学术投稿

ELISA和Realtime-PCR筛检献血员HBV感染结果分析

孙爱玉;许庆党

关键词:ELISA, Realtime-PCR, 筛检, 乙型肝炎, 献血员
摘要:目的 比较ELISA与Realtime-PCR检测献血员HBV感染的差异,探索准确高效的献血员筛选方法,为提高临床血源质量服务.方法 采集502例献血员血样,分离血清,分别采用ELISA与Realtime-PCR方法进行HBsAg和HBVDNA双盲检测,对两法检测结果不一致的献血员2个月后随访并抽血复检.结果 502例献血员中,两法初检HBV感染的一致率为97.61%(490/502)(S=5.3333,P=0.020 9).2个月后对检测结果不一致的12例献血员复检,有7例2种方法检查均阳性.结论 2种方法的初检结果有较好的一致性,均可用于HBV感染检测.Realtime-PCR的检测效果优于ELISA.
中国病原生物学杂志相关文献
  • HIV抗体确证试验假阳性1例分析

    目的 通过对1例艾滋病病毒(HIV)抗体确证试验阳性者进行随访检测,探讨目前HIV抗体筛查和确证检测技术存在的问题.方法 对受检对象进行HIV抗体筛查和确证试验,并于3、6个月和1年随访检测.结果 首次筛查试验PA试剂为阴性,第3代梅里埃ELISA试剂为阳性,确证试验WB试剂检测带型gp120p24,判为HIV-1抗体阳性.比较试验第4代梅里埃ELISA试剂为阳性,金豪、吉比爱ELISA试剂为阴性,雅培硒标试剂为弱阳性.病毒载量检测结果为阴性.3次随访检测,筛查试验结果与首次检测基本一致,确证试验带型分别为gp120p24、p24和p24p55,1年后的病毒载量检测结果为阴性,受检对象随访后结果定为阴性.4次血样集中检测显示,筛查试剂批间无明显差异,但不同试剂间有差异;确证WB试剂不同批号间带型存在差异.结论 目前应用的WB确证试剂存在一定的批间差异,对弱阳性带型或阳性带型不常见的样本,需更换试剂批号重复进行确证检测;确证试验结果处于临界阳性状态者需进行流行病学史调查;WB确证试验若同时出现1条env带和p24带判为HIV抗体不确定,并进行随访.

    作者:梁彩云;徐慧芳;高凯;李泽荣;韩志刚;李燕 刊期: 2008年第02期

  • 赣州市人芽囊原虫感染的流行病学调查分析

    目的 了解赣州市人芽囊原虫病流行情况.方法 随机抽取江西省赣州市5个县(市)20个调查点,调查不同人群、6种家禽家畜人芽囊原虫感染率,粪检采用生理盐水涂片法.采集生活污水饮用水及自然水源水样,用自然沉淀法查人芽囊原虫污染程度.结果 共检查不同人群1336人,查出人芽囊原虫感染99人,感染率为7.41%.采集5种家禽家畜粪便628份,查出人芽囊原虫67份,平均感染率为10.67%.调查3种水体标本304份,阳性11份,占3.62%.结论 赣州市人群与6种家禽家畜均存在人芽囊原虫感染,3种水体均受到人芽囊原虫污染.

    作者:苏子林;苏水莲;吴中发;廖华;廖勇;谢琼珺;张青生 刊期: 2008年第02期

  • 留学生医学微生物教学的几点体会

    本文针对多年的留学生教学中取得的经验、存在的一些问题及应对措施进行了总结和探讨.

