丁芳林；刘丛；李丽文
目的 探讨血凝仪用的异常凝血实验室内质控血浆的制备和应用.方法 连续采集多份健康人血浆,经离心混合和防腐处理后,置于37℃水浴箱中,连续进行APTT、PT检测,当PT、APTT值比正常对照延长2～3倍时,立即将混合血浆分装于适用容器内,置-80℃超低温冰箱速冻备用.在仪器配套质控血浆监控下进行检测,确定混合血浆靶值和标准差,以后每天取一份速冻正常混合血浆作为当天质控物与患者标本同时检测,连续观察6个月.结果 自制异常值混合血浆质控图变化较稳定,各项目每个月均数与靶值以及6个月的总体平均值无显著性差异(P＞0.05).结论 自制异常质控血浆在-80℃保存时,可稳定6个月以上,有较好的稳定性和均匀性,适用于日常异常凝血室内质控.
作者：王希平；凌寿坚；陈日荣 刊期： 2008年第10期
目的 初步探讨病毒性肝炎患者的红细胞分布宽度(RDW)、平均红细胞体积(MCV)、平均血小板体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW)等四项血常规参数在肝纤维化诊断中的意义.方法 303例病毒性肝炎患者分为急性肝炎(AH)组、慢性肝炎(CH)组、肝炎肝硬化(LC)组和重型肝炎(SH)组,对照组由16名健康人组成.采用全自动血细胞计数仪检测所有被测试者的血常规参数,并同期对其中179例患者采用放射免疫法检测其血清透明质酸(HA)和层粘蛋白(LN)水平、采用彩色多普勒超声仪测量其脾脏的长径(SPL)及厚度(SPT),研究上述指标之间的相互关系.结果 CH组、LC组和SH组患者的RDW均显著高于对照组,CH组、LC组的MCV显著高于对照组,MPV和PDW在各病毒性肝炎组与对照组之间无显著性差异;病毒性肝炎患者的RDW与其HA、LN、SPT、SPL成显著直线正相关.结论 RDW对慢性肝炎肝纤维化的诊断有一定的临床价值.
作者：周跃；沈轶瑶；顾宇峰；汤伟 刊期： 2008年第10期
目的 评价pEGFP-TCTP真核重组质粒联合免疫佐剂CpG诱导小鼠保护性免疫的效果.方法 构建日本血吸虫TCTP真核重组质粒,将pEGFP-TCTP注射入BABL/c小鼠,采用ELISA法检测免疫小鼠血清中IFN-γ,水平;尾蚴攻击感染后45 d处死小鼠,收集成虫和虫卵,计算减虫率和减卵率;小鼠肝脏送病理切片,计算虫卵肉芽肿的数量.结果 TCTP DNA免疫保护性效果显示:实验组与阴性对照组相比,显示出一定的保护性效果,TCTP组的减虫率和减卵率分别为43.91%和53.48%,与GST组效果相似.DNA免疫后及感染后期,TCTP组与PBS对照组血清IFN-γ水平有显著性差异(P＜0.05);攻击感染前后组间比较发现,GST组和GST+CpG组有显著性差异(P＜0.05),提示CpG显著提高了DNA免疫的效果.结论 SjTCTP DNA免疫能诱导较明显的保护性Th1免疫应答,CpG基序可以有效的诱导保护性Th1免疫应答,是一种有效的DNA免疫佐剂.
作者：阮志燕；吴忠道；曹爱莲 刊期： 2008年第10期
目的 探讨乙肝病毒C基因亚型与病毒变异的相关性.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法,对155例慢性HBV C基因感染者,包括78例肝细胞癌(HCC)、36例肝硬化(LC)和41例慢性肝炎(CH)血清样本进行C基因亚型和病毒基本核心启动子(BCP)以及前C区(Pc)变异检测.结果 在HCC、LC和CH研究组中C2的分布均高于C2,同时C1亚型有较高的BCP变异,C2亚型有较高的PC变异(P＜0.030).结论 慢性HBV C基因型患者HCC的高发生率和有较严重的肝脏损害可能与其中C1分布较多有关.因此HBV C基因型患者进行亚型鉴定能更好地评估HBV基因型系列对慢性HBV感染疾病进展和临床结局的影响.
