王奎;勾能;雷群建;周万江;蒋和宏
目的 培育并鉴定转细粒棘球绦虫Eg95-EgA31融合基因苜蓿,为进一步研究转基因苜蓿疫苗提供依据.方法 将构建好的Pbi-Eg95-EgA31质粒电穿孔转化根瘤农杆菌(Agrobacterium tumefaciens,At)LBA4404株,利用重组根瘤农杆菌(rAt)侵染苜蓿(alfalfa)叶片,卡那霉素抗性筛选伤愈组织体胚,培育转基因苜蓿,用SDS-PAGE、Western-blot、PCR和RT-PCR鉴定转基闪苜蓿.结果 SDS-PAGE和Western-blot证实Eg95-EgA31融合基因在苜蓿中得到表达,表达产物分子质量约为37500 Mr,表达效率约占苜蓿叶总蛋白的0.05%,且能被感染细粒棘球蚴的鼠血清特异识别.PCR和RT-PCR均扩增出1016 bp Eg95-EgA31融合基因片段.结论 成功培育了转细粒棘球绦虫Eg95-EgA31融合基因苜蓿,为进一步研究细粒棘球绦虫转基因苜蓿疫苗奠定了基础.
作者:周辉;李文桂;叶艳菊;周必英 刊期: 2009年第04期
目的 探讨缬沙坦对人脐动脉平滑肌细胞PAPP-A、MMP-9表达的影响.方法 分别在10-5mol/L的Ox-LDL的基础上,给予Ang Ⅱ以及Ang Ⅱ、缬沙坦混合培养人脐动脉平滑肌细胞,以普通培养基培养为对照,应用RT-PCR法检测PAPP-A、MMP-9的表达量.结果 AngⅡ组PAPP-A与MMP-9的表达量均显著高于对照组、Ox-LDL及缬沙坦组(P<0.01),缬沙坦组PAPP-A的表达量高于对照组(P<0.01),而与Ox-LDL组无明显差异(P>0.05),缬沙坦组MMP-9的表达量与Ox-LDL组及对照组均无明显差异(P>0.05).结论 Ang Ⅱ可促进人脐动脉平滑肌细胞PAPP-A和MMP-9的表达.缬沙坦可以抑制Ang Ⅱ的这种作用.
作者:查政;张清华;蒋知新;王小冬 刊期: 2009年第04期
基于疾病症候群的症状监测系统已经成为对疾病(生物恐怖袭击、新发传染病、原因不明疾病和其他聚集性不良公共卫生事件)暴发进行早期探查、预警和快速反应的重要方法.本文将对急性呼吸道感染的症状监测的发展现状及其病原体的研究进展进行综述.
作者:秦鹏哲;李铁钢;李泽荣;刘维斯 刊期: 2009年第04期
化学药物灭螺是目前主要采用的杀灭钉螺的方法.中国近研究出强螺杀粉剂、25%氯硝柳胺悬浮剂、4%杀螟丹颗粒剂和50%杀螟丹可溶性粉剂、三苯基锡壳聚糖羧酸酯、氯代水杨胺、荣宝与荣芽、O-磷酰化酚基化合物、密达利等新剂型的化学灭螺药.这些药物(除O-磷酰化酚基化合物)均已被证实具有一定的灭螺作用,有望用于现场灭螺,但尚需进一步研究以提高其灭螺效果及改进其不足.本文就这些新研究情况做一综述.
作者:吴月英;宁安 刊期: 2009年第04期
外伤性颈内动脉夹层(traumatic carotid dissection,TCaD)是一种少见疾病,常发生于交通事故或其他原因导致的头颈部钝性损伤,目前对其发病率尚无确切统计,其治疗尚存在较大争议.近年来,颈动脉支架治疗TCaD备受关注,我院自2007年6月至2008年3月为3例TCaD行支架成形治疗.
