和鹏;陈纯;狄飚;吴继彬;谢华萍;耿进妹;李嘉琪;吴忠道;王鸣
目的 了解引起2011年广州市手足口病流行的病原体,确定其型别分布特征.方法 收集手足口病疑似病例标本,用Real-time RT-PCR、巢式RT-PCR方法对其部分VPI基因进行扩增并测序,确定其病原谱构成,构建系统发育树.结果 共收集2 067例疑似手足口病病例标本,其中实验室确诊肠道病毒阳性1 113份,包括EV71、CoxA16、CoxA6、CoxA10、CoxA9、HEV96、埃可病毒和柯萨奇B组等15种肠道病毒,其中EV71、CoxA16和CoxA6是主要病原体,分别占32.6%、39.2%和18.5%;死亡病例3例,全部由EV71引起;重症病例9例,6例由EV71引起,3例由CoxA6引起.VP1基因构建进化树分型发现,广州市2011年手足口病病原体属于HEV-A (97.2%)、HEV-B(2.5%)、HEV-C(0.3%)3个型别,未发现HEV-D型毒株.结论 广州市2011年手足口病的流行主要由HEV-A型的EV71、CoxA16和CoxA6病毒引起,同时还存在HEV-B型和HEV-C型的CoxA9、EC、CoxB、CoxA24多种病毒.
作者:和鹏;陈纯;狄飚;吴继彬;谢华萍;耿进妹;李嘉琪;吴忠道;王鸣 刊期: 2012年第05期
目的 评价目前水痘疫苗接种方案对儿童集体单位水痘暴发的保护效果.方法 在发生水痘疫情的儿童集体单位,按年龄分层,以接种疫苗为暴露因素进行1∶1配对病例对照研究,评价疫苗保护效果.结果 儿童于1~2岁接种水痘疫苗后,在2~8岁时发生水痘的OR值为0.083(95% CI 0.037~0.185),疫苗保护效果为91.7%(95% CI 81.5%~96.3%);在9~15岁时OR值差异无统计学意义.结论 1~2岁接种水痘疫苗后6年内有良好的保护作用,但之后会快速衰减,应适时接种第2剂疫苗.
作者:何蔚云;梁建华;吴莉萍;陈清 刊期: 2012年第05期
内质网(ER)是细胞内重要的细胞器,参与多种细胞进程,这些进程对于维持细胞存活和发挥细胞的正常生理功能具有重要的作用.然而在多种生理病理条件下,内质网稳态会发生变化而失衡,从而诱发内质网应激(ERS),此时机体通过激活未折叠蛋白反应(UPR)来恢复内质网的正常功能.当持续的ERS状态无法恢复时,ERS就会触发细胞凋亡程序,通过不同的凋亡途径引起细胞凋亡.
作者:王硕;孟庆华;秦秀德;刘辉;王丹丹;康立源 刊期: 2012年第05期
目的 应用四聚体技术研究肺结核患者治疗前后各时间点外周血中E7多肽特异性CD4+T细胞的变化及结核患者肺组织切片中特异性CD4+T细胞的分布.方法 培养能稳定分泌表达E7/HLA-DRB1*0404和E7/HLA-DRB1*1602的果蝇S2细胞株,表达纯化获得2种蛋白质单体,并制备成PE标记的相应四聚体,流式细胞分析检测肺结核患者外周血中特异性CD4+T细胞.制备FITC标记的四聚体,对肺结核患者的肺组织切片进行原位染色,观察特异性CD4+T细胞的分布.结果 肺结核患者治疗前组及治疗1~60 d组分别与治疗61 d后各组及脐带血组之间的四聚体阳性多肽特异性CD4+T细胞差异均有统计学意义(P<0.05),但治疗前组与治疗1~60 d组之间、治疗61 d后各组之间及分别与脐带血之间、2个四聚体检测组之间差异均无统计学意义(P>0.05).在肺结核患者的肺组织切片中可观察到特异性CD4+T细胞.结论 制备的2种E7/HLA-DR四聚体对于结核病的检测具有一定的意义,可以用于检测研究肺结核患者治疗前后外周血E7多肽特异性CD4+T细胞的变化及肺结核患者局部病理组织中特异性CD4+T细胞的分布.
