周景儒；赵婉妮；王栋梁；梁剑峰
目的 观察膜联蛋白A11(ANXA11)对人胃癌细胞株SGC7901 5-氟尿嘧啶(5-Fu)耐药性影响.方法 检测人胃癌细胞株SCG7901、BGC823的ANXA11表达.将ANXA11-小干扰RNA(siRNA)及阴性对照序列瞬时转染入SGC7901细胞,应用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测转染后各组细胞对不同剂量5-Fu(1、10、20、40、80 μg/ml)的药物敏感性改变.应用流式细胞术检测不同处理组凋亡率,应用定量聚合酶链反应(qPCR)、Western blot检测胸腺嘧啶脱氧核苷合成酶(TS)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)和bcl-2相关X蛋白(bax)表达的改变.结果 ANXA11 mRNA及蛋白表达量在SGC7901中显著高于BGC823(t=3.212,P=0.033;t=-10.768,P=0.000).转染组(转染ANXA11-siRNA)细胞的半数抑制剂量(IC50)及20％抑制剂量(IC20)值明显低于阴性、空白对照组(F =47.500,P=0.000;F =45.523,P=0.000).转染组、联合组凋亡率较阴性(转染NS-siRNA)、空白对照组(转染LipofectamineTM2000)显著升高(F=117.525,P=0.000),且联合组凋亡率较转染组明显升高(=9.004,P=0.000).转染组及联合组ANXA11蛋白表达较阴性、空白对照组显著降低(F=118.403,P=0.000).转染组及联合组bax的表达上调(F =35.608,P=0.000),而bcl-2、TS的表达降低(F=30.048,P=0.000;F=22.874,P=0.000).结论 抑制ANXA11表达能提高人胃癌细胞株SGC7901对5-Fu的敏感性,可能与抑制TS、bcl-2、上调bax的表达有关.
作者：贾楠；李勇；赵一杰；赵群；范立侨；檀碧波；刘羽 刊期： 2018年第04期
目的 探讨红景天苷对人骨肉瘤143B细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其机制.方法 杜尔伯科改良伊格尔培养基(DMEM,含10％血清及1％双抗)培养骨肉瘤143B细胞,实验分组为对照组、30、60 μmol/L红景天苷处理组.噻唑蓝(MTT)实验检测各组24、36、72 h的细胞增殖活性;处理24 h后,采用Transwell法检测3组细胞的侵袭能力;处理24 h后采用划痕实验检测各组细胞迁移能力,计算细胞迁移率.3组细胞在处理24 h后,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的mRNA相对表达水平变化,Western blot实验检测各组细胞MMP-2、MMP-9的蛋白表达水平.透射电镜检测处理24 h后的细胞自噬体.结果 处理24 h后,60 μmol/L组(0.038±0.002)和30μmol/L组(0.054 ±0.002)143B细胞吸光度值低于对照组(0.074±0.004,t2.659,P=0.016;t=1.993,P=0.039).处理48、72 h后,与对照组比较,浓度为30、60 μmol/L的红景天苷组143B细胞吸光度值同样分别低于对照组,呈剂量依赖和时间依赖性.60 μmol/L[(48.7±8.2)个]和30 μmol/L[(76.8±12.8)个]红景天苷组143B细胞跨膜数目分别少于对照组[(94.5±11.9)个,t=8.056,P=0.000;t=2.472,P=0.038].60 μmol/L[(52.9±6.8)％]和30 μmol/L[(82.6±3.7)％]红景天苷组143B细胞迁移率分别低于对照组[(98.7±0.3)％,t=12.576,P=0.000;t2 =9.794,P=0.000].60 μmol/L和30 μmol/L红景天苷处理组MMP-2、MMP-9的蛋白和mRNA相对表达量分别低于对照组.60 μmol/L红景天苷实验组自噬体形成数目[(2.6±0.5)个]多于对照组[(1.3±0.4)个,t=3.517,P=0.025].结论 红景天苷抑制了骨肉瘤细胞增殖、迁移、侵袭,其机制可能与诱导自噬及抑制MMP家族蛋白表达相关.
