郑冼华;曾丽;罗冠彬;李成华;林智君
目的 探讨乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)对p16INK4A基因启动子甲基化的影响及机制.方法 以HepG2细胞和稳定表达GFP/HBx融合蛋白的HepG2/GFP-HBx为实验细胞,HepG2/GFP、HepG2/GFP-HBx细胞接种于裸鼠皮下建立裸鼠肝癌皮下移植瘤;设计合成靶向HBV X的siRNA(X-siRNA)和对照siRNA,用X-siRNA、5-N-2-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)单独或联合处理细胞及裸鼠;甲基化PCR检测细胞及移植瘤组织p16INK4A基因甲基化;RT-PCR法测定DNMT1、DNMT3A和DNMT3B的mRNA表达.结果 甲基化PCR检测显示HepG2/GFP-HBx组细胞及移植瘤组织均存在p16INK4a甲基化而HepG2/GFP组均未检出p16甲基化;X-siRNA、5-Aza-CdR处理的细胞及移植瘤组织中p16INK4A基因甲基化均减低;RT-PCR检测显示GFP-HBx/HepG2组DNMT1、DNMT3A较HepG2组显著升高,差异有统计学意义(P=0.000 2、P=0.000 5),较GFP/HepG2细胞组也显著升高,差异有统计学意义(P=0.001 1、P=0.0005),而DNMT3B在HepG2、GFP/HepG2、GFP-HBx/HepG2细胞组组间检测值差异无统计学意义(P>0.05).结论 HBX蛋白可能通过上调DNMT1、DNMT3A mRNA的转录表达而诱导p16INK4A基因启动子的甲基化.
作者:邝建玉;杨林;瞿志军 刊期: 2016年第08期
目的 了解韶关市区学龄前儿童视力发育异常的发病率以及影响学龄前儿童视力发育的相关因素,以采取相应措施,促进其视力健康发育.方法 随机选择韶关市区的20家托幼机构的1 265名学龄前儿童作为研究对象.采用SureSight视力筛查仪进行视力筛查,向视力异常儿童家长及同比例视力正常儿童家长发放《儿童视力影响因素调查表》,对各个影响因素进行统计分析.结果 筛查了1265名学龄前儿童,发现异常人数261名(20.63%).3~、4~、5~、6~<7岁四个年龄组的异常率分别为19.86%,18.39%、19.21%、26.09%.调查男性学龄前儿童652人,异常率22.59%,女性学龄前儿童613人,异常率18.59%.学龄前儿童视力异常率与其看电视时间、看电视距离、玩电子产品时间、挑食偏食、家庭采光、父母视力异常、每日户外运动时间、父母是否掌握眼睛保健知识、不良用眼习惯等日常生活有关(P<0.05).结论 韶关市区学龄前儿童的视力发育情况受到多种不良生活习惯的影响,应引起社会重视.
作者:肖朝霞;范开蓉;陈晓芳;邓新萍;张玉香;张文英;袁少芳;徐亮 刊期: 2016年第08期
目的 探讨颈围(NC)与代谢综合征(MS)关系及和第1秒用力呼气容积(FEV1)的相关性.方法 从2014年9月至12月期间在广州医科大学附属第二医院体检人群中随机抽取860人,年龄20~80岁,其中男性458人,女性402人.检测身高、体重、NC、腰围(WC)、血压、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和空腹血糖(FPG)、FEV1.结果 随着NC增大,男性及女性MS各组分异常率越高.男性NC诊断MS的ROC曲线下面积为0.874,佳切点为37.3 cm,女性NC诊断MS的ROC曲线下面积为0.863,佳切点为34.5 cm.多重线性回归分析,NC、WC、FPG与FEV1密切相关.结论 NC是反映MS的有效指标;随着NC的增粗,FEV1下降明显,NC可作为预测肺功能改变的指标之一.
