学术投稿

口蹄疫感染与免疫动物鉴别诊断方法的建立

鲁会军;金宁一;韩松;郑敏;王凯;贾雷立;李昌

关键词:重组杆状病毒, 表达, 蛋白, 鉴别诊断, ELISA
摘要:目的 建立鉴别自然感染口蹄疫动物和口蹄疫灭活疫苗免疫动物的诊断方法.方法 构建重组杆状病毒的转座质粒pFastBac-3AB,转化DH10 Bac感受态细菌,在体内进行重组,并经三重抗性与蓝白斑筛选,得到杆状病毒重组质粒Bacmid-3AB;将Bacmid-3AB转染Sf9细胞,获得重组杆状病毒.以重组杆状病毒表达的3AB蛋白为抗原建立鉴别口蹄疫感染与免疫动物的ELISA诊断方法,并对各种反应条件进行优化,包括抗原包被时间、包被浓度、封闭剂、酶标抗体工作浓度等.结果 获得了重组杆状病毒,成功表达了口蹄疫病毒3AB蛋白,并用纯化的3AB蛋白建立了检测口蹄疫病毒抗体的间接ELISA方法.用该方法检测FMDV感染动物和免疫动物血清抗3AB蛋白抗体,猪和牛感染血清检测的阳性率分别为83.3%和91.7%.结论 用纯化的口蹄疫病毒3AB蛋白建立了鉴别诊断口蹄疫感染与免疫动物的ELISA诊断方法.
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    作者:马雪莲;谭峰;潘长旺 刊期: 2008年第02期

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    作者:庞为;陈凤义;吴炜;梁玉红 刊期: 2008年第02期

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    目的 建立鉴别自然感染口蹄疫动物和口蹄疫灭活疫苗免疫动物的诊断方法.方法 构建重组杆状病毒的转座质粒pFastBac-3AB,转化DH10 Bac感受态细菌,在体内进行重组,并经三重抗性与蓝白斑筛选,得到杆状病毒重组质粒Bacmid-3AB;将Bacmid-3AB转染Sf9细胞,获得重组杆状病毒.以重组杆状病毒表达的3AB蛋白为抗原建立鉴别口蹄疫感染与免疫动物的ELISA诊断方法,并对各种反应条件进行优化,包括抗原包被时间、包被浓度、封闭剂、酶标抗体工作浓度等.结果 获得了重组杆状病毒,成功表达了口蹄疫病毒3AB蛋白,并用纯化的3AB蛋白建立了检测口蹄疫病毒抗体的间接ELISA方法.用该方法检测FMDV感染动物和免疫动物血清抗3AB蛋白抗体,猪和牛感染血清检测的阳性率分别为83.3%和91.7%.结论 用纯化的口蹄疫病毒3AB蛋白建立了鉴别诊断口蹄疫感染与免疫动物的ELISA诊断方法.

    作者:鲁会军;金宁一;韩松;郑敏;王凯;贾雷立;李昌 刊期: 2008年第02期

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    回顾性分析了32例胆道结石术后胆道镜取蛔虫的临床资料,所有患者经胆道镜一次完全取出蛔虫,无1例并发症,安全有效,简便易行.

    作者:刘鄂长;路中江;林秀云;魏振铨;邱国煌;胡俊根 刊期: 2008年第02期

  • 眼科手术后感染的病原学分析

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    作者:孙士营;刘梦阳;杨侠 刊期: 2008年第02期

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    本文针对多年的留学生教学中取得的经验、存在的一些问题及应对措施进行了总结和探讨.

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  • 消灭血吸虫病地区发生急性血吸虫病1例

    本文报道了1例消灭血吸虫病地区儿童急性血吸虫病病例,提示此类地区不能放松监测和防治,严防血吸虫病再度发生和流行.

