王书刚;程杨;陈华云
目的 研究胎儿血红蛋白纯化的佳方法,并对其进行免疫活性鉴定.方法 采用生理盐水洗涤、四氯化碳萃取得到粗提胎儿血红蛋白,再经sephadexG50凝胶层析柱纯化.纯化后的胎儿血红蛋白利用SDS-PAGE电泳、蛋白质印迹鉴定其性质.结果 获得了具有生物活性的胎儿血红蛋白,经SDS-PAGE电泳鉴定纯化蛋白杂带消失,蛋白单体相对分子质量为16000 Mr,纯度为95%,蛋白质印迹结果显示纯化后的蛋白具有良好的抗原性.结论 该方法成功获得了纯度较高的胎儿血红蛋白,且操作简便,纯化效果好.
作者:李星;曾嵘;金春华;张青;李莉 刊期: 2009年第12期
目的 探讨江门市居民主要死亡原因,为制定防治对策提供科学依据.方法 对2008年江门市居民死亡报告进行统计分析,计算死亡率、死因顺位、构成比等指标.结果 2008年江门市户籍居民报告死亡23 734例,死亡率为701.33/10万,男性死亡率高于女性,死因顺位前十位依次为循环系统疾病、肿瘤、衰老、呼吸系统疾病、损伤和中毒、消化系统疾病、诊断不明、内分泌、营养和代谢疾病、传染病和寄生虫病、泌尿系统疾病,不同性别及不同年龄组人群死因顺位不相同.结论 循环系统疾病、肿瘤、呼吸系统疾病、损伤和中毒等疾病已成为我市居民的主要死因,今后疾病防治工作的重点在于进一步健全社区卫生服务,加强慢性非传染性疾病的防治力度,开展伤害监测.
作者:莫兆波;周悦亮;黄艳珍 刊期: 2009年第12期
目的 观察双水平气道正压通气对慢性阻塞性肺疾病夜间低氧的治疗作用.方法 取60例慢性阻塞性肺疾病患者,随机分成2组.对照组30例使用吸氧、抗感染等常规治疗;治疗组在常规治疗的基础上加用夜间双水平气道正压通气治疗4 h,疗程为7 d.分别观察2组在治疗前后低氧血症及心率失常发生率和肺动脉压力的变化.结果 双水平气道正压通气组在治疗前后自身对照以及与对照组比较,夜间低氧血症及心律失常发生率和肺动脉压力的改变均有统计学意义(P<0.05~0.01).结论 双水平气道正压通气能改善慢性阻塞性肺疾病患者的夜间低氧血症,减少心律失常的发生率,降低肺动脉压力,可作为治疗慢性阻塞性肺疾病的重要方法之一.
作者:张春云;陈益民 刊期: 2009年第12期
目的 评价降落聚合酶链反应(touchdown PCR,TD-PCR)检测肠道病毒71型(Enterovirus71,EV71)的效能和敏感性.方法 根据touchdown原理设计TD-PCR程序,试验选择PCR佳反应条件,分别与普通PCR及TD-PCR、普通Taq酶与热启动酶扩增效果进行比较,并利用10倍稀释法检验了TD-PCR方法的灵敏度.琼脂糖凝胶电泳验证扩增产物,纯化后DNA产物测序验证该方法的特异性.结果 TD-PCR的扩增片段条带清晰,检测效果明显优于普通PCR,使用普通Taq酶的TD-PCR比使用热启动酶有更优的性价比,测序证实了此组片段的特异性,cDNA的低检测浓度为1.03.μg/mL.结论 成功建立TD-PCR检测EV71的方法,使用普通Taq酶获得理想的检测结果,为快速检测手足口病的病原体提供了可靠的手段.
作者:高璐璐;陈清;郭江;陈志永;俞守义 刊期: 2009年第12期
目的 探讨中低位直肠癌合并自发性穿孔的诊断与治疗措施.方法 回顾性分析11例中低位直肠癌合并肠穿孔的诊断与治疗.收集患者的一般情况、发病时临床表现、实验室检查、术中探查情况、手术方式、病理资料及患者结果等临床资料,探讨其临床诊疗特点.结果 除弥漫性腹膜炎及腹腔内游离气体等消化道穿孔常见临床表现外,穿孔12 h内,11例中有7例(63%)白细胞计数未见升高,其中有4例(36%)白细胞计数下降明显.术前仅2例(18%)经直肠指诊诊断为直肠癌.除3例(28%)肿瘤自身穿孔外,8例(72%)穿孔部位位于乙状结肠.9例(81%)一期肿瘤切除患者中8例痊愈出院.结论 术前明确诊断较为困难,直肠指诊是术前明确诊断的唯一方法.弥漫性腹膜炎症状后短期内出现白细胞水平下降这种现象可能是下消化道穿孔特征性表现.除少数肿瘤部位穿孔外,穿孔部位多位于乙状结肠.治疗以手术治疗为主,一期肿瘤切除是安全可靠的.
