张旭；乔继英；张荣；魏志超；蔡娟
目的 探讨黄芪对慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者外周血Th1/Th2功能平衡的影响.方法 CHB患者和健康人的外周血单个核细胞体外经黄芪作用,培养48 h后,用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测培养上清中Th1类细胞因子(IL-2、IFN-γ)和Th2类细胞因子(IL-4、IL-10)的含量变化.结果 在黄芪诱导下:①健康对照组和CHB患者组Th1类细胞因子明显增高(P＜0.01),Th2类细胞因子水平无明显变化(P＞0.05);②CHB患者组IFN-γ水平明显高于健康对照组(P＜0.01),IL-2水平两组比较差异无统计学意义(P＞0.05);③Th2类细胞因子水平CHB患者组比健康对照组高,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 黄芪可明显提高CHB患者Th1类细胞因子(IFN-γ、IL-2)的产生水平,改善CHB患者Th1/Th2功能失衡状态,可使CHB患者Th2优势应答状态部分得到纠正.
作者：吴晓蔓；袁文声 刊期： 2007年第11期
目的 在原核与真核细胞中表达丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)2a型JFH1(japanese fulminant hepatitis 1)株NS5A蛋白,分析JFH1 NS5A蛋白与其它基因型NS5A蛋白间的差异,为进一步研究NS5A蛋白在HCV病毒复制中的作用奠定基础.方法 PCR特异扩增JFH1 NS5A基因,克隆入pET-32a和pEGFP-N1载体中,构建JFH1 NS5A的原核和真核重组表达质粒pET-JFH1 NS5A和pEGFP-JFH1 NS5A.将pET-JFH1 NS5A转化大肠杆菌BL21(DE3),pEGFP-JFH1 NS5A转染HEK 293T细胞,在原核与真核系统中进行表达,并以SDS-PAGE、荧光显微术和Western blot方法检测.利用PubMed BLAST软件对JFH1与HCV1a、1b、2b和2c型NS5A蛋白间的同源性进行了分析.结果 酶切鉴定及测序结果表明成功构建了重组质粒pET-JFH1NS5A和pEGFP-JFH1 NS5A.SDS-PAGE电泳检测到融合蛋白在原核细胞中的表达,荧光显微镜观察和Western blot检测到了GFP-JFH1 NS5A融合蛋白在HEK 293T细胞中表达.BLAST分析显示,JFH1和H77、HC-J4、HCV-J8和BEBE1病毒株NS5A蛋白的同源性分别为57%、60%、68%和74%.结论 JFH1 NS5A蛋白在原核与真核细胞中表达成功,为研究HCV NS5A在JFH1株病毒高效复制中的作用提供了材料.
作者：王永智；任浩；丁惠；赵平；薛利军；潘卫；戚中田 刊期： 2007年第11期
目的 建立副溶血弧菌的基因分型技术,应用于广州市水产品食物中毒居前列的致病菌--副溶血弧菌的检测,寻找一种简便快速准确的检验方法.方法 分析副溶血性弧菌分离株的16S-23S rDNA IGS的相关信息(电泳图谱、序列分析等),找出合适的16S-23S rDNA IGS作为基因分型依据,建立副溶血性弧菌的基因分型技术.结果 通过克隆和测序,分析了副溶血性弧菌的16S-23S rDNAIGS片段,初步确定了以16S-23SrDNAIGS为分子标记的副溶血性弧菌基因分型技术.结论 本检测方法不但快速、灵敏,还对深入了解副溶血性弧菌的发病机制,研究其分子流行病学特征具有重要的意义.
作者：何晖；邓庆丽；李秀珍；黎淑端；刘振熙 刊期： 2007年第11期
目的 制备抗蓝载体(blue carrier,BC)单克隆抗体(mAb),为相关研究提供支持与工具.方法 用人工合成肽与蓝载体交联后免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与NS-1融合制备杂交瘤,经筛选和3次克隆化,从制备的腹水中纯化单克隆抗体.用ELISA以及Dot-ELISA方法鉴定单克隆抗体的特性(效价、Ig亚类、特异性以及亲和力).结果 筛选到1株可稳定分泌抗蓝载体单克隆抗体的杂交瘤细胞5B5,腹水效价2×10-6,单抗亚类为IgG1,抗体亲和力为7.8×108.Dot-ELISA结果显示,在相同条件下5B5 mAb只与蓝载体特异性结合,与钥孔戚血蓝素(KLH)、牛血清白蛋白(BSA)、鸡卵清白蛋白(OVA)等载体蛋白不发生交叉反应.结论 获得1株能特异性识别蓝载体蛋白的mAb,为评价短肽及半抗原交联免疫效果、某些疾病诊断及治疗方法疗效提供了工具.