作者：黄月华；曾文挺；梁建新；周彬；梁敏锋 刊期： 2008年第10期
目的 探索流动人口艾滋病防治模式,预防艾滋病在流动人口中的传播和蔓延.方法 建立以社区为基础的流动人口干预模式,政府组织领导,明确各部门职责,建立考核激励机制,充分动员基层工作人员和社会工作者的力量,全社会共同参与,针对不同类型的流动人口开展艾滋病防治工作.结果 经过一年多的探索与实践,基层工作人员的能力明显提高,流动人口艾滋病防治知识知晓率提高,自我保护意识增强,多部门分工负责的机制已经形成,目标人群主动咨询检测的意识增强,防治工作取得了一定成效.结论 以社区为基础的流动人口干预模式是可行和可推广的.但同时,也面临人力资源缺乏、经费不足、部门配合的积极性有待提高等挑战.
作者：丁贤彬；王豫林；周超；欧阳琳；潘传波；易辉容；郑建琼；卢戎戎 刊期： 2008年第10期
目的 针对不同哺乳类细胞建立相应的慢病毒体外感染体系,以建立慢病毒介导的外源基因体外投递系统.方法 按Invitrogen公司推荐的标准程序进行慢病毒(携带EGFP基因)包装(脂质体介导的瞬时转染)、超速离心浓缩和保存等,随后用病毒上清或浓缩后的病毒感染293FT细胞.24～48 h后荧光显微镜下观察是否见绿色荧光以证实慢病毒是否成功生产:将携带EGFP基因的病毒上清或浓缩后的病毒分别加入内含293FT细胞、小鼠ES细胞、小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)或小鼠睾丸生殖细胞的培养板孔内,感染6～12 h后.用相应培养基替换感染液,数天后荧光显微镜下观察是否见绿色荧光以证实慢病毒是否成功感染不同哺乳类细胞.结果 按标准程序生产的携带EGFP基因慢病毒(病毒上清或浓缩后的病毒)成功高效率感染293FT细胞、MEFs或小鼠睾丸生殖细胞;用浓缩后的病毒(携带EGFP基因)感染小鼠ES细胞.亦可获得EGFP阳性的ES细胞克隆.结论 熟练掌握了慢病毒包装、浓缩及鉴定等技术.同时针对不同哺乳类细胞建立了相应的慢病毒介导的外源基因体外传递系统,这些为相关后续研究打下了良好的基础.
作者：贾俊双；孙妍；肖东；姚开泰 刊期： 2008年第10期
胚胎干细胞是来源于早期胚胎内细胞团或着床后胚原始生殖细胞的一类未分化的全能性(多能性)干细胞,具有无限增殖和全向分化的能力.Es细胞能够自我更新和多向分化的生物学特性具有重要的医学价值,在基因治疗、组织工程学、药学研究等许多领域都具有广泛的应用前景.至今为止人类已建立了数百个小鼠的ES细胞系.但相对大鼠而言,由于其ES细胞在体外培养时较易发生分化,故建系较难.Iannaceone等从大鼠PVG近交系大鼠的囊胚分离克隆了大鼠ES细胞系-BESC-01.本文主要综述了目前分离、培养大鼠胚胎干细胞的技术进展,我实验小组在预实验中得到的结果 及面临的问题,讨论其在临床工作中的应用前景.
作者：刘蓉；张薇；张玉芳；郭中敏 刊期： 2008年第10期
目的 探讨2型糖尿病(T2DM)微血管病变患者细胞黏附分子(cell adhesion molecules,CAMs)的表达水平与尿白蛋白的相关性.方法 采用酶联免疫法、流式细胞术和放射免疫法分别测定129例T2DM患者(其中95例合并微血管病变)和39例健康对照者外周血中的SICAM-1水平及CD11b、CD62P、CD63的表达和尿微量白蛋白排泄率(urinary albumin excretion,UAER).结果 糖尿病各组SICAM-1水平和CD11b、CD62P、CD63的表达均明显高于对照组(P＜0.05及0.01);有微血管病变正常蛋白尿组CD63的表达与无微血管病变组比较,差异无显著性(P＞0.05),而SICAM-1水平和CD11b、CD62P的表达则均明显高于无微血管病变者(P＜0.05及0.01):微量蛋白尿组和l临床蛋白尿组的SICAM-1水平和CD11b、CD62P、CD63的表达与无微血管病变者比较,均随着病情的加重而增加,差异均有统计学意义(P＜0.05及0.01);相关分析SICAM-1水平和CD11b、CD62P、CD63的表达均与UAER呈正相关(P＜0.05).结论 2型糖尿病患者CAMs的高表达与微血管病变密切相关,联合UAER检测对诊断、观察病情及防止患者微血管病变和血栓的发生发展均有意义.
