周婧杰；叶惠芬；徐邦牢；方燮帆；张革；潘武宾
目的 针对不同哺乳类细胞建立相应的慢病毒体外感染体系,以建立慢病毒介导的外源基因体外投递系统.方法 按Invitrogen公司推荐的标准程序进行慢病毒(携带EGFP基因)包装(脂质体介导的瞬时转染)、超速离心浓缩和保存等,随后用病毒上清或浓缩后的病毒感染293FT细胞.24～48 h后荧光显微镜下观察是否见绿色荧光以证实慢病毒是否成功生产:将携带EGFP基因的病毒上清或浓缩后的病毒分别加入内含293FT细胞、小鼠ES细胞、小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)或小鼠睾丸生殖细胞的培养板孔内,感染6～12 h后.用相应培养基替换感染液,数天后荧光显微镜下观察是否见绿色荧光以证实慢病毒是否成功感染不同哺乳类细胞.结果 按标准程序生产的携带EGFP基因慢病毒(病毒上清或浓缩后的病毒)成功高效率感染293FT细胞、MEFs或小鼠睾丸生殖细胞;用浓缩后的病毒(携带EGFP基因)感染小鼠ES细胞.亦可获得EGFP阳性的ES细胞克隆.结论 熟练掌握了慢病毒包装、浓缩及鉴定等技术.同时针对不同哺乳类细胞建立了相应的慢病毒介导的外源基因体外传递系统,这些为相关后续研究打下了良好的基础.
作者：贾俊双；孙妍；肖东；姚开泰 刊期： 2008年第10期
目的 了解重庆市人群土源性寄生虫的感染状况,为防治决策提供科学依据.方法 将1982-2007年间按不同年代,且资料完善、有代表性年份的蛔虫、钩虫人群感染率调查资料进行统计,比较发展趋势.并对蛔虫、钩虫感染者与未感染者进行对照调查,用回归分析方法分析感染与生吃蔬菜、赤脚下地劳动、年人均收入的关系.结果 建国初期蛔虫、钩虫感染率高分别达到92.9%和74.7%,2007年已分别降至23.42%和7.89%,呈稳定下降态势.病例-对照研究共调查了1 180人,其中病例(感染者)425人,对照755人.蛔虫、钩虫病例对照研究结果 表明,感染与生吃蔬菜、赤脚下地劳动、年人均收入密切相关.结论 人群钩虫、蛔虫感染率呈下降趋势,社会经济发展、环境因素和社会因素发生改变,对促进土源性寄生虫的防治工作发挥了重要作用.
作者：蒋诗国；肖邦忠；罗兴建；罗飞；吴成果；李继艮；肖鹏；黄文利 刊期： 2008年第10期
目的 研究HIV/AIDS患者血清糖类抗原CA199、CA125、CA153水平的变化.探讨其在HIV/AIDS患者的病情进展及疗效观察中的应用价值.方法 对确诊的184例HIV/AIDS患者进行血清CA199、CA125、CA153和CD4+>T细胞的检测,并对检测结果 进行比较分析.结果 AIDS患者CA199、CA125、CA153值及阳性率显著高于HIV组和HIV/HBV/HCV组及健康对照者(P＜0.05),HIV/HBV/HCV组CA199、CA125、CA153值及阳性率显著高于HIV组和健康对照者(P＜0.05),CD4+>T细胞数和血清CA199、CA125、CA153水平及异常率呈显著负相关.结论 血清CA199、CA125、CA153对于HIV/AIDS的病情诊断及疗效观察具有较好的临床应用价值.建议对HIV感染者应常规进行血清CA199、CA125、CA153水平监测,积极治疗,改善预后.
作者：罗平；覃元锋；刘志华 刊期： 2008年第10期
目的 了解广州市近年来蠕虫在人群中的感染状况及流行特点,为制订防治策略提供依据.方法 根据本市各区的地理分布,连续4年分期分批选择不同职业的人群作为调查对象,采用改良加藤氏厚涂片粪检蠕虫卵.结果 共粪检4 200人,总肠道寄生虫感染率为8.00%,其中肝吸虫感染率为6.98%,钩虫感染率为0.50%,蛔虫感染率为0.31%,鞭虫感染率为0.26%.近年来市区感染率不断增高.职业中以工商人员的感染率高,其次是农民、医务人员及干部;男性感染率明显高于女性.结论 肝吸虫及农村的土源性线虫仍是今后重点防治的寄生虫.采取有效的综合防治措施,加强宣传教育,改变人们不良的饮食习惯,提高防护意识,可降低人群蠕虫感染率.