    作者:李梅;石立莹;钟启平 刊期: 2008年第02期

  • 孕期弓形虫感染对胎鼠体内微量元素的影响

    目的 探讨刚地弓形虫感染孕鼠后对胎鼠体内微量元素锌(Zn)、铜(Cu)、铁(Fe)含量的影响.方法 孕中期BALB/c孕鼠经腹腔接种弓形虫速殖子.分别于孕10、12、14、16和18 d剖杀,取胎盘,制作组织压片及病理切片,观察孕鼠胎盘组织的感染及损伤情况;取胎鼠组织,采用原子吸收分光光谱法测定Zn、Cu、Fe含量,采用DAB增强的Perl's铁染色观察胎鼠组织中Fe的分布.结果 感染组孕鼠胎盘组织压片可见大量弓形虫速殖子,病理切片HE染色可见炎症细胞浸润及凋亡小体.感染组胎鼠在孕10 d时体内Zn和Fe含量与未感染组比较差异无统计学意义(P>0.05),在孕12~18 d均低于未感染对照组(P<0.05);Cu含量在孕10、12、14 d与未感染组比较差异无统计学意义(P>0.05),在孕16、18 d均低于未感染组(P<0.05).感染组胎鼠组织铁染色强度与未感染对照组相比明显减弱.结论 孕期感染弓形虫可损伤胎盘组织,进而影响其转运功能,使胚胎体内Zn、Fe和Cu含量降低,影响胚胎的生长发育.

    作者:侯玉英;赵晋英;杨瑞;刘智深;饶华祥;张淑萍;徐秀文;侯丽萍;郭剑津 刊期: 2008年第02期

  • 消灭血吸虫病地区发生急性血吸虫病1例

    本文报道了1例消灭血吸虫病地区儿童急性血吸虫病病例,提示此类地区不能放松监测和防治,严防血吸虫病再度发生和流行.

    作者:李灿兴 刊期: 2008年第02期

  • 泡球蚴体外培养方法的改进及培养产物的初步鉴定

    目的 对泡球蚴体外培养模型进行改进,并对培养产物进行初步鉴定.方法 培养肝癌细胞(Bel7404),留取细胞上清液.取泡球蚴组织,用含肝癌细胞培养上清的DMEM完全培养基于37 ℃ 5% CO2培养箱中培养27 d.实验期间对囊泡进行计数,观察囊泡生长情况,记录囊泡大、小直径,绘制生长曲线.培养结束后,取培养囊泡壁及其囊液分别进行DNA鉴定和蛋白定量.结果 泡球蚴在含肝癌细胞上清液的DMEM中能生长,囊泡直径0.5~5.0 mm;囊液蛋白含量为1.8 mg/ml,囊壁DNA经PCR扩增出Em特异性200 bp条带.结论 1)泡球蚴体外生长因素可不依赖培养细胞本身;2)由于体外与动物体内的培养环境的不同,可能引起囊泡内囊液的蛋白含量有所差异;3)DNA检测证明培养产物为泡球蚴;4)利用肝癌细胞上清液建立泡球蚴体外培养改良模型具有一定的可行性.

    作者:马海龙;张亚楼;周晓涛;吕国栋;林仁勇;温浩 刊期: 2008年第02期

  • 1990~2005年松阳县疟疾监测结果分析

    1990~2005年松阳县累计血检三热病人9 760例,检出疟原虫阳性124例,报告疟疾126例,均为本地居民,其中以输入性病例(本地居民外出感染发病)为主,占91.27%(115/126);疟疾年平均发病率3.45/10万,带虫发病率(API)3.39/10万,呈下降趋势且持续维持在较低水平.