作者:郭卫平;卫洪波;郑峰;陈图锋;黄江龙;刘建培;区广生 刊期: 2009年第12期
目的 探讨人体寄生虫学双语教学在护理本科学生中的应用效果.方法 在2007级护理学专业的人体寄生虫学教学中,将83名学生随机分成双语教学组(45人)和中文教学组(38人)进行教学.结果 两个教学组在考试总成绩和试题得分上虽未见明显差异(P>0.05),但是调查问卷显示双语教学对于提高学生英语阅读能力、学习专业词汇的能力、英语水平的能力有很大的帮助.结论 在护理学本科生中开展人体寄生虫学双语教学是可行的、对学生未来的可持续发展具有重要意义.
作者:陈金铃;段义农;秦永伟 刊期: 2009年第12期
目的 探讨粘着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)介导血管内皮细胞生长因子C(vascular endothelial growth factor C,VEGF-C)促宫颈癌恶性进展的作用.方法 提取不同病理分期的宫颈癌组织标本蛋白,采用Western-blot检测VEGF-C及FAK蛋白的表达情况.在体外培养宫颈癌细胞株HeLa细胞,采用Western-blot测定VEGF-C对FAK蛋白的表达和磷酸化的调控作用.结果 随着宫颈癌恶性程度的增高,VEGF-C、FAK蛋白及磷酸化FAK蛋白表达水平均随之增加.与正常宫颈组织比较,宫颈原位癌(CIN)组织中VEGF-C、FAK、磷酸化FAK蛋白表达分别增加了(48±10)%、(78±14)%、(83±15)%,P<0.05;宫颈鳞癌Ⅰ期各蛋白增高幅度分别为(104±22)%、(121±28)%、(143±30)%(P<0.01);宫颈鳞癌Ⅱ期(未放疗、化疗)各蛋白表达增高更为显著,其幅度分别为(195±28)%、(186±22)%、(204±31)%,P<0.001.在培养的宫颈癌细胞株HeLa细胞上,VEGF-C(100μg/L)处理24 h后,可显著增高FAK蛋白、磷酸化FAK蛋白的表达,该作用可被VEGF-C单克隆抗体明显抑制.结论 VEGF-C、FAK蛋白表达与宫颈癌恶性程度密切相关,VEGF-C可能通过上调FAK表达及其磷酸化水平而促进宫颈癌的恶性进展.
作者:王书刚;程杨;陈华云 刊期: 2009年第12期
目的 制备和鉴定鼠抗粉尘螨主要变应原Der f1的单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb).方法 利用重组Der f1蛋白为免疫原,免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤NS-1细胞融合.通过间接ELISA法筛选特异性分泌的杂交瘤细胞.用杂交瘤细胞株诱生小鼠腹水,应用蛋白A亲和层析法进行抗体纯化.采用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定该单克隆抗体的Ig亚型;通过间接ELISA、Western Blotting鉴定该单克隆抗体的特性和交叉性.结果 获得6株可稳定分泌鼠抗粉尘螨主要变应原Der f1的单克隆抗体,其Ig亚型均为IgG1,且6株单抗均具有良好的效价.ELISA和Western-blotting分析表明,该6株单抗均能识别重组Der f1蛋白和天然的粉尘螨提取物.其中,除了484不识别屋尘螨提取物,其他均能识别.结论 成功制备了6株鼠抗粉尘螨主要变应原Der f1的单克隆抗体.为建立粉尘螨主要变应原Der f1检测及纯化方法奠定了基础.
作者:顾耀亮;李佳娜;陈家杰;吉坤美;刘志刚 刊期: 2009年第12期
目的 观察臭氧对外阴阴道假丝酵母菌病(VVC)的治疗效果.方法 将102例VVC患者随机分为观察组(51例)和对照组(51例),观察组接受臭氧治疗,对照组接受达克宁硝酸咪康唑栓治疗.两组于治疗后第3天进行临床和真菌学疗效分析.结果 治疗结束后第3天,观察组治愈42例(82.3%)、显效6例(11.8%)、有效3例(5.3%),总有效率为100%;对照组治愈28例(55.0%)、显效12例(23.5%)、有效6例(11.8%)、总有效率为90.3%.两组治愈率差异有统计学意义(P<0.01).结论 臭氧治疗外阴阴道假丝酵母菌病效果显著,不良反应发生率低.