作者：张豪；刘小宁；任文锋；郭荣同；高雨藩；潘志明 刊期： 2008年第10期
目的 探讨紫外线减毒弓形虫免疫对小鼠旋毛虫感染的影响.方法 ICR小鼠分为两组,实验组为紫外线减毒弓形虫免疫3周后再感染旋毛虫,对照组为旋毛虫单独感染.结果 与旋毛虫单感染相比,小鼠预先经紫外线减毒弓形虫免疫再感染旋毛虫,在感染后5～14 d其小肠内的成虫数明显增加(肠道排虫明显延迟),而感染后23～90 d其肌肉中的幼虫数明显下降.结论 紫外线减毒弓形虫免疫对小鼠旋毛虫感染具有一定的免疫调节和异源性保护作用.
作者：朱佩娴；郑焕钦；王树萍；张瑞琳；黄世光；吕芳丽 刊期： 2008年第10期
目的 建立经济有效且功能良好的原代肝细胞体外分离培养系统.方法 采用0.02%胶原酶和Pereoll分离液分离纯化大鼠肝细胞,光镜和电镜下观察HepatoZYME-SFM培养的肝细胞形态,自动生化仪定期检测培养肝细胞功能,RT-PCR半定量方法检测白蛋白mRNA,高效液相色谱法(high performance liquidchromatography,HPLC)分析安定代谢能力.结果 分离纯化的大鼠肝细胞总数(2-3)×108>cells/整肝,活力和纯度大于95%,生长良好形态正常.培养3 d后ALT、AST显著下降,加入NH4>C1后8 d内BUN保持相对稳定高水平,白蛋白合成在第3～4天达到高峰.培养的2～5 d内肝细胞可有效清除安定.结论 通过使用低浓度胶原酶灌流、Percoll分离液纯化以及HepatoZYME-SFM无血清培养基培养,肝细胞可有效保持良好形态结构和一定的生物合成代谢能力.
作者：庄鹏；李志莹；范紫香；江元森；姚集鲁 刊期： 2008年第10期
目的 建立诺如病毒遗传组I型TaqMan-MGB探针实时荧光RT-PCR快速、特异、灵敏的检测方法,为疾病预防控制提供可靠的依据.方法 根据GenBank诺如病毒遗传组Ⅰ型代表株保守序列设计特异引物对和TaqMan-MGB探针,建立一步法实时荧光RT-PCR快速检测反应体系,优化反应条件,评价反应体系的灵敏度、特异性、重复性.并与常规RT-PCR比较.结果 诺如病毒遗传组I型TaqMan-MGB探针实时荧光RT-PCR检测时限短.仅1 h就出结果 ,与轮状病毒、腺病毒、星状病毒、甲肝病毒、诺如病毒遗传组Ⅱ型无交叉反应,低检出下限为100拷贝/反应.比常规RT-PCR灵敏100倍,5份浓度不同的诺如病毒遗传组Ⅰ型标本重复检测5次,平均Ct值变异系数范围为0.39%～1.02%.结论 诺如病毒遗传组Ⅰ型TaqMan-MGB探针实时荧光RT-PCR快速、特异、灵敏、重复性好,可应用于突发公共卫生应急检测和诺如病毒遗传组Ⅰ型监测,提高快速检测能力.
作者：谭翰清；郭赐贶；谭海芳；陈华；程洁萍；林凤；孔秀珍；丁丽娜 刊期： 2008年第10期
目的 对阴沟肠杆菌所产CTX-M型β-内酰胺酶进行基因克隆、原核表达重组质粒的构建及其特性研究.方法 以产CTX-M型β-内酰胺酶的阴沟肠杆菌45号基因组DNA为模板,设计两对引物PCR扩增CTX-M,将其克隆入pGEM-T载体后测定该核苷酸序列.再将CTX-M基因克隆到pGEX-6P-3表达质粒并转入感受态BL21,选择阳性菌落进行药物敏感试验和酶动力学检测.结果 PCR扩增出大小为876 bp和1 067 bp的基因片段,与GenBank上CTX-M-9和CTX-M-3酶的基因序列同源性为100%.CTX-M-3型重组菌株药敏试验结果 与原菌株相比,对青霉素类和头孢噻肟具有明显的水解作用,第三、四代头孢菌素对之较为稳定,动力学结果与酶稳定性结果基本一致.结论 重组质粒pGEX-6P-3/CTX-M构建成功,CTX-M-3型重组菌株与原菌株比较,对β-内酰胺类抗生素的敏感性和稳定性增加,亲和力下降.
