学术投稿

华支睾吸虫乳酸脱氢酶(CsLDH)基因的识别及其结构与功能分析

胡旭初;徐劲;吕刚;黄灿;余新炳

关键词:华支睾吸虫, 乳酸脱氢酶, 结构与功能, 生物信息学
摘要:目的 分析华支睾吸虫乳酸脱氢酶基因及其编码蛋白的结构和特性,用于指导其生物学功能的实验研究.方法 利用多种生物信息在线分析工具和分析软件包,从华支睾吸虫全长cDNA质粒文库的表达序列标签(EST)中识别乳酸脱氢酶(CsLDH)基因,预测该基因编码蛋白质的理化特性、氨基酸修饰位点、功能域、亚细胞定位、拓扑结构、二级结构、三维结构及酶学特性和免疫学特性等.结果 该基因全长1224bp,编码区为79~1062,编码328 aa,理论分子量为35 633 Mr,等电点为8.13,半衰期长,理化性质稳定,含有多个潜在的磷酸化和酯酰化位点.预测该蛋白有3个跨膜区,其拓扑结构为N端在膜内侧、C端在膜外侧.有两个主要的线性抗原表位aa10~aa30和aa94~aa102,后者位于膜外,与日本血吸虫LDH相应表位完全一致,与人和小鼠LDH相应表位仅有1个氨基酸差异.该表位中Arg102是酶催化中心的关键氨基酸之一,模拟三维结构显示组成催化中心的另外两个关键氨基酸残基Asp162和His189的空间位置也靠近该表位,酶的催化中心贯穿膜内外.结论 推测华支睾吸虫乳酸脱氢酶不仅负责将糖酵解产生的丙酮酸转化为乳酸,而且还能将乳酸直接排出体外:可作为筛选水溶性抗华支睾吸虫药物的靶标;可介导特异性抗体对虫体的ADCC作用和补体的杀伤作用,以及对酶活性的抑制作用,是一个重要的疫苗侯选抗原.
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    目的 探讨慢性乙型肝炎患者血清可溶性E选择素和外周血T淋巴细胞亚群变化及其临床意义.方法 对50例慢性乙型肝炎患者和20例正常对照者,采用ELISA法检测血清可溶性E选择素(sE-selectin)水平,流式细胞术检测外周血T淋巴细胞亚群.结果 与正常对照组相比,慢性乙型肝炎组sE-selection明显增高,差异具有统计学意义(P<0.01),慢性乙型肝炎中、重度患者外周血CD3、CD4、CD4/CD8比值明显降低,而CD8则明显升高,与正常人比较差异具有统计学意义(P<0.01);慢性乙型肝炎患者sE-selection与CD4/CD8比值之间呈负相关关系.结论 检测血清E-选择素水平和外周血T淋巴细胞亚群对评估慢性乙型肝炎患者肝组织炎症和肝细胞功能损害程度、判断预后都有一定的价值.

    作者:陈群蓉;彭运生;梁辉;曹建华;蔡朝民 刊期: 2007年第12期

  • 深圳市福田区华支睾吸虫病流行现状调查

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    作者:范苏云;黄慈林;刘莹;李丽廉;石向辉 刊期: 2007年第12期