    作者:李灿兴 刊期: 2008年第02期

  • 陕西省鼠疫疫区夜行鼠寄生蚤调查

    目的 掌握鼠疫疫区夜行鼠寄生蚤种类及季节消长规律.方法 逐月捕获夜行鼠,梳检鼠体蚤,作种属鉴定并计算染蚤率和蚤指数.结果 采集夜行鼠鼠体蚤188匹,隶属于4科8属8种,以二齿新蚤和同型客蚤为优势种,二齿新蚤主要选择性寄生于黑线仓鼠,同型客蚤则以子午沙鼠为主要宿主.夜行鼠染蚤率和蚤指数消长曲线均呈现两个高峰,分别在4月和10月.二齿新蚤的季节消长同夜行鼠寄生蚤总体变化趋势一致,同型客蚤仅出现于4~8月份,以5、6、7月为高峰期.结论 同一蚤种在不同地区、不同宿主其消长规律不同,研究当地不同宿主媒介蚤的种类和季节消长对于揭示鼠疫流行规律、有效预防鼠疫具有重要意义.

    作者:孙养信;阮春来;白江春;范锁平 刊期: 2008年第02期

  • 168例猪囊虫病心理障碍患者的临床资料分析

    目的 了解有心理障碍的猪囊虫病患者分布和发病特点及治疗情况,为防治提供依据.方法 从2005~2006年经山东省寄生虫病防治研究所确诊的猪囊虫病住院患者中,挑选168例有心理障碍的病例进行调查和统计分析.结果 168例患者中,山东籍150例(89.29%),分布于全省16个地级市.农村患者与城镇患者之比为2.45:1;男女患者之比为2.43:1;年龄以18~45岁的中青年患者所占比例高,为64.80%;临床分型以脑囊虫病所占比例高,为76.79%.所有患者共分4种心理类型,其中消极悲观型占36.31%,忧郁自卑型占31.55%,焦虑恐惧型占24.40%,对抗偏执型占7.74%.用吡喹酮(PQT)结合阿苯哒唑(ALB)治疗后,总有效率为98.21%,治愈率为45.24%.结论 山东省猪囊虫病仍处于较高的发病态势,患者以农村男性中青年占多数;吡喹酮(PQT)和阿苯哒唑(ALB)联合应用仍是目前猪囊虫病的有效治疗方法.

    作者:刘娟美;高新华;吴士玲 刊期: 2008年第02期

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    目的 了解赣州市人芽囊原虫病流行情况.方法 随机抽取江西省赣州市5个县(市)20个调查点,调查不同人群、6种家禽家畜人芽囊原虫感染率,粪检采用生理盐水涂片法.采集生活污水饮用水及自然水源水样,用自然沉淀法查人芽囊原虫污染程度.结果 共检查不同人群1336人,查出人芽囊原虫感染99人,感染率为7.41%.采集5种家禽家畜粪便628份,查出人芽囊原虫67份,平均感染率为10.67%.调查3种水体标本304份,阳性11份,占3.62%.结论 赣州市人群与6种家禽家畜均存在人芽囊原虫感染,3种水体均受到人芽囊原虫污染.

    作者:苏子林;苏水莲;吴中发;廖华;廖勇;谢琼珺;张青生 刊期: 2008年第02期

  • 襄樊地区溪蟹并殖吸虫囊蚴感染与人群认知、行为状况调查

    调查襄樊溪蟹体内并殖吸虫囊蚴感染率为15.6%,群众缺乏对有关并殖吸虫病流行环节和防治的认知和行为.