    作者:叶夏良;鲍夏艳;徐伟旺 刊期: 2008年第02期

  • HBsAg阳性孕妇免疫接种阻断HBV宫内感染疗效的Meta分析

    目的 评价HBsAg阳性孕妇产前应用乙肝免疫球蛋白(HBIG)或联用乙肝疫苗阻断胎儿HBV宫内感染的有效性及安全性.方法 计算机检索6个数据库,手检9种期刊,并追查参考文献,纳入国内外符合纳入标准的随机对照试验和半随机对照试验,由两名评价员独立筛查文献,评价质量和提取资料.用Revman 4.2.10软件分析数据.采用χ2检验鉴定研究间异质性,使用固定效应或随机效应模型合并结果.结果 HBsAg阳性/HBsAg和HBeAg均阳性孕妇孕期应用HBIG总剂量600 IU,胎儿HBV宫内感染率<空白对照组(RR=0.42, 95%CI= 0.21~0.83, P=0.01),新生儿HBV DNA阳性率低于空白对照组(RR=0.30, 95%CI=0.10~0.85, P=0.02),新生儿HBeAg阳性率Anti-HBs阳性率与空白组比较差异无统计学意义;总剂量大于600 IU时,宫内感染率<空白对照组(RR=0.39, 95%CI=0.26~0.58, P<0.000 01),新生儿Anti-HBs阳性率与对照组比较差异无统计学意义.HBsAg和HBeAg均阳性孕妇孕期应用HBIG总剂量>600 IU,胎儿HBV宫内感染率、新生儿HBeAg阳性率、新生儿HBV DNA阳性率、新生儿Anti-HBs阳性率与对照组比较差异均无统计学意义;总剂量600 IU组新生儿HBeAg阳性率和新生儿HBV DNA阳性率与对照组比较差异有统计学意义.结论 HBsAg阳性/HBsAg和HBeAg均阳性孕妇孕期应用HBIG可降低胎儿HBV宫内感染率;HBsAg和HBeAg均阳性孕妇孕期应用HBIG阻断宫内感染的疗效尚不清楚.

    作者:李苗;景涛;杨克虎;祝秉东;刘雅莉;田金徽;马彬;谭继英 刊期: 2008年第02期

  • 鼠疫误诊1例

    本文报告鼠疫误诊死亡病例1例.经尸体剖检、血清学和细菌学检验、流行病学调查确诊后按照人间鼠疫疫区处理标准及原则(GB15978-1995)进行处理.

    作者:魏荣杰 刊期: 2008年第02期

  • 口蹄疫感染与免疫动物鉴别诊断方法的建立

    目的 建立鉴别自然感染口蹄疫动物和口蹄疫灭活疫苗免疫动物的诊断方法.方法 构建重组杆状病毒的转座质粒pFastBac-3AB,转化DH10 Bac感受态细菌,在体内进行重组,并经三重抗性与蓝白斑筛选,得到杆状病毒重组质粒Bacmid-3AB;将Bacmid-3AB转染Sf9细胞,获得重组杆状病毒.以重组杆状病毒表达的3AB蛋白为抗原建立鉴别口蹄疫感染与免疫动物的ELISA诊断方法,并对各种反应条件进行优化,包括抗原包被时间、包被浓度、封闭剂、酶标抗体工作浓度等.结果 获得了重组杆状病毒,成功表达了口蹄疫病毒3AB蛋白,并用纯化的3AB蛋白建立了检测口蹄疫病毒抗体的间接ELISA方法.用该方法检测FMDV感染动物和免疫动物血清抗3AB蛋白抗体,猪和牛感染血清检测的阳性率分别为83.3%和91.7%.结论 用纯化的口蹄疫病毒3AB蛋白建立了鉴别诊断口蹄疫感染与免疫动物的ELISA诊断方法.

    作者:鲁会军;金宁一;韩松;郑敏;王凯;贾雷立;李昌 刊期: 2008年第02期

  • 免疫层析试纸条检测感染小鼠肉汁中抗旋毛虫抗体的研究

    目的 建立一种肉类旋毛虫感染的快速免疫学检测方法.方法 以胶体金标SPA和旋毛虫肌幼虫ES抗原制备免疫层析试纸条,对不同剂量旋毛虫幼虫感染小鼠后不同时间的血清及肉汁抗体进行检测,并与ELISA、镜检法及消化法的检测结果进行比较.结果 用100、300、500条旋毛虫幼虫感染小鼠后6周,3组小鼠的血清及肉汁抗体阳性率均达100%;试纸条法对血清与肉汁的抗体检出率差异无统计学意义(χ2=0.22, P>0.05).试纸条法和ELISA检测100条幼虫感染小鼠肉汁的阳性率分别为91.3%和100%(χ2=2.09, P>0.05),检测300、500条幼虫感染小鼠肉汁的阳性率均为100%;试纸条法和镜检法对3组小鼠感染后5~7周的肉汁和膈肌检测的阳性率均为98.6%.消化法检查每克肌肉虫荷<33条幼虫的6份标本,试纸条5份阳性,每克肌肉中含有6条幼虫时可被试纸条法检出.感染旋毛虫小鼠肌肉4 ℃保存1~7 d及-20 ℃保存1~7个月的肉汁抗体阳性率均为100%.结论 免疫层析试纸条可用于新鲜肉、冷藏肉及冷冻肉中抗旋毛虫抗体的检测.

