学术投稿

大鼠胸腺石蜡切片自发荧光的去除方法及应用

黄启顺;钟永豪;王业增;陈德

关键词:胸腺, 石蜡切片, 自发荧光, 免疫荧光, 硼氢化钠
摘要:目的:研究高效去除大鼠胸腺石蜡切片自发荧光的方法,并探索其在免疫荧光染色中的应用。方法应用硼氢化钠、台盼蓝、苏丹黑B对大鼠胸腺组织的石蜡切片进行处理并在荧光显微镜下观察自发荧光猝灭情况;并通过免疫荧光双标法对胸腺CD103及CD4阳性细胞进行染色探究其实用价值。结果经硼氢化钠处理后的切片红、绿、蓝三种颜色的自发荧光均较对照组明显减弱,且可增强胸腺组织切片免疫荧光染色效果。其他两种试剂处理后的石蜡切片自发荧光的强度与对照组无明显差异。结论硼氢化钠能显著的减低胸腺石蜡切片的自发荧光,可使免疫荧光特异性染色更加鲜明。
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  • 2012-2015年茂名市病毒性腹泻病原学特征

    目的:分析茂名市病毒性腹泻的病原学特征,为病毒性腹泻的预防和控制提供科学的依据。方法采集2012-2015年监测点医院门诊的腹泻病例粪便标本,采用实时荧光定量RT-PCR检测诺如病毒,采用ELISA法检测轮状病毒。结果共检测1822份标本,总阳性率为20.75%(378/1822),诺如病毒阳性率为12.79%(233/1822),轮状病毒阳性率为8.73%(159/1822),混合感染占5.29%(20/378);病毒性腹泻冬季发病高(40.13%),夏季发病低(4.07%),各年龄组人群均可感染。诺如病毒常年散发,轮状病毒以冬季为主(25.48%);6月~2岁年龄组是轮状病毒感染主要人群,诺如病毒以GⅡ基因型为主(95.71%)。结论病毒性腹泻阳性率较高,存在一定比例的混合感染;诺如病毒感染以GⅡ基因型为主,轮状病毒阳性率逐年下降。

    作者:罗雪梅;李晓君;许铭清;廖国东 刊期: 2016年第12期

  • 上海市浦东新区学校水痘聚集性疫情分析

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    作者:彭毅;费怡;任亚萍;张秀英;陈红英;肖绍坦 刊期: 2016年第12期

  • 5种miR表达对NSCLC患者临床预后的影响

    目的:分析外周血内不同微小RNA(miR)的表达水平对非小细胞肺癌(NSCLC)患者临床预后的影响,为NSCLC患者早期预后判断提供参考依据。方法以同济大学附属上海市肺科医院胸外科收治的184例NSCLC患者为研究对象,按照其术后复发情况分为复发组(n=121)及非复发组(n=63),使用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测其外周血miR-19b、miR-21、miR-146a、miR-183、miR-221表达水平,记录两组患者总生存期(OS)并运用单因素及多因素Cox回归分析,计算外周血内不同miR表达水平对患者OS的影响。结果复发组miR-19b、miR-21、miR-146a、miR-221表达水平及高表达率高于未复发组,其miR-183表达水平及高表达率低于未复发组,差异有统计学意义(P<0.05)。Cox回归分析显示,临床分期Ⅲ~Ⅳ期,miR-19b、miR-21、miR-146a、miR-221高表达,miR-183低表达是影响NSCLC患者OS的独立危险因素(P<0.05)。结论外周血内不同miR的表达水平对NSCLC患者复发及OS存在一定影响,有望成为NSCLC患者预后判断的分子标志物。