作者:黄利荣;李研;方毅敏;任亮亮;朱艳;赖小敏 刊期: 2012年第05期
目的 构建并表达弓形虫复合基因SAG1-BAG1及分析重组抗原的免疫反应性.方法 利用PCR扩增弓形虫SAG1基因,利用RT-PCR扩增弓形虫BAG1基因,通过酶切连接分别将SAG1、BAG1基因克隆到pET28a表达载体中构建复合基因SAG1-BAG1.将质粒pET28a-SAG1-BAG1转入大肠杆菌BL21( DE3)中进行诱导表达,Western-blot分析该重组蛋白的免疫反应性.结果 复合基因SAG1-BAG1全长约1 407 bp,重组蛋白相对分子质量约为50 000,表达量约占菌体总蛋白的10%,Western-blot分析显示重组蛋白具有良好的免疫反应性.结论 成功构建并表达弓形虫复合基因SAG1-BAG1.
作者:秘文婷;姚硕;钟志刚;杨培梁;吴焜;陈晓光 刊期: 2012年第05期
目的 构建带有血凝素(HA)标签的小鼠组蛋白变异体macroH2A1 (mH2A1)的真核表达载体,并观察其在人胚肾293T细胞中的表达定位情况.方法 提取内毒素休克的BALB/c小鼠肝脏组织的总RNA,通过逆转录-聚合酶链反应获得内毒素休克小鼠肝脏组织的cDNA,以cDNA为模板使用PCR方法扩增得到mH2A1编码序列,并将其酶切后连接至带有HA标记的载体pcDNA3-HA上;对阳性克隆进行酶切、PCR和测序鉴定.随后将重组质粒瞬时转染293T细胞,利用荧光显微镜观察.结果 PCR、双酶切和测序鉴定表明pcDNA3-mH2A1-HA真核表达质粒构建正确;经转染实验发现,该质粒能够在293T细胞中表达,表达产物主要定位在细胞核中.结论 mH2A1真核表达载体pcDNA3-mH2A1-HA的成功构建及明确其在哺乳动物细胞中的具体核定位,为进一步研究mH2A1作用细胞的信号通路提供了一个重要的工具.
作者:张菁;罗海华;王娟;卢康荣;姜勇 刊期: 2012年第05期
目的 系统评价局限性肺切除(包括肺段切除和楔形切除)与肺叶切除治疗Ⅰ期非小细胞肺癌后总生存期和复发率.方法 计算机检索Pubmed和EMBASE数据库,纳入比较局限性肺切除与肺叶切除治疗Ⅰ期非小细胞肺癌后总生存期和复发的随机临床研究和非随机研究.结果 终纳入25篇文献,病例数8 968.对于Ⅰ期非小细胞肺癌,局限性肺切除较肺叶切除术后总生存期差(HR=1.34,95%CI 1.15-1.56,P=0.0002),总体复发率(OR=1.41,95%CI 1.05-1.89, P=0.02)和局部复发率(OR=2.64,95%CI 1.77-3.93,P<0.00001)高;肺段切除与肺叶切除术后总生存期(HR=1.25,95%CI 0.98-1.58,P=0.07)和总体复发率(OR=1.20,95%CI 0.74-1.94,P=0.46)比较差异无统计学意义,但具有更高的局部复发率(OR=2.08,95%CI 1.13-3.83,P=0.02).对于Ⅰa期≤2 cm的非小细胞肺癌,局限性肺切除与肺叶切除的术后总生存期(HR=1.07,95%CI 0.93-1.23,P=0.34)、总体复发率(OR=0.55,95% CI 0.09-3.43,P=0.52)和局部复发率(OR=2.28,95%CI 0.34-15.41,P=0.40)差异无统计学意义.结论 对于Ⅰ期非小细胞肺癌,肺段切除有较好的总生存期,但面临局部复发率高的风险;对于Ⅰa期≤2 cm的非小细胞肺癌,局限性肺切除与肺叶切除总生存期和复发率相当.