作者：赵迎春；陶海；郭卫春 刊期： 2018年第04期
目的 探讨榄香烯对神经母细胞瘤增殖和凋亡的作用.方法 将SK-N-SH神经母细胞瘤细胞株分为对照组和实验组,实验组中加入不同浓度的榄香烯.应用细胞计数试剂盒(CCK-8)法测定榄香烯对SK-N-SH细胞增殖活力的影响,采用流式细胞仪测定榄香烯对SK-N-SH细胞凋亡的诱导作用,应用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测榄香烯对SK-N-SH细胞中半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3和Caspase-9的mRNA表达的影响,并进一步用Caspase活性试剂盒测定Caspase-3和Caspase-9的活性.结果 榄香烯作用24 h后,各浓度点的抑制率为(10.963 ±2.994)％、(50.013±3.641)％、(77.515 ±4.612)％,t=4.220、5.615、8.096,P=0.022、0.000、0.000;榄香烯作用48 h后,各浓度点的抑制率为(14.478±2.270)％、(56.387±3.494)％、(79.531±3.874)％,t=4.229、5.379、7.842,P=0.021、0.000、0.000;榄香烯作用72 h后,各浓度点的抑制率为(24.174±2.920)％、(64.619±3.180)％、(87.375±4.189)％,t=4.759、6.773、15.384,P=0.001、0.000、0.000.榄香烯作用SK-N-SH细胞24 h后显著诱导细胞凋亡,各浓度点的凋亡率为(19.280±2.991)％、(52.493±4.379)％、(82.189 ±3.175)％,t=4.166、6.324、9.703,P=0.048、0.000、0.000.榄香烯作用SK-N-SH细胞后上调其Caspase-3和Caspase-9的mRNA表达,Caspase-3 mRNA在各浓度点的上调倍数为(2.712 ±0.127)、(3.013 ±0.304)、(3.931 ±0.410),t=4.714、6.079、9.318,P=0.015、0.000、0.000;Caspase-9 mRNA在各浓度点的上调倍数为(1.206±0.136)、(2.331 ±0.412)、(2.824 ±0.410),t =4.874、7.523、10.530,P =0.038、0.010、0.000.并且榄香烯增强Caspase-3和Caspase-9的活性,Caspase-3的活性在各浓度点的上调倍数为(1.517±0.192)、(2.016±0.323)、(2.081 ±0.361),t=5.175、7.107、12.100,P=0.005、0.001、0.000;Caspase-9在各浓度点的上调倍数为(1.672 ±0.331)、(2.100 ±0.276)、(2.328 ±0.361),t=4.605、6.532、15.101,P=0.003、0.011、0.000.结论 榄香烯对神经母细胞瘤的增殖有抑制作用,并且通过激活Caspase-3和Caspase-9诱导其凋亡.
作者：周景儒；赵婉妮；王栋梁；梁剑峰 刊期： 2018年第04期
目的 观察非老年慢性疼痛患者术后认知功能及相关脑区的代谢变化.方法 纳入骨关节镜手术患者15例,根据视觉模拟评分(VAS)将患者分为:观察组8例(慢性疼痛),对照组7例(非慢性疼痛).术前和术后3个月随访完成VAS、简短认知能力测试(SKT)评分和磁共振扫描.结果 SKT评分子测试的各部分在两组间差异无统计学意义.术后观察组脑导水管周围灰质(PAG)区谷氨酰胺/谷氨酸(Glx)水平显著高于对照组(1.64 ±0.46比1.21±0.19),观察组PAG区Glx术后显著升高(1.64±0.46比1.22±0.23),两组间大脑前部内侧前额叶皮层(mPFC)区不同代谢产物浓度差异无统计学意义.结论 慢性疼痛可导致PAG区适应不良,此类患者可能是潜在的认知功能障碍发生的高危人群.
作者：顾华华；李磊；吕一正；陈茜；俞卫锋 刊期： 2018年第04期
目的 探讨姜黄素对人血管瘤内皮细胞(HemECs)中血管内皮细胞生长因子(VEGF)、血管生成素2(Ang-2)的影响及促进其凋亡的机制.方法 酶消化法分离培养HemECs,并经不同浓度(0、6.25、12.50、25.00、50.00和100.00 μmol/L)姜黄素作用后,用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测HemECs增殖,原位缺口末端标记法(TUNEL)法检测HemECs的凋亡,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测VEGF、Ang-1和Ang-2 mRNA,细胞免疫荧光定量检测血管内皮细胞生长因子受体(VEGFR)1、VEGFR2、内皮特异性酪氨酸激酶受体(Tie)1和Tie2蛋白表达.结果 25.00、50.00 μmol/L姜黄素作用48 h比24 h细胞存活率降低[(62.34±10.08)％比(79.25±8.17)％和(15.23 ±4.01)％比(26.10±6.05)％;t=3.192,P=0.010和t=3.668,P=0.004].25.00μmol/L姜黄素作用48 h后,TUNEL阳性细胞数为(16.00±2.80)个,高于0.μmol/L姜黄素作用48 h后的[(5.00±1.40)个,t=8.607,P=0.000].25.00 μmol/L姜黄素作用24h后,VEGF mRNA相对表达量为0.34±0.09,低于0μmol/L姜黄素的1.00±0.12(=8.193,P=0.001);Ang-2 mRNA相对表达量为0.45±0.07,低于0μmol/L姜黄素的0.99 ±0.12(t =6.756,P=0.003).25.00 μmol/L姜黄素作用24h后,VEGFR2和Tie2的相对表达量分别为0.30 ±0.05、0.30±0.04,较0μmol/L姜黄素的0.48±0.09、0.52±0.07降低(=4.300,P=0.002;t=6.602,P=0.000).结论 姜黄素可抑制HemECs的生长并促进其凋亡,其可能与下调VEGF、Ang-2的表达有关.