作者:郭兵;焦力群;叶明;凌锋 刊期: 2009年第04期
目的 了解临床脑脊液培养阳性患者病原菌分布及其耐药情况.方法 对2002~2008年临床脑脊液培养病原菌阳性患者标本进行回顾性统计分析;按常规方法进行细菌分离和鉴定;细菌药物敏感试验采用Kirby-Bauer纸片扩散法.结果 分离出细菌97株,其中革兰阳性球菌占54.63%,革兰阴性菌占28.87%;新型隐球菌占13.40%.常见的6种感染菌分别为凝固酶阴性葡萄球菌(40.21%)、不动杆菌属(8.25%)、铜绿假单胞菌(6.19%)、金黄色葡萄球菌(5.15%)、肺炎克雷伯菌(5.15%)、肠球菌属(5.15%);耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRSCN)和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的检出率分别是89.7%和80.0%,细菌对常用抗生素耐药性较高,未见万古霉素耐药的葡萄球菌;美洛培南以及头孢哌酮/舒巴坦对革兰氏阴性杆菌有良好的抗菌活性.结论 近6年来细菌性脑膜炎患者病原菌以革兰阳性球菌为主,主要为医院获得性细菌性脑膜炎感染.检出病原菌对常用抗生素耐药性较高,临床需警惕新型隐球菌的高发病趋势.
作者:肖柯玲;魏衍超;陈文捷;孙卫民;郭海波 刊期: 2009年第04期
目的 应用抑制性消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)技术构建汉族人IgA肾病肾阴虚证cDNA消减文库.方法 选择IgA肾病且中医辨证为肾阴虚证的患者以及正常人作为其对照组,进行正向和反向消减杂交.采用Trizol BD法提取总RNA,用SMART技术逆转录并扩增总cDNA,用Rsa Ⅰ酶切基因组cDNA成大小不等的片段,分别与两种不同的接头连接,进行2次消减杂交及2次抑制性PCR,然后将PCR产物与U载体连接,经蓝白斑筛选后,再用PCR方法插入片段筛选出阳性重组质粒.构建IgA肾病肾阴虚证消减文库.结果 用SSH方法筛选出了IgA肾病肾阴虚证的差异cDNA片段.其中正向消减文库共获得325个阳性克隆,反向消减文库获得306个阳性克隆,从而成功地构建了IgA肾病肾阴虚证的cDNA消减文库.结论 SSH技术能够快速有效地分离差异cDNA片段.成功构建了IgA肾病肾阴虚证的cDNA文库,为进一步克隆肾阴虚证的相关基因奠定了基础.
作者:魏敏;孙晓敏;黄平;赵晓山;李玉萍;陈晶;赖名慧;罗仁 刊期: 2009年第04期
目的 了解老年大鼠血液白细胞基因表达水平的变化.方法 将雄性Wister大鼠分为老年组(18月龄)和年轻组(4月龄),用illumina大鼠全基因组芯片研究其分子水平的变化.结果 生物信息学分析显示.造成老年组和年轻组显著生物学差异的基因功能及所属基因是:28条凋亡基因和22条炎性基因上调,9条涉及氧与活性氧中间物代谢的基因下调.结论 差异基因功能导致老年大鼠和年轻大鼠的生物学差异.
作者:张燕;罗炳德 刊期: 2009年第04期
目的 了解广州地区儿童感染肺炎克雷伯菌产质粒介导的AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况及其耐药特征,为临床合理用药提供参考依据.方法 采用标准纸片扩散法检测ESBLs,头孢西丁三维试验法检测AmpC酶,K-B纸片法测定肺炎克雷伯菌对抗菌药物的敏感性.结果 共检出248株肺炎克雷伯菌,其中46株产AmpC酶,阳性率为18.5%;157株产ESBLs,阳性率为63.3%;同时产AmpC酶和ESBLs菌株阳性率为18.1%.产AmpC酶肺炎克雷伯菌对第三代头孢菌素高度耐药.耐药率达80%~100%:对头孢吡肟、含酶抑制剂复合药的耐药率也在56.5%~93.5%之间;但对环丙沙星、阿米卡星的耐药率则在30%以下,对亚胺培南全部敏感.产ESBLs菌株对头孢菌素、含酶抑制剂复合药的耐药率也较高,在50%~91.7%之间.但对阿米卡星、环丙沙星、亚胺培南仍高度敏感.ESBLs阴性肺炎克雷伯菌对所测抗生素的敏感率均在81.2%以上.产酶菌株耐药率明显比非产酶菌株高.结论 广州地区儿童感染肺炎克雷伯菌产ESBLs和AmpC酶的状况已十分突出:产酶菌株对常用抗生素的耐药率较高;碳青霉烯类抗生素可作为治疗产AmpC酶和/或ESBLs肺炎克雷伯菌感染的经验用药.