作者:陈亮;许建功;王武军 刊期: 2012年第05期
目的 构建过表达鸟氨酸脱羧酶(ODC)基因慢病毒载体,并研究其对氧化应激诱导大鼠H9C2心肌细胞凋亡的影响.方法 构建大鼠ODC基因pHIV-ODC过表达质粒,与包装质粒psPAX2、pMD2G共转染293FT细胞,检测其侵染效率;包装慢病毒并侵染H9C2心肌细胞;72 h后观察其侵染效率,RT-PCR法检测细胞ODC mRNA的表达,利用CCK-8、Hochest33258染色检测ODC对H2O2诱导H9C2心肌细胞凋亡的影响.结果 酶切及测序鉴定ODC序列正确插入慢病毒过表达载体.侵染H9C2细胞72 h后ODC mRNA水平较阴性慢病毒感染组显著升高.过表达ODC能抑制H2O2诱导的细胞活力下降,减轻H2O2诱导的心肌细胞凋亡,与H2O2组比较差异均有统计学意义(P<0.001).结论 成功构建的过表达ODC慢病毒,上调H9C2细胞中ODC的表达,过表达ODC能显著抑制氧化应激诱导的H9C2心肌细胞凋亡.
作者:臧书文;刘彬;周迎春;孙学刚;黄平;邱锦帆;刘紫庭 刊期: 2012年第05期
目的 分析深圳市福田区疑似预防接种异常反应(AEFI)的发生特征.方法 通过国家网络信息系统收集AEFI 个案资料,采用描述性方法对相关指标进行分析.结果 2009-2010年报告AEFI 394例,其中≤2岁儿童占65.74%,男女性别比为1.28∶1.接种后1d内发生占79.44%.AFFI分类诊断中,一般反应占59.14%,异常反应占22.59%,偶合症占18.27%.临床诊断前3位为:发热、红肿、硬结,过敏性皮疹,无菌性脓肿,分别占57.11%、19.54%、5.08%.394例AEFI预后良好,未出现后遗症或死亡病例.发生AEFI前3位的疫苗为麻疹减毒活疫苗、全细胞百白破疫苗、甲型流感(裂解)疫苗,分别为69例(17.51%)、63例(15.99%)、57例(14.47%).不同疫苗AEFI报告发生率在28.53/100万剂~1 495.00/100万剂.结论 辖区AEFI监测敏感性和质量都较之前有明显的提高,各项监测指标均达到了国家方案要求,但AEFI报告发生率与WHO报道的预期发生率还有一定差距,说明监测工作仍有待提高.
作者:周志峰;方琼;曹丽;林宝妮;蔡琳;刘俊玲 刊期: 2012年第05期
目的 探讨复方中药含药血清对人A375黑素瘤细胞酪氨酸酶(TYR)活性的影响.方法 体外培养人A375黑素瘤细胞,采用多巴速率氧化法研究复方中药含药血清对TYR活性的影响.结果 低浓度(5%~10%)的Ⅰ方、Ⅱ方、Ⅲ方对酪氨酸酶活性无明显激活作用(P>0.05);高浓度(20%~30%)的Ⅰ方、Ⅲ方、Ⅵ方对TYR活性均有明显激活作用(P<0.05),以Ⅵ方作用显著,且与其它各组相比,差异均有统计学意义(P<0.01).结论 对TYR具有激活作用的中药组成复方并不一定对TYR有激活作用,具有祛风活血和补肾三重作用的Ⅵ方在促进TYR活性上优于祛风除湿Ⅰ方、养血活血Ⅱ方和滋补肝肾Ⅲ方.
作者:刘利利;杨柳;洪逊强 刊期: 2012年第05期
目的 观察白介素32(IL-32)在胃癌细胞株中的表达情况,探讨其在胃癌发生、发展中的意义.方法 采用逆转录PCR、real-time PCR及Western blot法分别从基因和蛋白水平上检测IL-32在正常胃上皮细胞GES-1以及胃癌细胞株MKN-45、KATO中的表达情况.结果 逆转录PCR及real-time PCR结果均显示胃癌细胞IL-32 mRNA表达水平明显高于正常胃上皮细胞,逆转录PCR灰度比值(目的/内参)为:GES-1(0.34±0.09)、MKN-45 (0.79±0.11)、KATO( 0.90±0.17),差异有统计学意义(P<0.05).real-time PCR Ct值显示:MKN-45的IL-32基因表达量是GES-1的(5.34±1.09)倍,KATO是GES-1的(4.07±1.69)倍,差异均有统计学意义(P<0.05).Western blot结果显示IL-32在蛋白表达水平的结果与前一致,灰度比值(目的/内参)为:GES-1 (0.30±0.10)、MKN-45(0.92±0.32)、KATO(0.86±0.15),差异有统计学意义(P<0.05).结论 IL-32在胃癌细胞株中呈高表达,推测其可能在胃癌的发生、发展中起一定作用.
