学术投稿

套式聚合酶链反应直接测序法分析产超广谱β-内酰胺酶菌TEM全基因

丁云芳;糜祖煌;张建华;秦玲

关键词:套式聚合酶链反应, TEM DNA测序, 产超广谱β-内酰胺酶菌
摘要:目的建立套式聚合酶链反应直接测序方法分析产超广谱β-内酰胺酶菌TEM全基因,以便TEM分型和发现新的亚型.方法根据Genbank核酸数据库已登录的TEM各亚型序列,在保守区自行设计4条引物,分A、B两段半套式重叠扩增TEM全基因;并对A段作正向测序,B段作反向测序. 结果大肠埃希菌TEM1、TEM2、TEM26等3种典型菌株均成功扩出A、B两段,产物直接测序波峰锐利,信噪比值高.该三株菌测得的序列与已在Genbank登录的序列一致.结论套式聚合酶链反应直接测序可用于TEM分型研究.
苏州大学学报(医学版)杂志相关文献
  • 甲亢术后甲状腺危象10例临床分析

    总结10例甲亢术后甲状腺危象的抢救经验.发生危象的时间为术中~术后20 h,均抢救成功.随访1~5年,无甲亢复发或甲减,仅1例仍有慢性肝损害.认为只要术前准备充分,麻醉完善,术中术后预防性使用激素,及时发现,治疗措施得力,就能预防甲状腺危象的发生,即使发生也能及时救治成功.

    作者:何山;高敏;张志德 刊期: 2004年第01期

  • 呼吸道合胞病毒毛细支气管炎患儿T细胞亚群和相关细胞因子的变化及其临床意义

    对58例呼吸道合胞病毒(RSV)毛细支气管炎患儿(RSV组)及20名正常儿童(对照组),采用间接免疫荧光检测外周血T细胞亚群CD4、CD8的比例,ELISA方法及多标记免疫分析系统检测血清IL-4和INF-γ的表达水平.结果显示,RSV组与对照组外周血T细胞亚群CD4和CD8无明显差异(P>0.1),CD4/CD8比值RSV组显著高于对照组(P<0.02);血清IFN-γ两组无明显差异(P>0.1);IL-4和IL-4/IFN-γ RSV组均显著高于对照组(分别P<0.05和P<0.02).表明RSV毛细支气管炎患儿存在T细胞亚群变化(CD4/CD8比值增高);以IL-4为代表的Th2类细胞因子表达和释放增多,导致Th1/Th2免疫反应失衡.这与支气管哮喘有相似变化,提示两者的发病机制存在一定的联系.

    作者:黄莉;季伟;周卫芳;朱灿红 刊期: 2004年第01期

  • 产后出血64例临床分析

    分析64例产后出血的发生率、原因、出血量与结局,并提出完善的预防措施.认为产后出血与多种因素有关,宫缩乏力是常见的病因.正确估计失血量有重要意义,能明显降低产后出血的发生率.

    作者:龙启芳;钱志红;蔡惠萍 刊期: 2004年第01期

  • 再生丝素膜对鼠胚真皮层成纤维细胞生长的影响

    目的研究再生丝素膜对鼠胚真皮层成纤维细胞生长的影响.方法采用静置贴壁培养法在再生丝素膜上体外培养鼠胚真皮层成纤维细胞,并用活细胞计数法及MTT比色法观察再生丝素膜对细胞的形态、功能和生长的影响.结果再生丝素膜对鼠胚真皮层成纤维细胞的贴壁能力和形态及其代谢功能未见明显改变,也未见明显毒性,并能支持细胞正常生长,呈现正常的生长繁殖曲线.结论再生丝素膜对鼠胚真皮层成纤维细胞具有良好的细胞相容性.