作者：叶青；刘艳君；朱平；富宁 刊期： 2007年第11期
目的 建立B型流感病毒实时荧光PCR检测(FQ-PCR)法,并与常规病毒培养法比较,判断二者结果的相关性,确定两种检测方法各自更适合的应用领域.方法 建立FQ-PCR法并对76株经Quidel胶体金试纸条鉴定型别的流感病毒分离培养株进行检测,比较其敏感性和特异性.21～223梯度稀释的B型流感病毒分别用FQ-PCR法和病毒培养法进行检测,记录FQ-PCR的Ct值及培养物的血凝效价,并对FQ-PCR阳性但血凝无效价的梯度进行盲传,再次检测HA效价,比较二法的灵敏度及相关性.对临床采集的881份咽拭子标本做FQ-PCR检测,同时进行病毒培养并盲传、血凝试验及Quidel胶体金试纸条分型,综合比较两种检测方法之间的差异.结果 在76株已知流感病毒标本中,FQ-PCR方法检出B型16份,与Quidel胶体金分型结果相符.FQ-PCR方法的灵敏度约高出常规培养法的25～26倍.FQ-PCR法对临床咽拭子的检测灵敏度高,无非特异性反应.结论 流感病毒FQ-PCR法具有与组织培养法一致的特异性,前者操作简便快捷,灵敏度更高,在流感病毒临床快速检测和鉴定中具有更广阔的应用前景.
作者：彭春梅；李军涛；林斌；陈美翩；周曦；杨仁峰；周荣 刊期： 2007年第11期
目的 探讨人重组生长激素(rhGH)减轻梗阻性黄疸时肠源性细菌及内毒素移位的作用及机制.方法 Wister大鼠42只分为3组:假手术组(SO组)、胆总管结扎组(BDL组)及rhGH治疗组(rhGH组).实验1周后检测各组肝功指标的变化及血浆内毒素水平,取肝、肾、肠系膜淋巴结等肠道外器官组织做细菌培养,电镜观察末端回肠粘膜变化.结果 rhGH组多项肝功指标较BDL组明显改善,rhGH组血浆内毒素水平为(0.38±0.03)EU/ml,较BDL组的(0.65+0.04)EU/ml明显降低(P＜0.01),与SO组的(0.30+0.02)EU/ml比较差异无统计学意义(P＞0.05).BDL组肝、肾、肠系膜淋巴结中细菌移位率高于另两组,其中肠系膜淋巴结细菌移位率为64.29%,明显高于SO组及rhGH组(P＜0.05),后两组之间各部位细菌检出率差别无统计学意义(P＞0.05).电镜显示BDL组肠粘膜上皮细胞坏死,细胞核固缩,线粒体肿胀变性,内质网明显扩张.rhGH组肠粘膜上皮改变较BDL组明显减轻,接近SO组所见.结论 应用rhGH可保护梗阻性黄疸时小肠粘膜屏障功能,减少肠源性细菌/内毒素移位的发生.
作者：孙丽芳；李晶；施中凯 刊期： 2007年第11期
目的 分析和预测亚洲带绦虫肌动相关蛋白2/3复合体亚单位4(Actin related protein 2/3 complex subunit 4,Atp2/3)基因及其编码蛋白的结构和特性.方法 利用美国国家生物技术信息中心(NCBI,http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)和瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统(ExPASY,http://ca.expasy.org/)中有关基因和蛋白的序列和结构信息分析的各种工具,结合其它生物信息学分析软件包,如Pcgene和Vector NTI suite,从亚洲带绦虫全长cDNA质粒文库中识别Arp2/3基因及其编码区,分析、预测该基因编码蛋白质的理化特性、翻译后的修饰位点、功能域、亚细胞定位、拓扑结构、二级结构、三维空间构象等.结果 该基因全长718 bp,编码区为30-530,编码167个氨基酸,为全长基因.GenBank中与日本血吸虫Arp2/3氨基酸序列一致性达78%,相似性达90%.理论分子量为19533.9.没有跨膜区和各种亚细胞序列.预测3个主要的抗原表位为53～58,74～82,138～143均在Arp2/3空间结构的分子表面.结论 应用生物信息方法从亚洲带绦虫成虫cDNA文库中筛选出Arp2/3基因.