作者:赵思文;李万根;吴君洁 刊期: 2016年第08期
目的 通过原核表达获得登革2型病毒NS2BH-NS3pro重组蛋白,并对其蛋白酶活性进行初步研究.方法 通过引入G4TG4连接臂,利用重叠PCR扩增登革2型病毒NS2BH和NS3pro基因序列,构建pET-28b-NS2BH-G4TG4-NS3pro蛋白酶复合物原核表达载体,采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术对纯化后重组蛋白进行鉴定,FRET技术检测其蛋白酶活性.结果 成功构建pET-28b-NS2BH-G4TG4-NS3pro原核表达载体,获得与预期分子量大小相符且纯度较高的可溶性蛋白,质谱分析表明重组蛋白为登革2型病毒NS2BH-NS3pro蛋白酶复合物,具有较高的蛋白酶活性.结论 基因工程技术获得的NS2BH-G4TG4-NS3pro重组蛋白为后续登革病毒蛋白酶适配体抑制剂的筛选奠定了基础.
作者:林卫虹;林勇平;杨笑涵;徐霞 刊期: 2016年第08期
目的 探讨红细胞相关参数和铁代谢检验项目鉴别诊断缺铁性贫血(IDA)与慢性病贫血(ACD)的临床价值. 方法 分析30例IDA和29例ACD患者的红细胞(RBC)相关参数与铁代谢检测结果;比较总铁结合力(TIBC)、血清铁(SI)、红细胞分布宽度(RDW)的ROC曲线特性.结果 RBC、TIBC、铁蛋白浓度(SF)、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)和RDW两组患者间差异有统计学意义(P<0.01),SI、HCT两组患者间差异无统计学意义(P>0.05);TIBC、SI、RDW用于诊断IDA的ROC曲线下分别为0.986、0.457和0.905,对应的优截断点分别为3.23 mg/L,95.5 μg/L和15.56%,其灵敏度为93.3%,86.7%和76.7%,特异性为100%,31.0%和93.1%;TIBC的阳性预测值和阴性预测值分别为100%和93.5%.结论 RBC、TIBC、SF、MCV、MCH、MCHC和RDW对诊断IDA非常有临床价值;TIBC、RDW鉴别诊断IDA与ACD时都有很好的准确性、灵敏度和特异性,TIBC优于RDW.
作者:黄衍锋;郑望春;丘衍博;刘雄伟;陈建霞;许瑞环 刊期: 2016年第08期
目的 探讨近足月胎儿生长受限(FGR)的适宜分娩孕周.方法 收集2010年1月至2015年9月分娩孕周≥36周、单胎、头位分娩的FGR病例符合入选标准与排除标准的孕妇146例,按其分娩孕周分为研究组(38周后分娩)和对照组(36~37+6周分娩),并对两组资料进行比较分析.结果 研究组的孕妇较对照组延迟15 d分娩,剖宫产率降低(x2=5.132,P=0.023);而且研究组的新生儿出生体重较对照组明显增加(t=6.958,P<0.001),入住NICU的概率明显下降(x2=10.537,P=0.001),住院天数缩短(t=-2.291,P=0.023).结论 FGR的孕妇在孕38周后分娩与在孕36周~37+6周分娩相比,不增加其妊娠不良结局和围产儿不良结局.
作者:曾慧倩;赖毓冕;石磊 刊期: 2016年第08期
目的 分析深圳市西乡地区2009-2015年感染性腹泻病例流行病学特征,为控制感染性腹泻提供依据.方法 收集深圳市疾病监测信息报告管理系统的感染性腹泻病例资料,采用流行病学描述性方法进行分析.结果 2009-2015年深圳市西乡地区共报告感染性腹泻病例4 741例,年平均发病率为45.2/10万,其中2009年年发病率高,为70.2/10万.发病高峰主要在6-9月之间.男女性别比为1.42:1.感染性腹泻发病多的年龄组为20-30岁年龄组,为2041例,占全部病例数的43.05%.职业分布前四位为工人、散居儿童、学生和商业服务.结论 2009-2015年深圳市西乡地区感染性腹泻病例有下降趋势,但是需加强感染性腹泻监测和病原检测工作,加强对工厂企业的卫生管理和健康知识的宣传教育.
