张贤昌;方悦怡;张启明
目的克隆人血管紧张素转换酶2基因(ACE2),并构建其真核表达载体.方法用Trizol试剂从人肺组织提取总RNA,然后经逆转录得到人ACE2的cDNA.半巢式PCR方法扩增人ACE2基因后,先进行T-A连接,转化感受态大肠杆菌DH5α,接种含IPTG和x-Gal平板筛选重组子,并进一步亚克隆至真核表达质粒载体pcDNA3.1(+).经PCR扩增、酶切和序列测定方法鉴定重组质粒.结果获得了人ACE2的编码基因,并成功构建了其真核表达载体.结论人血管紧张素转换酶2是SARS冠状病毒的功能受体,与SARS冠状病毒Spike蛋白上的受体结合域相结合,在SARS冠状病毒感染和传播中起重要作用,本工作为研究SARS冠状病毒感染及跨种属传播机制奠定了基础.
作者:肖洪广;高俊;刘利东;林勇平;黄泽红;李宁 刊期: 2006年第07期
目的研究肇庆市端州区孕妇TORCH感染与异常妊娠的相关性.方法采用抗体捕获ELISA法对产前检查及近期自然流产诊治的妇女共778例,进行TORCH-IgM抗体检测.结果480例无异常妊娠史者阳性病例54例,IgM总阳性率为11.24%;285例有异常妊娠史者阳性病例126例,IgM总阳性率为44.21%(P<0.05);13例近期自然流产者阳性病例9例,IgM总阳性率为69.22%(P<0.05).结论在孕早期自觉进行TORCH感染检测,是做好优生优育工作的首要环节.
作者:陈金强 刊期: 2006年第07期
目的研究微囊藻毒素(microcystin,MC)损伤肝细胞的毒性机制.方法以不同浓度的微囊藻毒素LR(MCLR)处理L-02肝细胞,通过光镜和电镜下的形态观察、DNA片断化分析、线粒体膜电位变化等了解MCLR对肝细胞的毒性效应.结果光镜下观察表明,50μg/ml MCLR处理可使细胞变圆、萎缩、不贴壁生长,电镜下L-02细胞呈现皱缩、膜发泡及染色质凝聚并边缘化等变化,这是典型的细胞凋亡形态特征,但电镜下没有观察到凋亡小体的形成;DNA电泳表明凋亡细胞没有出现明显的DNA ladder,与电镜观察的结果一致.流式细胞仪检测发现以50μg/ml MCLR处理60h后,细胞的线粒体膜电位显著下降.结论微囊藻毒素损伤线粒体可能是其损伤细胞的途径之一,这种微囊藻毒素诱导的无DNA片段断裂的凋亡现象属首次报道,具体机制有待进一步阐明.
作者:雷腊梅;宋立荣;韩博平 刊期: 2006年第07期
目的研究体外缺氧对乳腺癌细胞系MCF7浸润能力及其细胞表面金属蛋白酶MMP-2、丝氨酸蛋白酶u-PA受体u-PAR和细胞基质蛋白FN的表达的影响.方法本实验模拟体外缺氧环境,观察缺氧对乳腺癌细胞MCF7浸润穿透Metrigel的能力;以及采用半定量RT-PCR检测细胞表面MMP-2、u-PAR和FN表达情况.结果缺氧状态下MCF7细胞的浸润能力明显增强;其表面的MMP-2、u-PAR、FN基因表达升高.结论缺氧可以上调与乳腺癌浸润转移有关的基因的表达,缺氧条件促进乳腺癌细胞的浸润转移.