作者:谭川云 刊期: 2009年第12期
目的 了解延安地区中枢神经系统疾病患者弓形虫(Toxoplasma gondii,TOX)的感染情况.方法 应用酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immune absorbent assay,ELISA)对180例不明原因神经系统疾病患者和135例健康体检者进行抗弓形虫抗体(antitxoplasma antibody,ATAb)的检测.结果 研究组ATAb的阳性率为28.89%(52/180),对照组为9.63%(13/135).不同类型疾病患者ATAb阳性率分别为:脑型28.05%(23/82)、癫痫型44.44%(4/9)、精神病型32.14%(9/28)、神经衰弱型26.23%(16/61).有宠物接触史者ATAb阳性率为47.62%(30/63),无接触史者ATAb阳性率为18.80%(22/117).结论 研究组ATAb阳性率明显高于对照组,两组间差异有统计学意义(P<0.01).不同类型疾病患者ATAb阳性率差异无统计学意义(P>0.05).有宠物接触史者ATAb阳性率明显高于无接触史者,两者间差异有统计学意义(P<0.01),说明TOX感染与接触宠物有关.
作者:张晓文 刊期: 2009年第12期
目的 查明广州市2例人感染猪链球菌病的感染来源、流行特征,为预防控制疫情提供依据.方法 采用流行病学调查方法进行回顾性调查和现场调查,采集脑脊液标本进行细菌培养、分离,用PCR进行鉴定.结果 患者均有明显的生猪接触史且首例患者手部有伤口,起病急,全身中毒症状明显,病程进展迅速,均为脑膜炎型.患者脑脊液分离培养出猪链球菌经生化和PCR检测结果为猪链球菌Ⅱ型,病人经及时治疗均痊愈出院.结论 2例病例均为人感染猪链球菌病(Ⅱ型)实验室确诊病例,为散发疫情,相互间无流行病学关联,传播途径可能为接触被猪链球菌污染的生猪肉.
作者:李美霞;杨智聪;汤国球;沈秋逢 刊期: 2009年第12期
目的 了解曾发生登革热流行的旧疫区健康人群抗登革病毒的抗体水平及分布.方法 在1986年曾爆发Ⅱ型登革热疫情的黄埔区鱼珠街一带,对2周内无临床症状的健康人群横断面采样,收集血清,ELISA 法检测血清中抗登革病毒IgG抗体,并和非疫点健康人群抗登革病毒IgG抗体阳性率进行比较.RT-PCR法检测抗体阳性者血清中登革病毒.结果 登革热疫点健康人群抗登革病毒IgG抗体阳性率为23.3%,非疫点健康人群抗登革病毒IgGc抗体阳性率为3.8%,两者差异有统计学意义(P<0.01);登革热疫点人群抗体阳性率与年龄成正相关,0~20、21~30、31~40、41~50、51~60、61~70和70岁以上各年龄组的抗体阳性率分别为3.8%、5.8%、9.1%、26.5%、27.7%、32.5%和35.1%.30岁以下年龄组与31~40岁年龄组、31~40岁年龄组与41~60岁年龄组、41~60岁年龄组与61岁年龄组间的抗登革病毒IgG抗体阳性率差异分别具有统计学意义(P<0.05).登革熱疫点和非疫点15岁以下中小学生滤纸血样标本中均未检测到抗登革病毒IgG抗体.RT-PCR法未检测到抗体阳性者血清中有登革病毒.结论 登革热疫点人群抗登革病毒IgG阳性率明显高于非疫点人群,疫点人群抗体阳性率随年龄增长而上升,提示登革热疫点在登革热疫情后,登革病毒可能在蚊媒体内存在低密度的循环.
作者:郑小英;吴瑜;张美春;何霭;李卓雅;曲振宇;詹希美 刊期: 2009年第12期
目的 分析佛山市麻疹流行病学特征,探讨麻疹的控制对策.方法 对2005-2008年麻疹发病情况进行描述性流行病学分析.结果 佛山市2005-2008年共报告麻疹病例3721例.年平均发病率为16.09/10万;病例主要集中在流动人口较多的顺德区、南海区和禅城区,发病数占全市总病例数的94.97%;4~8月为高发季节,占总病例数的67.53%;小于15岁为麻疹高发年龄组,占总病例数的70.36%;散居儿童病例占51.49%;流动人口病例占62.00%;无免疫史及免疫史不详者占88.33%.结论 佛山市近年麻疹发病持续保持较高水平,应进一步加强以流动儿童为重点的适龄儿童麻疹常规免疫,加强麻疹的监测和控制,适时对重点人群实施强化免疫等综合防控措施.
