学术投稿

结核杆菌MTC28基因原核表达载体构建

佟伟;李宏伟;卢颖;吴学敏

关键词:结核杆菌, MTC28, 重组质粒
摘要:快速、有效和灵敏的诊断是控制结核病的关键之一.目前常用的诊断试剂结核菌素纯蛋白衍生物(PPD)是一种未被明确成分的结核杆菌抗原混合物,普遍存在于结核杆菌、环境中非结核杆菌等菌株中,检测时常将卡介苗接种者及活动性肺结核治愈者误检为阳性,而且不能将活动性肺结核与潜伏感染相区别,限制了PPD的临床应用[1,2].
中国公共卫生杂志相关文献
  • 哈尔滨市养禽人群禽流感病毒感染检测

    禽流感已被认为是一种新发的人、禽共患传染病,禽流感病毒不仅能造成大批禽类死亡,还发现禽H5N1、H7N7和H9N2毒株可能直接感染人类[1].为了解黑龙江省哈尔滨市人群中禽流感病毒的感染状况,建立禽流感病毒抗体的实验室检测方法,有效预防和应对人禽流感疫情的发生,于2007年7~8月对全市养禽职业人群及非职业人群采用血凝抑制试验方法进行人血清中3个亚型H5、H7、H9禽流感病毒感染状况的检测,为制定人禽流感防制对策提供科学依据和技术支持.

    作者:肖凤娟;王艳;怀清杰;梁爽 刊期: 2009年第05期

  • 汶川大地震甘肃省灾民心理状况调查

    2008年发生的汶川大地震重创了包括四川、甘肃、陕西等数个省份,地震不仅造成人群的身体伤害,同时也会造成心理的伤害.地震引起的心理和精神上的创伤,如果不及时疏导稳定情绪,就可能出现一些过激的心理应激反应.此次地震使甘肃省陇南、天水、甘南等地的自然环境遭受严重破坏.居民的生活环境、心理状况均发生了重大变化.鉴于此,于2008年6月12日对甘肃省灾区居民进行了心理状况调查,以便为心理救助提供科学依据.

    作者:李盛华;王久夏;周明旺;叶丙霖;宋渊 刊期: 2009年第05期

  • 舟山市婴幼儿急性呼吸道病毒感染病原学分析

    目的 探讨浙江省舟山市婴幼儿急性呼吸道病毒感染的病原学特点.方法 采集2004年4月~2008年11月因急性呼吸道感染而住院治疗的1 217例患儿痰液,用直接荧光法检测呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、流感病毒A、B型(IFVA、B)、副流感病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型(PW Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)共7种病毒抗原.结果 1 217例患儿鼻咽分泌物中病毒抗原检测阳性360例,阳性率29.58%;所检病毒依次为RSV(17.50%)、ADV(5.67%)、IFV A(2.88%)、IFV B(1.39%)、PIV Ⅰ(0.74%)、PIV Ⅱ(1.07%)和PW Ⅲ(0.33%).<3个月患儿组病原检测阳性率高为45.67%,随着患儿年龄的增大,阳性率逐渐降低;冬春季节病毒抗原阳性率与夏秋季相近;毛细支气管炎患儿病毒阳性率明显高于急性支气管炎、急性支气管肺炎和上呼吸道感染.结论 呼吸道合胞病毒(RSV)感染仍是舟山市婴幼儿急性呼吸道病毒感染常见的病原,喘息性疾病感染率较高.

    作者:汤景平 刊期: 2009年第05期

  • 农村心血管疾病防治适宜技术推广绩效分析

    目的 了解河南省农村心血管防治适宜技术示范研究6个西医技术项目的 推广绩效.方法 从适宜技术推广能力和推广效率两方面入手,通过专家咨询法,结合现场调查,终确定医疗质量、医疗工作量、经济和社会效益等12项指标评价推广绩效.结果 参与推广的技术人员中中高级技术职称占57.8%,大专以上学历占58.0%;接受培训的346名卫生技术人员中89.0%熟练掌握了培训内容;累计推广心血管疾病防治适宜技术46例,人均推广0.133例;以慢性心力衰竭规范治疗技术推广效果好.结论 河南省农村心血管疾病防治适宜技术推广示范有一定绩效,还应进一步提高推广效率.

