对TCC恶性程度和预后判断的参考指标.
作者:曾剑;温端改;侯建全;何军 刊期: 2006年第02期
目的研究大鼠皮肤损伤愈合过程中血管内皮细胞生长因子(VEGF)和促血管生成素-1(Ang-1)表达的动态变化,阐明其在组织修复血管再生中的作用.方法在大鼠背侧切开皮肤全层建立大鼠创伤模型,不同时间后活体取材,应用HE染色观察组织病理形态学变化;应用免疫组化SP法检测VEGF和Ang-1的蛋白表达.结果伤口组织病理学检查可见,毛细血管在伤后第3 d即见增多,伤后第7 d达高峰,随后逐渐减少.血管内皮细胞胞浆VEGF蛋白表达在伤后第1 d呈阳性,伤后第3 d呈强阳性,伤后第5 d呈阳性,而于伤后第7 d阳性程度逐渐减弱.伤后第1~14 d VEGF蛋白表达与对照组比较,有非常显著性差异(P<0.01).血管内皮细胞胞浆Ang-1蛋白表达在伤后第1 d部分呈阳性表达,部分呈弱阳性表达,在伤后第3 d呈阳性表达,伤后第5、7 d呈强阳性、阳性表达,随后阳性程度逐渐减弱,伤后第3~21 d Ang-1蛋白表达与对照组比较,有非常显著的统计学差异(P<0.01).结论 VEGF和Ang-1在血管内皮细胞中的表达强度与组织损伤愈合程度密切相关,在创伤愈合过程中互相协调、促进并调节血管肉芽组织的生长和成熟.
作者:潘秀花;杨占山;杨淑琴;岳凌;潘鹏 刊期: 2006年第02期
回顾分析16例结肠癌并发急性穿孔患者的临床资料.16例均出现弥漫性或局限性腹膜炎的症状与体征,其中15例行肿瘤切除术,1例行单纯穿孔修补术.结果:14例临床治愈,1例死于感染性休克,1例死于肿瘤性消耗.认为提高结肠肿瘤性穿孔的诊断是治疗本病的关键,手术一期切除肿瘤是佳的治疗选择.
作者:杨晓东 刊期: 2006年第02期
采用主观性波前像差仪对85例(168眼)近视及近视散光患者的眼波前像差进行评估.测量结果通过Madlab软件分析,直接获取35项Zernike系数及每阶Zernike系数的像差(RMS)值.将眼球总RMS值与近视屈光度数、眼球总散光度数、平均角膜曲率、角膜散光、眼轴等进行相关分析.结果:眼球总RMS值与近视屈光度呈低度正相关(P<0.05),与眼球总散光度数、角膜散光度数呈中度正相关(P<0.01),与角膜平均曲率和眼轴长无关.认为角膜散光是构成眼球总像差的重要因素.
作者:王熹;张晓峰;李龙标;沈博渊 刊期: 2006年第02期
目的为羊膜移植治疗感染性角膜溃疡、化学性烧伤等许多眼表疾病寻找一种简单实用的中期保存方法以指导临床工作.方法对取自同一来源的羊膜组织分别在4℃和-25℃环境中保存时,研究其超微结构上的变化,羊膜的处理程序(方法)同许多文献中阐述的一样,包括硝酸纤维素滤纸、DMEM以及甘油等.结果在4℃下保存的羊膜发生明显的病理变化包括上皮细胞异常和细胞核自溶现象.作为对照,保存在-25℃环境中的羊膜则结构正常并无细胞核自溶现象.结论中低温冷冻保存方法优于甘油保存法,建议为延长羊膜的保存期可采用-25℃中低温冷冻保存方法,它具有简单、方便、经济、实用的特点.
作者:徐国旭;郝丽莉;徐国彤;唐华;张积;卜曙阳 刊期: 2006年第02期
对经连续性血液净化(Continuous Blood Purification,CBP)治疗的重症患者26例按病因分类,并分析治疗前后肾功能、血气、电解质及生命体征的变化.结果:1例难治性心衰和1例肾病综合征经超滤后好转,1例感染性休克经连续性静脉-静脉血液滤过(Continuous Veno-venous Hemofiltration,CVVH)36 h后血压稳定,10例慢性肾衰合并低血压者肾功能改善且治疗中生命体征平稳,1例脑出血合并肾衰者病情好转,1例死亡.认为CBP能有效减少感染性休克患者血管活性药物的剂量;慢性肾衰行血液透析治疗致低血压者行CBP治疗安全有效;CBP治疗脑出血合并肾衰不会增加颅内压.
作者:宋锴;石永兵;沈华英;施晓松;金东华;姜山 刊期: 2006年第02期
目的探讨第四脑室肿瘤的MRI表现及鉴别诊断.方法回顾性分析经手术及病理检查证实的10例第四脑室肿瘤的MRI表现.结果术前定位正确率为100%,定性正确率为70%.10例肿瘤中,2例室管膜瘤,2例髓母细胞瘤,2例脉络丛乳头瘤,2例星形细胞瘤,1例胆脂瘤,1例转移瘤.结论 MRI对第四脑室肿瘤的诊断及鉴别诊断具有重要价值.
作者:黄瑾瑜;沈海林 刊期: 2006年第02期
回顾性分析11年来14例先天性食管闭锁的诊断与治疗经验.14例均经造影明确诊断.9例手术患儿中,1例Ⅰ型中途放弃治疗,2例术后脱机困难自动出院,6例治愈.4例随访者均健康生存.认为早期诊断、应用新材料、ICU的建立、加强围手术期处理、胃肠外营养的支持、新生儿麻醉的改进及外科技术的改良是提高食管闭锁治愈率的关键.
作者:徐永根;徐洪军;朱锦祥;严向明 刊期: 2006年第02期
目的通过比较5种不同体外培养人骨髓间充质干细胞(hMSCs)条件,找到一种能在质和量上均能满足需要的体外培养条件.方法使用Percoll-Paque液(1.073 g/ml)分离人骨髓血,采用DMEM+15%的小牛血清、人体白蛋白、人血清、脐带血清及MesenCult培养基,在相同培养条件下,动态观察hMSCs的生长状况、细胞数量变化,通过流式细胞仪检测细胞的纯化状况.结果 5种培养条件在一定时相内均能获得较为纯化的hMSCs,但在生长速度和纯化率上存在一定的差异.结论 Mesen Cult是一种较为优秀的hMSCs培养基,胎儿脐带血清培养也能在短期内获得足量纯化的hMSCs,人血清的使用还需要做进一步的研究.
作者:金钧;黄坚;吴思荣;惠国桢 刊期: 2006年第02期