作者:郭煜;方荸荠;潘学谊;石菁华 刊期: 2006年第07期
目的应用PCR-SSCP检测常规及BACTEC培养耐INH、RFP、SM的耐多药结核分枝杆菌临床分离株KatG、rpoB、rpsL基因突变,分析其敏感性和特异性,评价其在检测结核分枝杆菌耐药性方面的价值和临床实用性.方法22株常规培养和8株BACTEC培养检出的高浓度及低浓度耐INH、RFP、SM耐多药结核分枝杆菌分离株,分别用PCR-SSCP检测KatG、rpoB、rpsL基因,观察其电泳条带,并与结核菌标准株H37Rv对比.结果22株常规培养耐INH、RFP、SM的耐多药结核分枝杆菌分离株中,KatG、rpoB、rpsLPCR扩增产物,用SSCP分别检出KatG基因16株(72.7%)、rpoB基因19株(86.4%)和rpsL基因14株(63.6%).8株BACTEC培养耐INH、RFP、SM的耐多药结核分枝杆菌分离株中分别检出KatG基因5株(62.5%),rpoB基因6株(75%)、rpsL基因5株(62.5%).综合两者KatG、rpoB和rpsL基因检出率分别为70.0%(21/30)、83.3%(25/30)和63.3%(19/30).高浓度耐药与低浓度耐药分离株中的检出率有显著差异(P<0.05),常规培养与BACTEC培养分离株中的检出率无显著差异(P>0.05),与结核菌标准株H37Rv电泳条带对比,特异性为100%,敏感性97%.结论PCR-SSCP敏感、特异,可快速检测结核分枝杆菌的KatG、rpoB和rpsL基因,可用于耐多药结核分枝杆菌的临床检测.
作者:刘良安;李秋梅;张志军 刊期: 2006年第07期
目的探讨带状疱疹后遗神经痛(PHN)伴发内脏反应的临床特点.方法分析25例带状疱疹后遗神经痛伴发内脏反应的临床表现、病程特征及诊疗经过,并追踪随访.结果25例的PHN均为脊神经损害,呈节段性分布,伴有感觉过敏带,8例(32%)有轻微脊髓横贯性损害;内脏反应为反复发作的功能性激惹症状,其中消化系18例占72%,泌尿系7例占28%,与PHN同时或随后发生,早期漏诊误诊21例(84%);以抗病毒为主的综合治疗有效,复发率低.结论PHN临床特征为胸段脊神经痛,呈节段性分布;伴发内脏反应常见为消化、泌尿系统激惹性症状,病程呈反复发作性经过;临床误诊漏诊率较高;本病预后良好.
作者:黄宗青;李爱东;刘洪涛;陈锦辉 刊期: 2006年第07期
目的了解三水区健康人群百日咳、白喉、破伤风抗体水平,评价百白破疫苗的免疫效果,为今后免疫规划工作制定科学的免疫方案和接种质量监测提供依据.方法选择2~4、6~8、13~15、25~39岁4个年龄组的健康人群进行抗体水平监测.结果百日咳、白喉、破伤风抗体水平保护率分别为90.58%、76.97%和84.82%.各年龄组GMRT差异有非常显著性(x2=14.9,P<0.01),抗体水平高是6~8岁组,低的是25~39岁组.白喉和破伤风抗毒素,各年龄组间平均抗毒素差异有非常显著性(P<0.01);2~15岁各年龄组抗体水平均较高,25~39岁组则明显较低.25岁以上的育龄妇女破伤风免疫水平,平均抗毒素为0.0082IU/ml,低于保护水平者近50%.结论三水区健康人群百日咳、白喉、破伤风抗体达到保护水平者在75%以上,百日咳、白喉、破伤风在15岁以下群体中形成较好的免疫屏障,保护水平在82%~100%之间,显示目前使用的百白破联合疫苗免疫效果良好,育龄妇女破伤风低于保护水平者近50%,提示今后应加强育龄妇女破伤风免疫水平监测,在巩固儿童接种率和接种质量的基础上,有必要制订可行的成人免疫程序.