    作者:谢宇锋;盛伟华;龚爱华;缪竞诚;杨吉成;李明忠;卢神州 刊期: 2004年第01期

  • 双极人工股骨头置换治疗老年股骨颈骨折疗效观察

    对60例65岁以上的老年人股骨颈骨折行双极人工股骨头置换术治疗.结果术后3周均能扶双拐行走.48例获随访,随访时间1~8年,满意率93.75%.26例随诊X片,髋臼完好19例,髋臼外缘骨质增生4例,无人工股骨头中心脱位,假体下沉>2 mm 1例,假体透光区域>2 mm 2例.表明双极人工股骨头置换术是治疗老年人股骨颈骨折的有效方法,可促使老年人早期活动,提高生活质量.

    作者:高爱国;孙俊英 刊期: 2004年第01期

  • 腹部随意型带蒂真皮下血管网皮瓣临床应用712例报告

    采用761块腹部任意型带蒂真皮下血管网皮瓣(SVNF),移位修复手、前臂及上臂皮肤软组织缺损712例.断蒂时间为术后10~21 d.结果761块皮瓣完好存活749块,部分坏死9块,完全坏死3块.523例患者540块SVNF 获随访2个月~7年,肤色满意,质地柔软,滑动性良好,保护性感觉恢复.提示腹部SVNF具有设计随意、操作简单、断蒂早、感觉恢复快、供区隐蔽等优点,是修复上肢皮肤软组织缺损简单而较为理想的皮瓣.

    作者:贺楚宇;陆兴安;唐举玉;李波;刘俊;谢松林;刘鸣江 刊期: 2004年第01期

  • 大脑原始神经外胚层肿瘤的临床与病理分析

    目的分析大脑原始神经外胚层肿瘤的临床与病理特点.方法 使用光镜、免疫组化和临床资料对7例大脑原始神经外胚层肿瘤进行观察和分析.结果7例中5例为儿童和青少年,病程短且颅内高压症状突出;肿瘤组织由小圆形细胞构成;免疫组化:NSE阳性5例,Syn阳性1例,CD99阳性2例,Vimentin阳性1例,GFAP、S-100均为阴性;CT表现为混合密度或均匀高密度肿块,MRI呈长T1、长T2信号. 结论大脑原始神经外胚层肿瘤的临床预后极差,诊断主要依靠病理.

    作者:傅军;周幽心;徐峰;叶明;周岱;鲍耀东;康苏娅 刊期: 2004年第01期

  • 盖诺联合顺铂治疗中晚期非小细胞肺癌32例分析

    对32例盖诺联合顺铂(NP方案)与26例足叶乙甙联合顺铂(EP方案)治疗中晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的近期疗效进行比较,结果近期总有效率NP组为43.8%,EP组为30.8%,两组有显著差异(P<0.05).主要毒副反应均为白细胞减少,NP组发生率为84.4%,EP组为84.6%,两组无显著差异(P>0.05).提示NP方案有较高疗效,毒副反应可耐受,值得临床进一步应用.

    作者:朱凡 刊期: 2004年第01期

  • 术后早期炎性肠梗阻18例分析

    分析18例术后早期炎性肠梗阻的临床表现特点、发病机制、诊断与治疗方法.其中17例行保守治疗,1例手术治疗无效后继续保守治疗,结果均治愈,平均治愈时间10.9 d.提示术后早期炎性肠梗阻发病机制以肠道功能障碍为主,多发生于术后1~2周,宜采用保守治疗.

    作者:陈彦;汪良;朱兴国 刊期: 2004年第01期

  • 凋亡调控基因Fas/APO-1、bcl-2在胆囊癌中的表达及与生物学特性的关系

    目的研究肿瘤凋亡调控基因Fas/APO-1、bcl-2在胆囊癌发生发展中的作用.方法应用免疫组化法对28例胆囊癌及其癌旁组织、20例胆囊息肉和腺瘤组织检测基因Fas/APO-1、bc1-2的表达,并分析它们与胆囊癌生物学特性的关系.结果胆囊癌组织中bc1-2表达率与癌旁组织、息肉和腺瘤组织相比显著增高,而Fas/APO-1表达明显降低(均P<0.05);与肿瘤生物学特性的关系,bc1-2蛋白表达率在高、中分化组中明显低于低、未分化组,NevinⅠ、Ⅱ、Ⅲ期低于Ⅳ、Ⅴ期,而Fas/APO-1蛋白表达则相反(均P<0.05).结论 bc1-2为胆囊癌细胞凋亡抑制基因,而Fas/APO-1则为促进基因,两者在胆囊癌的发生发展中起重要作用.