作者:黄勇;周珍文;邓秋连;万根平;谢永强 刊期: 2009年第04期
目的 构建尿激酶型纤溶酶原激活因子(uPA)原核表达质粒,并在大肠埃希菌BL21中表达,为进一步研究uPA奠定基础.方法 应用逆转录RT-PCR,从人肝细胞cDNA中扩增人尿激酶型纤溶酶原激活因子基因序列,与原核表达质粒pET32a重组,获得表达质粒uPA-pET32a.用氨苄青霉素平板筛选转化子,双酶切与DNA测序进行鉴定,用IPTG诱导表达,并用Western blotting进行鉴定.结果 从肝细胞cDNA中扩增的uPA基因片段长1296 bp,酶切及DNA测序证实uPA-pET32a重组质粒构建正确,表达融合蛋白分子量约为68900Mr,经Western blotting证实为目的蛋白.结论 成功构建了重组原核表达质粒uPA-pET32a.并能在大肠埃希菌内表达,所表达的融合蛋白分子量大小与预期的相一致,为进一步的研究奠定了基础.
作者:邱峰;刘振杰;陈富 刊期: 2009年第04期
德国小蠊的抗药性问题日渐突出,成为城市害虫防治的一大难点.德国小蠊抗性机理的研究可为抗性监测、治理以及新型杀虫剂的开发提供理论基础.本文主要就德国小蠊的抗药性产生情况及抗性机理的研究进展进行综述.
作者:赵霞;张仁利;张韶华;胡章立 刊期: 2009年第04期
目的 研究变应性鼻炎特异性免疫治疗患者的依从性及其影响因素.方法 对过去3年接受特异性免疫治疗的变应性鼻炎患者进行回顾性调查,对未完成基础疗程的患者采取电话方式了解其不依从的原因,率的比较采用X2检验进行分析.结果 特异性免疫治疗患者的完全依从率为70.1%;儿童的完全依从率为84.6%,高于成人(64.16%,58.46%),有统计学意义(X2值分别为8.712,6.441,P<0.05);不依从的原因调查表明,效果不明显或无效占29.49%,工作忙或学业紧张占20.86%,症状消失或好转占12.23%.结论 变应性鼻炎特异性免疫治疗患者的依从性不甚理想,其中儿童的依从性高于成人.调查结果提示治疗中应有针对性地采取相应的干预措施,以提高患者免疫治疗的依从率,从而提高疗效.
作者:林志斌;李添应;董文其 刊期: 2009年第04期
目的 探讨无创正压通气(noninvasive positive pressure ventilation,NIPPV)对急性中毒性肺水肿的临床效果.方法 选择符合中毒性肺水肿诊断并且氧合指数(oxygenation index,PaO2/FiO2,OI)低于300mmHg的患者48例,随机分成无创正压通气组(NIPPV组)25例及常规治疗组23例;NIPPV组在常规治疗的基础上给予以经面罩接呼吸机辅助通气(通气模式ASB+PEEP).结果 治疗1 h后,NIPPV组的血气分析结果、氧合指数、呼吸频率(respiratory rate,RR)、氧饱和度(blood oxygen saturation,SaO2)均较治疗前显著改善(P<0.01).与常规治疗组比较,OI、SaO2明显占优(P<0.01),总住院费用及住院天数也明显少于常规治疗组(P<0.001);同时,NIPPV组的气管插管机械通气率显著低于常规治疗组(P<0.01).结论 急性中毒性肺水肿早期应用无创压力支持通气能迅速改善患者的氧合能力,提高组织氧供,减少并发症,这对提高抢救成功率,改善患者预后有积极作用.