作者:蔡文安;范子健 刊期: 2006年第07期
目的构建含人幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)尿素酶B(Urease B,UreB)编码基因的重组质粒,测定、分析其核苷酸序列,并在E.coli Top10中表达,研究其抗原性.方法应用PCR技术从Hp DNA染色体中扩增UreB编码基因片段,将其T-A克隆和测序,并与GenBank公布的其它Hp菌株基因序列比较,再将目的基因克隆至表达载体pGEX-4T-1中进行表达,用GST亲和层析对其进行纯化,纯化产物用于对29株小鼠抗Hp-全菌单克隆抗体(mAb)的鉴定及与Hp感染患者血清进行Western blot.结果扩增的UreB基因全长1 704 bp,并在GenBank上登录(No.DQ141576),与GenBank公布的其它Hp菌株的核酸同源性为97%~99%,表达的UreB融合蛋白的相对分子量为91 000.29株小鼠抗Hp-全菌mAb中有6株是针对UreB抗原的,纯化产物可被病人血清和抗UreB的鼠单克隆抗体识别.结论重组UreB具有较好的抗原性,为Hp检测诊断和疫苗的研究奠定了基础.
作者:李妍;宁云山;龙敏;董文其;李明 刊期: 2006年第07期
目的分析未经拉米夫定治疗的HBV病毒YMDD变异出现的情况,探讨HBV病毒YMDD变异出现可能的机理,了解以YMDD自然变异的慢性HBV感染患者的肝损害情况.方法对140例HBV DNA阳性,未经拉米夫定治疗的慢性HBV感染者进行YMDD检测,同时检测谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、血清总胆红素(TBIL)、白蛋白(ALB)、发病年龄、HBeAg与抗HBe等临床相关指标.结果140例未经拉米夫定治疗的慢性乙肝病毒感染者中20例自然发生YMDD变异,YMDD变异组与未变异组引起的肝损害无显著性差异(P>0.05).YMDD变异与HBeAg与抗HBe的阳性表达无明显差异(P>0.05).结论HBV病毒YMDD变异株作为一个准种与野毒株同时存在感染个体,YMDD变异对肝损害严重性无关,YMDD变异与HBeAg阳性率与抗HBe阳性率无明显差异.
作者:区映研;卫建均;曾文铤;朱科伦;马佩球 刊期: 2006年第07期
目的分析梅州市艾滋病流行和防治现状,探讨对策.方法对1992~2005年梅州市艾滋病监测结果和防治情况进行分析.结果自1992年发现首例HIV感染者,至2005年底累计报告HIV感染者29例,死亡17例.感染者主要以男性(79.31%)、20~49年青壮年(75.86%)为主;以性传播为主,占62.07%;血液传播占13.79%,母婴传播占3.45%.结论梅州市艾滋病预防控制进入关键时期.今后应继续加强艾滋病监测和预防控制网络建设,实施以宣传教育为主的艾滋病综合性预防措施.
作者:林立新;杨翼龙 刊期: 2006年第07期
目的探讨治疗小儿包皮过长、包茎的较理想术式.方法从小儿中随机抽取100例包皮环套术病例作为实验组,取小儿包皮环切术的93例作为对照组进行临床观察、随访、对比.结果环套组与环切组比较,手术时间分别(8±2)min和(30±5)min(P<0.001),术中出血分别(1±0.5)ml和(8±2.5)ml(P<0.001),外观差分别1%和8.6%(P<0.05);术中麻醉要求、术后护理要求和工作量环套组均明显低于环切组.结论小儿包皮环套术麻醉风险低、操作简单、手术时间短、术中无出血、术后痛苦少、术后护理简单方便,是较理想的术式.
作者:曾海锋;陈伯棠;黄擎雄;赖梅;冯平;吴志扬;郑小明 刊期: 2006年第07期
目的研究新装修客房中挥发性有机毒物对人体及小鼠外周淋巴细胞DNA损伤的影响.方法通过动物实验和人群流行病学调查相结合的方法,应用单细胞凝胶电泳法,分别检测在新装修场所和未装修场所工作半年以上女服务员外周血淋巴细胞DNA的损伤和实验动物外周血淋巴细胞DNA的损伤.结果在新装修场所工作半年以上女服务员的外周血淋巴细胞DNA断裂比对照组高,差别具显著性意义(P<0.01).动物实验组外周血淋巴细胞DNA的损伤高于对照组,两组比较具有显著性差异(P<0.01).结论新装修住房中挥发性有机毒物对人体外周血淋巴细胞存在DNA损伤作用.高浓度有机挥发物可引起小鼠外周血淋巴细胞DNA损伤.