作者：丁芳林；刘丛；李丽文 刊期： 2008年第10期
目的 克隆弓形虫RH株Calpain-like基因片段,构建原核表达载体,诱导表达Calpain-like基因重组蛋白.方法 收集、纯化弓形虫RH株速殖子,提取总RNA,在设计合成的引物中引入Sal I和EcoR I酶切位点.应用RT-PCR扩增弓形虫RH株Calpain-like基因片段,插入pGEM-T载体,提取重组质粒,双酶切获得目的基因,亚克隆到原核表达质粒pET32a,重组子经双酶切、PCR和DNA序列分析鉴定,转化大肠杆菌BL21并以IPTG诱导表达.结果 从弓形虫RH株速殖子cDNA中扩增出316 bp的Calpain-like基因片段;含pET32a/Calpain-like的重组质粒在宿主菌经诱导后,获得与预期分子量相符的表达产物.结论 成功地克隆和表达弓形虫RH株Calpain-like基因,弓形虫Calpain-like基因的克隆表达为进一步筛选弓形虫疫苗候选分子和治疗药物的靶位提供了研究基础.
作者：陈雪艳；付玉才；李璐；耿艺介；黄达娜；高世同；张仁利 刊期： 2008年第10期
目的 探讨IFN-γ、L-Arg及L-NNA对旋毛虫病沙鼠的脑及心肌NO合成和脑组织病理变化的影响.方法 经腹腔给予感染旋毛虫后不同时期的沙鼠不同剂量的IFN-γ、L-Arg及L-NNA,检测沙鼠脑及心肌的NO含量,并观察脑组织的病理变化.结果 IFN-γ和L-Arg组沙鼠脑及心肌NO含量明显升高,且随药物浓度的增加而升高.给予L-NNA后,脑和心肌组织阴性对照组、脑7 d组及心肌7 d组和40 d组的NO含量明显降低,且随药物浓度的增加而降低;脑25 d组、40 d组及心肌25 d组的NO量则明显升高,且随药物浓度的增加而升高.大脑组织未见明显病理改变.结论 IFN-γ和L-Arg能促进旋毛虫病的沙鼠脑及心肌的NO合成,给予L-NNA后对不同时期及不同组织则表现出不同的增强或抑制NO合成的双重作用.
作者：万启惠；贺利芳；刘兴安；张曦 刊期： 2008年第10期
近来在众多原核生物的基因组中,人们发现一类成簇的、有规律间隔的短回文重复序列(clusteredregularly interspaced short palindromic repeats, CRISPR)结构家族.CRISPR由一类DNA重复单元构成,在功能上与DNA的重组、修复及原核生物的免疫防御系统关系密切.通过对CRISPR和其相关系统(CASS)基因的比较性分析,CRISPR独特的结构和功能引起人们的广泛关注.实验表明CASS的插入序列来源于细胞内的许多染色体外遗传物质,并且以一种类似于真核生物中:RNA干扰(RNAi)系统的机制,在原核生物抵抗入侵的噬菌体和质粒的防御系统中发挥着重要作用.本文对CRISPR的结构、片段来源和功能进行综述.
作者：王菲；罗恩杰 刊期： 2008年第10期
目的 探讨影响女性外阴阴道念珠菌病发病的易感因素.方法 通过病例对照研究,分析比较社会文化、环境、疾病史及生活习惯等多种因素与外阴阴道念珠菌病发病的关系.结果 工作压力大、自身手足癣、常穿紧身裤、洗衣机洗涤内裤、非经期使用卫生护垫、外阴药液清洗等因素在病例组中的发生率明显高于对照组(P＜0.05).清洁外阴毛巾经常晾晒、内裤经常晾晒、内裤全棉质地在病例组中的发生率明显低于对照组(P＜0.05).结论 外阴阴道念珠菌病好发于月经前期,其发病与环境因素及多种生活卫生习惯有关.