作者:詹磊磊;唐保东 刊期: 2012年第05期
目的 探讨英夫利昔单抗(INF)治疗难治性银屑病关节炎(PsA) 22周的疗效与安全性.方法 18例接受规范的非甾体抗炎药(NSAIDs)和改善病情抗风湿药物(DMARDs)治疗6月以上病情仍活动的PsA患者,0、2、6、14周予INF 3 mg/kg静脉输注.主要疗效评价指标为第2、14、22周达到PsA疗效标准(PsARC)及PASI改善50%(PASI 50)的患者比例,次要疗效指标为第2、14、22周达到PASI 70/90的患者比例及各疗效参数(关节肿胀及压痛数、患者总体评价、健康评估问卷、医师综合评价、PASI评分、CRP)的变化.治疗前及观察期间查血常规、自身抗体、肝肾功、胸片等,记录不良反应.结果 治疗2、14、22周时,达到PsARC、PASI 50的患者比例分别为55.6%、55.6%,72.2%、83.3%,88.9%、88.9%;达到PASI 70、PASI 90的患者比例分别为33.3%、22.2%,55.6%、38.9%,77.8%、61.1%;各疗效参数均较基线有改善(P<0.05).出现3例感染,对症治疗后痊愈,无严重不良反应发生.结论 INF治疗难治性PsA有较好的疗效和安全性.
作者:李静;李娟;朱俊卿 刊期: 2012年第05期
B细胞主要通过分泌各种抗体发挥免疫学作用,新近研究发现在B细胞中存在一种新的细胞亚群——调节性B细胞,它们可通过分泌IL-10和TGF-β1抑制获得性免疫介导的炎症反应发展和(或)加快炎症的恢复,相关研究表明此种细胞可在炎症性肠病、系统性红斑狼疮、肿瘤等疾病中发挥重要作用.本文综述了调节性B细胞的来源、功能、作用机制及相关研究进展.
作者:刘洪波;封艳玲;郑学宝 刊期: 2012年第05期
目的 回顾性分析轻微血糖升高对大陆地区孕妇不良妊娠结局的影响.方法 符合以下入选标准:①年龄大于18岁;②单胎、头胎、胎龄符合孕周;③于孕24~32周行50 g GCT试验,1 h PG≥7.8 mmol/L者于1周内行75 g OGTT试验,且OGTT试验在正常范围内(FBG<5.1 mmol/L、1 h<10.0 mmol/L、2 h<8.5 mmol/L).结果 共有527例符合入选标准,根据血糖水平高低将FBG、1 h BG、2h BG等各分为4个亚组,每个亚组相差一个标准差.随着FBG、1h BG、2h BG水平升高,大于胎龄儿、新生儿高胆红素血症的发生率也随着增加;而胎儿宫腔内感染、先兆子痫、1min Apgar评分低及转儿科监护治疗的发生率并未达到差异具有统计学意义的升高.结论 对于轻微血糖升高的孕妇而言,大于胎龄儿、新生儿高胆红素血症的血糖阈值是4.6 mmol/L<FBG≤5.0 mmol/L、9.5 mmol/L<1 h BG≤9.9 mmol/L、8.0 mmol/L<2 h BG≤8.4 mmol/L,而需转新生儿监护治疗的血糖阈值是4.6 mmol/L<FBG≤5.0 mmol/L、9.5 mmol/L<1 h BG≤9.9 mmol/L.但这仍需更大规模的前瞻性研究加以证实.