作者:许增生;常改凤;邱望;潘波 刊期: 2016年第08期
目的 探讨跑台运动对阿尔茨海默病模型小鼠同型半胱氨酸水平的影响.方法 实验动物分4组,除正常组(C组)以外,模型组(M组)、运动1组(E1组)、运动2组(E2组)为造模组,利用D-半乳糖120 mg/(kg·d)联合亚硝酸钠100mg/(kg·d)给小鼠腹腔皮下注射,C组给予等量生理盐水注射,连续8周,同时运动组开始运动干预,E1组每天以10 m/s跑100 m,E2组以相同的速度跑200 m.第9周采用Morris水迷宫检测小鼠的学习记忆能力后取血清测同型半胱氨酸(Hcy)、叶酸(FA)、维生素B12(VB12)、总胆固醇(T-CHO)、甘油三酯(TG)水平.结果 水迷宫测试结果表明,与M组相比,E1组,E2组小鼠空间学习记忆能力均有提高(P=0.000,0.006).8周的跑台运动有降低小鼠血清Hcy水平趋势,E1、E2组与C组差异无统计学意义(P=0.127,0.190);E1、E2组的FA、VB12、T-CHO、TG水平均有改善.结论 跑台运动可能会降低D-半乳糖联合亚硝酸钠诱导的AD模型小鼠血清Hcv水平.
作者:郑冼华;曾丽;罗冠彬;李成华;林智君 刊期: 2016年第08期
目的 制备抗重组刚地弓形虫腺苷激酶(AK)的抗体IgY,对IgY进行特异性鉴定,并用间接ELISA的方法进行滴度、耐热、耐酸、耐碱、耐胃蛋白酶等理化性质的研究.方法 利用弓形虫AK蛋白,免疫产蛋母鸡,制备并纯化抗AK的卵黄抗体IgY,SDS-PAGE和Westem blot进行特异性分析,间接EILSA进行滴度和理化性质的检测.结果 SDS-PAGE检测Igy分子量与理论值一致;Western blot显示制备的IgY为抗AK的特异性IgY;二喹啉甲酸(BCA)法测浓度为4.25 mg/ml;间接ELISA检测滴度为1∶1×105;耐热,温度80℃时作用5 min不降解;耐碱,pH为8.5时,作用120 min不降解;30%岩藻糖可以完全抑制在pH等于3时的迅速降解;37℃胃蛋白酶作用120 min不降解.结论 本研究成功制备并鉴定了抗AK的IgY,IgY具有滴度和浓度高、耐热、耐酸、耐碱、耐胃蛋白酶的性质,为下一步的研究提供了理论依据.
作者:汪六庆;周银娣;徐海红 刊期: 2016年第08期
目的 建立斑点免疫金渗滤技术检测抗心磷脂抗体(AcAb)的新方法.方法 采用牛心磷脂抗原,以胶体金颗粒结合的羊抗人IgG为标记抗体,根据斑点免疫金渗滤技术原理,建立斑点免疫金渗滤技术法检测人血清抗心磷脂抗体.分别检测78份抗心磷脂抗体阳性血清和80份正常体检女性血清,并与酶联免疫吸附试验(ELISA)的结果对比分析.结果 与酶联免疫吸附试验的结果对比,其符合率为91.77%,特异性为95.00%,敏感性为88.46%,交叉试验与重复试验结果显示,斑点免疫金渗滤技术测定抗心磷脂抗体具有较好的稳定性和特异性.结论 斑点免疫金渗滤技术可以快速准确地测定血清抗心磷脂抗体,便于推广普及.