  • 华支睾吸虫乳酸脱氢酶(CsLDH)基因的识别及其结构与功能分析

    目的 分析华支睾吸虫乳酸脱氢酶基因及其编码蛋白的结构和特性,用于指导其生物学功能的实验研究.方法 利用多种生物信息在线分析工具和分析软件包,从华支睾吸虫全长cDNA质粒文库的表达序列标签(EST)中识别乳酸脱氢酶(CsLDH)基因,预测该基因编码蛋白质的理化特性、氨基酸修饰位点、功能域、亚细胞定位、拓扑结构、二级结构、三维结构及酶学特性和免疫学特性等.结果 该基因全长1224bp,编码区为79~1062,编码328 aa,理论分子量为35 633 Mr,等电点为8.13,半衰期长,理化性质稳定,含有多个潜在的磷酸化和酯酰化位点.预测该蛋白有3个跨膜区,其拓扑结构为N端在膜内侧、C端在膜外侧.有两个主要的线性抗原表位aa10~aa30和aa94~aa102,后者位于膜外,与日本血吸虫LDH相应表位完全一致,与人和小鼠LDH相应表位仅有1个氨基酸差异.该表位中Arg102是酶催化中心的关键氨基酸之一,模拟三维结构显示组成催化中心的另外两个关键氨基酸残基Asp162和His189的空间位置也靠近该表位,酶的催化中心贯穿膜内外.结论 推测华支睾吸虫乳酸脱氢酶不仅负责将糖酵解产生的丙酮酸转化为乳酸,而且还能将乳酸直接排出体外:可作为筛选水溶性抗华支睾吸虫药物的靶标;可介导特异性抗体对虫体的ADCC作用和补体的杀伤作用,以及对酶活性的抑制作用,是一个重要的疫苗侯选抗原.

    作者:胡旭初;徐劲;吕刚;黄灿;余新炳 刊期: 2007年第12期

  • 62例社区获得性肺炎病原学调查及细菌耐药性分析

    目的 调查社区获得性肺炎(CAP)的病原体分布状况,了解细菌的耐药情况.方法 收集2003年12月至2004年11月在中山大学附属三院就诊CAP患者共62例,分别留取呼吸道分泌物进行细菌培养,应用常规方法分离鉴定细菌并进行药物敏感性试验,同时检测患者急性期和恢复期肺炎支原体、肺炎衣原体、嗜肺军团菌血清抗体.结果 62例CAP患者39例(62.9%)病原学检查阳性,其中流感嗜血杆菌11例,肺炎链球菌7例,肺炎克雷伯杆菌5例,化脓性链球菌4例,金黄色葡萄球菌3例,卡他莫拉菌1例.检出肺炎支原体13例,肺炎衣原体4例,嗜肺军团菌3例.11例为混合感染.流感嗜血杆菌对氨苄西林耐药率为27.3%;肺炎链球菌对青霉素不敏感率为57.1%,对阿齐霉素耐药率为71.4%.结论 流感嗜血杆菌和肺炎链球菌是CAP的主要致病菌,肺炎链球菌对青霉素及大环内酯类耐药率较高.非典型病原体感染率高,且多为混合感染.

    作者:徐雄;张扣兴;张永标;刘丽华;席云;唐英春 刊期: 2007年第12期

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    目的 了解桑拿按摩女性从业人员梅毒感染情况及影响感染的危险因素,为制定预防控制对策和措施提供科学依据.方法 对305名从事桑拿按摩的女性进行面对面的匿名健康问卷调查及血标本检测梅毒.结果 305名被调查人员中平均年龄(24.27±4.73)岁;未婚占56.7%;文化程度主要为初中,占68.2%;89.2%的调查者听说过梅毒,其获得途径主要为电视,占48.9%;初次性交年龄集中在18岁、19岁和20岁,占总体53.7%;近1个月与非固定性伴安全套使用情况为47.5%;52.13%承认有卖淫行为;54.1%曾有性病症状;14.1%的人缺乏正确的求医行为.梅毒阳性率为2.30%.结论 桑拿按摩女性从业人员文化程度低,普遍存在高危性行为,严重缺乏自我保护意识,其梅毒感染率高,必须采取有效的干预措施.

    作者:谭雪玲;王千秋;黄澍杰;周丽丽;冯丽珊;黄丽卿;吴志周;黄东辉;卢和琨;李育林;郭震宇 刊期: 2007年第12期

  • 检验医学专业临床微生物学实习教学改革探讨

    对检验医学专业临床微生物学实习进行系列教学改革,包括系统理论知识培训、系统实践操作技能培训、科研能力培训和考核方式改革.

