学术投稿

黄芪SSR-PCR反应体系的优化及初步应用

刘亚令;王文全;候俊玲;张茹;杨文玺;刘风波;魏胜利

关键词:黄芪, SSR标记, 反应体系优化, 多态性
摘要:目的 为了获得药用植物黄芪SSR-PCR反应的优体系.方法 以山西浑源黄芪为试验材料,采用单因素实验的方法,对影响SSR扩增结果的SSR-PCR反应体系中的5种反应组分(模板DNA、dNTP、TaqDNA聚合酶、引物及退火温度)进行了探索.结果 在20 μl反应体系中,模板DNA的用量为60 ng,引物的适浓度为0.6 μmol/L,dNTP浓度为0.1 mmol/L、TaqDNA聚合酶浓度为0.05 U/μl、退火温度为57℃为适反应体系.利用此反应体系对不同来源(山西、黑龙江、辽宁、河北、甘肃)的黄芪进行PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳检测,扩增结果清晰且谱带多态性丰富.结论 成功建立了药用植物黄芪的SSR-PCR优体系,并利用筛选出的引物检测出不同产地黄芪具有很高的多态性,为今后黄芪种质资源的分子评价奠定了技术基础.
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  • 大鼠胃热阴虚型血热证候的建立及经典方玉女煎对其影响作用的实验研究

    目的 建立实验性大鼠胃热阴虚型血热证候模型及观察经典方玉女煎对该模型影响作用.方法 用昆明山海棠加肉桂水煎浓缩剂连续灌胃大鼠建立胃热阴虚型血热证候模型,用玉女煎三个剂量灌胃对该模型进行治疗.结果 造模可致大鼠出现牙龈粘膜红肿出血舌色质红等阴虚血热证症状以及血液、病理微观的相应变化,玉女煎可使症状及变化显著缓解.结论 该模型可成为中医胃热阴虚型血热证候防治研究的药效评价的实用模型,可为经典方玉女煎有效新药的研制开发应用提供有效的中医基础研究思路和方法.

    作者:李莉;王晓东;代小娇;李波;张春梅;杨薇;黄利;曹毓;刘亚欧 刊期: 2014年第09期

  • 芎汤有效部位中阿魏酸在大鼠体内排泄动力学研究

    目的 考察大鼠灌服芎汤有效部位后,有效成分阿魏酸在大鼠体内排泄动力学规律.方法 芎劳汤醇提液经分离制备的有效部位给SD大鼠灌胃给药后,按不同时间段收集大鼠的尿液和粪样,对其中阿魏酸进行HPLC测定,建立其尿液和粪样排泄代谢曲线,考察排泄特征.结果 尿液和粪样中阿魏酸的半衰期分别为(3.37±1.2)h、(23.09 ±5.7)h;排泄速率常数分别为(0.21 ±0.002) h-1、(0.03 ±0.0005) h-1.结论 阿魏酸在尿液和粪便中的累积排泄率为11.77%,说明小部分阿魏酸以原型药通过粪便和尿液排泄,大部分阿魏酸在大鼠体内转化为其他形式.该研究为阐明阿魏酸体内过程提供一定依据.

    作者:周严严;赵睁睁;郭小藤;容蓉;杨勇;吕青涛;巩丽丽 刊期: 2014年第09期

  • 不同产地云白芍中3种活性成分含量的高效液相色谱法测定

    目的 同时测定不同产地云白芍药材中儿茶素、芍药苷和苯甲酰芍药苷的含量.方法 采用ZORBOX SB-C18柱(4.6 mm× 250 mm,5μm);流动相为乙腈(A)-0.1%甲酸溶液(B),梯度洗脱:洗脱条件为:0~2 min,5%A;2 ~30 min,5%A→16 %A;30 ~50 min,16%A→20 %A;50~75 min,20 %A→60%A;流速1.0ml·min-1;检测波长245 nm;柱温30℃.结果 儿茶素、芍药苷和苯甲酰芍药苷分别在0.200 ~2.000 μg(r =0.999 3)、0.202 ~2.020 μg(r=0.999 5)、0.200~2.000μg(r=0.999 8)范围内呈良好的线性关系;平均回收率(n=6)分别为98.12%(RSD=1.66%)、99.44%(RSD=0.78%)、97.25%(RSD=1.55%).结论 该方法准确可靠、重复性好,是用于云白芍的质量控制的有效方法之一;不同产地云白芍不同部位中儿茶素、芍药苷和苯甲酰芍药苷的含量差异较大.