作者:陈淑芬;李凯;李相新;宋春林;韦僖雯 刊期: 2016年第08期
目的 建立一种基于重组酶聚合酶介导的等温扩增技术(RPA)快速检测结核分枝杆菌的方法.方法 根据结核分支杆菌基因保守序列设计的2对引物和特异性寡核苷酸探针,以结核分枝杆菌阳性菌株和其他5种非结核分枝杆菌基因组DNA为模板,考察该方法的检测灵敏度和特异性.结果 RPA快速检测结核分枝杆菌方法仅需15 min,检测灵敏度为可检出0.043 ng/μl的基因组DNA;5种非结核分支杆菌均不能扩增,特异性较高.结论 本研究建立了结核分枝杆菌的RPA快速检测方法,具有快速、简单、成本较低等优点,为结核分枝杆菌的快速检测提供一个新的工具.
作者:陈斌;杨银梅;钟志敏;徐邦牢 刊期: 2016年第08期
目的 探讨输入性疟疾的临床特点,为早期识别及更好地救治疟疾提供依据.方法 对我院2005至2015年收治的449例疟疾住院患者的临床和实验室资料进行回顾性分析.结果 449例患者均为输人性疟疾病例,其中重症疟疾患者48例(10.7%).血涂片检测可见恶性疟351例,间日疟85例,卵形疟1例,恶性疟合并间日疟12例,未发现三日疟的病例.患者以男性为主(88.2%);平均年龄(37.00±10.22)岁.临床表现以不规则热(74.4%)、疲乏(84.2%)、头痛(71.9%)、脾大(33.4%)为主要症状及体征,常见并发症为中毒性肝炎、急性肾功能不全、休克、严重出血等.实验室特征为血小板减少,红细胞压积下降,胆红素升高及低蛋白血症等.98.2%患者治愈出院,26例出现疟疾再燃,4例出现疟疾复发.结论 输入性疟疾以恶性疟为主,重症比例较高,临床症状常不典型.
作者:洪文昕;王建;杨慧勤;邱爽;刘丽儿;李剑萍;张复春 刊期: 2016年第08期
目的 探究特发性血小板减少性紫癜(ITP)病患血清中可溶性Fas(sFas)、可溶性Fas配体(sFasL)、β2-微球蛋白(β2-MG)以及细胞因子的水平,并分析其相关性.方法 选择2013年1月至2014年12月在海南省澄迈县人民医院接受治疗的ITP病患73例,并记为观察组.再随机选择同期在本院进行健康体检的志愿者73名,同时记为对照组.对比两组血清中sFas、sFasL、β32-MG及相关细胞因子水平,后进行相关性分析.结果 观察组患者sFas、sFasL、β2-MG、CD4+及CD28+水平分别为(14.94±2.08)、(0.67±0.13)、(2.63±0.45)、(25.61±4.28)及(32.74±7.03),显著高于对照组患者的(5.82±1.46)、(0.33±0.06)、(1.27±0.19)、(36.09±5.12)、(50.17±10.36),差异有统计学意义(P均<0.05);而观察组IL-2水平(0.31±0.07)低于对照组(0.62±0.18),差异有统计学意义(P<0.05).相关性分析结果显示,sFas、sFasL及β2-MG与ITP呈正相关,而IL-2、CD4+及CD28+与ITP呈负相关,差异有统计学意义(P<0.05).结论 sFas、sFasL和β32-MG参与了ITP的发病过程,可以应用于病变的诊断及分型.并且ITP病患免疫功能出现缺陷,对预后效果有一定的指导价值.
作者:陈扬清 刊期: 2016年第08期
目的 利用EP12-A2文件推荐方法对肺炎支原体快速鉴定培养药敏法(培养法)和肺炎支原体抗体检测法(抗体法)进行性能评价.方法 对我院儿科病区861名住院患儿的病历资料进行回顾性分析,这861名患儿均同时进行了肺炎支原体培养和肺炎支原体抗体检测,将两种方法的检测结果与患儿的出院诊断进行比较.结果 两种方法各自的敏感度和特异性的95%可信区间:培养法是[13.2%,23.0%]和[95.1%,97.9%],抗体法是[78.9%,88.3%]和[55.0%,62.7%];两方法之间敏感度和特异性差值的95%CI分别是[-73.6%,-57.8%]和[-1.3%,0.6%],抗体法的敏感度高于培养法,差异有统计学意义.结论 医生如果发现患者MP抗体结果与临床症状不符时,应根据用药效果、后期再次MP培养或MP抗体检测而做出综合判断.