作者:李小强;陈运超;刘移民 刊期: 2009年第04期
目的 合成构建鼠艾滋病病毒(FLV)荧光定量检测标准品,明确核糖核酸(RNA)标准品体外合成的基本原则.方法 通过序列对比,找到FLV为保守的区段作为RNA标准品的合成目标,进行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增,克隆于T载体,测序,设计带有T7启动子的引物,PCR扩增,将所得的PER产物凝胶回收纯化,用T7RNA聚合酶进行体外合成RNA,后用PER和电泳检测验证.结果 成功合成了FLV荧光定量PCR标准品.结论 FLV荧光定量标准品的成功合成必须遵守以下4条基本原则:①选择保守序列;②设计引物时将潜在的终止密码或起始密码排除在PCR目标产物之外;③将启动子(如r17启动子)挂在适当的引物上,保证所合成的RNA模板与所要定量检测的RNA模板一致,而不是互补;④合成RNA后必须检测,以保证不含其他RNA或者未消化完的DNA.
作者:葛文华;何金洋 刊期: 2009年第04期
目的 通过基因重组的方法表达IgE Cε3-Cε4区,鉴定重组蛋白与天然细胞表面受体FcεR Ⅰ之间的相互作用,并用重组蛋白免疫小鼠制备血清.方法 用RT-PCR方法从过敏性疾病病人外周血淋巴细胞调取IgE Cε3-Cε4 cDNA片段,克隆至pET28a(+)构建原核表达载体IgE Cε3-Cε4-pET28a(+),将重组质粒转化到大肠杆菌B121(DE3),诱导表达IgE Cε3-Cε4区蛋白,通过Ni-NTA亲和层析纯化融合蛋白后,用免疫荧光方法鉴定重组蛋白与天然细胞表面受体FceR Ⅰ之间的结合能力,并用UniCAP 100全自动分析检测仪对重组抗原进行定量检测与鉴定;用表达蛋白免疫BALB/c小鼠,制备抗鼠血清,用Western-blot法对多克隆抗体进行鉴定.结果 成功调取的人IgE Cε3-Cε4区基因与已报道的序列相一致;获得的IgE Cε3-Cε4区蛋白相对分子质量(Mr)同预期的结果相一致;IgE Cε3-Cε4能特异性结合人嗜碱性粒细胞表面的FcaR Ⅰ受体;通过UniCAP 100全自动分析检测仪能够检测到重组抗原并精确到国际单位;免疫鼠血清多抗能特异性结合天然人血清IgE.结论 成功构建了IgE Cε3-Cε4-pET28a(+)表达载体,获得了能被人嗜碱性粒细胞表面的FeaR Ⅰα亚基特异性识别的IgE Cε3-Cε4区蛋白,并用天然人血清IgE鉴定了多克隆抗体,为下一步单克隆抗体的制备打下了基础.
作者:付琛颖;曲戎梅;邱国真;魏威;林志斌;王萍;王文敬;李珍;董文其 刊期: 2009年第04期
目的 探索宝安地区肝吸虫感染的危险因素,为制定适合本地的防制策略提供参考.方法 采用多级整群抽样法对宝安区居民进行肝吸虫血清学监测,并利用病例对照研究方法分析肝吸虫感染危险因素.结果 共抽查856人,阳性32人,阳性率为3.74%.各年龄组感染率差别有统计学意义;性别及学历组感染率差别无统计学意义.病例对照研究表明生吃或半生吃海鱼、生吃或半生吃淡水鱼、食用生鱼粥、生吃或半生吃淡水虾、有过抓生鱼虾后不洗手就抓食物吃的行为、用盛过生鱼虾的器皿不洗干净就盛熟食以及用切过生鱼的刀及砧板不洗就切熟食是当地引起感染的危险因素.结论 引起本地区肝吸虫感染增高的主要原因是由于个人或家庭的饮食和卫生行为习惯不良而造成.