作者：唐保东；黄江；胡旭初；黄艳；包怀恩；郎书源 刊期： 2007年第11期
目的 探讨乙肝病毒前S1抗原(PreS1)与HBV-DNA、HBV血清标志物(HBV-M)和ALT之间的相关性和临床应用价值.方法 收集380例荧光定量PCR法检测HBV-DNA含量升高患者血清,用酶联免疫法(ELISA)检测乙肝病毒前S1抗原和HBV血清标志物、用速率法检测ALT.结果 380例HBV-DNA含量升高乙肝患者中,PreS1的阳性率为84.6%,HBeAg阳性率为67.8%,两者比较差异有统计学意义(P＜0.005);在各种模式HBV血清标志物中,HBeAg阳性组PreS1阳性率和ALT异常升高与HBeAg阴性组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);随着HBV-DNA含量的增加,HBeAg和PreS1的阳性率也增加,HBV-DNA拷贝数为5×102～1×105 范围时,PreS1的阳性率高于HBeAg阳性率(P＜0.005),当HBV-DNA拷贝数高于1×105时,HBeAg阳性率与PreS1阳性率相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论 乙肝病毒前S1抗原和HBeAg两者阳性率与HBV-DNA含量密切关联,乙肝病毒前S1抗原检测可作为乙肝病毒复制、传染性及肝细胞损伤的指标,同时也可用于指导临床由于病毒变异和其他原因造成HBeAg阴性乙肝患者的诊断和治疗.
作者：张婷；廖伟娇；陈涛；高俊；温丹萍 刊期： 2007年第11期
目的 为HBV感染临床个体化治疗、指导临床用药寻找一种能更好地检测HBV YMDD模序混合感染的方法.方法 28份已知乙肝病人血清,其中10份为HBV YMDD模序感染,5份为HBV YIDD模序感染,5份为HBV YVDD模序感染,2份为HBV YMDD和YIDD模序混合感染,2份为HBV YMDD和YVDD模序混合感染,2份为HBV YIDD和YVDD模序混合感染,2份为HBV YMDD、YIDD和YVDD模序混合感染,都用PCR产物直接测序和PCR-流过式反向斑点杂交(Flowthrough-RDB)方法检测.结果 HBV YMDD模序单一感染标本用两种方法检测准确性都达到100%,对混合感染标本PCR-流过式反向斑点杂交方法检测准确性也可达100%,然而用PCR产物直接测序方法只能检测其中一种或两种型别.结论 PCR-流过式反向斑点杂交方法是一种敏感、特异和快速的检测HBV YMDD野生型及其突变型模序单一感染和混合感染的有效方法,比PCR产物直接测序更优越,更有利于实现临床个体化治疗和指导临床用药.
作者：袁耀钦；潘小划；何东华；欧志英 刊期： 2007年第11期
腺病毒载体目前广泛地应用于肿瘤的基因治疗.随着对腺病毒分子结构、功能以及感染机制的进一步深入了解,人们在降低其免疫原性,增强基因导入特异性,增强感染和表达效率等方面进行了许多探索,开发具有肿瘤靶向性的溶瘤腺病毒载体是其发展方向与研究热点.本文对腺病毒载体的生物学、构建策略及其在肿瘤基因治疗中的应用进行综述.
作者：刘泽玉；李国伟；陆家海 刊期： 2007年第11期
目的 通过比较鸦胆子、黄连、白头翁和槟榔对人芽囊原虫的体外杀虫作用,筛选出对人芽囊原虫有效的中药及浓度.方法 分别于加药24 h和72 h后对细胞进行计数,来评价药物的作用效果.结果 鸦胆子的适浓度为1 600～3 200 μg/ml;黄连的适浓度为6 400 μg/ml;白头翁不能完全杀死虫体,其低抑虫浓度为800 μg/ml;槟榔无效.结论 鸦胆子、黄连、白头翁和槟榔是传统的治疗肠道感染和抗肠道寄生虫的中草药.通过比较药物适浓度和低抑虫浓度,发现鸦胆子的杀虫效果强于黄连;白头翁可抑制虫体繁殖;槟榔对人芽囊原虫无抑制和杀灭作用.