    作者:王宇明;赵菁;胡大一 刊期: 2009年第05期

  • 耐多药结核杆菌与药物敏感菌株蛋白质比较

    目的 比较结核分支杆菌耐多药菌株与药物敏感菌株在蛋白表达水平的差异,为进一步研究结核杆菌耐药的分子调控机制提供依据.方法 利用双向聚丙烯酰胺凝胶电泳(2-DE)分离耐多药结核分支杆菌和结核分支杆菌药物敏感菌株总蛋白质,通过计算机图像分析软件比较分析电泳图谱,切取部分差异蛋白质点进行肽质量指纹图谱分析.结果 发现27个蛋白质点具有明显差异,其中耐多药结核分支杆菌有6个蛋白质点明显表达上调.质谱分析发现,6个蛋白质点分别代表的蛋白质为无机焦磷酸酶、多肽脯氨酰基顺反同分异构酶A、延伸因子Tu、420个氨基酸的未知功能蛋白质、双加氧酶和转录调节蛋白(MoxR).结论 耐多药结核杆菌与药物敏感菌株在蛋白表达水平存在明显差异.

    作者:谢勇恩;任碧轩;胡为民;唐恩洁;敬保迁 刊期: 2009年第05期

  • 痛风相关因素及其易感基因研究进展

    痛风(Gout)是因嘌呤代谢障碍而导致血尿酸水平增高,和(或)因尿酸排泄减少而导致尿酸盐在组织中沉积的疾病.其中.在排除其他疾病的基础上,由先天性嘌呤代谢障碍和(或)尿酸排泄减少所致的痛风,称为原发性痛风.

    作者:沙海滨;贺圣文 刊期: 2009年第05期

  • 大连市某中学一起流行性腮腺炎暴发调查

    2007年3~4月,大连市某中学生发生一起流行性腮腺炎暴发疫情,经大连市金州区疾病预防控制中心及学校医务室人员的综合防治,使疫情得到有效控制.为了解此次流行性腮腺炎暴发流行状况,进行了流行病学调查.

    作者:刘红娥 刊期: 2009年第05期

  • 甘肃省12岁儿童口腔健康知识及行为调查

    12岁儿童是口腔健康教育和促进所关注的重点人群,他们的口腔健康知识及行为可反映学生时期获取口腔卫生知识、形成口腔卫生习惯的现况,因此,12岁儿童口腔健康知识及行为调查是全国口腔流行病学抽样调查的一个重要组成部分.为了解甘肃省12岁儿童的口腔健康知识水平及行为,为甘肃省儿童口腔健康教育工作和为预防保健工作提供科学依据,于2005年对甘肃省城乡431名12岁儿童进行口腔健康知识及行为调查.结果报告如下.

    作者:马力扬;杨兰;冯正虎;周海静;王凌;李娜;刘琳 刊期: 2009年第05期

  • 蒙古族人群2型糖尿病瘦素水平与胰岛素抵抗

    目的 在蒙古族人群中探讨血清瘦素水平与2型糖尿病胰岛素抵抗的关系.方法 在蒙古族人群中选择2型糖尿病患者54例及健康对照36人,检测其血清瘦素(Leptin)水平、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、体质指数(BMI)、血压、血脂等指标,并计算胰岛素敏感指数(ISI).结果 病例组与对照组比较,瘦素、FPG、FINS、BMI、甘油三酯(TG)、明显高于对照组,而ISI、高密度脂蛋白(HDL-C)明显低于对照组(P<0.05);糖尿病组瘦素与BMI、FINS、TG、总胆固醇(TC)呈正相关,而与ISI呈负相关(P<0.05);多元逐步回归分析显示,影响胰岛素敏感指数(ISI)的独立预测因素是瘦素、BMI、FINS(P<0.05).结论 2型糖尿病患者血清瘦素水平明显升高,肥胖、瘦素抵抗与胰岛素抵抗(IR)密切相关.