    作者:张德全;黄传会;杨永寿;马阿丽;周浓 刊期: 2014年第09期

  • 栀子柏皮汤化学成分研究

    目的 阐明栀子柏皮汤(栀子,黄柏,炙甘草)的药效作用物质基础.方法 运用多种色谱技术进行分离纯化,并根据理化性质及波谱数据对分离得到的化合物进行结构鉴定.结果 分离鉴定了14个化合物,分别为:栀子苷(1),栀子酸(2),山栀苷甲酯(3),去乙酰车前草酸甲酯(4),芦丁(5),槲皮素(6),甘草苷(7),巴马汀(8),药根碱(9),小檗碱(10),甘草酸(11),甘草次酸(12),熊果酸(13),绿原酸(14).结论 所得化合物均为首次从该复方中分离得到.

    作者:李敏;胡庆华;李磊;朱继孝;朱玉野;任刚 刊期: 2014年第09期

  • 汉黄芩素对慢性低灌注大鼠的神经保护作用

    目的 观察汉黄芩素对慢性脑缺血大鼠的行为学影响,并探讨其可能的机制.方法 制备慢性脑缺血模型(2-VO),术后6周分别给予汉黄芩素(实验组)和PBS(对照组)干预.2周后行Morris水迷宫评价大鼠的空间学习记忆功能变化,同时从缺血区脑组织的血管密度、缺血区脑细胞增殖等方面探讨其可能的机制.结果 干预组大鼠的空间学习记忆能力较对照组明显改善,缺血区脑组织血管密度较对照组明显增高(P<0.05);而缺血区神经细胞的凋亡数量明显减轻(P<0.05).结论 汉黄芩素可以显著改善慢性脑缺血大鼠的空间学习记忆能力,其可能的机制与增加血管密度、减轻神经细胞凋亡有关的神经血管保护作用,其在缺血性脑血管病的治疗中有很大的应用前景.

    作者:凌芳;华梅 刊期: 2014年第09期

  • 健脾益肺口服液治疗慢性阻塞性肺疾病稳定期患者的临床研究

    目的 观察健脾益肺口服液治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期(肺脾气虚证)的临床疗效.方法 将52例COPD稳定期患者随机分为治疗组和对照组.对照组24例采用西药常规治疗,治疗组28例在对照组治疗的基础上加用健脾益肺口服液治疗.连续治疗3个月,观察治疗前后证候积分、BODE指数(包括FEV1、6 min步行距离、呼吸困难量表评分、标准体重指数);测定治疗前后血清免疫球蛋白水平;同时观察2组患者疗1年内急性加重次数.结果 治疗后两组患者证候积分均较治疗前降低,且治疗后治疗组证候积分低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗组临床控制及显效率(42.8%),高于对照组(20.8%),差异具有统计学意义(P<0.05);与治疗前比较,治疗组患者治疗后体重指数、呼吸困难量表评分及6 min步行距离明显增加,BODE指数降低,且优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);对照组治疗前后体重指数、呼吸困难量表评分、6 min步行距离及BODE指数差异无统计学意义(P>0.05);两组患者治疗后FEV1差异无统计学意义(P>0.05);治疗后治疗组血清IgG、IgA、IgM水平较治疗前提高,且IgG、IgA水平均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);1年内治疗组急性发作频率低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 健脾益肺口服液治疗COPD稳定期患者可以改善症状,增加运动耐量,提高机体免疫机能,减少急性发作次数.