作者：张旭；乔继英；张荣；魏志超；蔡娟 刊期： 2007年第11期
目的 了解慢性咽炎患者咽部细菌种类及分布特征,研究细菌感染与慢性咽炎的相互关系.方法 采集180例各类型慢性咽炎患者咽后壁分泌物,进行细菌培养和鉴定.结果 慢性咽炎患者咽拭子标本中,细菌培养检出率为100%.检出率前三位的细菌分别是α-溶血性链球菌(54.4%)、卡它莫拉菌(26.7%)、副流感嗜血杆菌(26.1%);检出率前3位的致病菌分别是α-溶血性链球菌(54.4%)、副流感嗜血杆菌(26.1%)、表皮葡萄球菌(22.8%),慢性咽炎患者咽部细菌检出率明显高于对照组(P＜0.05).α-溶血性链球菌为临床各类型慢性咽炎患者中检出率高的细菌,其次为副流感嗜血杆菌(慢性单纯性咽炎患者),或肺炎克雷伯菌(慢性肥厚性咽炎患者),或金黄色葡萄球菌(干燥性咽炎患者),其检出率分别为32.9%、28.8%和23.3%.结论 慢性咽炎患者咽部携带的细菌谱与健康人群有明显的差异,且致病菌的检出率较高,不同临床分型慢性咽炎发病与咽部优势菌群有一定关系.
作者：杜利军；张莉滟；吕志跃；吴忠道 刊期： 2007年第11期
目的 探求乙型肝炎病毒(HBV)对出生性别比例(sex ratio at birth,SRB)失调的影响,以便为解决SRB持续偏高提供参考信息及理论依据.方法 回顾性调查分析在解放军第157医院妇产科住院的4 480位产妇的HBV与孕产次情况,以及她们分娩的4 513名活婴的SRB情况.结果 在4 513个活婴中,SRB为121.88;孕1产1产妇的子代SRB为111.45,非孕1产1的子代SRB则为128.14,95%的可信区间分别为98.02～119.63、115.24～134.30,两者之间的差异有统计学意义(χ2=4.617,P=0.032).HBV正常组子代SRB为112.18,HBV携带组则为173.76,95%的可信区间分别为104.79～119.30、143.68～203.84,两者之间的差异有统计学意义(χ2=21.892,P＜0.001);在孕1产1这部分产妇分娩的子代中,HBV正常组SRB为103.90,HBV携带组则为148.78,95%的可信区间分别为92.71～114.78、107.14～190.42,两者之间的差异有统计学意义(χ2=5.610,P=0.018).结论 HBV是影响SRB失调的疾病因素之一,是SRB失调的非社会性因素.
作者：何宗忠；王强；任均田；宋梅；裘宇容 刊期： 2007年第11期
目的 了解HBV基因型对乙型肝炎病毒慢性感染者临床影响.方法 采用限制性片段长度多态性(RFLP)及序列测定法检测广东地区27例HBV携带者和173例慢性乙肝患者的HBV基因型.结果 B基因型105例(52.5%),C型94例(47%),D型1例,未发现其它基因型.B型中乙型肝炎表面抗原携带者(ASC)所占比例(18.1%)显著高于C型中ASC所占比例(8.5%).C型中肝硬化所占比例(23.4%)显著高于B型中肝硬化所占比例(7.6%).C型在ASC、慢性乙肝轻度、中度、重度及重型肝炎、肝硬化的比例依次增高.C型较B型年龄大,但二者间性别差异无统计学意义.结论 广州地区HBV基因型由B、C、D型构成,以B型为主.C型较B型年龄大.C型与较重肝病有关.B、C型间性别差异无统计学意义.
作者：冼建中；关玉娟；唐小平 刊期： 2007年第11期
目的 探讨孕妇孕早期血清标志物筛查与胎儿唐氏综合征检出的关系.方法 应用全自动时间分辨荧光测定仪及配套试剂对妊娠9～13周的5 225例孕妇进行血清妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)和游离β-人绒毛膜促性腺激素(free β-HCG)的测定,筛查结果应用PerkinElmer公司提供的1T软件计算唐氏综合征风险.风险率≥1:250定为筛查阳性,再做羊水或脐带血产前诊断以确认.结果 5 225例孕妇中筛查阳性者为283例,阳性率为5.42%,有159例接受了产前诊断,检出唐氏综合征胎儿4例,漏诊2例,检出率为66.67%,还检出其它染色体异常3例、畸形10例、死胎6例、18-三体2例.结论 孕早期血清PAPP-A和free β-HCG联合筛查胎儿唐氏综合征是行之有效的方法,结合MOM对防止先天缺陷有实用性价值.