作者：赵松峰；张晓坚；赵高峰 刊期： 2018年第04期
目的 观察膜联蛋白A9(ANXA9)在人结肠癌细胞株SW620增殖中发挥的作用,并探讨其机制.方法 实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot法检测人结肠癌细胞株HT29、SW620、SW480、LoVo、SW1116中ANXA9的表达;应用40 nmol/L的ANXA9-小干扰RNA(siRNA)转染ANXA9表达强的SW620细胞株,抑制内源性ANXA9的表达;细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测转染对SW620细胞活性的影响;流式细胞术(FCM)检测转染ANXA9-siRNA对SW620细胞周期的影响;Real-time PCR和Western blot法检测增殖相关基因增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白(Cyclin)D、Cyclin E、p21、p16的表达.结果 人结肠癌细胞株HT29、SW620、SW480、LoVo、SW1116中ANXA9 mRNA表达强度分别为0.027±0.004、0.041±0.005、0.028±0.003、0.033±0.003、0.025±0.005;ANXA9蛋白表达强度分别为0.287±0.076、1.246±0.103、0.326±0.040、0.387±0.097、0.295±0.064,其中SW620细胞ANXA9的mRNA和蛋白表达强(F=8.212,P=0.003;F=81.728,P=0.000).转染组、阴性对照组、空白组的ANXA9mRNA和蛋白的表达水平分别为0.209±0.016、0.317±0.104,0.957±0.070、0.647±0.155,1.031±0.171、0.727±0.145.转染后转染组的细胞ANXA9的mRNA和蛋白均明显低于对照组及空白组(F=54.072,P=0.000;F=7.601,P=0.023).CCK8结果显示,转染组、阴性对照组、空白组的细胞活性24h分别为0.605±0.024、0.612±0.022、0.628 ±0.027;48 h分别为0.810±0.049、1.196±0.118、1.308±0.070;72 h分别为1.145±0.070、1.531±0.062、1.454±0.081.转染组的细胞活性明显低于对照组及空白组(F =38.742,P=0.000;F=32.56,P=0.000).G0/G1、G2/M、S期的细胞比例在转染组为(66.870±3.850)％、(15.060±2.480)％、(18.080± 1.420)％;阴性对照组为(50.070±3.370)％、(32.520±2.500)％、(17.410±0.920)％;空白组为(48.740±2.170)％、(32.390±1.820)％、(19.210±0.390)％.转染组细胞的G0/G1期比例升高(F=29.752,P=0.001)、G2/M期的比例降低(F=57.860,P=0.000),S期细胞的比例无明显变化(F=1.568,P=0.284).转染组细胞Cyclin D1、Cyclin E1的mRNA和蛋白表达明显降低[mRNA:F=462.821、5.512,P=0.000、0.044;蛋白:F=15.148、8.300,P=0.005、0.019)],而p21的mRNA和蛋白表达明显增高[mRNA:F=6.472,P=0.032;蛋白:F=21.230,P=0.002].结论 ANXA9可能通过Cyclin D1、Cyclin E1、p21表达而参与了结肠癌细胞株SW620的增殖过程.
作者：卞红磊；于溯洋；张盛君；高鑫 刊期： 2018年第04期
本文旨在建立一种稳定、易复制、符合临床实际的代谢综合征(MS)合并心肌梗死大鼠模型,现报道如下.一、材料与方法1.MS模型制备:自发性2型糖尿病(OLETF)大鼠为代谢综合征组(MS组),OLETF同品系的完全不发病对照(LETO)大鼠为对照组各9只,分别给予高脂、标准饲料喂养24周.
作者：贺晶；方涛；任梦萌；崔晓旭；邸研博；刘勇；李永辉；国欣涛；田凤石 刊期： 2018年第04期
目的 检测儿童类风湿关节炎亚型(S-JIA、JIA少关节型)外周血Nod样受体家族包含pyrin结构域蛋白-3(NLRP-3)mRNA基因表达差异,探讨NLRP-3 mRNA表达水平差异与患儿临床表现特征的相关性.方法 收集28例初治类风湿关节炎(S-JIA13例,JIA少关节型15例)住院患儿及20例同期正常体检患儿的外周血标本,提取标本总RNA,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测外周血标本中NLRP-3 mRNA表达的差异.结果 在外周血中NLRP-3 mRNA在S-JIA组的相对表达量为0.0667 ±0.0044,高于JIA少关节型组(0.0107±0.001 5)及正常对照组(0.021 3 ±0.003 2),差异有统计学意义(F=5.491,P=0.010);正常对照组与JIA少关节型组之间比较时,差异无统计学意义(F=1.745,P=0.105).结论 NLRP-3 mRNA水平升高,是导致S-JIA产生炎性反应的重要影响因素之一.