    作者:史肃育;吴同启;郭建辉;韦蓉;梁栋 刊期: 2014年第09期

  • 麦冬多糖对NOD小鼠颌下腺AQP5和VIP mRNA表达的影响

    目的 观察麦冬多糖对NOD小鼠颌下腺的保护作用.方法 给予NOD小鼠高中低剂量麦多冬多糖灌胃11周,观察麦冬多糖对NOD小鼠颌下腺中水通道蛋白5(AQP5)及血管活性肠肽mRNA(VIPmRNA)表达的影响.结果 麦冬多糖高中低剂量均可降低颌下腺淋巴细胞浸润度,上调颌下腺AQP5和VIP mRNA的表达.结论 麦冬多糖对NOD小鼠颌下腺具有保护作用.

    作者:陶依凤;李成荫;汪悦;孙丽霞;晏婷婷;吴素玲 刊期: 2014年第09期

  • 红景天苷对H9c2心肌细胞损伤的保护作用及机制研究

    目的 观察红景天苷对H2O2诱导的H9c2心肌细胞氧化应激损伤的线粒体保护作用,并探讨其具体的信号转导机制.方法 利用大鼠胚胎心脏组织来源的H9c2细胞建立H2O2损伤模型,分别给予100,75,50,25,1μmol/L的红景天苷预处理,MTT法测定细胞存活率,确定红景天苷的适保护浓度;应用激光扫描共聚焦显微镜成像法,检测线粒体特异性荧光染料四甲基罗丹明乙酯(tetramethyrhodamine ester,TMRE),观察细胞线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,△Ψm)的变化,证明红景天苷是否通过抑制线粒体通透性转移孔(mitochondrial permeability transition pore,mPTP)的开放而发挥心肌线粒体的保护作用;同时用Western-blot法检测磷酸化Akt,磷酸化GSK-3β蛋白表达,初步探讨其具体信号转导机制.结果 与H2O2组比较,红景天苷各浓度组细胞存活率显著提高(P<0.05);TMRE荧光减弱程度均明显减低,以浓度50 μmol/L时作用明显(P<0.05);红景天苷(50 μmol/L)可显著上调Akt及GSK-3β的磷酸化水平(P<0.05).结论 红景天苷能够通过线粒体保护途径对抗H2O2诱导的H9c2细胞氧化应激损伤,且该保护作用可能是通过PI3K/Akt通路促进其下游因子GSK-3β的磷酸化,从而抑制mPTP的开放实现的.

    作者:尹敬;田炜;魏建强;崔书霞;喇孝瑾;徐菁蔓;王亚;李继安 刊期: 2014年第09期

  • 中医护理在老年人工全髋关节置换术病人中的应用

    目的 研究中医护理在人工全髋关节置换术病人中的应用效果.方法 将112例老年骨折后行人工全髋关节置换术病人,随机分为研究组和对照组,其中研究组57例和对照组55例.对照组给予常规护理,研究组结合中医护理模式进行临床护理,分别于患者住院时、住院10天后采用焦虑自测量表(SAS)评分、抑郁自测量表(SDS)进行评分比较,及住院期间健康教育掌握率、并发症发生率、患者满意度等比较分析.结果 SAS评分、SDS评分两组治疗后均有改善(P<0.05),研究组改善较对照组显著.在健康教育掌握率、并发症发生率、患者满意度的比较中,研究组优于对照组.结论 结合中医护理可以明显减轻术后病人的焦虑和抑郁程度,提高健康教育掌握率,减少术后并发症发生率,提高患者满意度,值得临床研究推广应用.