    作者:芮勇宇;耿穗娜;王前;裘宇容 刊期: 2007年第12期

  • 结核病患者生存质量及其影响因素的定性研究

    目的 探讨定性研究方法在结核病患者的生存质量及其影响因素中的应用.方法 联合采用专题小组讨论和个人深入访谈对调查对象进行访谈,探讨结核病患者的生存质量及其影响因素.结果 结核病影响所有预测领域的生存质量,包括总体健康感觉、躯体感觉、心理健康、躯体功能、角色功能和社会功能;病人的社会耻辱感、药物负担、长期治疗的耐受性、性功能的紊乱、收入的减少以及恐惧也会对病人的生存质量产生一定的影响.结论 尽管有合适的药物治疗,结核病及其治疗仍然对病人的生存质量有显著的影响.因此,医疗工作者在对患者进行治疗的同时,不仅要关注其躯体康复还必须提高他们的生存质量.

    作者:刘秀惠;杨本付;庄斌;颜炳光;王银成 刊期: 2007年第12期

  • 2007年深圳市宝安区居民流感样疾病发病情况电话调查

    目的 快速评估2007年元旦前后(2006年12月17日至2007年1月13日)深圳市宝安区居民流感样疾病发病、就诊及流感疫苗接种情况.方法 使用Mitofsky-Waksberg二阶段抽样方法,用深圳市宝安区电话局向号和随机数字相结合产生的电话号码,对300户城区居民进行电话调查.结果 成功调查300户(863人),流感样病例罹患率为8.7%,男女性别总罹患率无统计学意义,0~9 岁年龄组女性罹患率明显高于男性;居民流感疫苗接种率为15.2%(131/863),接种组和未接种组罹患率有统计学意义,0~9 岁年龄组男女接种率有统计学意义;长病程30 d,短1 d,中位数为4 d;75例病例中48人(64%)未去医院就诊;治疗费用在100元以下为53例(70.7%);慢性病患者与非慢性病患者流感样疾病罹患率无显著差别;27例去医院就诊病例看病时均不带口罩,71个应答者患病时在公共场所均不带口罩.结论 深圳市宝安区存在一定程度的流感样疾病流行,电话调查是快速、易行、经济的调查方法,幼儿特别是幼年女性儿童是我们预防的重点人群,流感疫苗对流感样疾病发生有一定的预防作用,群众对流感样疾病的认识有待进一步加强,相关部门应加强呼吸道疾病院内感染控制和居民健康教育工作.

    作者:马智超;邓立权;吴泰顺;周小涛;陈兵;余家麟;黄振宇;朱奕 刊期: 2007年第12期

  • 102例女性泌尿系感染临床分析

    目的 探讨女性泌尿系感染(UTI)的临床特点,以提高临床诊断、治疗水平.方法 收集2003年1月-2006年12月102例女性UTI的病例进行检索,对其发病特点、感染部位、合并全身疾病状况、致病菌分布、治疗效果等进行回顾性分析.结果 102例UTI患者,上尿路感染57例(55.90%),下尿路感染45例(44.1%);复杂性尿路感染85例(83.30%),非复杂性尿路感染17例(16.7%);合并全身疾病依次为泌尿系结石、泌尿系肿瘤、糖尿病,慢性肾实质病变,性传播疾病等.致病菌中革兰阴性菌(64.3%),其中又以大肠埃希菌为主(40.5%),革兰阳性菌(31%),其中又以屎肠球菌为主(17.9%).治疗总有效率为87.3%.结论 女性UTI以上尿路感染且合并全身疾病者居多,致病菌多为革兰阴性菌,提示临床医师诊断时注重感染部位鉴别、致病菌分布以针对性选择抗生素,及时治疗合并的全身性疾病.