作者:黄妩姣;张伟涛;黄宪章;黎小琼;王云秀 刊期: 2016年第08期
目的 对深圳市1例境外输入性2岁幼儿感染三日疟病例进行病例调查及实验室检测分析.方法 开展病例个案的流行病学调查,对血样进行涂片镜检,多重PCR扩增检测疟原虫核糖体DNA(rDNA),将PCR扩增片段进行序列测定,BLAST软件比对分析.结果 该患儿于2015年8月被家人带往尼日利亚探亲,9月中旬回国,11月初出现反复发热,退热时伴大汗等症状,初步诊断为疟疾并住院治疗.血涂片镜检可见典型的三日疟原虫形态.多重PCR扩增出与三日疟原虫预期一致的特异性条带.PCR产物大小为412 bp,与GenBank数据库中国外报道的9株三日疟原虫同源序列比对的一致性均为99%.结论 根据流行病学史、临床表现和实验室检测结果判断,确诊该2岁幼儿为一例输入性疟疾病例.血片镜检与核酸检测分析证实为三日疟原虫感染.
作者:李晓恒;高世同;裴福全;阮彩文;潘波;黄达娜;卢茜;谢旭;梅树江 刊期: 2016年第08期
目的 探讨正常高值血压人群颈动脉内膜中层厚度(CIMT)与同型半胱氨酸(HCY)的关系.方法 2014年1月至2014年10月期间,在丰润区人民医院就诊的门诊患者中选择符合要求的正常高值血压者和正常血压者各120例,采用超声测量两组人群CIMT,采用t检验比较两组人群CIMT和HCY水平,采用Pearson相关分析CIMT和HCY之间的关系,采用多元线性回归方法分析影响CIMT的可能因素.结果 正常高值血压组CIMT值(0.85±0.17 mm)和HCY水平(13.5±4.6 μmol/L)明显高于正常血压组(0.68±0.12 mm,8.6±_3.7 μmol/L),差异均有统计学意义(P<0.05).相关分析结果显示,CIMT与HCY之间呈正相关(r=0.462,P<0.05).多元线性回归结果显示,在校正其他影响因素后,HCY仍是CIMT的主要影响因素(β=0.307,P<0.05).结论 正常高值血压人群CIMT增厚、HCY水平升高,且CIMT与HCY水平呈正相关.
作者:韩梅;邢淑芳 刊期: 2016年第08期
目的 观察不同剂量瑞舒伐他汀钙对合并高脂血症的青年脑梗死患者的临床疗效.方法 选取住院治疗的青年脑梗死患者100例,随机分为两组:A组行小剂量瑞舒伐他汀钙+常规治疗,B组行大剂量瑞舒伐他汀钙+常规治疗.分别于治疗前,治疗后14 d、6个月进行NIHSS评分、BI评分,检测血脂水平,每月查肝肾功能、心肌酶、血糖评价药物不良反应.结果 治疗14 d及6月后两组进行比较,NIHSS评分B组均低于A组(P=0.0377,P=0.0291),BI评分B组均高于A组(P=0.0121,P=0.0238).治疗14 d后两组甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、非高密度脂蛋白胆固醇(non-HDL-C)比较,B组低于A组(P=0.0083,P=0.0040,P=0.0205,P=0.0185),治疗6月后两组TG、TC、LDL-C、non-HDL-C比较,B组均低于A组(P=0.0046,P=0.0008,P=0.0000,P=0.0041).两组不良反应发生率分别为4.00%、6.00%,差异无统计学意义(x2=0.323,P=0.851).结论 大剂量瑞舒伐他汀钙治疗青年脑梗死的临床疗效确切,不良反应轻微,可长期应用.