    作者:樊星;赵海燕;崔立敏 刊期: 2014年第09期

  • 新疆雪莲总黄酮对DNA甲基化酶抑癌作用的影响

    目的 探讨新疆雪莲总黄酮对DNA甲基化酶活性及癌细胞DNA甲基化状态的影响.方法 采用DNA甲基化酶活性分析实验检测雪莲总黄酮对DNA甲基化酶活性的影响,甲基化特异性PCR(MSP)检测雪莲总黄酮处理2d后食管癌KYSE510细胞抑癌基因P16启动子CpG岛甲基化状态;同时流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 雪莲总黄酮抑制DNA甲基化酶M.Alu I活性,MSP实验结果显示雪莲总黄酮处理2d后,癌细胞未甲基化状态P16基因的表达水平升高,KYSE510细胞P16基因mRNA恢复表达.流式分析结果显示,雪莲总黄酮处理KYSE510癌细胞2d后,处理组细胞凋亡率与对照组比较显著增加(P<0.05).结论 雪莲总黄酮可以通过影响DNA甲基化酶活性,激活表现沉默的抑癌基因表达,抑制癌细胞增殖.

    作者:吕芳;李雪峰;张晓梅;王大新;李江伟 刊期: 2014年第09期

  • 升阳理论在慢性乙型肝炎证治中的意义

    从中医“肝主升发”的生理观、慢性乙型肝炎正气内馁,阳气不振,无力达邪的中医病机观、及升阳以解郁、除湿、散火、培正的慢性乙型肝炎治疗观3个层面阐发和论述升阳理论在慢性乙型肝炎证治中的意义,为慢性乙型肝炎中医治法的优化和疗效的提高提供理论基础.

    作者:张晓东 刊期: 2014年第09期

  • 白芍药材及不同炮制加工品亲脂性成分气相色谱-质谱联用分析

    目的 研究白芍药材及其不同炮制品(饮片、酒白芍、麸炒白芍、发酵白芍)亲脂性成分,为白芍的综合利用提供参考.方法 运用GC-MS法对白芍药材及其不同炮制品亲脂性成分进行分离测定,结合质谱库检索系统对化合物进行结构鉴定,应用色谱峰面积归一化法计算各成分的相对百分含量.结果 白芍药材及其不同炮制品共鉴定出23种成分.结论 炮制对白芍的亲脂性成分有显著影响,经不同程度加热炮制后,亲脂性成分种类和数量均有不同程度的改变,以发酵白芍成分数量多.

    作者:马玉;郭力;许莉 刊期: 2014年第09期

  • 梵净山自然保护区石松类药用植物资源调查

    目的 对贵州梵净山自然保护区石松类药用植物的种类进行研究.方法 采用野外实地考察、资料查阅、标本的采集和鉴定、以及石松类药用植物蕴藏量的调查等研究方法.结果 基本掌握了梵净山自然保护区石松类药用植物的种类情况.结论 梵净山自然保护区石松类药用植物有2科,4属,21种.

    作者:徐宏;赵能武;杨玉涛;张敬杰;刘亚华 刊期: 2014年第09期

  • 针灸动物实验标准化若干问题浅议

    针灸的标准化建设是针灸学在国际领域中发展的必然需求,目前已取得了卓有成效的进展,但也存在一些困难.笔者在针灸动物实验过程中发现一些问题,提出若干建议,以期能够为促进针灸标准化建设发挥作用.

    作者:梁玉磊;许晓康;孙彦辉;孙立虹;石斐;刘君 刊期: 2014年第09期

  • 一年生喜马拉雅紫茉莉根的产量和boeravinone C的动态变化

    目的 确定一年生喜马拉雅紫茉莉的佳采收时期.方法 利用HPLC研究了不同采收期对一年生喜马拉雅紫茉莉根的产量和boeravinone C含量的影响.结果 林芝地区一年生喜马拉雅紫茉莉根的佳采收时期是9月20日左右.结论 为喜马拉雅紫茉莉的人工种植与示范提供指导,从源头上保证喜马拉雅紫茉莉药材的质量和产量.

    作者:李连强;权红;王莉莎;蔡翠萍;陈敏;兰小中 刊期: 2014年第09期

  • 中药指纹图谱与药效关联方法的研究进展

    将中药指纹图谱与药效进行关联,既能保证中药的有效性,又为中药的质量控制增加了“安全锁”.全文阐述了谱效关联的研究现状、谱效相关的数据处理方法、应用前景及发展远期目标,为建立新形态的中药质量评价新模式提供参考,终实现对中药质量的准确控制.