    作者:李犹龙;范江 刊期: 2016年第12期

  • 坝上和接坝地区居民缺血性脑卒中危险因素

    目的:调查分析坝上和接坝地区居民缺血性脑卒中的危险因素。方法采用多阶段整群随机法抽取河北省承德市丰宁县坝上地区和接坝地区常住居民3300例,共发放3300份问卷调查表,回收3170份,回收率为96.06%。其中有缺血性脑卒中者215例(病例组),无缺血性脑卒中者2955例(对照组)。回顾性分析坝上和接坝地区居民缺血性脑卒中的发病原因。结果性别、年龄、民族、吸烟、饮酒、肥胖或超重、脑卒中家族史、高尿酸血症、糖尿病、高血压、饮食习惯不合理、劳累过度、突然用力等构成比在病例组和对照组中差异均有统计学意义(P<0.05)。肥胖或超重、高尿酸血症、糖尿病、高血压及饮食习惯不合理均与缺血性脑卒中呈强相关性,是其发病的独立危险因素(P<0.05)。结论肥胖或超重、高尿酸血症、糖尿病、高血压及饮食习惯不合理等均是坝上和接坝地区居民缺血性脑卒中危险因素。

    作者:李龙;李涛;姚洪儒;张秀梅;李宏伟 刊期: 2016年第12期

  • Leptin水平与妊娠的研究进展

    Leptin蛋白为肥胖基因(ob)的编码产物,人类Leptin含167个氨基酸,分子量为16×103 Mr,由脂肪、胎盘等组织产生。 Leptin受体分布于下丘脑、胰腺、脂肪、子宫、胎盘等器官和组织。 Leptin通过内分泌、旁分泌及自分泌方式作用于其受体,在多种生理过程中发挥重要作用。近来发现,Leptin与妊娠维持密切相关。临床资料显示,妊娠期间母体Leptin明显升高,自然流产以及分娩后母体Leptin下降显著,妊娠期母体血清Leptin迅速下降有可能是妊娠终止的信号。关于Leptin与妊娠相关性的研究提示,Leptin可提高小鼠胚胎着床率,促进滋养细胞侵袭,调控胎盘转运及内分泌功能,并参与母胎免疫耐受。

    作者:钟轶磊;刘梅兰;张建平;陈慧 刊期: 2016年第12期

  • 佛山地区女性尖锐湿疣患者HPV基因型检测

    目的:了解佛山地区女性尖锐湿疣患者中人乳头瘤状病毒(HPV)基因型别的感染状况及其临床意义。方法选择149例尖锐湿疣女性患者,通过聚合酶链式反应对病毒DNA进行扩增后,利用基因芯片对扩增产物进行导流杂交和分型检测。结果149例被诊断为尖锐湿疣的受检者中,有113例检出HPV DNA阳性,其检出率为75.8%。感染人群主要集中在21~30岁年龄段,占39.8%(45/113)。在诊断为HPV阳性的113位患者中,单一感染83例,占73.5%(83/113);多重感染30例,占26.5%(30/113)。在HPV单一亚型感染病例中,HPV 6型是主要感染亚型,其次是11型。在HPV多重感染病例中,共出现3种多重感染类型,其中二重感染为主要类型,且以混合型感染为主。结论佛山地区女性尖锐湿疣患者以感染低危型HPV为主,好发于21~30岁的青壮年阶段;以单一感染为主,多重感染则以二重感染和混合型感染为主。

    作者:黄泽棋;姚少暖;邹林;陈启然;周少雄;谢伟贤;黄小娟 刊期: 2016年第12期

  • PBL教学法在成教医学免疫学中的应用效果

    目的:探讨PBL教学法在成教医学免疫学中的应用效果。方法随机抽取昆明医科大学2015级2个成教班,成教1班(50人)作为实验组,应用PBL教学法进行教学;成教2班(48人)作为对照组,实施传统教学方法。采用收集考试成绩、问卷调查等方法进行教学研究。结果教学效果统计结果显示:在调动学生兴趣、参与意识、参与发言次数、累计发言时间、实际解决问题的能力和提高成绩等方面实验组明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PBL教学法能促进昆医成教学生对免疫学知识的掌握,提高对临床问题的解释能力,适合对成教学生应用PBL教学。