    作者:刘秉志;许秀举;布仁巴图 刊期: 2009年第05期

  • 铁岭市1998~2007年梅毒疫情分析

    随着改革开放及经济的发展,梅毒发病率有逐年上升趋势.梅毒患者是艾滋病感染的高危人群,控制梅毒疫情,可对防控艾滋病起积极作用.为掌握辽宁省铁岭市梅毒的流行特征及趋势,有效控制梅毒疫情,为制定防控措施和防治规划提供依据,对铁岭市1998-2007年梅毒疫情资料进行分析.

    作者:徐志宏 刊期: 2009年第05期

  • 铝螯合剂对染铝大鼠学习记忆及脑ATP酶影响

    目的 探讨铝鳌合剂1,2-二甲基-3-羟基-4-吡啶酮(deferiprone,DFP)对染铝大鼠学习记忆、脑组织中三磷酸腺苷酶(ATP)及铝、锌、铜、铁、钙、镁等元素的影响.方法 AlCl3染毒Wistar大鼠4周后分别给予不同剂量的DFP 2周,进行迷宫实验、测定脑组织ATP酶活力及铝、锌、铜、铁、钙、镁含量.结果 铝染毒组大鼠迷宫实验全天总反应时间(TRT)和错误次数显著高于各给药组(P<0.05,P<0.01);铝染毒组大鼠脑组织中Ca2+Mg2+-ATP酶活力显著低于高剂量组(P<0.05),各给药组ATP酶活力与阴性对照组比较差异均无统计学意义;各给药组脑铝含量显著低于铝染毒组(P<0.01),高剂量组恢复至阴性对照组水平;各给药组大鼠脑组织中锌、铜、铁、钙、镁的含量与阴性对照组比较,差异均无统计学意义.结论 在一定剂量范围内,DFP通过排铝,恢复ATP酶的活力改善大鼠的学习记忆功能,同时维持脑组织中锌、铜、铁、钙、镁代谢平衡.

    作者:巩泉泉;刘萍;禚金花;徐华雷;张雅楠 刊期: 2009年第05期

  • 亚洲牛带绦虫NOMO1基因在原核细胞中表达

    目的 构建亚洲牛带绦虫NOMO1基因原核重组质粒,进行原核表达、纯化及免疫学研究.方法 以亚洲牛带绦虫成虫cDNA文库中含NOMO1基因的质粒作为模板,扩增该基因,将其克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,测序鉴定重组质粒后再行诱导表达,表达产物通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定,并用蛋白免疫印迹(Western-blotting)分析其免疫反应性.结果 成功建构了原核重组质粒pET28a(+)-NO-MI1.该基因在大肠埃希菌中以包涵体形式存在,破包涵体后纯化蛋白通过SDS-PAGE鉴定结果表明该基因在大肠埃希菌BL-21/DE3得到高效表达.Western blotting结果显示,该重组蛋白可被亚洲牛带绦虫、牛带绦虫病人血清识别,具有免疫反应性.结论 成功克隆亚洲牛带绦虫NOMO1基因、表达和纯化得到了该基因的重组蛋白并且证明该基因具有免疫反应性,为进一步研究该基因的功能提供条件.