作者：江洁华；徐韫健；廖伟娇；李乃健 刊期： 2008年第10期
近来在众多原核生物的基因组中,人们发现一类成簇的、有规律间隔的短回文重复序列(clusteredregularly interspaced short palindromic repeats, CRISPR)结构家族.CRISPR由一类DNA重复单元构成,在功能上与DNA的重组、修复及原核生物的免疫防御系统关系密切.通过对CRISPR和其相关系统(CASS)基因的比较性分析,CRISPR独特的结构和功能引起人们的广泛关注.实验表明CASS的插入序列来源于细胞内的许多染色体外遗传物质,并且以一种类似于真核生物中:RNA干扰(RNAi)系统的机制,在原核生物抵抗入侵的噬菌体和质粒的防御系统中发挥着重要作用.本文对CRISPR的结构、片段来源和功能进行综述.
作者：王菲；罗恩杰 刊期： 2008年第10期
目的 评价pEGFP-TCTP真核重组质粒联合免疫佐剂CpG诱导小鼠保护性免疫的效果.方法 构建日本血吸虫TCTP真核重组质粒,将pEGFP-TCTP注射入BABL/c小鼠,采用ELISA法检测免疫小鼠血清中IFN-γ,水平;尾蚴攻击感染后45 d处死小鼠,收集成虫和虫卵,计算减虫率和减卵率;小鼠肝脏送病理切片,计算虫卵肉芽肿的数量.结果 TCTP DNA免疫保护性效果显示:实验组与阴性对照组相比,显示出一定的保护性效果,TCTP组的减虫率和减卵率分别为43.91%和53.48%,与GST组效果相似.DNA免疫后及感染后期,TCTP组与PBS对照组血清IFN-γ水平有显著性差异(P＜0.05);攻击感染前后组间比较发现,GST组和GST+CpG组有显著性差异(P＜0.05),提示CpG显著提高了DNA免疫的效果.结论 SjTCTP DNA免疫能诱导较明显的保护性Th1免疫应答,CpG基序可以有效的诱导保护性Th1免疫应答,是一种有效的DNA免疫佐剂.
作者：阮志燕；吴忠道；曹爱莲 刊期： 2008年第10期
目的 探讨乙肝病毒C基因亚型与病毒变异的相关性.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法,对155例慢性HBV C基因感染者,包括78例肝细胞癌(HCC)、36例肝硬化(LC)和41例慢性肝炎(CH)血清样本进行C基因亚型和病毒基本核心启动子(BCP)以及前C区(Pc)变异检测.结果 在HCC、LC和CH研究组中C2的分布均高于C2,同时C1亚型有较高的BCP变异,C2亚型有较高的PC变异(P＜0.030).结论 慢性HBV C基因型患者HCC的高发生率和有较严重的肝脏损害可能与其中C1分布较多有关.因此HBV C基因型患者进行亚型鉴定能更好地评估HBV基因型系列对慢性HBV感染疾病进展和临床结局的影响.
作者：黄月华；曾文挺；梁建新；周彬；梁敏锋 刊期： 2008年第10期
目的 调查分析一起水痘爆发疫情的原因和特点,总结经验教训.方法 病例定义为2007年2月28日以来,学校内教师和学生中出现典型的水痘样皮疹(疱疹≥3 d),伴或无发热症状体征.通过现场调查、问表等方法 ,描述本次爆发的流行病学特征,通过病例对照研究危险因素.结果 123例患者中罹患率为6.8%,其中男6.7%,女7.0%.流行病曲线上发病高点在4月30日到5月3日.三年级的罹患率为20.1%,一年级的罹患率为16.2%.患病的主要危险因素为:中午两小时午休时间(RR＝4.9,95%CI＝3.4-7.1)和乘坐校巴时(RR＝3.2,95%CI＝2.3-4.5)的密切接触.对27个班级的940名学生进行进一步分析发现,只在学校午休而不乘校巴的(RR＝5.4,95%CI＝3.5-8.3);在校午休同时也乘校巴(RR＝2.8,95%CI＝1.9-4.2).对午休的57个宿舍进行人群聚集性分析有显著性意义.结论 此次水痘爆发的主要危险因素与学生中午两小时午休期间在宿舍聚集和乘坐校巴时的密切接触有关.有效的控制措施是对病例的隔离及学校和校巴的消毒.