作者：向明丽；刘秋亮；刘玉峰；张素琴；丁婧 刊期： 2018年第04期
目的 观察血管活性肠肽(VIP)对骨关节炎(OA)治疗效果和OA软骨细胞体外培养影响,并探讨其相关作用机制.方法 通过Huhh造模法建立SD大鼠膝关节OA模型大鼠,构建重组pcDNA3.1 +/VIP质粒,并通过关节腔连续1个月注射VIP质粒,通过苏木素-伊红(HE)染色观察OA大鼠膝关节病理变化,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测血清细胞因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1、IL-2和IL-6]水平.同时,体外培养OA软骨细胞,VIP质粒处理后,通过细胞计数试剂盒(CCK-8)检测软骨细胞增殖能力,通过Western blot法检测软骨细胞的Ⅰ型胶原(Collagen Ⅰ)、Ⅱ型胶原(CollagenⅡ)、核因子(NF)-KB蛋白表达水平.通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测软骨细胞的基质金属蛋白酶(MMP)-3和基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP)-1的mRNA表达水平.结果 VIP可显著改善OA大鼠膝关节病理状态,此外,VIP质粒作用前,OA大鼠血清TNF-α、IL-1、IL-2、IL-6分别为(185.3±9.1)、(391.7 ±20.6)、(169.8±10.8)、(143.7±15.2)pg/ml,VIP质粒作用后OA大鼠血清TNF-α、IL-1、IL-2、IL-6分别为(112.8±10.2)、(298.2±15.9)、(131.4±13.4)、(81.6±13.4) pg/ml,有效降低了OA大鼠血清TNF-α、IL-1、IL-2、IL-6水平.同时,经CCK-8检测发现,OA组和VIP质粒处理组细胞测定的吸光度(A450nm)值分别为0.75±0.12、1.38±0.14、即在VIP质粒处理下,软骨细胞增殖能力明显增强.此外,OA组和VIP质粒处理组软骨细胞的MMP-3的mRNA相对表达量分别为2.48 ±0.24、1.35±0.16;TIMP-1的mRNA相对表达量分别为0.56 ±0.11、0.85±0.09,即在VIP质粒作用下,MMP-3表达明显下调,TIMP-1表达显著上调.Western blot法检测Collagen Ⅰ、CollagenⅡ、NF-KB蛋白表达发现,在VIP质粒作用下,软骨细胞的Collagen Ⅰ和NF-KB表达降低,CollagenⅡ表达升高.结论 VIP质粒在一定程度上可通过抑制NF-κB信号通路治疗OA.
作者：王华；姜未；张晓明；吕猛；林博文；周楚坤 刊期： 2018年第04期
目的 通过3D打印脊柱骨盆模型及计算机软件辅助导航,介绍S3髂骨螺钉内固定的置钉入路及参数分析.方法 通过3D打印模型及计算机软件相关数据确定S3节段的置钉空间,并选取本次髂骨螺钉进针点位置.随机抽取已进行过骨盆三维CT重建扫描的男女成年患者图像各20份,选取本次已确定可以进钉的螺钉入点(O),以身体冠状面或骶骨水平横切面为水平切面(X),测量球形探针进针偏角小角度范围(A)、大角度范围(B)及佳进钉角度范围(Z),并测量本次进针点位置螺钉钉道长度及宽度.对应成人3D打印模型中证实本次新型置钉方式的准确性及安全性.结果 进针角度由小角度OA范围至大角度OB角度范围内,在窄横径超过7 mm的条件下,均可安全置入万向髂骨螺钉(平均长度80 ～ 90 mm)进行固定.进针角度范围:男性X-OA-OB平面[(47.1±1.9)°～(56.7±1.4)°],佳角度X-OZ范围[(52.3±1.1)°];女性X-OA-OB平面[(49.6±0.8)°～(59.9±1.1)°],佳角度X-OZ范围[(53.7±0.8)°].钉道长度范围:男性OA平面为(91.4±2.3) mm,OB平面为(89.5±4.6)mm,OZ平面范围为(94.2±2.1)mm;女性OA平面为(90.4±1.9) mm,OB平面为(85.6±2.3)mm,OZ平面范围为(96.4±1.7) mm.在佳置钉角度OZ,男性与女性比较,置钉角度(F =4.276,P =0.001)及置钉长度比较差异均有统计学意义(F =3.647,P=0.001);OA中,男性与女性的置钉偏角数值比较,差异有统计学意义(F=5.268,P=0.001),置钉长度数值比较差异无统计学意义(F=1.513,P=0.139).OB中,男性与女性比较,置钉角度(F=8.153,P=0.001)及置钉长度比较差异均有统计学意义(F=3.341,P=0.002).在相同的置钉平面上,不同性别的成人钉道尾向偏角数值差异无统计学意义(P＞0.05).结论 经S3侧块髂骨螺钉置钉均可安全有效置入髂骨螺钉,通过进针点O-Z方向的髂骨螺钉是理论上安全性及稳定性较好的脊柱骨盆固定术置入髂骨螺钉的位置角度.