    作者:廖兴江;戴佳琳;黄江;胡旭初;余新炳;申萍香;周灵贵;郎书源 刊期: 2009年第05期

  • 儿童膳食营养与学习行为障碍相关性

    目的 研究儿童学习行为障碍的异常情况,探讨膳食营养与儿童学习行为障碍的相关性.方法 采用Conners父母用症状问卷对814名儿童进行学习行为障碍调查,对其中的368名儿童进行1年膳食营养回顾调查.结果 814名儿童注意力缺陷多动障碍(ADHD)的异常率为4.1%,男女生、各年级之间差异均无统计学意义(P>0.05).膳食调查的368名儿童中,ADHD异常儿童的脂肪、维生素E、硒的每日摄入量分别为(65.79±33.92)g,(18.22±11.70)mg,(39.94±21.04)μg,较正常儿童低,差异有统计学意义(P<0.05).膳食纤维、硒、洋葱、苹果等营养素或食物的摄入量与学习行为障碍各因子得分呈负相关(标准化系数=-0.400,-0.321,-0.114,-0.144等,P<0.05);膨化类食品、碳酸饮料、锰等食物或营养素的摄入量与学习行为障碍呈正相关(标准化系数=0.153,0.150,0.252等,P<0.05).结论 儿童膳食营养对学习行为有影响.

    作者:龚丽文;邹宁;范广勤;冯昶;邹时朴;肖元梅;阎骥 刊期: 2009年第05期

  • 日本广岛市脑卒中发病与气象条件关系

    目的 探讨脑卒中发病与气象条件的关系.方法 脑梗塞与脑出血病的病例由日本广岛市急救中心于2003年10月~2006年3月收集,气象数据由日本气象协会提供.日平均气温和气压分别定义为分组变量,采用泊松回归分析模型估计不同气温和气压条件下脑梗塞与脑出血发病的危险度.结果 在研究的892 d中,发生脑梗塞629例(男性占56.9%,女性占436.1%);发生脑出血677例(男性占55.7%,女性占44.3%).脑梗塞发病与气温呈U字形的关系,发病的危险度在21~24℃时低,当气温低于15℃和高于30℃时,发病的危险度升高(P<0.05);脑梗塞发病的危险度在日平均气压高于1 015hPa时增大(P<0.05).脑出血发病的危险度随气温的升高而减小(P<0.05),随气压的升高而增大(P<0.05),并呈剂量-反应关系.结论 脑梗塞和脑出血的发病与气温、气压有关.

    作者:汪宏莉;韩延柏;梯正之 刊期: 2009年第05期

  • 膨化食品中微量铅ID-ICP-MS检测

    膨化食品是儿童经常食用的一种食品.铅是一种对儿童的生长发育,学习记忆有害的微量元素.准确测定儿童膨化食品中微量铅的含量,评估儿童日常铅暴露水平,对维护儿童的正常生长发育有着重要意义.

    作者:余晓刚;邹向宇;颜崇淮;徐芳;沈晓明 刊期: 2009年第05期

  • 结核病耐药原因分析

    为加强结核病的预防与控制,中国28个省于1993年先后实施了世界银行贷款中国结核病控制项目,全面贯彻以发现和治疗肺结核病人为主的现代控制措施,结核病治疗取得了巨大的进步.

    作者:周丽莎;耿文奎 刊期: 2009年第05期

  • 海鞘对糖尿病大鼠血浆内皮素-1影响

    目的 探讨海鞘提取物治疗糖尿病及并发心血管疾病的有效性及其作用机制.方法 用链尿菌素建立大鼠糖尿病模型,给予海鞘提取物干预,检测血糖和血浆内皮素-1(endothelin-1,ET-1)含量.结果 链脲菌素腹腔注射1周后,其血糖水平均显著高于正常对照组,应用于本次实验的糖尿病大鼠的血糖含量均>8.1 mmol/L.连续给药干预4周后,糖尿病模型对照组血糖明显高于空白对照组(P<0.01),海鞘干预组明显低于糖尿病模型对照组(P<0.01).糖尿病模型对照组大鼠血浆ET-1含量明显高于正常对照组(P<0.01),海鞘干预组的血浆ET-1含量明显低于糖尿病模型对照组(P<0.01).结论 海鞘提取物对链尿菌素所致大鼠糖尿病具有降糖作用;对糖尿病引起的ET-1升高有抑制作用.