作者:潘燕飞;沈洁;韩亚娟;陈超凤;谢敏 刊期: 2012年第05期
目的 了解艾滋病病毒(HIV)感染者和艾滋病( AIDS)病人(简称PLWHA)焦虑状况,探讨其影响因素.方法 采用Zung氏焦虑自评表(SAS)和评价方法,在广州市番禺区艾滋病VCT门诊对144名PLWHA进行面对面问卷调查,采用SPSS统计软件进行统计学析.结果 PLWHA的SAS总粗分(32.19±6.91)高于国内常模,差异有统计学意义(t=3.919,P<0.01).焦虑总发生率为17.36%,其中HIV感染者和AIDS病人分别为16.16%和20.00%.SAS标准总分方面,AIDS病人、年龄>50岁者、在本市居住的非本市户籍者中居住年限<5年者、确认感染HIV年限<1年者、抗病毒治疗年限<1年者和CD4细胞计数≤200个/mm3者均相对较高,差异均有统计学意义(P<0.05).年龄> 50岁者和确认感染HIV年限<1年者的焦虑患病率均相对较高,差异均有统计学意义(P<0.05).Logistic多因素分析发现,性别、年龄和确认感染年限是PLWHA焦虑的主要影响因素,年龄>50岁者产生焦虑的危险是≤50岁者的7.8倍.结论 PLWHA的焦虑状况较一般人群严重,并受多方面因素的影响,应在随访关怀过程中加强心理支持体系的构建,改善其焦虑状况,提高生活质量.
作者:杨燕君;凌莉;张晖;秦小洁;黄桂锋;曾锐志;李功理 刊期: 2012年第05期
目的 观察大鼠肾小球系膜细胞中内脏脂肪素(Visfatin)对肾素血管紧张素系统(RAS)mRNA表达的影响及探讨其机制.方法 分别构建Visfatin表达载体质粒及Visfatin RNAi表达载体质粒,将细胞分为8组:正常糖对照组、正常糖+NF-κB特异性抑制剂吡咯烷二硫基甲酸酯(PDTC)组、过表达Visfatin组、过表达Visfatin +PDTC组、空白过表达载体组、空白过表达载体+PDTC组、Visfatin RNAi组及空白沉默载体组,用Realtime-PCR方法检测血管紧张素原(AGT)、血管紧张素转化酶(ACE)、血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)、血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2R)等RAS相关基因表达,使用电泳迁移率变动分析法(EMSA)检测NF-κB活性,比较各组间基因表达及NF-κB活性的差异;以及通过观察PDTC处理对照组、过表达Visfatin组、空白过表达载体组前后上述指标的变化.结果 细胞过表达Visfatin后,NF-κB活性、Visfatin、AGT、ATIR mRNA表达量显著升高,分别为正常糖对照组的1.52、11.42、2.85、1.25倍(P均<0.01);转染RNAi质粒pSIREN-Visfatin/sh RNA后,NF-κB活性、Visfatin、AGT、AT1R mRNA表达量显著降低,分别为正常糖对照组的10.90%、26.83%、30.00%、73.47%(P均<0.01).经PDTC处理的各组NF-κB活性、AGT mRNA表达量与相应的未经PDTC处理组相比显著降低(P<0.01),正常糖+PDyT℃干预组NF-κB活性、AGT mRNA表达量是正常糖对照组的21.60%、34.59%;过表达Visfatin+PDTC干预组的NF-κB活性、AGT mRNA表达量是过表达Visfatin组的37.96%、19.72%;空白过表达载体+PDTC干预组NF-κB活性、AGT mRNA表达量是空白表达载体组的52.53%、33.08%,差异均具有统计学意义(P<0.01).结论 在大鼠肾小球系膜细胞中,Visfatin可通过NF-κB引起RAS相关基因表达的变化.
作者:吴秋菊;郭颖;曾华;何爽;冯志美;丁鹤林 刊期: 2012年第05期
目的 建立、优化快速检测临床标本中热带假丝酵母菌的实时荧光定量PCR方法,并对其临床应用进行初步评价.方法 用自行设计的高效引物、探针检测5种临床标本中的热带假丝酵母菌,对该方法的敏感性、特异性进行评价,并与真菌培养法进行比较.结果 检测临床标本中热带假丝酵母菌的灵敏度可达10 copies/ml,与人类基因组、细菌及其他真菌无交叉阳性反应.与真菌培养法的检测一致性好(Kappa值为0.916,P<0.01).结论 实时荧光定量PCR检测热带假丝酵母菌灵敏度高、特异性强,可直接用于各种临床标本中热带假丝酵母菌的检测,而且可大大缩短报告时间,为临床诊断提供可靠依据.