作者：惠宝锋；王志杰；褚言琛；侯庆先；杨文玖；宫硕 刊期： 2018年第04期
目的 观察胃癌细胞中缺氧对N-myc下游调节基因4(NDRG4)功能的影响.方法 建立胃癌细胞缺氧模型,Transwell和划痕实验分析缺氧对胃癌细胞转移潜能的作用,同时通过Western blot和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析缺氧诱导的NDRG4蛋白表达上调在缺氧促胃癌进展中的潜在功能.另外通过细胞增殖实验、克隆形成实验、Transwell和划痕实验分析常氧下NDRG4过表达对胃癌细胞恶性表型的作用.结果 缺氧诱导24h可明显增强胃癌细胞的转移潜能,BGC-823的侵袭细胞数由常氧下的(48.20±11.76)个上升至(174.20±9.04)个,而MGC-803侵袭细胞数也由常氧下的(28.75 ±2.50)个上升至(229.00±34.22)个,差异均有统计学意义(均P=0.000).划痕实验结果也表明,常氧下BGC-823和MGC-803细胞的划痕愈合率分别为(15.69±0.04)％和(11.90 ±0.04)％,而缺氧诱导后的BGC-823和MGC-803细胞的划痕愈合率分别为(25.00±0.02)％和(32.03±0.04)％,且差异均有统计学意义(P=0.025、0.006).此过程伴随NDRG4蛋白表达水平的上升,NDRG4在缺氧应激下的表达上调或参与了胃癌进展;然而常氧状态下NDRG4过表达却能显著抑制胃癌细胞增殖,降低其克隆形成能力,并能有效抑制其转移.结论 缺氧诱导上调NDRG4或在缺氧促胃癌进展过程中发挥积极作用,不同氧浓度状态下NDRG4功能变化或与缺氧刺激下NDRG4异常积聚及功能性蛋白修饰相关.
作者：洪莲莲；吴盈利；陈香浏；雷兰；凌志强 刊期： 2018年第04期
目的 观察转录因子性别决定区Y框蛋白2(SOX2)在肝癌组织中的表达及其对肝癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响.方法 利用免疫组织化学方法分析SOX2在32例肝癌及其癌旁组织中的表达;在肝癌细胞株SMMC-7721中通过细胞增殖、侵袭等功能实验分析SOX2通过上皮-间充质转化(EMT)促进转移复发的具体机制.结果 在人肝癌组织标本中SOX2较其配对癌旁组织及正常组织表达上调,其在癌组织、癌旁组织及正常肝组织中SOX2的阳性率分别为73.8％、32.5％及12.4％ (P =0.008、0.006).在体外克隆形成实验结果示pWPI-SOX2转染组细胞克隆形成数为(654.9±39.4)个,显著高于对照组(232.7±19.4)个(P=0.000).Transwell小室实验结果显示它能促进肝癌细胞侵袭能力(P =0.003).慢病毒转染的SOX2高表达SMMC-7721肝癌细胞株发生EMT,上皮化表型E-钙黏蛋白(E-cadherin)、紧密连接蛋白(ZO-1)的表达下调和间质化表型N-钙黏蛋白(N-cadherin)和纤维连接蛋白(Fn)表达上调.结论 SOX2表达与肝癌的发生、发展密切相关,其具体机制可能是通过诱导EMT促进肝癌的转移复发.
作者：薛玉龙；汪传一；韩杰；杨征宇；辛永利 刊期： 2018年第04期
目的 筛选早期甲状腺乳头状癌(PTC)特征性微小RNA(miRNAs,miR)表达谱,旨在寻找一种无创早期诊断PTC标志物.方法 采用基于实时荧光定量聚合酶反应(PCR)的miRNA芯片分析10例早期PTC特征性miRNAs表达谱,采用10例甲状腺结节组织作对照鉴定和验证PTC特征性标记;同时在100例早期PTC患者术前和术后7d外周血、100例甲状腺结节患者外周血、以及100例健康人外周血标本中进行验证分析.结果 与癌旁正常组织比较,早期甲状腺乳头状癌组织中有20种miRNAs表达存在差异,其中11种miRNAs(hsa-miR-21-5p、hsa-miR-31-5p、miR-34a等)上调、9种miRNAs(hsa-miR-15a-Sp、hsa-miR-16-5p 、hsa-miR-26a-5p等)下调;hsa-miR-181 b-5p在良性甲状腺结节标本中表达上调.hsa-miR-21-5p、hsa-miR-146a-5 p、hsa-miR-155-5p、hsa-miR-221-3p、hsa-miR-222-3p、hsa-miR-181b 6种miRNAs在PTC患者术前血清中的表达显著高于健康对照组(六者在PTC组和健康对照组表达中位数分别为:hsa-miR-21-5p(8.25比3.38)、hsa-miR-146a-5p(13.63比3.42)、hsa-miR-155-5p(10.83比3.49)、hsa-miR-221-3p(18.63比3.82)、hsa-miR-222-3p(22.74比3.92)、hsa-miR-181b(9.52比3.43),均P=0.000.术后7d血清hsa-miR-146a-5p、hsa-miR-221-3 p、hsa-miR-222-3p水平均显著下调(均P=0.000).结论 筛选出hsa-miR-146a-5p、hsa-miR-221-3p、hsa-miR-222-3p 3种miRNAs分子组合作为早期PTC外周血循环miRNAs指纹图谱,有助于PTC早期诊断.