    作者:吴文;徐巧兰;周耀辉 刊期: 2007年第12期

  • 孕中期弓形虫感染对胎鼠生长发育及营养状况的影响

    目的 探讨孕中期弓形虫感染孕鼠对胎鼠生长发育及营养状况的影响.方法 BALB/c孕鼠在孕第8天经腹腔接种弓形虫速殖子,于孕14、16、18 d处死,剖取胎鼠.记录胚胎总数、死胎数、活胎数.测量活胎身长、尾长.火焰原子吸收分光光度法测定活胎体内Zn、Cu、Fe微量元素含量.采用考马氏亮蓝G-250染色法对胎鼠总蛋白进行定量分析.结果 ①在孕14、16、18 d,染虫组的胚胎总数、活胎数、胎鼠的平均体重比对照组均明显减少(P<0.05).染虫组胎鼠平均身长、尾长在孕14 d时虽有下降,但无统计学意义(P>0.05),而孕16、18d时均明显下降(P<0.05).②染虫组胎鼠体内Zn含量在孕14~18 d均低于对照组(P<0.05);Cu含量在孕14 d与对照组无差异,而在孕16、18 d均低于对照组(P<0.05);Fe含量在孕14~18 d均低于对照组(P<0.05).③染虫组孕14 d胎鼠总蛋白含量与对照组无差别(P>0.05),而孕16、18天均明显减少(P<0.01).结论 孕中期弓形虫感染孕鼠,可引起胚胎营养不良和发育障碍.

    作者:赵晋英;侯玉英;李艳伟;刘智深;饶华祥;徐秀文;张杰;侯丽萍 刊期: 2007年第12期

  • 广州市2006年病毒性肝炎流行特点分析

    目的 分析广州市2006年病毒性肝炎的发病特点,掌握流行规律,提出防控对策.方法 对广州市2006年法定传染病综合年报表和生育期妇女乙肝病毒感染状况监测结果进行分析.结果 广州市2006年病毒性肝炎报告发病率为119.5/10万,死亡率为0.3/10万.乙肝发病多,占已分型肝炎的76.2%,发病率为83.2/10万.15岁以下人群乙肝发病200例,占乙肝总报告病例数的3.2%,继续维持在较低水平.共监测生育期妇女3 952人,HBsAg阳性576人,阳性率为14.6%.HBsAg、HBeAg、抗-HBc三项阳性133人,占3.4%.HBsAg、抗-Hbe、抗-HBc三项阳性329人,占8.3%.结论 乙肝发病率直接影响病毒性肝炎总发病率.对儿童进行乙肝疫苗免疫是控制乙肝的主要策略.必须加强对流动人口的管理力度,杜绝乙肝病毒经血传播.

    作者:蔡衍珊;刘于飞;王玉林;胡文穗;陈雄飞 刊期: 2007年第12期

  • 三七三醇皂苷对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用和脑血流量的影响

    目的 探讨三七三醇皂苷(PTS)对局灶性脑缺血损伤的保护作用.方法 将大鼠随机分成6组:假手术组,模型组,PTS25、50、100 mg/kg组和阳性对照药血栓通注射液(XST)组;采用栓线法使大脑中动脉闭塞(MCAO)建立大鼠局灶性脑缺血模型,于造模24 h后进行行为学评分,测定脑组织含水量以及脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量,计算脑梗塞面积百分比以及进行组织病理学检查.结果 三七三醇皂苷50、100 mg/kg能明显缓解脑缺血大鼠的行为学症状,减轻其脑水肿程度,降低血清中MDA含量和升高SOD含量,并能减少其脑梗塞面积,减轻脑组织病理学损伤.结论 PTS对大鼠局灶性脑缺血有较明显的保护作用,增加脑血流量可能为治疗作用机理之一.

    作者:陈健文;蓝秀健;陈少锐;马仁强;徐索文;赖文珊;周小石;刘培庆 刊期: 2007年第12期

  • 多元化考核方式在病原生物学与免疫学综合实验考核中的应用

    目的 培养学生自主学习性,增强学生实际动手操作能力.方法 在病原生物学与免疫学实验整合的基础上,建立了包括实验技能操作、实验报告评估、设计性实验、标本考试及实验理论考试等在内的多元化考核方式.结果 实践成功证明了其可行性,取得了预期成效.结论 多元化考核方式的建立对培养具有创新精神和创新能力的高素质人才、提高课程教学质量具有极其重要的作用.