    作者:崔晶;秦银霞;王中全 刊期: 2008年第02期

  • 襄樊地区溪蟹并殖吸虫囊蚴感染与人群认知、行为状况调查

    调查襄樊溪蟹体内并殖吸虫囊蚴感染率为15.6%,群众缺乏对有关并殖吸虫病流行环节和防治的认知和行为.

    作者:许正敏;李伶;武小樱;赵汉芬;杜爱萍;胡生梅;陶永平;孙莉;唐玉成;李明华;关继国;张志勇 刊期: 2008年第02期

  • 乙型肝炎病毒转录调控的研究进展

    乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)基因组由一个约3.2 kb的环形DNA组成,包含了C、P、S和X 4个基因开放读码框、4个启动子和2个增强子,基因组开放读码框相互重叠,所有转录调控元件均隐含在基因编码序列中,病毒DNA序列达到高效重复利用.而HBV新的调控元件和正链转录体,以及转录后调节元件的发现,则为以后的研究提供了新的思路.

    作者:余波;黄爱龙 刊期: 2008年第02期

  • 强螺杀粉剂杀灭江滩春季钉螺的效果观察

    采用4%强螺杀粉剂50.0 g/㎡和50%氯硝柳胺可湿性粉剂2.0 g/㎡作江滩现场喷粉和喷洒灭螺,第3、7、15和30 d的钉螺死亡率分别为77.50%、83.90%、85.71%、87.50%和77.36%、78.38%、80.00%、78.10%,30 d时两药的杀螺效果差异有显著性(χ2=4.7019,P<0.05),其余时间点两药的杀灭螺效果差异均无显著性;清水对照组仅为7.41%和5.22%.同时两药亦有较好的杀螺卵作用.

    作者:陈前;田斌;张正球;李定新;高扬 刊期: 2008年第02期

  • 筛选结核分枝杆菌CFP-10抗原适体的研究

    目的 建立SELEX技术筛选结核分枝杆菌CFP-10抗原适体的方法,并获得CFP-10 的高亲和性适体.方法 体外构建长度为78个碱基的随机单链DNA(ssDNA)文库,以微孔板为筛选介质,采用SELEX 技术筛选获得CFP-10的适体库.将适体库克隆、测序,用DNAMAN软件对其结构进行分析,利用酶联寡核苷酸吸附试验(enzyme-linked oligonucleotide sorbent assay,ELOSA)测定亲和力.结果 构建的ssDNA文库经过14轮筛选与CFP-10亲和力从0.273提高到1.265;克隆子测序,大多数长度与预期值相符.二级结构显示,口袋和茎环结构可能是适体与CFP-10结合的结构基础.结论 成功建立了SELEX筛选技术,并初步获得了CFP-10的高亲和性适体.

    作者:马占忠;王玉炯;秦莲花;丁元生;谢琴;胡忠义 刊期: 2008年第02期

  • 济南市1991~2006年疟疾疫情分析

    济南市1991~2006年疟疾发病率为0~0.15/10万,本地病例50例,占44.64%,每年8~10月发病较多.