作者:孙宝志;黄祖星;杨泽锋 刊期: 2009年第12期
目的 动态观察细粒棘球绦虫转正Eg95-Eg31融合基因苜蓿疫苗免疫小鼠后脾T淋巴细胞的增殖情况.方法 热絮凝法提取转基因苜蓿疫苗叶蛋白,配成浓度为20 μg/μL.88只BALB/c小鼠随机分为两组,用100 μl(约含1μg融合抗原)口服灌胃和10 μl(约含0.1μg融合抗原)鼻腔黏膜接种分别免疫小鼠,每3天1次,连续免疫2月.在末次免疫后0、2、4、6、8、10、12、14、16、18和20周各组随机剖杀4只小鼠,取脾,分离脾细胞,体外经Eg粗抗原(EgAg)或刀豆素A(ConA)刺激培养,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测免疫小鼠脾T淋巴细胞增殖情况.结果 口服灌胃组的脾T淋巴细胞增殖水平在末次免疫后4~10周升高,在末次免疫后6周达高水平;鼻腔黏膜接种组的脾T淋巴细胞增殖水平在末次免疫后4~12周升高,在末次免疫后6周达高水平;鼻腔黏膜接种组脾T淋巴细胞增殖水平高于口服灌胃组.EgAg或ConA刺激组脾T淋巴细胞增殖水平高于相应原液组,且ConA刺激组高于相应EgAg刺激组(P<0.01或P<0.05).结论 细粒棘球绦虫转正Eg95-EgA31融合基因苜蓿疫苗能诱导免疫鼠产生脾T淋巴细胞增殖反应,鼻腔黏膜接种途径优于口服灌胃途径.
作者:叶艳菊;李文桂 刊期: 2009年第12期
目的 了解湘潭地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型流行情况及其临床意义,并对HBV基因分型试剂盒进行评价.方法 用HBV基因分型试剂对湘潭地区95例HBV感染者的样本进行检测,并对PCR产物进行测序分析.结果 HBV基因分型试剂盒检测结果与测序的符合率为100%,湘潭地区HBV各种基因型分布比例:B型占74.74%,C型占11.58%,B、C型混合感染占13.68%.无症状携带者组与慢性重型肝炎组,慢性乙型肝炎组与慢性重型肝炎组及肝硬化组之间HBV B型和C型感染率存在显著性差异,其中慢性重型肝炎组及肝硬化组C型感染率要明显高于其他组.结论 HBV基因分型检测试剂盒检测结果是准确、简便的,具有临床推广和应用价值.湘潭地区流行的HBV基因型主要为B型和C型,其中B型为优势基因型,具有其自身的特点.
作者:段建平;朱坤;吴薇佳;张太松;易红根;李明 刊期: 2009年第12期
目的 了解延安市嗜肺军团菌的感染情况.方法 采用微量凝集法对286份呼吸科住院患者血清标本进行嗜肺军团菌Lp1型军团菌抗体测定.结果 抗体阳性率为17.13%,其中男为18.56%,女为15.13%;在各年龄组均有嗜肺军团菌Lp1型抗体阳性者,其中40岁年龄组的感染率(26.09%)高;呼吸科疾病中肺结核患者合并嗜肺军团菌LP1感染率较高,为26.56%,各疾病类型之间感染率比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 延安市存在一定的嗜肺军团菌感染,需加强对军团病血清学的监测工作.
作者:景彩霞;薛亚娟;陈建平 刊期: 2009年第12期
目的 研究抗病毒药物利巴韦林体外抗肠道病毒(EV)的效果.方法 采用细胞病变效应(CPE)法和MTT分析法,观察利巴韦林对肠道病毒(EV71、CAV16、CBV3、ECHO11、EV84)的抑制作用.结果 利巴韦林对Vero细胞的半数毒性浓度(TC_(50))为2.09 mg/mL,0.2 mg/mL浓度的利巴韦林对5种肠道病毒均有抑制作用,对CAV16、EV71、ECHo11、EV84、CBV3的抑制率分别为13%、27%、36%、23%、58%.对EV84、EV71病毒,利巴韦林浓度为0.1 mg/mL时其抑制率为16.5%、29.5%;对CBV3病毒,利巴韦林抗病毒作用与其剂量呈正相关,半数有效浓度(IC_(50))为0.125 mg/mL,治疗指数(TI)为16.72.结论 利巴韦林在体外对肠道病毒具有抑制作用,对不同的肠道病毒其抑制效率不同,对CVB3的抑制率较高.