    作者:张泽华;宋文剑;胡松;许楚娟;程喻力;黄丽霞;邱文洪 刊期: 2007年第12期

  • Survivin及其剪接变异体survivin-△Ex3,survivin-2B mRNA在乳腺癌中的表达和临床意义

    目的 观察乳腺癌组织中survivin及其剪接变异体survivin-△Ex3,survivin-2B mRNA表达情况,并探讨其与临床病理学指标的关系.方法 以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测50例乳腺癌及癌旁5 cm正常乳腺组织标本中的凋亡抑制因子survivin及其剪接变异体survivin-△Ex3、survivin-2B mRNA表达,半定量分析电泳结果.免疫组化法检测乳腺癌石蜡标本中的雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和HER-2基因.结果 50例乳腺癌标本中survivin及其剪接变异体survivin-△ Ex3、survivin-2B mRNA均高表达,与癌旁正常乳腺组织中差异有统计学意义(P<0.01),survivin mRNA与survivin-△Ex3,survivin-2B mRNA在乳腺癌组织中的高表达呈正相关(P<0.05),survivin-△Ex3,survivin-2B mRNA的表达与淋巴结转移有关(P<0.05).结论 Survivin及其剪接变异体survivin-△Ex3、survivin-2B系重要的凋亡蛋白抑制因子,与其他预后指标联合检测可望对患者的治疗以及预后作出更准确的预测.

    作者:贺勇;章乐虹;张昊;杨基鹏 刊期: 2007年第12期

  • 人体寄生虫种质资源的保存与利用

    人体寄生虫种质资源具有重要的保存与利用价值.中山大学中山医学院收藏保存有较丰富的人体寄生虫种质资源,分属于4门、12纲、43科、189属、496种,包括36 196份玻片标本以及日本血吸虫、华支睾吸虫、广州管圆线虫、弓形虫和细粒棘球绦虫的cDNA文库等.这些标本在教学、科研、学术交流中发挥了重要的作用.

    作者:吕志跃;梁炽;郑焕钦;甘明;吴瑜;孙希;吴忠道 刊期: 2007年第12期

  • 孕期营养宣教效果初步评价

    目的 对早孕、中晚孕的孕妇进行营养知识宣教和指导,并对宣教效果进行初步评价.方法 随机抽取我院门诊孕妇,其中自愿接受营养宣教的271例早孕孕妇为干预组A、207例中晚孕孕妇为干预组B,孕期未接受营养宣教的256例孕妇为对照组,比较两干预组孕妇宣教前后营养知识知晓情况的变化,观察干预组和对照组的妊娠结局.结果 宣教前干预组B孕妇营养知识知晓率明显高于干预组A(P<0.05),宣教后两组孕妇营养知识知晓率较宣教前均有很大程度的提高(P<0.05).从妊娠结局看,干预组A中妊高征、剖宫产及巨大儿的发生率明显低于对照组(P<0.05),干预组B中剖宫产和产后出血的发生率也低于对照组(P<0.05).结论 孕期营养宣教能有效提高孕妇营养知识水平,并能明显降低部分妊娠并发症的发生.

    作者:胡晨;戴咏梅;吴小丽;徐芾;张悦;杨莉;黎枫;吴江平 刊期: 2007年第12期

  • 广州市2005-2006年鼠疫宿主动物监测结果分析

    目的 了解广州市鼠疫宿主动物的种群构成及数量分布情况,为鼠疫防治工作积累基础资料.方法 采用夜笼法.对捕获鼠类及捡获蚤类进行鉴定;计算鼠带蚤率和蚤指数;用鼠疫IHA法检测鼠疫F1抗体.结果 捕获鼠形动物1 797只,分属2目2科4属6种.其中啮齿目动物1 707只,食虫目动物90只,总鼠密度为10.80%,鼠密度为10.26%;在171只鼠形动物中发现有蚤鼠只61只,捡获蚤265匹,鼠体表蚤经鉴定为印鼠客蚤、缓慢细蚤;鼠染蚤率为35.67%,总蚤指数为1.55;黄胸鼠蚤指数为2.56;未查出鼠疫F1抗体.结论 褐家鼠仍是广州市主要鼠种,主要蚤种是印鼠客蚤,未发现鼠间鼠疫流行迹象,黄胸鼠蚤指数较高,应引起重视.