作者:龙燕;郑磊;曾方银;杨红玲;王前 刊期: 2012年第05期
目的 探讨CCR5基因启动子59029位点单核苷酸多态性(SNPs)与HIV-1感染者疾病进展的关系.方法 按照制定的检索策略,在PubMed、CBM、VIP等数据库检索有关CCR5基因启动子59029位点SNPs与HIV-1感染者疾病进展关系的研究,按照纳入和排除标准选取文献,评价文献质量,提取相关数据.用Stata 10.0统计软件对数据进行Meta分析.结果 按照纳入和排除标准,共纳入4个病例对照研究,其中长期不进展者(LTNP)总例数375人,快速进展者(RP)总例数282人.Meta分析结果显示,在排除了CCR5△32和CCR2-64I突变后,RP组的59029A/A纯合子基因型频率是0.235,高于LTNP组的0.144,两者差异具有统计学意义(Z=2.37,P=0.018),OR及95%CI是3.441(1.236,9.582).RP组的59029A等位频率是0.513,也高于LTNP组的0.370(Z=3.13,P=0.002).结论 CCR5基因启动子59029A等位与HIV-1疾病的快速进展相关.
作者:朱文昌;聂军;王云芸;李建栋;陈清;俞守义 刊期: 2012年第05期
目的 建立2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的BALB/c小鼠炎症性肠病(IBD)模型,探讨其影响因素.方法 将48只BALB/c小鼠随机分为8组:乙醇非夹闭对照组、乙醇夹闭对照组、低剂量非夹闭组、低剂量夹闭组、中剂量非夹闭组、中剂量夹闭组、高剂量非夹闭组、高剂量夹闭组,每组6只.各组分别用相应试剂灌肠造模,利用DAI评分及Wallace评分并结合一般情况评价模型.结果 一般情况显示夹闭各组死亡小鼠均有肠梗阻现象,非夹闭组死亡小鼠未见肠梗阻现象;非夹闭各组体重低于乙醇非夹闭对照组(P<0.01);中剂量夹闭组和高剂量夹闭组体重低于乙醇夹闭对照组(P<0.01);高剂量夹闭组体重低于高剂量非夹闭组(P<0.01).疾病模型评价显示中剂量非夹闭组和高剂量非夹闭组第7天DAI评分及Wallace评分均高于乙醇非夹闭对照组(P<0.01),中剂量夹闭组和高剂量夹闭组第7天DAI评分及Wallace评分均高于乙醇夹闭对照组(P<0.01);中剂量夹闭组第7天DAI评分高于中剂量非夹闭组(P<0.05);中剂量夹闭组和高剂量夹闭组Wallace评分高于同等剂量的非夹闭组(P<0.01);中剂量夹闭组Wallace镜下评分高于中剂量非夹闭组(P<0.01).结论 TNBS诱导BALB/c小鼠IBD模型过程中,在造模试剂注入结肠后不宜夹闭肛门.同时,相对于大鼠,小鼠造模所用的TNBS剂量略高.
作者:王振磊;黎曙霞 刊期: 2012年第05期
目的 了解几内亚首都科纳克里某校高中生艾滋病相关知识、态度的现状.方法 2011年11月,采用横断面调查方法,用自制问卷调查几内亚首都科纳克里某中学294名高中生的艾滋病相关知识和态度.测量相关知识和态度的得分情况,并比较不同人口学特征学生得分的差异.结果 回收有效问卷284份(96.6%).调查对象年龄范围为15~18岁,其中男生148人,女生136人.艾滋病相关知识总分范围为4~25分(满分26分),各条目答对率范围为35.9%~84.9%,只有78.2%的学生知识得分超过13分;被调查学生艾滋病相关态度总分范围为0~8分(满分10分),各条目态度积极率范围为9.5%~90.5%,仅有27.1%的学生态度较积极;不同性别、年龄和城乡的学生之间知识及态度总分差异无统计学意义.结论 几内亚高中生艾滋病知识面狭窄现象较明显,存在较消极态度,需大力加强艾滋病的健康教育工作.
作者:KEITA Halimatou;叶萍;罗雅丽;张琼花;SYLLA alpha oumar;陈清 刊期: 2012年第05期