    作者:徐淑慧;成洪旗;许华茹 刊期: 2008年第02期

  • 2005年云南省疟疾流行与防治监测报告

    目的 了解目前云南省疟疾流行和防治情况.方法 采用全国疟疾监测方案在云南省选择5个点,开展疟疾监测.结果 瑞丽等5个疟疾高发县市的年疟疾发病率为34.94‰,用抗疟药使用量推算的疟疾发病率为314.46‰,疫情漏报率为88.99%.中华按蚊叮人率为3.20只/人·夜,微小按蚊叮人率为2.00只/人·夜.当地村民蚊帐使用率57.28%.实验室诊断疟疾占总病例数的53.43%,乡村医生诊治的疟疾病例占总例数的61.70%,当地疟疾病人17.61%为境外感染,26.57%为复发病例.结论 云南疟疾流行态势依然严峻,境外输入疟疾对边境地区的防治工作造成一定的困难.村医生担负着61.70%的疟疾病人诊断和治疗任务,但各级CDC提供疟疾防治方面的培训和治疗药物的供给等主要还是在乡镇级以上医疗机构.为了更好地防控疟疾,应该选择适合云南流行特点的防治措施,将防治的重点进一步放到村级及流动人员出入境频繁的边境地区.

    作者:陈国伟;陈章伟;赵晓涛;杨丽香;陈于文;赵海燕;赵津妍;刀应华;唐永泉;白志明 刊期: 2008年第02期

  • 开化市肺吸虫病流行病学调查

    调查了衢州市开化县肺吸虫病的现况.第二中间宿主溪蟹肺吸虫囊蚴感染率为6.82%,人群血清肺吸虫抗体阳性率为5.69%,人群溪蟹生食率为28.41%.提示衢州市存在肺吸虫病疫源地,流行区人群中可能有隐性感染或近期感染病例,且肺吸虫感染与生食溪蟹密切相关.

    作者:吕跃民;汪德兵;阮卫;姚立农;夏生荣;陈华良;吴婷婷 刊期: 2008年第02期

  • 眼科手术后感染的病原学分析

    目的 对眼部手术后发生感染的微生物种类及耐药性进行总结和分析,讨论术后感染的原因及预防措施.方法 眼病术后感染患者29例,采用常规方法作微生物学检查和药敏试验.结果 29例患者,微生物培养检查18例阳性,阳性率为62.07%(18/29).其中细菌培养17例阳性,检出细菌6种,阳性率为58.62%(17/29);真菌培养1例阳性,阳性率为3.45%(1/29).细菌耐药率分别为环丙沙星64.71%、氧氟沙星52.94%、妥布霉素58.82%、头孢唑啉70.59%、庆大霉素47.06%.结论 细菌是手术后感染的主要病原菌,真菌所占比例较小.检出细菌的耐药率高,及时合理选用敏感的抗生素治疗非常关键.

    作者:孙士营;刘梦阳;杨侠 刊期: 2008年第02期

  • 广州管圆线虫中间宿主福寿螺感染检测方法的比较

    目的 比较3种检测广州管圆线虫第Ⅲ期幼虫的方法,并采用简单易行、检测效率高、速度快的检测手段对温州疫区进行疫源地分级,寻求用于疫源地流行病学调查的有效方法手段.方法 应用直接沉渣镜检法、胃蛋白酶消化法、螺肺检法3种方法分别对从温州广州管圆线虫疫源地采集的福寿螺进行检查,比较3种方法检查福寿螺体内广州管圆线虫第Ⅲ期幼虫的效果.并根据检查效率高的一种方法的检查结果对温州市区、苍南县、永嘉县进行疫源地分级.结果 3种方法检查福寿螺广州管圆线虫第Ⅲ期幼虫阳性率分别为60.0%(51/85)、32.9%(23/70)和15.9%(11/69),差异有统计学意义(P<0.01).温州地区疫源地分级显示苍南县为Ⅳ级,永嘉县为Ⅲ级,温州市区为Ⅰ级.结论 检查螺内广州管圆线虫第Ⅲ期幼虫的方法较适合于疫源地流行病学调查和分析判断.直接沉渣镜检法检测速度适中,对幼虫活力影响小,适合于幼虫的分离和动物接种试验;胃蛋白酶消化法适合于幼虫的分离和筛选;肺检法适用于疫区的流行病学调查或定性筛选.

    作者:马雪莲;谭峰;潘长旺 刊期: 2008年第02期

中国病原生物学杂志

中国病原生物学杂志

主管:中国寄生虫病防治杂志

主办:中华人民共和国卫生部