作者:马智超;陈兵;余家麟;余平;朱奕;黄振宇;周小涛;张仁利;高世同 刊期: 2009年第04期
目的 探讨糖尿病患者血清胱抑素C(CysC)、尿白蛋白(Alb)、β2微球蛋白(β2-M)、Tamm-Horsfall蛋白(T-Hp)及视黄醇结合蛋白(RBP)的变化对早期精尿病肾病的诊断价值.方法 分别采用免疫比浊法和放射免疫法对糖尿病病人和正常人血清中的Cysc含量及尿中4项尿蛋白指标(Alb、β2-M、T-HP和RBP)的水平进行联合检测.结果 糖尿病患者尿Alb、β2-M、RBP及血清CysC显著高于正常人(P<0.01),而尿T-HP则明显低于正常人(P<0.01),尿RBP水平与尿Alb含量呈显著正相关(r=+0.47,P<0.05).随着肾脏病变的加重上述各项指标的异常改变更趋显著.结论 联合检测糖尿病病人尿Alb、β2-M、T-HP、RBP及血清CysC有助于糖尿病肾病的早期诊断.
作者:池晓霞;陈剑雄;阎德文 刊期: 2009年第04期
目的 观察合并高血压的脑卒中并发稳定期慢性阻塞性肺疾病患者应用血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)类降压药对其预防吸入性肺炎的影响.方法 将120例合并高血压非昏迷且年龄≥60岁的脑卒中伴稳定期慢性阻塞性肺疾病患者分为ACEI组和对照组,ACEI组患者应用ACEI类降压药(卡托普利)治疗,对照组应用其它类型的降压药,观察两组在住院期间吸入性肺炎等并发症的发生情况.结果 在住院期间ACEI组有4例患者(6.7%)并发吸入性肺炎,而对照组有13例患者(21.7%)合并吸入性肺炎,两组相比差异有统计学意义(P<0.05).ACEI组有11例(18.3%)患者出现不同程度咳嗽,其中4例因持续性干咳而停药.ACEI组住院期间患者死亡率为313%,而对照组患者死亡率为5%,两组差异无统计学意义.结论 预防性应用ACEI类降压药,可降低合并高血压非昏迷老年脑卒中伴稳定期慢性阻塞性肺疾病患者并发吸入性肺炎的发生率.
作者:李子渊;晏良 刊期: 2009年第04期
目的 通过检测造影剂相关性肾病患者尿液中β2微球蛋白(β2-MG)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)及肾损伤分子1(KIM-1)的水平,了解β2-MG、NAG及KIM-1在造影剂相关性肾病患者中的改变及其与肾功能之间的关系.方法 收入49例造影剂相关性肾病患者,同时收入52例健康志愿者,以ELISA法分别检测其尿液中的β2-MG、NAG及KIM-1水平,分析其与患者肾功能之间的关系.结果 造影剂相关性肾病患者尿液中β2-MG、NAG、KIM-1分别为(594.62±87.93)mg/L、(24.52±4.64)U/L、(4.68±0.83)ng/mL,均高于健康对照组[β2-MG(108.16±10.55)mg/L,NAG(8.74±1.75)U/L,KIM-1(0.28±0.10)ng/mL],差异有统计学意义(P均<0.05);患者组的肌酐清除率Ccr为(25.09±7.50)ml/min,低于健康对照组的(83.75±33.84)ml/min,差异亦有统计学意义(P<0.05).结论 造影剂相关性肾病患者尿液中β2-MG、NAG及KIM-1水平较健康对照组明显升高,反映了肾小管的损伤情况,可作为造影剂相关性肾病患者肾功能的检测指标.
作者:徐向明;何坚;贺军 刊期: 2009年第04期
目的 评价卡维地洛对冠心病心绞痛型患者心率变异性(HRV)的影响.方法 冠心病心绞痛型患者120例随机分为卡维地洛组(62例)和对照组(58例),用药前后2周分别记录24 h动态心电图,评价患者心率变异性指标的变化.结果 两组治疗后心率变异性各参数较治疗前均显著改善(P<0.01),治疗后卡维地洛组较对照组改善更为显著(P<0.01).结论 卡维地洛可以显著提高冠心病心绞痛型患者的心率变异性.
作者:余新东;王孝杰;李庆云 刊期: 2009年第04期