    作者:车光昇;宋光熠;刘铁;马越娇;李屹;董瑶;韩健 刊期: 2009年第05期

  • 福建省全球基金结核病控制项目效果评价

    目的 评价福建省第一轮全省基金结核病控制项目实施效果.方法 收集2003~2008年项目单位季报表,2007年全省结防机构人力资源现状调查、项目期末评估资料进行分析.结果 (1)结防工作经费投入逐年增加,从2001年的4.5万元增加到2007年的243.6万元(P<0.05).(2)结防人员人力资源明显改善,人员从项目实施前的146名,增加到项目实施后的190名,增长了30.1%.其中省、市、县三级人员分别增加了21.4%,23.2%,36.8%.(3)项目实现了肺结核病人的高发现与高治疗管理水平,5年共发现新涂阳肺结核病人13 317例,新涂阳病人发现率从2003年53.6%提高到2005年的74.5%,2006~2007年也达到并超过国家规定的70%目标;新涂阳肺结核病人治疗满2个月痰菌转阴率为88.8%,治愈率为91.1%.结论 第一轮全球基金结核病控制项目促进了福建省结核病防治规划的实施,也为其他项目提供了经验借鉴.

    作者:林淑芳;杜永成;陈求扬 刊期: 2009年第05期

  • 猪链球菌2型多重PCR鉴定方法建立

    目的 建立猪链球菌2型多重PCR鉴定方法.方法 根据猪链球菌种特异基因16S rRNA序列和猪链球菌2型特异性荚膜多糖编码基因cps2J基因序列,设计和合成2对特异引物,通过条件和体系优化,建立多重PCR检测方法.结果 猪链球菌2型参考株及18株分离株均扩增到清晰的目的 条带,而6株非猪链球菌2型参考菌株不能扩增出目的 条带.结论 多重PCR可以用于猪链球菌2型检测,特异性和敏感性好,为该病的快速诊断和分子流行病学调查提供了新的技术方法.

    作者:胡玉山;刘俊华;庞杏林;候水平;邓志爱;陈守义 刊期: 2009年第05期

  • 结核杆菌PEPCK表达及保护性免疫反应效果

    目的 研究结核杆菌磷酸烯醇型丙酮酸羧激酶(PEPCK)的表达,并观察此融合蛋白使机体产生的保护性免疫反应.方法 将含有结核杆菌磷酸烯醇型丙酮酸羧激酶(pckA)基因的重组质粒转化大肠埃希菌HB101,表达出融合蛋白PEPCK,并进行蛋白质印迹(Western blot)分析;选BALB/c小鼠60只,随机分为实验组和对照组.实验组每只小鼠用表达的PEPCK 10 μg加弗氏不完全佐剂进行腹腔免疫注射,对照组小鼠仅用弗氏不完全佐剂注射.每隔2周免疫1次,共免疫3次.末次免疫2周后,分别取小鼠脾脏、血清,检测CD4+T细胞和CD8+、T细胞及各细胞因子.结果 成功表达出融合蛋白PEPCK,并能够与小鼠抗卡介苗(BCG)血清反应;实验组小鼠的脾脏明显增大,粘连严重;CD4+T细胞增殖明显(73.5±3.69),CD4+/CD8+比值显著升高(5.1±0.98)(P<0.01);血清中γ干扰素(IFN-γ)、白介素12(TL-12)和α肿瘤坏死因子(TNF-α)均有不同程度的升高.结论 PEPCK能够诱发小鼠产生细胞免疫和体液免疫反应,是很好的抗结核疫苗候选分子之一.

    作者:柏雪莲;魏庆宽;李瑾;李桂萍;韩广东;崔勇;刘克义 刊期: 2009年第05期

中国公共卫生杂志

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主管:中华人民共和国卫生和计划生育委员会

主办:中华预防医学会