    作者:许正敏;李伶;武小樱;赵汉芬;杜爱萍;胡生梅;陶永平;孙莉;唐玉成;李明华;关继国;张志勇 刊期: 2008年第02期

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    目的 建立一种肉类旋毛虫感染的快速免疫学检测方法.方法 以胶体金标SPA和旋毛虫肌幼虫ES抗原制备免疫层析试纸条,对不同剂量旋毛虫幼虫感染小鼠后不同时间的血清及肉汁抗体进行检测,并与ELISA、镜检法及消化法的检测结果进行比较.结果 用100、300、500条旋毛虫幼虫感染小鼠后6周,3组小鼠的血清及肉汁抗体阳性率均达100%;试纸条法对血清与肉汁的抗体检出率差异无统计学意义(χ2=0.22, P>0.05).试纸条法和ELISA检测100条幼虫感染小鼠肉汁的阳性率分别为91.3%和100%(χ2=2.09, P>0.05),检测300、500条幼虫感染小鼠肉汁的阳性率均为100%;试纸条法和镜检法对3组小鼠感染后5~7周的肉汁和膈肌检测的阳性率均为98.6%.消化法检查每克肌肉虫荷<33条幼虫的6份标本,试纸条5份阳性,每克肌肉中含有6条幼虫时可被试纸条法检出.感染旋毛虫小鼠肌肉4 ℃保存1~7 d及-20 ℃保存1~7个月的肉汁抗体阳性率均为100%.结论 免疫层析试纸条可用于新鲜肉、冷藏肉及冷冻肉中抗旋毛虫抗体的检测.

    作者:崔晶;秦银霞;王中全 刊期: 2008年第02期

  • HIV抗体确证试验假阳性1例分析

    目的 通过对1例艾滋病病毒(HIV)抗体确证试验阳性者进行随访检测,探讨目前HIV抗体筛查和确证检测技术存在的问题.方法 对受检对象进行HIV抗体筛查和确证试验,并于3、6个月和1年随访检测.结果 首次筛查试验PA试剂为阴性,第3代梅里埃ELISA试剂为阳性,确证试验WB试剂检测带型gp120p24,判为HIV-1抗体阳性.比较试验第4代梅里埃ELISA试剂为阳性,金豪、吉比爱ELISA试剂为阴性,雅培硒标试剂为弱阳性.病毒载量检测结果为阴性.3次随访检测,筛查试验结果与首次检测基本一致,确证试验带型分别为gp120p24、p24和p24p55,1年后的病毒载量检测结果为阴性,受检对象随访后结果定为阴性.4次血样集中检测显示,筛查试剂批间无明显差异,但不同试剂间有差异;确证WB试剂不同批号间带型存在差异.结论 目前应用的WB确证试剂存在一定的批间差异,对弱阳性带型或阳性带型不常见的样本,需更换试剂批号重复进行确证检测;确证试验结果处于临界阳性状态者需进行流行病学史调查;WB确证试验若同时出现1条env带和p24带判为HIV抗体不确定,并进行随访.

    作者:梁彩云;徐慧芳;高凯;李泽荣;韩志刚;李燕 刊期: 2008年第02期

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    目的 建立SELEX技术筛选结核分枝杆菌CFP-10抗原适体的方法,并获得CFP-10 的高亲和性适体.方法 体外构建长度为78个碱基的随机单链DNA(ssDNA)文库,以微孔板为筛选介质,采用SELEX 技术筛选获得CFP-10的适体库.将适体库克隆、测序,用DNAMAN软件对其结构进行分析,利用酶联寡核苷酸吸附试验(enzyme-linked oligonucleotide sorbent assay,ELOSA)测定亲和力.结果 构建的ssDNA文库经过14轮筛选与CFP-10亲和力从0.273提高到1.265;克隆子测序,大多数长度与预期值相符.二级结构显示,口袋和茎环结构可能是适体与CFP-10结合的结构基础.结论 成功建立了SELEX筛选技术,并初步获得了CFP-10的高亲和性适体.

    作者:马占忠;王玉炯;秦莲花;丁元生;谢琴;胡忠义 刊期: 2008年第02期

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    乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)基因组由一个约3.2 kb的环形DNA组成,包含了C、P、S和X 4个基因开放读码框、4个启动子和2个增强子,基因组开放读码框相互重叠,所有转录调控元件均隐含在基因编码序列中,病毒DNA序列达到高效重复利用.而HBV新的调控元件和正链转录体,以及转录后调节元件的发现,则为以后的研究提供了新的思路.

    作者:余波;黄爱龙 刊期: 2008年第02期

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    济南市1991~2006年疟疾发病率为0~0.15/10万,本地病例50例,占44.64%,每年8~10月发病较多.

    作者:徐淑慧;成洪旗;许华茹 刊期: 2008年第02期

中国病原生物学杂志

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