    作者:罗夙医;郭海军;宝福凯;柳爱华 刊期: 2016年第12期

  • 原发性高血压人群红细胞脂肪酸分布及Omega-3指数研究

    目的:研究原发性高血压人群与健康人群的红细胞脂肪酸分布及Omega-3指数的差异。方法采用气相色谱-质谱法(GC-MS)分别测定广州地区29例健康人群和22例原发性高血压人群的红细胞脂肪酸,计算出红细胞Omega-3指数等指标,并对两组人群红细胞脂肪酸结果进行比较。结果健康人群与原发性高血压人群间的C22:5n3(P=0.018)、C20:4n6(P=0.042)、总Omega-6脂肪酸(P=0.028)、Omega-6/Omega-3(P=0.007)及花生四烯酸/二十碳五烯酸含量化值(AA/EPA)(P=0.005)差异有统计学意义,其余指标间的差异无统计学意义。结论原发性高血压人群红细胞中总Omega-6脂肪酸、Omega-6/Omega-3、AA/EPA均高于健康人群。

    作者:刘勇;李维;程雅婷;赵蓓蓓;郑磊 刊期: 2016年第12期

  • 代谢综合征患者肺功能改变的回顾性分析

    目的:分析代谢综合征(MS)患者的肺功能变化。方法选取云浮市人民医院2013年10月至2015年10月收治的MS患者为病例组(n=34);同期行肺功能检查的非MS患者为对照组(n=62)。对患者的肺功能资料进行回顾性分析,测定指标包括用力肺活量(FVC)、1秒钟用力呼气容积(FEV1)、大通气量(MVV)、肺一氧化碳弥散量( DLco)。每项目连续做3次,取其理想曲线大值。结果 MS患者的FVC、FEVl、MVV、DLco分别为(2.67±0.43)L、(2.15±0.35)L、(93.73±15.08)L、(85.31±14.40)ml/(min·mm Hg),均低于对照组的(3.18±0.47)L、(2.61±0.38)L、(109.59±15.82)L、(99.75±13.72)ml/(min·mm Hg),差异有统计学意义(P<0.001)。MS患者的FEV1/FCV比值亦低于非MS个体,但差异无统计学意义。结论 MS可引起肺功能受损。

    作者:刘艳秀;汪利华;苏菊香;何玉萍 刊期: 2016年第12期

  • MDSCs与乙型肝炎的研究进展

    髓系来源性抑制细胞(MDSCs)是来自髓系的具有异质性未分化成熟的细胞群,首次发现于肿瘤患者外周血循环中。目前,MDSCs在各种严重人类疾病中得到发现和研究,例如肿瘤、自身免疫性疾病、支气管哮喘以及严重感染等疾病。MDSCs可通过不同途径对机体的固有免疫和适应性免疫应答产生抑制作用,对肿瘤以及感染性、自身免疫性疾病等疾病的发生发展以及预后产生影响。乙型肝炎病毒(HBV)感染疾病的发展取决于病毒复制和宿主免疫的相互作用,机体适应性免疫系统在控制乙型肝炎病毒感染具有重要作用,过度活化的免疫抑制细胞可导致机体不能产生有效的免疫反应清除病毒导致HBV感染慢性化。本文就MDSCs在慢性HBV感染中的作用及其作为潜在的免疫治疗目标进行综述。

    作者:朱雪莲;邓小燕;吴晓蔓 刊期: 2016年第12期

  • 大鼠胸腺石蜡切片自发荧光的去除方法及应用

    目的:研究高效去除大鼠胸腺石蜡切片自发荧光的方法,并探索其在免疫荧光染色中的应用。方法应用硼氢化钠、台盼蓝、苏丹黑B对大鼠胸腺组织的石蜡切片进行处理并在荧光显微镜下观察自发荧光猝灭情况;并通过免疫荧光双标法对胸腺CD103及CD4阳性细胞进行染色探究其实用价值。结果经硼氢化钠处理后的切片红、绿、蓝三种颜色的自发荧光均较对照组明显减弱,且可增强胸腺组织切片免疫荧光染色效果。其他两种试剂处理后的石蜡切片自发荧光的强度与对照组无明显差异。结论硼氢化钠能显著的减低胸腺石蜡切片的自发荧光,可使免疫荧光特异性染色更加鲜明。