作者:田新贵;李翔;周荣;彭涛 刊期: 2009年第12期
目的 观察护肝合剂对肝损害模型大鼠血清TGF-β1的影响及护肝合剂含药血清对HSC-T6细胞的增殖、Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的表达的影响,探讨该复方对肝纤维化的可能作用及其机制.方法 设立正常组、护肝合剂组、模型组,采用卡介苗和脂多糖进行肝损害造模,然后观察3组ALT、AST和血清TGF-β1的变化.制备各组大鼠的血清,进行HSC-T6细胞的培养,采用MTT方法观察该细胞的增殖情况,并用RT-PCR的方法观察Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的表达.结果 模型组造模前后的ALT、AST及了TGF-β1都显著升高(P<0.01),护肝合剂组上述指标较模型组显著下降(P<0.01),护肝合剂组的HSC-T6细胞增殖较模型组显著下降(P<0.01),且没有Ⅱ型胶原和Ⅲ型胶原的表达.结论 护肝合剂能在一定程度上通过改善肝功能、降低FGF-β1水平抑制肝星形细胞的增殖,改善肝纤维化程度.
作者:游唯春;项凤梅;卢建溪 刊期: 2009年第12期
目的 应用简并引物RT-PCR和RACE方法获取白纹伊蚊Rh类糖蛋白(Aedes albopictus rhesus-like glycoprotein,AaRh)基因的全长cDNA.方法 根据冈比亚按蚊、埃及伊蚊等亲缘关系较近物种的Rb类糖蛋白同源性分析结果,在氨基酸高度保守区域184/343和219/337氨基酸位点设计2对简并引物,以白纹伊蚊雌蚊总RNA为模板,应用巢式RT-PCR扩增AaRh的基因片段.根据获得的AaRh基因部分序列,设计2对特异性引物AaRh GSP1、CSP2和AaRh GSP3、GSP4,应用5'RACE和3'RACE分别扩增AaRh基因的5'端和3'端cDNA片段,然后拼接出全长cDNA序列.通过在线生物信息学分析(NCBI和Expasy),对目的 基因序列进行生物信息学分析.结果 应用2对简并引物进行巢式RT-PCR,获得379 bp AaRh基因片段.应用5'RACE和3'RACE方法,分别获得AaRh基因5'端1008 bp、3'端822 bp cDNA序列,根据两个片段的首/尾共同序列拼接为1717 bp的基因片段.该核苷酸序列经BLASTn分析显示,与埃及伊蚊Rh蛋白的一致性高达95%,鉴定其为白纹伊蚊Rh类糖蛋白基因.AaRh基因具有完整的开放阅读框,其ORF从第128位到1516位含1389bp,编码462个氨基酸.Expasy在线生物信息学程序分析显示,白纹伊蚊Rh类糖蛋白是一个整合膜蛋白,跨膜11次,58aa-446aa具有铵离子通道的结构功能域;理论等电点(pI)5.37,分子量49775.10 Mr,1aa-26aa可能为分泌信号肽序列;含有4个潜在的天冬酰胺糖基化位点和17个线性抗原决定簇,翻译后可能进行糖基化修饰,提示其为糖蛋白.结论 成功获取AaRh基因的全长cDNA,生物信息学分析结果为AaRh蛋白的生物学特性和功能研究奠定了基础.
作者:吴瑜;郑小英;张美春;何蔼;李卓雅;詹希美 刊期: 2009年第12期
目的 调查分析桑拿女工人型支原体宫颈感染率及其可能的临床意义.方法 采用女性阴道分泌物革兰染色方法检测阴道毛滴虫、念珠菌和线索细胞,酶联免疫法检测沙眼衣原体,培养法鉴定淋球菌和支原体.结果 1030例样本中,人型支原体阳性52例(5%),其中5例为单独人型支原体定植,而47例(90.4%)为混合菌感染,以解脲脲原体为主(30/52,57.7%).宫颈炎组与非宫颈炎组人型支原体的感染率差异无统计学意义(X~2=0.51,P>0.05).7例人型支原体阳性的宫颈炎病例同时混合感染沙眼衣原体或淋球菌,10例人型支原体阳性的非宫颈炎病例同时伴有念珠菌或阴道毛滴虫感染,或细菌性阴道病.结论 无论女性是否患宫颈炎,人型支原体均可以定植于宫颈管,但并不是单独引起宫颈炎的病原体.
作者:郑和平;李美玲;冯占芹;黄进梅 刊期: 2009年第12期