作者：马智超；周小涛；李基；严新风；邓立权；张廷禄 刊期： 2008年第10期
目的 监测分析某综合性教学医院医院感染的分布动态和变化发展趋势,为制定防治措施以及评价医院感染管理效果提供依据.方法 采取回顾性调查的方法 对某综合性教学医院2002-2006年具有明确医院感染的6 595例病人的临床资料进行统计学分析.结果 各年度医院感染发病率差异有统计学意义(χ2＝177.61,P＜0.01),2003年以后呈现逐渐下降的趋势.医院感染主要分布部位为呼吸道,其中又以下呼吸道为主,占38.95%,其次为泌尿道,占10.89%.中医康复科,神经外科,血液内科的医院感染率有逐年上升的趋势.各年度检出菌株数排在前2位的病原菌分别是真菌、铜绿假单胞菌.其中,真菌所占的比率呈逐年上升的趋势.结论 连续动态的医院感染的流行病学调查和监测可以把握医院感染的变化趋势.加强重点科室、重点环节和高危人群的专项监测并制定有针对性的预防策略,能够大程度的降低医院感染的发生.
作者：曾伟英；聂绍发；萧帼稳；王宏；钟振锋；王莉 刊期： 2008年第10期
目的 探讨IFN-γ、L-Arg及L-NNA对旋毛虫病沙鼠的脑及心肌NO合成和脑组织病理变化的影响.方法 经腹腔给予感染旋毛虫后不同时期的沙鼠不同剂量的IFN-γ、L-Arg及L-NNA,检测沙鼠脑及心肌的NO含量,并观察脑组织的病理变化.结果 IFN-γ和L-Arg组沙鼠脑及心肌NO含量明显升高,且随药物浓度的增加而升高.给予L-NNA后,脑和心肌组织阴性对照组、脑7 d组及心肌7 d组和40 d组的NO含量明显降低,且随药物浓度的增加而降低;脑25 d组、40 d组及心肌25 d组的NO量则明显升高,且随药物浓度的增加而升高.大脑组织未见明显病理改变.结论 IFN-γ和L-Arg能促进旋毛虫病的沙鼠脑及心肌的NO合成,给予L-NNA后对不同时期及不同组织则表现出不同的增强或抑制NO合成的双重作用.
作者：万启惠；贺利芳；刘兴安；张曦 刊期： 2008年第10期
目的 初步探讨病毒性肝炎患者的红细胞分布宽度(RDW)、平均红细胞体积(MCV)、平均血小板体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW)等四项血常规参数在肝纤维化诊断中的意义.方法 303例病毒性肝炎患者分为急性肝炎(AH)组、慢性肝炎(CH)组、肝炎肝硬化(LC)组和重型肝炎(SH)组,对照组由16名健康人组成.采用全自动血细胞计数仪检测所有被测试者的血常规参数,并同期对其中179例患者采用放射免疫法检测其血清透明质酸(HA)和层粘蛋白(LN)水平、采用彩色多普勒超声仪测量其脾脏的长径(SPL)及厚度(SPT),研究上述指标之间的相互关系.结果 CH组、LC组和SH组患者的RDW均显著高于对照组,CH组、LC组的MCV显著高于对照组,MPV和PDW在各病毒性肝炎组与对照组之间无显著性差异;病毒性肝炎患者的RDW与其HA、LN、SPT、SPL成显著直线正相关.结论 RDW对慢性肝炎肝纤维化的诊断有一定的临床价值.
作者：周跃；沈轶瑶；顾宇峰；汤伟 刊期： 2008年第10期
目的 调查广州地区老年患者肺炎链球菌分离株对青霉素的敏感性,并分析其亲缘关系.方法 K-B纸片法对33株分离自老年住院病人的肺炎链球菌进行青霉素药敏试验;应用PCR技术检测青霉素结合蛋白基因pbpla,pbp2x,pbp2b;用盒式PCR(BOX-PCR)分析菌株间亲缘关系.用多位点测序分型技术(multilocussequence typing,MIST)检测青霉素耐药菌株的分子分型.结果 青霉素的耐药率为3.03%(1/33);用PCR方法鉴定PSSP的准确率为68.75%:BOX-PCR可将这33株肺炎链球菌分为21型.MLST分型显示,青霉素耐药菌株属ST271型.结论 广州地区老年患者肺炎链球菌对青霉素耐药率较低,用PCR方法检测PSSP有一定的可行性.BOX-PCR显示了较高的分辨率,能快速可靠地检测菌株间的亲缘关系.广州地区流行的耐药克隆与Taiwanl9F-14株同源.