作者：胡晨；吴小丽；魏善荣；杨京京；张悦；李芹；蔡云清 刊期： 2008年第10期
目的 了解重庆市人群土源性寄生虫的感染状况,为防治决策提供科学依据.方法 将1982-2007年间按不同年代,且资料完善、有代表性年份的蛔虫、钩虫人群感染率调查资料进行统计,比较发展趋势.并对蛔虫、钩虫感染者与未感染者进行对照调查,用回归分析方法分析感染与生吃蔬菜、赤脚下地劳动、年人均收入的关系.结果 建国初期蛔虫、钩虫感染率高分别达到92.9%和74.7%,2007年已分别降至23.42%和7.89%,呈稳定下降态势.病例-对照研究共调查了1 180人,其中病例(感染者)425人,对照755人.蛔虫、钩虫病例对照研究结果 表明,感染与生吃蔬菜、赤脚下地劳动、年人均收入密切相关.结论 人群钩虫、蛔虫感染率呈下降趋势,社会经济发展、环境因素和社会因素发生改变,对促进土源性寄生虫的防治工作发挥了重要作用.
作者：蒋诗国；肖邦忠；罗兴建；罗飞；吴成果；李继艮；肖鹏；黄文利 刊期： 2008年第10期
目的 探讨紫外线减毒弓形虫免疫对小鼠旋毛虫感染的影响.方法 ICR小鼠分为两组,实验组为紫外线减毒弓形虫免疫3周后再感染旋毛虫,对照组为旋毛虫单独感染.结果 与旋毛虫单感染相比,小鼠预先经紫外线减毒弓形虫免疫再感染旋毛虫,在感染后5～14 d其小肠内的成虫数明显增加(肠道排虫明显延迟),而感染后23～90 d其肌肉中的幼虫数明显下降.结论 紫外线减毒弓形虫免疫对小鼠旋毛虫感染具有一定的免疫调节和异源性保护作用.
作者：朱佩娴；郑焕钦；王树萍；张瑞琳；黄世光；吕芳丽 刊期： 2008年第10期
目的 对阴沟肠杆菌所产CTX-M型β-内酰胺酶进行基因克隆、原核表达重组质粒的构建及其特性研究.方法 以产CTX-M型β-内酰胺酶的阴沟肠杆菌45号基因组DNA为模板,设计两对引物PCR扩增CTX-M,将其克隆入pGEM-T载体后测定该核苷酸序列.再将CTX-M基因克隆到pGEX-6P-3表达质粒并转入感受态BL21,选择阳性菌落进行药物敏感试验和酶动力学检测.结果 PCR扩增出大小为876 bp和1 067 bp的基因片段,与GenBank上CTX-M-9和CTX-M-3酶的基因序列同源性为100%.CTX-M-3型重组菌株药敏试验结果 与原菌株相比,对青霉素类和头孢噻肟具有明显的水解作用,第三、四代头孢菌素对之较为稳定,动力学结果与酶稳定性结果基本一致.结论 重组质粒pGEX-6P-3/CTX-M构建成功,CTX-M-3型重组菌株与原菌株比较,对β-内酰胺类抗生素的敏感性和稳定性增加,亲和力下降.
作者：江洁华；徐韫健；廖伟娇；李乃健 刊期： 2008年第10期
目的 建立经济有效且功能良好的原代肝细胞体外分离培养系统.方法 采用0.02%胶原酶和Pereoll分离液分离纯化大鼠肝细胞,光镜和电镜下观察HepatoZYME-SFM培养的肝细胞形态,自动生化仪定期检测培养肝细胞功能,RT-PCR半定量方法检测白蛋白mRNA,高效液相色谱法(high performance liquidchromatography,HPLC)分析安定代谢能力.结果 分离纯化的大鼠肝细胞总数(2-3)×108>cells/整肝,活力和纯度大于95%,生长良好形态正常.培养3 d后ALT、AST显著下降,加入NH4>C1后8 d内BUN保持相对稳定高水平,白蛋白合成在第3～4天达到高峰.培养的2～5 d内肝细胞可有效清除安定.结论 通过使用低浓度胶原酶灌流、Percoll分离液纯化以及HepatoZYME-SFM无血清培养基培养,肝细胞可有效保持良好形态结构和一定的生物合成代谢能力.