作者：周剑英；廖灿；孙茜；龚惠芳；苏洁玲 刊期： 2007年第11期
目的 回顾性分析盆腔脓肿的临床表现,提高妇科的诊疗水平.方法 对1998年1月至2005年12月,收住我院的盆腔脓肿共89例,其中误诊为其他疾病20例进行分析.结果 误诊为外科急腹症阑尾炎7例,卵巢瘤扭转及卵巢囊破裂各5例,异位妊娠2例,卵巢癌1例.结论 要提高对盆腔脓肿的认识,尤其是临床症状不典型的患者,详细询问病史,认真进行体格检查,明确诊断,但决不能一味依赖辅助检查或主观臆断,草率诊断,匆忙手术.
作者：杜莲芳 刊期： 2007年第11期
目的 构建乙肝病毒全长基因组真核表达载体.方法 PCR一步法扩增乙肝病毒全长基因组;乙肝病毒基因组和真核表达载体pcDNA3.1(+)经Hind Ⅲ和EcoR Ⅰ双酶切,连接并转化大肠杆菌DH5α.结果 PCR、酶切和测序表明乙肝病毒全长基因组成功插入真核表达载体pcDNA3.1(+).结论 成功构建乙肝病毒全长基因组真核表达载体.
作者：周豪杰；聂咏梅；付涌水；汪传喜；郑优荣 刊期： 2007年第11期
目的 控制输入性间日疟继发病例.方法 对输入性间日疟现症病人采用氯喹、伯喹8日根治疗法,回归人员进行假定抗疟治疗,所有治疗人员由乡村医生实施督导服药.流行季节输入性疟疾发病的村点开展重点人群预防服药.对流动人口及本地居民定期监测疟疾发病情况.结果 2003-2005 年,流动人员96人,输入疟疾47例,发病率48.96%,现症病人治疗47例,预防性治疗49人.经监测连续3年未发生当地继发病例.结论 及时控制传染源,有效遏制二代病例的发生.
作者：黄光全；袁方玉；吕伦权；胡乐群；刘井元 刊期： 2007年第11期
目的 观察革兰分型半巢式聚合酶链反应(PCR)在浆膜腔细菌感染诊断中的应用价值.方法 对30例浆膜腔积液标本,以细菌16SrRNA基因为靶序列,采用一对通用引物和一条革兰阴性菌特异性引物,以半巢式PCR方法进行检测,并同时作细菌培养.结果 以通用引物对30例标本作第1次PCR,11例扩增出371 bp长度的DNA片段,阳性率为36.7%;对阳性PCR产物再以革兰阴性菌特异性引物作第2次PCR,9例扩增出353 bp的DNA片段即为革兰阴性菌.对此30例标本作细菌培养,阳性率为16.7%,低于PCR扩增法.5例标本细菌分离结果与半巢式PCR革兰分型结果相同.结论 革兰分型半巢式PCR方法能够灵敏地检测细菌并作出革兰阴性、阳性分型,对于浆膜腔感染的早期诊断具有较好的应用价值.
作者：周跃；王建民；沈轶瑶；汤伟；顾宇峰 刊期： 2007年第11期
目的 探讨血清甲胎蛋白(AFP)、a-L-岩藻糖苷酶(AFU)、癌胚抗原(CEA)联合检测对原发性肝癌诊断的诊断价值.方法 正常健康对照组84例,原发性肝癌组69例,肝炎肝硬化组44例,均同时检测血清AFP、AFU、CEA.结果 原发性肝癌组血清AFP、AFU、CEA与肝硬化组、正常健康对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).原发性肝癌组血清AFP、AFU、CEA单独检测时的敏感性分别为71.0%、81.2%和26.1%,联合检测AFP和AFU或CEA可使检测敏感性提高到87.0%和77.0%,三者联合检测敏感性为92.8%,血清AFP阴性标本AFU、CEA的敏感性分别为55.0%和25.0%.结论 联合检测AFP、AFU和CEA 3项指标可以大大提高原发性肝癌尤其是AFP阴性的诊断率.
作者：刘刚；庞利群；徐三荣；朱秋伟 刊期： 2007年第11期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