作者：周婧杰；叶惠芬；徐邦牢；方燮帆；张革；潘武宾 刊期： 2008年第10期
目的 了解九龙坡区麻疹的流行病学特征,为更好地制定有针对性的控制措施提供依据.方法 利用办公软件Excel2003对九龙坡区2005-2007年麻疹疫情资料和监测资料进行分析.结果 2005-2007年九龙坡区麻疹年平均发病率为10.59/10万.发病地区有明显的聚集趋势,发病时间有一定的季节性,男女性别比为1.30;发病以0～6岁儿童为主,占病例总数的76.36%,无免疫史病例占67.83%.结论 无麻疹疫苗免疫史是麻疹发病的主要危险因素.以后应减少＜8个月婴儿的暴露机会,加强≥8个月龄婴儿麻疹疫苗的及时和有效接种,加强麻疹疫情监测,完善流动儿童的计划免疫管理,减少免疫空白,保护易感人群.
作者：李中琴；邱财丽；谭学钧 刊期： 2008年第10期
目的 探讨血清内脂素在2型糖尿病伴冠心病及冠心病患者中的作用.方法 采用酶联免疫法(ELISA)对临床上确诊为2型糖尿病伴冠心病患者64例,冠心病患者85例及健康对照组30例,进行血清内脂素水平的测定.结果 2型糖尿病伴冠心病组及冠心病组的血清内脂素水平明显高于正常对照组(P＜0.01),有统计学意义.结论 血清内脂素在2型糖尿病的发生和发展中具有一定的生理作用.并可能对冠心病的发生和发展中也具有一定的生理作用.
作者：曾鸿毅；邹劲涛 刊期： 2008年第10期
目的 克隆弓形虫RH株Calpain-like基因片段,构建原核表达载体,诱导表达Calpain-like基因重组蛋白.方法 收集、纯化弓形虫RH株速殖子,提取总RNA,在设计合成的引物中引入Sal I和EcoR I酶切位点.应用RT-PCR扩增弓形虫RH株Calpain-like基因片段,插入pGEM-T载体,提取重组质粒,双酶切获得目的基因,亚克隆到原核表达质粒pET32a,重组子经双酶切、PCR和DNA序列分析鉴定,转化大肠杆菌BL21并以IPTG诱导表达.结果 从弓形虫RH株速殖子cDNA中扩增出316 bp的Calpain-like基因片段;含pET32a/Calpain-like的重组质粒在宿主菌经诱导后,获得与预期分子量相符的表达产物.结论 成功地克隆和表达弓形虫RH株Calpain-like基因,弓形虫Calpain-like基因的克隆表达为进一步筛选弓形虫疫苗候选分子和治疗药物的靶位提供了研究基础.
作者：陈雪艳；付玉才；李璐；耿艺介；黄达娜；高世同；张仁利 刊期： 2008年第10期
目的 探讨冬凌草甲素对急性白血病HL-60细胞的增殖抑制作用及其作用机制.方法 以不同浓度的冬凌草甲索作用于体外培养的HL-60细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,应用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,瑞氏染色法观察细胞凋亡时的形态学变化.应用PCR-ELISA及RT-PCR法检测细胞凋亡前后端粒酶活性及端粒酶hTERT mRNA表达水平的变化.结果 冬凌草甲素可显著的抑制HL-60细胞的生长,诱导细胞发生凋亡,并呈现出明显的量-效与时-效关系.冬凌草甲素作用48～60 h后在瑞氏染色图片上可见核浓缩及核碎裂等典型的细胞凋亡特征,同时端粒酶hTERT mRNA的表达水平及端粒酶活性均明显降低.结论 冬凌草甲素能抑制HL-60细胞的生长及诱导细胞发生凋亡;降低端粒酶hTERT mRNA的表达水平及端粒酶活性可能是其重要作用机制之一.
作者：刘加军；林东军；陆敏强；张俊峰；陈规划 刊期： 2008年第10期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