作者：庄鹏；李志莹；范紫香；江元森；姚集鲁 刊期： 2008年第10期
目的 研究HIV/AIDS患者血清糖类抗原CA199、CA125、CA153水平的变化.探讨其在HIV/AIDS患者的病情进展及疗效观察中的应用价值.方法 对确诊的184例HIV/AIDS患者进行血清CA199、CA125、CA153和CD4+>T细胞的检测,并对检测结果 进行比较分析.结果 AIDS患者CA199、CA125、CA153值及阳性率显著高于HIV组和HIV/HBV/HCV组及健康对照者(P＜0.05),HIV/HBV/HCV组CA199、CA125、CA153值及阳性率显著高于HIV组和健康对照者(P＜0.05),CD4+>T细胞数和血清CA199、CA125、CA153水平及异常率呈显著负相关.结论 血清CA199、CA125、CA153对于HIV/AIDS的病情诊断及疗效观察具有较好的临床应用价值.建议对HIV感染者应常规进行血清CA199、CA125、CA153水平监测,积极治疗,改善预后.
作者：罗平；覃元锋；刘志华 刊期： 2008年第10期
目的 了解广州市水源水水质卫生状况,为水污染的治理提供科学依据.方法 连续3年每季度对市政水厂的水源水采集一次样本,对水源水进行常规分析.结果 3年共采集样本94宗,对32个常规指标和氨氮进行了检测,超标严重的指标依次是色度、混浊度、铝、铁、锰、耗氧量、氨氮、氟化物、细菌总数和粪大肠菌群,合格率在3.13%～93.95%之间,2007年与2005和2006年相比主要超标指标除了铝有所上升外,其余指标均显著降低(P＜0.05).结论 广州市水源水的主要污染来源是工业废水和生活污水,主要污染物为有机物.加大治污力度、选取新的水源水,是提高饮用水源水质量的直接和有效方法 .
作者：石同幸；孙兰；施洁；傅雪松；黄汝明；刘慧；王德东 刊期： 2008年第10期
目的 分析广东省性病实验室淋球菌培养鉴定的质量.方法 2004-2006年间开展性病实验室淋球菌培养鉴定室间质评活动.发放淋球菌质控样品到参评实验室,各室按照常规操作进行淋球菌培养鉴定和产β-内酰胺酶(PPNG)试验.结果 3年间,共计162家实验室检测765份质评样本,培养鉴定的总体符合率为70.13%.2004年质评实验室15家、2005年60家和2006年87家,淋球菌培养鉴定的总符合率分别为63.3%、62.1%和72.7%.3年间PPNG鉴定的总体准确率87%.结论 通过规范化建设的性病实验室淋球菌鉴定能力逐年提高,但个别实验室存在试剂质量,操作技能,结果 报告准确性和规范性等问题,有待进一步提高.
作者：曾维英；郑和平；黄进梅 刊期： 2008年第10期
目的 了解广州市近年来蠕虫在人群中的感染状况及流行特点,为制订防治策略提供依据.方法 根据本市各区的地理分布,连续4年分期分批选择不同职业的人群作为调查对象,采用改良加藤氏厚涂片粪检蠕虫卵.结果 共粪检4 200人,总肠道寄生虫感染率为8.00%,其中肝吸虫感染率为6.98%,钩虫感染率为0.50%,蛔虫感染率为0.31%,鞭虫感染率为0.26%.近年来市区感染率不断增高.职业中以工商人员的感染率高,其次是农民、医务人员及干部;男性感染率明显高于女性.结论 肝吸虫及农村的土源性线虫仍是今后重点防治的寄生虫.采取有效的综合防治措施,加强宣传教育,改变人们不良的饮食习惯,提高防护意识,可降低人群蠕虫感染率.
作者：张豪；刘小宁；任文锋；郭荣同；高雨藩；潘志明 刊期： 2008年第10期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