    作者:王平;张丽美;赵渤年;高燕 刊期: 2014年第09期

  • 夏阳教授治疗更年期综合征经验介绍

    更年期综合征也称围绝经期综合征,是指妇女在绝经前后一段时间,由于卵巢功能减退,下丘脑-垂体-卵巢轴(性腺轴)平衡失调而出现的以植物神经功能失调为主的症候群[1].该病是妇科临床常见病,随着社会节奏加快、人口老龄化、平均寿命延长,该病呈现出发病早、病程久的趋势,严重影响了广大妇女的健康.西医治疗本病主要以激素替代疗法(HRT),单纯补充雌激素、辅以孕激素或雄激素联合用药.虽疗效肯定,但其阴道出血、乳房胀痛等不良反应及中远期致子宫内膜癌、乳腺癌、中风等副作用无法排除,寻找安全有效、副作用小的治疗方法势在必行.传统的中医药治疗积累了很多丰富的临床经验,传承至今,且药物毒副作用少,成为研究的热点.滋肾疏肝饮是已故天津著名妇科专家王敏之教授的经验方,吾师在早年跟师学习的基础上不断实践总结,形成了自身治疗更年期综合征的经验.吾有幸将之总结如下.

    作者:闫清雅;夏阳 刊期: 2014年第09期

  • 香砂六君丸中的黄曲霉素B1、B2 、G1 、G2的含量测定及安全性评价

    目的 建立高效液相色谱法测定香砂六君丸中的黄曲霉素B1、B2、G1、G2的含量测定,并评价香砂六君丸中黄曲霉素安全性.方法 采用C18柱,流动相为甲醇-水(45:55),紫外光衍生,荧光检测器,激发波长为360nm,发射波长450nm,并对全国流通领域的香砂六君九中黄曲霉素B1、B2、G1、G2进行测定.结果 建立的HPLC法,4种物质平均回收率92.6%、93.18%、92.99%、91.69%,RSD分别为:1.61%、1.72%、1.59%、1.31%,全国流通领域的香砂六君丸所含黄曲霉素的含量安全情况较好.结论 该方法操作简便,结果稳定可靠,可作为该制剂的定量分析方法及安全评价.

    作者:宋晓宁;张志勇 刊期: 2014年第09期

  • 广西茉莉花叶总黄酮的抗氧化作用研究

    目的 提取广西茉莉花叶中的总黄酮并探究总黄酮的抗氧化能力,为充分利用茉莉花资源提供理论依据.方法 以95%乙醇为提取溶剂,超声辅助法提取茉莉花叶中的总黄酮;分别采用紫外分光光度法、邻苯三酚自氧化法研究其黄酮提取液对DPPH·和O2-·两种自由基的清除能力,以及利用普鲁士兰法测定其黄酮还原Fe3+的能力.结果 茉莉花叶总黄酮对DPPH·和O2-·两种自由基的清除作用明显,且清除率与浓度存在一定的量效关系,清除率随黄酮的浓度增加而增强;茉莉花叶总黄酮对Fe3+也具有较强的还原能力.结论 广西茉莉花叶总黄酮具有较强的抗氧化作用.

    作者:周金花;何燕平;梁绍兰;温昭君;李月仕;李容;黄锁义 刊期: 2014年第09期

  • 通肝生乳汤配合乳房按摩治疗产后乳房胀痛的研究

    目的 运用通肝生乳汤配合乳房按摩,治疗产后乳房胀痛,并进行对照研究,确定治疗效果.方法 选择经阴道正常分娩的初产妇,采用不同治疗方案,在三个时段的治疗效果进行统计.结果 研究对象经过不同治疗方案的处置,24 h治愈率、总有效率有统计学意义(P<0.05).结论 通肝生乳汤配合乳房按摩,治疗产后乳房胀痛具有良好的临床效果,可在临床上应用和推广.

    作者:杨春花;龚丽;叶莅琦;肖晓萍 刊期: 2014年第09期

时珍国医国药杂志

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