作者：魏丽君；马小琴；凌志强 刊期： 2018年第04期
目的 观察巴戟天寡糖(MOO)对去卵巢大鼠心肌缺血再灌注损伤(IRI)的作用.方法 健康雌性SD大鼠100只按随机数字表法随机均分为5组,每组20只:空白对照组、假手术组、IRI组、MOO2.1 g/(kg·d)组、MOO 0.7 g/(kg·d)组.空白对照组仅开腹并分离卵巢,假手术组开腹切除双侧卵巢并开胸暴露心脏,其余3组均按去卵巢心肌IRI模型处理,其中MOO 2.1g/(kg·d)组、MOO 0.7 g/(kg·d)组给予含相应浓度MOO的10 ml/kg药液灌胃.实验结束均称重大鼠及其子宫,并取出心脏组织,采用黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),采用硫代巴比妥酸法检测微量丙二醛(MDA)水平;采用酶联免疫吸附试验检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平;采用Western blot法检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)、磷酸化p38(p-p38)、磷酸化p53(p-p53)蛋白表达.结果 各组SOD、GSH-Px、MDA、TNF-0、IL-1β、IL-6、bcl-2、bax、p-p38、p-p53比较差异均有统计学意义(F=205.773、268.788、57.214、205.395、264.242、221.096、202.681、70.138、132.288、64.817,P均=0.000). MOO2.1 g/(kg·d)组[(152.11±4.53)、(134.34±5.20) U/mg]、MOO 0.7 g/(kg·d)组[(137.96±5.21)、(118.60 ±4.37) U/mg] SOD、GSH-Px水平高于IRI组[(87.40±6.28)、(69.91±5.48) U/mg],而MOO 2.1 g/(kg·d)组[(2.30±0.11) nmol/mg,(79.26±8.32)、(96.76±7.63)、(137.42 ±7.85) ng/g]、MOO 0.7g/(kg·d)组[(2.81±0.15) nmol/mg,(99.87 ±8.84)、(130.86±8.37)、(157.19±12.20) ng/g] MDA、TNF-α、IL-1β、IL-6水平低于IRI组[(4.06±0.65) nmol/mg,(158.46±14.65)、(192.47 ±9.61)、(233.59±14.37) ng/g,P均=0.000].与MOO 2.1 g/(kg·d)组比较,MOO 0.7g/(kg·d)组SOD、GSH-Px水平降低,而MDA、TNF-α、IL-1β、IL-6水平升高(P均=0.000).MOO 2.1 g/(kg·d)组(1.45±0.15)、MOO 0.7 g/(kg·d)组bcl-2水平(1.03±0.13)高于IRI组(0.60±0.12,P均=0.000);而MOO 2.1 g/(kg·d)组bax、p-p38、p-p53水平[(1.71±0.16)、(4.25±1.07)、(2.99±0.61)]、MOO 0.7g/(kg·d)组(2.05±0.14、5.90±1.46、5.19±1.16)低于IRI组(2.39±0.23、11.79±1.46、6.22±1.35,P均=0.000).MOO 2.1 g/(kg,d)组和MOO0.7g/(kg·d)组SOD、GSH-Px、MDA、TNF-α、IL-1β、IL-6、bcl-2、bax、p-p38、p-p53比较差异均有统计学意义(P均=0.000).结论 MOO对去卵巢心肌IRI有保护作用,能够减轻去卵巢心肌IRI中细胞损伤或凋亡,其中p38、p53信号通路发挥重要作用.
作者：王志红；刘海；黄冬梅；邓克红；王武亮；徐臻；袁博；胡滨；王燕 刊期： 2018年第04期
目的 探讨转录延伸样因子7(TCEAL7)对低分化人胃癌细胞株BGC823侵袭、迁移的影响及其机制.方法 应用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot法检测TCELA7 mRNA和蛋白在BGC823和正常胃黏膜细胞株GES-1中的表达;构建TCEAL7真核表达载体GFP-TCEAL7并转染BGC823细胞48 h,检测转染效果;噻唑蓝(MTT)法检测GFP-TCEAL7转染对BGC823细胞活性的影响;划痕实验、Transwell小室实验检测细胞侵袭、迁移;应用Real-time PCR和Western blot法检测转染GFP-TCEAL7转染对BGC823细胞侵袭、迁移基因表达水平的影响.结果 Real-time PCR和Western blot法显示,BGC823的TCEAL7表达(mRNA:0.280±0.048,蛋白:0.181±0.038)明显低于GES-1(mRNA:0.474±0.062,蛋白:0.346±0.057;t=-6.061,P=0.000;t=-5.900,P=0.000).GFP-TCEAL7转染后胃癌BGC823细胞TCEAL7的mRNA及蛋白表达(1.886±0.326、1.007±0.262)比对照组(0.302±0.053、0.172±0.030)显著上调(t=11.748,P =0.000:t=7.756,P=0.000).MTT结果显示,转染了GFP-TCEAL7的BGC823细胞活性(0.672±0.083)比对照组(1.242±0.215)显著减弱(t=-6.058,P =0.000).划痕实验、Transwell小室实验显示转染了GFP-TCEAL7的BGC823细胞迁移能力[转染组(53.945 ±9.952)％,对照组(81.017±7.208)％]和侵袭能力(转染组76.333±12.420,对照组121.167±11.771)均明显降低(t=-5.396,P =0.000;t=-6.418,P=0.000).Real-time PCR和Western blot法显示转染GFP-TCEAL7的BGC823细胞基质金属蛋白酶(MMP)-7 、MMP-9的mRNA和蛋白表达水平下降,组织基质金属蛋白酶抑制剂-1 (TIMP1)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达明显增高.结论 过表达TCEAL7可抑制BGC823细胞的侵袭、迁移.