    作者:黄启顺;钟永豪;王业增;陈德 刊期: 2016年第12期

  • 胃癌患者血清CK-18、CA72-4、CEA的临床意义

    目的:探讨胃癌患者血清中细胞角蛋白-18(CK-18)、糖链抗原72-4(CA72-4)和癌胚抗原(CEA)水平及其临床意义。方法随机选取2015年5月到2016年5月常州市金坛区人民医院行胃癌治疗的患者40例作为实验组,所有病例经诊断均未患其他恶性肿瘤(肿瘤位于胃部15例,位于胃窦部9例,位于贲门胃底部16例;另外在门诊随机选取30例健康体检者作为对照组。测定两组人群血清中CK-18、CA72-4和CEA的水平。结果实验组血清中CK-18、CA72-4和CEA阳性表达与胃癌的生物学特征如年龄、性别、肿瘤位置及其大小、淋巴结转移等差异无统计学意义(P>0.05);实验组CK-18、CEA、CA74-2浓度(中位数)分别为2.03、2.93、4.34 ng/ml,均显著低于对照组的8.96、8.35、21.68 ng/ml,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CK-18、CA72-4和CEA三种肿瘤指标联合检测可考虑作为新的胃癌检测指标,对胃癌预防及治疗有一定意义。

    作者:吴军;徐美珍 刊期: 2016年第12期

  • 广州市番禺区人感染H7N9禽流感流行病学和外环境监测

    目的:分析广州市番禺区人感染H7N9禽流感的流行特征和外环境监测结果,为防控H7N9禽流感工作提供科学依据。方法采用流行病学个案调查与描述性分析方法,收集2014-2015年番禺区出现的人感染H7N9禽流感确诊病例的流行病学调查资料,以及全区外环境监测点的监测资料。结果2014-2015年番禺区共确诊6例人感染H7N9病例,均在2月份发病,死亡4例,发病前有活禽市场接触史5例;共采集外环境标本3031份,检测阳性率为6.17%,肉菜市场、禽类批发市场、禽类养殖场检测阳性率分别为7.22%、2.04%、0.00%,差异有统计学意义(P<0.05);外环境标本阳性检出率与病例发病时间分布上一致。结论冬春季节是本地人感染H7N9禽流感易发季节,活禽市场暴露是危险因素,规范活禽交易是防控人感染H7N9禽流感的关键。

    作者:李伟强;李功理;冯嘉韵 刊期: 2016年第12期

  • 老年重症肺炎患者TNF-α及IL-10的表达水平对预后的评估价值

    目的:探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白介素-10(IL-10)对老年重症肺炎病情严重程度及预后的评估价值。方法选取86例老年重症肺炎患者为重症肺炎组、70例普通肺炎老年患者为非重症肺炎组、65例体检正常的健康老年人为正常对照组。采用酶联免疫吸附法检测并比较三组TNF-α及IL-10血浆水平。根据临床转归情况将86例重症肺炎患者分为死亡组与存活组,比较两组TNF-α与IL-10血浆水平的比值的动态变化情况。结果重症肺炎组患者确诊后24 h内血浆TNF-α、IL-10水平及TNF-α/IL-10均明显高于非重症肺炎组和正常对照组(P<0.05);非重症肺炎组血浆TNF-α、IL-10水平及TNF-α/IL-10明显高于正常对照组(P<0.05);入院后第1、3、5、7天死亡组TNF-α与IL-10血浆水平的比值一直处于较高水平,而存活组则逐渐下降,下降幅度明显低于存活组(P<0.05)。结论血浆TNF-α及IL-10水平不仅可反映老年重症肺炎患者机体炎症反应状况,也可以作为判断疾病预后的早期指标,对临床治疗有一定参考价值。