    作者:颜鸣;吴晓阳;李海 刊期: 2004年第01期

  • 经电视胸腔镜行肺叶切除术的麻醉处理

    我院自2000年3月至今,采用经电视胸腔镜术(Video-assisted thoracoscopic surgery,VATS)行肺叶切除45例,现将麻醉处理总结如下.

    作者:仇正平;谢红;李华 刊期: 2004年第01期

  • TF-1细胞增殖特性与信号蛋白JAK2/STAT3表达研究

    目的探索JAK/STAT途径活化与细胞增殖和凋亡之间的关系.方法通过表达内源性GM-CSF受体的TF-1细胞,观察细胞增殖与凋亡;建立免疫沉淀和Western blot印迹方法,检测经GM-CSF 100 ng/ml瞬时诱导的TF-1细胞信号蛋白JAK2和STAT3酪氨酸磷酸化情况.结果经过GM-CSF刺激,细胞不但免于凋亡,TF-1细胞还呈现剂量与时间信赖性的增殖反应.当耗竭细胞因子6~12 h后,倒置显微镜下TF-1细胞呈现折光性改变,细胞开始凋亡,呈现凋亡特征性形态改变和出现DNA梯形条带,而加入0.1 ng/ml的GM-CSF,TF-1细胞即开始进入增殖状态,提示GM-CSF对细胞具有凋亡保护作用.经过100 ng/ml GM-CSF的瞬时诱导,在分子量130 kd区域见到JAK2蛋白条带,显示GM-CSF可诱导TF-1细胞磷酸化JAK2表达;而在分子量90 kd区域未见到STAT3蛋白条带,显示无磷酸化STAT3表达;而未经GM-CSF诱导的TF-1细胞,既无磷酸化JAK2也无磷酸化STAT3表达.结论 GM-CSF为TF-1细胞增殖诱导和凋亡保护所必需;GM-CSF诱导的TF-1细胞生物学效应涉及到胞浆信号分子JAK2磷酸化而非STAT3磷酸化.

    作者:谌登兵;张日;夏学鸣 刊期: 2004年第01期

  • 抗内皮细胞抗体测定在鉴别特发性血小板减少性紫癜和系统性红斑狼疮中的临床意义

    目的研究抗内皮细胞抗体(AECA)测定在鉴别特发性血小板减少性紫癜(ITP)和系统性红斑狼疮(SLE)中的临床意义.方法用ELISA法分别测定76例ITP患者、41例SLE患者及50名正常人血清中的AECA水平. 结果 SLE组、ITP组患者的血清AECA水平明显高于正常对照组(P<0.01);SLE组患者的血清AECA水平显著高于ITP组(P<0.01). 结论 AECA的测定对鉴别ITP和SLE有显著的临床意义.

    作者:庄茜;庞爱明;赵益明;阮长耿 刊期: 2004年第01期

  • 自体血回输在髋关节手术中的应用

    将24例髋关节手术患者随机分为A、B两组,每组12例.A组采用自体血回收机回收术野出血,经过滤、离心、净化、清洗后,以洗涤红细胞的形式回输; B组完全输注库存血补充失血.记录回输血量及库存血输血量.结果:A组平均每例回收浓缩红细胞600 ml,除1例髋关节置换翻修患者因术中失血较多,输入400 ml血浆外,其余患者均未输库存血; B组平均每例输库存血550 ml.两组比较,A组共节约用血6000 ml.表明术中自体血回输是髋关节手术安全有效的补充失血的方法,对减少输库存血的机会具有临床意义.