作者：梁巍；耿玮；范亚男；叶智斌；高明；张立晓 刊期： 2018年第04期
目的 探讨塞来昔布(celecoxib)对肺腺癌手术应激所致非小细胞肺癌细胞A549的抗失巢凋亡的影响及其分子作用机制.方法 采用多聚2-羟乙基甲基丙烯酸酯(poly-HEMA)覆盖细胞培养板培养A549细胞,分别设立对照组、前列腺素E2(PGE2)处理组、PGE2联合塞来昔布处理组,处理48 h后应用流式细胞术检测各组中细胞发生失巢凋亡情况.采用Western blot方法检测各组细胞的丝裂原细胞外激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)通路和磷酸肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路激活以及下游凋亡相关蛋白Mcl-1和Bim的表达.应用BALB/c小鼠开胸手术模拟手术应激,进行尾静脉注射A549细胞建立肺转移动物模型.将小鼠分成对照组、手术组和手术+塞来昔布组(完全随机化分组),4周后处死小鼠并观察肺转移,同时采用免疫组织化学方法检测转移产生的肺结节中Mcl-1和Bim的表达.结果 流式细胞术检测结果表明poly-HEMA培养的A549细胞凋亡率为(41.0±2.4)％,而PGE2处理组的凋亡率为(22.8±3.2)％,与对照组比较差异有统计学意义(P=0.012),PGE2联合塞来昔布处理组的凋亡率为(36.6±2.4)％与PGE2组比较,差异有统计学意义(P=0.034).Westem blot结果显示,PGE2能激活MEK/ERK1/2通路,上调ERK1/2的磷酸化水平,并降低Bim的表达,而塞来昔布能明显抑制PGE2的作用.另外PGE2对PI3K/Akt通路无明显作用,但塞来昔布可以抑制该通路,并下调Akt的磷酸化水平,抑制Mcl-1的表达.体内实验中,手术组的肺结节数明显多于对照组,而塞来昔布组肺结节数与手术组比较明显减少,免疫组织化学检测肺结节中的Mcl-1和Bim蛋白的表达水平,结果与体外实验一致.结论 PGE2是手术应激中产生的主要细胞因子,PGE2具有明显的体外抗失巢凋亡作用,且塞来昔布在体内外皆能通过抑制MEK/ERK1/2通路和PI3K/Akt通路来升高促凋亡蛋白Bim的表达和降低抗凋亡蛋白Mcl-1的表达,从而达到促进失巢凋亡,减少肺癌细胞转移的作用.
作者：王雅静；施润；游庆军；王安彭；夏文杰；许林；张帅；蒋峰 刊期： 2018年第04期
目的 观察肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体(TRAIL)联合顺铂对荷PC-9肺癌小鼠肿瘤生长的影响.方法 将60只荷PC-9肺癌肿瘤的裸鼠随机分为对照组、TRAIL组、顺铂组和联合治疗组,每组15只,TRAIL组经腹腔注射TRAIL 10 mg/kg,顺铂组经腹腔注射顺铂1.5 mg/kg,联合治疗组经腹腔分别注射TRAIL 10 mg/kg和顺铂1.5 mg/kg,对照组经腹腔注射等体积的生理盐水.所有小鼠每隔1d给药1次,连续治疗30d,测定每组小鼠肿瘤的生长情况和体重的变化.并采用原位缺口末端标记法(TUNEL)染色法分析4组小鼠肿瘤组织中细胞的凋亡水平.采用Western blot分析4组小鼠肿瘤组织细胞中p53、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3等凋亡相关蛋白的表达水平.结果 与对照组比较,TRAIL组、顺铂组和联合治疗组小鼠肿瘤生长受到显著抑制(P=0.030、0.026、0.009),而联合治疗组小鼠肿瘤生长速度明显缓于TRAIL组和顺铂组(P=0.036、0.018).与对照组比较,顺铂组和联合治疗组小鼠体重明显下降(P=0.030、0.038),而TRAIL组小鼠体重变化差异无统计学意义(P =0.070).与对照组比较,TRAIL组、顺铂组和联合治疗组小鼠肿瘤组织中细胞凋亡比例明显增加(P=0.023、0.034、0.027).与顺铂组比较,TRAIL组和联合治疗组小鼠肿瘤组织细胞凋亡比例明显增加(P =0.028、0.013).Western blot结果显示与对照组比较,TRAIL组、顺铂组和联合治疗组p53和Caspase-3表达水平明显增加,而联合治疗组增加水平更加显著(P=0.018).结论 TRAIL联合顺铂能显著抑制荷PC-9小鼠肿瘤的生长,这一现象是通过促进肿瘤细胞凋亡相关基因表达,进而促进肿瘤细胞凋亡来实现的.