    作者:高萍;尚丽娟;张芳芳 刊期: 2016年第12期

  • 应用ROC曲线确定化学发光法检测梅毒特异性抗体的佳临界值

    目的:应用受试者操作特性(ROC)曲线,确定化学发光法(CLIA)检测梅毒特异性抗体的佳临界值。方法收集经CLIA检测的临床血清标本共计261份,全部标本使用酶联免疫吸附试验(ELISA)和梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)进行复检。以TPPA作为参考标准,计算CLIA和ELISA检测梅毒抗体的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值;应用ROC曲线确定CLIA检测梅毒抗体的佳临界值。结果 CLIA和ELISA检测梅毒抗体的敏感性分别为100.0%和97.1%,特异性为86.3%和91.1%,阳性预测值为72.9%和80.0%,阴性预测值为100.0%和98.9%。ROC曲线分析表明,当CLIA的临界值设定为2.41时,其方法的敏感性和特异性分别为100.0%和96.0%,与TPPA的总符合率为98.0%。结论当CLIA检测梅毒特异性抗体的临界值设定为2.41时,能够有效提高该方法的特异性。

    作者:俞辉;林勇平;向波;张婷;刘忠民 刊期: 2016年第12期

  • NF-κBp65、TNF-α在妊娠期糖尿病患者中高表达

    目的:探讨核转录因子-κBp65(NF-κBp65)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在妊娠期糖尿病患者中的表达水平及意义。方法收集张家港市中医医院分娩的250例孕产妇的临床资料,将合并有妊娠期糖尿病的97例患者作为研究组,153例正常孕妇作为对照组,对两组孕妇血清和脐血中NF-κBp65、TNF-α的表达水平及在胎盘组织中的阳性率进行对比分析。结果研究组血清和脐血中NF-κBp65水平为(875.66±148.67)、(880.72±151.57) ng/L,明显高于对照组的(312.39±95.38)、(327.84±94.23)ng/L;且研究组血清和脐血中TNF-α水平为(7.72±0.23)、(8.17±0.36)ng/L,亦明显高于对照组的(5.54±0.59)、(5.79±0.43)ng/L,差异均有统计学意义(P<0.05)。两组胎盘组织中均可见NF-κBp65和TNF-α阳性颗粒表达,研究组NF-κBp65和TNF-α阳性率分别为92.78%和95.88%,明显高于对照组22.88%和13.73%(P<0.05)。结论妊娠期糖尿病孕妇NF-κBp65和TNF-α炎症因子的表达阳性率较正常孕妇高,提示二者对妊娠期糖尿病发生有一定的促进作用。

    作者:温玲;候顺玉 刊期: 2016年第12期

  • 麻疹患者胃肠道受累及肝损害特征

    目的:了解麻疹患者胃肠道受累及肝损害临床特征。方法回顾性分析58例成人麻疹患者和142例儿童麻疹患者胃肠道受累及肝损害情况,并对两组进行对比分析。结果儿童麻疹呕吐、腹胀症状的发生率要高于成人组(P<0.05),大便潜血阳性在成人组中更为常见(P<0.05),纳差及腹泻在两组均较常见,差异无统计学意义(P>0.05)。成人麻疹并肝损害常见且明显高于儿童麻疹(P<0.05)。结论成人麻疹及儿童麻疹胃肠道受累情况均较常见,而成人麻疹更易并发肝损害,需积极治疗。