    作者:潘志明;郭荣同;高雨藩;任文锋;刘小宁;李钏华 刊期: 2007年第12期

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    目的 了解肇庆市人群华支睾吸虫感染现状,为今后的防治工作提供依据.方法 采用分层随机抽样法进行人群抽样,用改良加藤氏法粪检华支睾吸虫虫卵.结果 全市共调查10 386人,发现华支睾吸虫感染498人,感染率为4.79%.其中男性感染率为6.01%,女性感染率为3.51%;以50~59 岁年龄组人群感染率高;重点人群感染率远高于一般人群;高要市是全市感染严重的地区,其感染率为19.53%,其次是鼎湖区,感染率为11.65%.结论 肇庆市山区县属华支睾吸虫病低流行区,而淡水鱼养殖区的高要市及鼎湖区属华支睾吸虫高、中流行区,是我市华支睾吸虫防控的重点所在.建议加强政府领导,全社会共同参与,采取以行为干预及对重点地区、重点人群进行查治为主的综合防制措施,以降低人群华支睾吸虫感染率,控制华支睾吸虫病的流行.

    作者:郭艳玲;区意;高向雄;李伟文;伍立;周少恩 刊期: 2007年第12期

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    目的 探讨江西省蛔虫感染的危险因素.方法 采用1:1匹配的病例对照研究,选择改良加藤厚涂片法检查蛔虫卵阳性者为病例组,同一调查县粪检虫卵阴性者为对照组,按性别、年龄(±5)配对,共收集255对病例和对照.Epi Info 6.0建立数据库,SAS8.2软件进行单因素和多因素条件Logistic回归分析.结果 单因素及多因素条件Logistic回归分析表明,饭前、便后洗手是蛔虫病的保护因素,OR值分别为0.352和0.474;瓜果不洗即食、喝生水是蛔虫病的危险因素,OR值为1.753和1.722;使用卫生厕所是可能的保护因素,单因素Logistic回归OR值为0.375.结论 饭前、便后洗手,瓜果不洗即食和喝生水是江西省蛔虫感染的主要影响因素.

    作者:谢曙英;陈红根;曾小军;姜唯声;杭春琴 刊期: 2007年第12期

  • 四种初筛试验检测耐甲氧西林葡萄球菌的评价

    目的 评价四种初筛试验检测耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的价值.方法 收集临床分离金黄色葡萄球菌100株、凝固酶阴性葡萄球菌51株,分别进行头孢西丁纸片、MHA中添加4%NaCl的头孢西丁纸片、MHA中添加2%NaCl的苯唑西林纸片、苯唑西林-盐琼脂,以PBP2a胶乳凝集作为MRS检测标准,按CLSI 2006版标准操作和判读结果.结果 对于金黄色葡萄球菌,头孢西丁纸片、MHA中添加4%NaCI的头孢西丁纸片、MHA中添加2% NaCl的苯唑西林纸片、苯唑西林-盐琼脂检测MRS灵敏度和特异性分别为96.3%和100.0%、85.2%和100.0%、77.8%和100.0%、92.6%和94.5%,其中2株苯唑西林-盐琼脂24 h未生长但延长至48 h生长,48 h内敏感性100.0%;对于凝固酶阴性葡萄球菌,四种方法检测MRS灵敏度和特异性分别为97.8%和80.0%、95.6%和80.0%、95.6%和80.0%、100.0%和80.0%(P>0.05).结论 四种方法均能可靠检测MRS,头孢西丁纸片和苯唑西林-盐琼脂具有较高应用价值.

    作者:宋焰桃;徐元宏 刊期: 2007年第12期

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主办:广东省寄生虫学会 中华预防医学会