作者:冯志霞;许哲通;吕志坤;何妮娜;张晓红;王晓静;岳术义;郭书琴 刊期: 2016年第08期
目的 采用循证医学方法系统评价体外循环冠状动脉旁路移植术后联用阿司匹林氯吡格雷与单用阿司匹林抗血小板治疗效果和安全性.方法 检索Cochrane图书馆、Pubmed、EMBASE、MEDLINE、中国知网、万方数据库、维普数据库中从建库到2015年6月发表的有关文献.提取资料并对纳入研究的质量进行严格评价,对数据进行Meta分析.统计学分析应用RevMan 5.3软件.结果 纳入9个研究共计16 032例患者;阿司匹林+氯吡格雷组(C组)围术期死亡率、术后出血的发生率均显著低于单用阿司匹林组(A组)[OR(95%CI)分别为0.51(0.36,0.73)、0.84(0.71,0.99)];且C组ADP和ASPI诱导的血小板聚集率均显著低于A组[MD(95%CI)分别为-10.74(-19.73,-1.75)、-27.98(-35.84,-20.12)],而两组术后桥静脉闭塞率、心梗发生率、休克发生率及住院时间差异无统计学意义.结论 现有临床证据表明,体外循环冠状动脉旁路移植术后联用阿司匹林和氯吡格雷抗血小板治疗效果比单用阿司匹林好,但系统评价纳入的研究多为观察性研究,仍需大样本、多中心、高质量的临床随机对照实验进一步论证.
作者:曹晨;唐其柱;陈榕;沈涤非;孟庆涛;夏中元 刊期: 2016年第08期
目的 研究宫腔镜联合阴式超声在剖宫产后子宫憩室(CSD)诊断中的价值.方法 选取2014年7月至2015年6月因月经间期阴道出血、月经淋漓不尽、经期延长、性交后出血、痛经等症状在茂名石化医院东院妇产科接受检查的患者50例,先行阴式超声检查,然后再在超声引导下行宫腔镜检查,比较两种检查方式的声像学特点,CSD检出率,测量CSD的深度、宽度以及距浆膜面距离.结果 阴式超声检查CSD检出率(64.00%)显著低于阴式超声联合宫腔镜检查(90.00%),差异有统计学意义(P<0.05).CSD深度为(2.52±0.26)mm,宽度为(12.45±2.56)mm,距浆膜面距离为(12.45±2.56)mm.结论 宫腔镜联合阴式超声诊断CSD能够充分发挥二者的优势,提高诊断准确率,且无创无痛,简便易行,是准确诊断CSD的有效方法.
作者:李三群 刊期: 2016年第08期
目的 构建钩端螺旋体融合基因lipL32-lipL41重组表达质粒,并获得重组表达的融合蛋白.方法 设计引物,聚合酶链反应(PCR)从各参考标准株中扩增LipL32、LipL41基因,连接引物PCR法构建LipL32-LipL41融合基因,连接到大肠杆菌表达载体pET28a上,构建pET28a-LipL32-LipL41重组质粒,并转化到大肠杆菌DE3菌株中进行诱导表达,聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)及Western blot鉴定融合蛋白的表达.结果 扩增获得的LipL32-LipL41融合基因为1900 bp,原核表达重组质粒PET28a-LipL32-LipL41经酶切鉴定含有融合基因片段,在大肠杆菌中表达出Mr 90000左右的重组融合蛋白LipL32-LipL41.结论 成功构建钩体LipL32-LipL41融合基因,并在大肠杆菌中成果表达融合蛋白,为进一步评价LipL32-LipL41作为候选抗原诊断钩端螺旋体病的价值奠定基础.
作者:胡玉山;肖丽红;刘巧谊;周勇;侯水平;张欣强;夏丹;杨智聪 刊期: 2016年第08期