    作者:吴学东;赵建华;方志源 刊期: 2004年第01期

  • 套式聚合酶链反应直接测序法分析产超广谱β-内酰胺酶菌TEM全基因

    目的建立套式聚合酶链反应直接测序方法分析产超广谱β-内酰胺酶菌TEM全基因,以便TEM分型和发现新的亚型.方法根据Genbank核酸数据库已登录的TEM各亚型序列,在保守区自行设计4条引物,分A、B两段半套式重叠扩增TEM全基因;并对A段作正向测序,B段作反向测序. 结果大肠埃希菌TEM1、TEM2、TEM26等3种典型菌株均成功扩出A、B两段,产物直接测序波峰锐利,信噪比值高.该三株菌测得的序列与已在Genbank登录的序列一致.结论套式聚合酶链反应直接测序可用于TEM分型研究.

    作者:丁云芳;糜祖煌;张建华;秦玲 刊期: 2004年第01期

  • 苯那普利及其合用缬沙坦对心衰患者神经内分泌激素和心功能的影响

    将74例慢性心衰患者随机分为苯那普利治疗组(36例)和苯那普利合用缬沙坦组(38例),治疗前及治疗6个月后,用同位素放射免疫测定法和酶联免疫吸附法分别测定两组患者的血浆AngⅡ、ALD和NE水平,用心脏彩色多普勒超声诊断仪测量两组患者的左室射血分数(LVEF).结果:(1)苯那普利治疗后血浆NE水平明显降低,LVEF明显增高(均P<0.01);而血浆AngⅡ、ALD水平改变不大;(2)苯那普利加缬沙坦治疗后血浆NE、ALD水平明显降低,LVEF明显增高(均P<0.01),而血浆AngⅡ水平改变不大;(3)组间对比发现,苯那普利合用缬沙坦能更有效地降低血中NE、ALD的水平(均P<0.01),提高LVEF,且AngⅡ水平亦较单用苯那普利组明显下降(P<0.05).提示两种治疗方法都能提高CHF患者的LVEF,改善心功能;联合用药组在降低NE、AngⅡ和ALD水平方面明显优于单用苯那普利组.

    作者:金恒;华守明;刘志华 刊期: 2004年第01期

  • 鼠脑缺血再灌注损伤后P-、L-选择素表达的研究

    目的研究P-、L-选择素在鼠局灶性脑缺血再灌注后的表达规律,探讨P-、L-选择素在脑缺血再灌注损伤中的作用.方法 72只雄性SD鼠随机分为假手术组和脑缺血2 h再灌注2 h、3 h、4 h、6 h、12 h、24 h、48h组,采用尼龙线栓塞法建立鼠局灶性脑缺血再灌注模型,用免疫组化法检测脑组织缺血再灌注不同时间点P-、L-选择素的表达.结果假手术组未见P-、L-选择素的表达.P-选择素在脑缺血再灌注后3 h出现少量表达,12 h达高峰,48 h仍有表达;L-选择素在脑缺血再灌注后2 h出现少量表达,6 h达高峰,24 h仍有表达.结论鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中,P-、L-选择素表达明显上调,提示两者介导了白细胞、脑微血管内皮细胞的黏附,参与了脑缺血再灌注损伤的病理过程.

    作者:张世明;孙雪波 刊期: 2004年第01期

  • 痔脱垂经吻合器直肠下端粘膜环切术并发症的防治

    痔脱垂经事器直肠下端粘膜不切术(procedure for prolapse and hemorrhoids,PPH)作为一种新的治疗方法逐步得到推广应用[1,2].

    作者:谢于;赵宏;李德春 刊期: 2004年第01期

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    分析18例多发伤引起MODS的相关因素.18例中死亡12例,病死率66.7%.认为把治疗重点放在原发病的处理上,严格控制第2次打击,保护胃粘膜屏障,是控制多发性创伤引起MODS发生的关键环节.

    作者:沈敏慎 刊期: 2004年第01期

  • 重型肝炎血清甲胎蛋白水平与预后的关系

    采用放射免疫分析法检测40例重型肝炎患者血清AFP水平.结果显示,血清AFP呈高水平者(>400 μg/L)预后良好;血清AFP呈低水平者(≤4100 μg/L)常病情恶化.提示观察血清AFP的水平变化对判断重型肝炎的预后有参考价值.

    作者:林斌 刊期: 2004年第01期

苏州大学学报(医学版)杂志

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