    作者:周伟泽;利旭辉;廖晓辉;肖春花;黄秀明 刊期: 2016年第12期

  • 干扰素联合布地奈德对病毒性肺炎患儿的疗效

    目的:探讨干扰素联合布地奈德雾化吸入治疗病毒性肺炎患儿的疗效及对血清IL-6的影响。方法收集2014年11月至2015年5月清远市妇幼保健院儿科收治的64例病毒性肺炎患儿,随机分为观察组和对照组,对照组采用利巴韦林治疗,观察组在此基础上给予干扰素α1b联合布地奈德治疗,观察两组患儿的疗效及血清IL-6表达。结果观察组患儿咳嗽、喘息、退热、肺部湿罗音消失时间及住院时间少于对照组(P<0.05);观察组患儿总有效率高于对照组(87.5%vs 65.63%, P<0.05);入院第2天两组血清IL-6水平差异无统计学意义(P>0.05),治疗7 d后观察组血清IL-6水平显著低于对照组(t=6.27,P<0.05);两组患儿不良反应差异无统计学意义(χ2=0.63,P>0.05)。结论干扰素联合布地奈德雾化吸入治疗小儿病毒性肺炎能够显著改善患儿的临床症状,降低患儿血清IL-6水平。

    作者:徐志威;戴洪法;黄美莲;廖翠乐 刊期: 2016年第12期

  • 绵阳市2014-2015年输入性疟疾流行病学分析

    目的:探讨输入性疟疾的流行病学和临床特征,为该病的诊断和治疗提供指导。方法对2014-2015年的43例输入性疟疾患者的流行病学和临床资料进行回顾性分析。结果43例输入性疟疾病例均为男性,年龄(40.04±11.90)岁。间日疟19例,恶性疟24例。有12例(27.91%)在疟疾流行区曾经感染疟疾。所有病例均发热,37.21%病例热退后有大汗,30.23%有寒战。此外还伴有肌肉酸痛65.12%(28/43)、恶心呕吐55.81%(24/43)、咳嗽30.23%(13/43)、腹痛腹泻18.60%(8/43)、贫血27.91%(12/43)、黄疸4.65%(2/43)和肝脾肿大37.21%(16/43)。43例病例中,中性粒细胞比值升高58.14%(25/43),嗜酸性粒细胞降低60.47%(26/43),PLT降低76.74%(33/43)、HGB降低27.91%(12/43);肝脏酶学升高60.47%(26/43)、总胆红素升高4.65%(2/43)、白蛋白降低4.65%(2/43);尿素氮和肌酐升高2.33%(1/43)。 B超查见肝脏长大者占4.65%(2/43),脾脏长大者占32.56%(14/43)。经病原学治疗和对症治疗后,除1例死亡外,其余病例均在1~2周内治愈。结论输入性疟疾临床表现复杂,遇有疟疾流行区返回人员,临床医师要高度警惕输入性疟疾的发生,结合流行病学史和临床表现,及时诊断并进行抗疟治疗及处理并发症。

    作者:史映红;刘世安;王保东;龙波 刊期: 2016年第12期

  • 高胆红素血症新生儿体内IgA、IgG、IgM、补体C3、C4表达水平变化

    目的:探讨患有高胆红素血症的新生儿体内IgA、IgG、IgM以及补体C3、C4水平变化的临床意义。方法收集2013年2月至2015年2月衡水市人民医院新生儿科收治的高胆红素血症患儿155例为研究对象,按参考标准分为轻度高胆组(n=78)、中度高胆组(n=45)、重度高胆组(n=32);同时选择胆红素水平正常的新生儿123例作为正常对照组,对所有病例的胎龄、日龄、体重、胆红素检测水平进行统计,对IgA、IgG、IgM、补体C3、C4水平进行检测。结果随着黄疸进行性加重,IgA和IgM逐渐降低,各组间差异均有统计学意义(P<0.05),IgG各组间差异无统计学意义(P>0.05), C3、C4轻度高胆组和中度高胆组与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),而C3、C4重度高胆组和正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论高胆红素血症对新生儿体液免疫有影响,降低其免疫力,应加强对新生儿胆红素的监测,及时采取有效措施控制其发展。

    作者:李森;许沙沙;郭连峰;李益廷;户林燕 刊期: 2016年第12期

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