作者：张春敭；齐宇；吴恺；张岩；赵松 刊期： 2018年第04期
目的 探讨经尿道前列腺电切术(TURP)后尿失禁的危险因素及防治方法.方法 行TURP的263例患者根据术后有无尿失禁分为两组,其中术后出现尿失禁患者55例为尿失禁组,其余208例为无尿失禁组,比较分析2组患者的相关资料.结果 尿失禁组的国际前列腺症状评分表(IPSS)评分、切除前列腺比例分别为(23.25±3.56)分、(67.25±5.36)％,均高于无尿失禁组的(18.34±4.05)分、(52.15±6.23)％,差异均有统计学意义(t=8.191、16.433,P均=0.000).尿失禁组的年龄、大尿流率、病程、前列腺体积、手术时间、术后留置尿管时间分别为(69.78±6.47)岁、(6.21±2.82) ml/s、(33.54±16.54)个月、(65.46±33.52) ml、(70.36±19.21) min、(6.81±0.46)d,与无尿失禁组的(70.05±4.82)岁、(5.62±2.63) ml/s、(35.20±17.50)个月、(62.65±35.23) ml、(68.21±17.86) min、(6.79±0.52)d比较差异均无统计学意义(t=0.289、1.457、0.633、0.531、0.781、0.260,P=0.773、0.146、0.528、0.596、0.435、0.795).随访发现,55例尿失禁患者中,真性尿失禁1例(1.82％)、急迫性尿失禁25例(45.45％)、压力性尿失禁29例(52.73％).结论 尿失禁是TURP常见的并发症,术前IPSS评分高及术中过度的切除前列腺组织是导致术后尿失禁的主要因素,临床上可通过术中对功能尿道的保护以及手术前后盆底肌锻炼减少尿失禁的发生.
作者：张道秀；顾朝辉；高宛生；王智勇；魏金星 刊期： 2018年第04期
随着肿瘤学、免疫学以及分子生物学等相关学科的迅速发展和交叉渗透,肿瘤免疫治疗的研究突飞猛进.免疫治疗成为继手术、放射治疗和化学治疗之后又一种重要的治疗胃肠道恶性肿瘤的手段.新型的免疫治疗技术得到迅速发展,为晚期胃肠道恶性肿瘤患者带来新的希望.化学治疗联合免疫治疗有望成为晚期胃肠道恶性肿瘤治疗的新模式.同时如何客观评价免疫治疗疗效也成为研究热点.
作者：陶凯雄；吴轲 刊期： 2018年第04期
目的 应用改良“枕大池二次注血法”建立稳定、可靠的蛛网膜下腔出血(SAH)模型,并评估其脑血管痉挛程度.方法 在“枕大池二次注血法”的基础上进行改良:(1)利用立体定向仪在三维空间定位和角度调节,更加准确地穿刺枕大池的部位.(2)应用微量注射泵以恒量、恒速注射自体血,减少手工注射时对脑于的损伤.采用随机数字法将SD大鼠分为:假手术组、对照组、SAH组,每组各25只.SAH组采用改良“枕大池二次注血法”建立蛛网膜下腔出血模型,对照组用等量的生理盐水,假手术组仅仅暴露寰枕筋膜.观察该模型的成功率和失败率、神经功能、脑组织含水量、基底动脉改变、局部脑血流量(rCBF)变化.结果 与假手术组比较,SAH组大鼠造模第1天时神经功能受损严重,差异有统计学意义[(9.2±0.7)分比(1.0±0.6)分,P=0.001];与假手术组、对照组比较,SAH组第1天时大鼠脑组织含水量显著增多,差异有统计学意义[(79.98±0.11)％比(78.29±0.12)％、(78.39±0.13)％,P=0.001].光镜下苏木素-伊红(HE)染色结果显示:与假手术组比较,SAH组第5天时大鼠基底动脉管腔内径和管腔面积明显缩小,差异有统计学意义[(325.200±15.156) μm比(461.000±22.705) μm,P=0.000;(80 739.200±7 297.735) μm2比(167 124.200 ±7 067.155) μm2,P=0.000].激光散斑结果显示:SAH组大鼠第5天时的rCBF明显低于假手术组和对照组,差异有统计学意义[(56.0±3.5)％比(97.2±1.7)％、(95.8±3.5)％,P=0.001].结论 应用改良“枕大池二次注血法”可以建立稳定、可靠的SAH模型.
作者：周帅；殷冬培；徐新；高伟伟；李飞；王计伟；孙东东；王毅；张建宁 刊期： 2018年第04期
中华实验外科杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