作者:王秀英;余淑苑;牛恩宏;康莉 刊期: 2006年第07期
目的研究马拉色菌毛囊炎患者皮损区和非皮损区马拉色菌菌种的检出以及菌种的构成.方法采用菜子油培养基,根据菌落形态和生理生化特点进行菌种鉴定.结果从毛囊内共分离出326株马拉色菌,其中球形马拉色菌255株,占78.22%;合轴马拉色菌54株,占16.56%;糠秕马拉色菌17株,占5.22%.从皮损部位疹间皮肤皮屑分离马拉色菌298株,其中合轴马拉色菌221株,占74.16%;糠秕马拉色菌43株,占14.43%;球形马拉色菌30株,占10.07%;钝形马拉色菌4株,占1.34%.菌种检出率和菌种构成差异均有显著性(P<0.05和P<0.0001).结论球形马拉色菌是马拉色菌毛囊炎的优势致病菌,正常皮肤则以合轴马拉色菌为主.
作者:刘玉梅;黎小东;邢蕴博;刘金花;龚业清 刊期: 2006年第07期
目的比较三种不同给药方法在老年患者胃镜检查中的镇静作用及对呼吸循环的影响.方法选择老年胃镜检查患者240例,单盲随机分为三组,每组80例.Ⅰ组先静注2%利多卡因2 ml,接着静注丙泊酚1.6 mg/kg,1~2 min静注完毕,待睫毛反射消失后开始进镜;Ⅱ组静注2%利多卡因2ml,再静注依托咪酯0.2mg/kg,待睫毛反射消失后开始进镜;Ⅲ组先静注2%利多卡因2 ml,再静注丙泊酚0.8 mg/kg+依托咪酯0.16mg/kg,待睫毛反射消失后开始进镜.观察术中镇静程度及记忆缺失、苏醒时间、HR、SBP、DBP和脉搏血氧饱和度(SaO2)的变化、术后恶心呕吐.结果Ⅰ组血压下降,注药前后有显著差异(P<0.05),Ⅱ组、Ⅲ组两组血压注药前后无显著性差异(P>0.05);三组患者镇静程度和苏醒时间是无显著性差异;Ⅱ组术后有明显恶心呕吐,Ⅰ组、Ⅲ组无恶心呕吐.结论Ⅲ组丙泊酚0.8 mg/kg+依托咪酯0.16 mg/kg辅助老年患者胃镜检查是安全、有效、舒适的.
作者:高林兵;易晓青 刊期: 2006年第07期
目的观察流行性乙型脑炎患者用布洛芬降温治疗的疗效及安全性.方法药物降温组胃管注入布洛芬制剂(美林口服液),按年龄剂量每4 h一次,至体温稳定在38℃以下,其他治疗与对照组相同.结果治挝疗后1 h、2 h、4 h、12 h、24h、48 h两组病例体温对比有显著差异(P<0.01),治疗组在治疗48 h内降温效果较对照组更好;治疗组神志异常恢复更快(P<0.05);两组病人均未发生严重副作用.结论流行性乙型脑炎患者用布洛芬降温较单纯物理降温效果更佳,病情恢复更快,并且安全性高.
作者:何日东;庞增;张木春 刊期: 2006年第07期
目的分析开平市人体重要寄生虫病的流行情况,评估防治效果,为制定防治策略提供依据.方法收集开平市1989、1997、2002年三次寄生虫病调查所得数据进行分析,了解当地人体重要寄生虫病的流行态势.结果1989、1997、2002年三次调查,开平市检查人数依次为2 029人、1 030人、1 516人;总感染率依次为50.02%、26.99%和11.21%;蛔虫感染率依次为34.84%、7.09%、4.68%;鞭虫感染率依次为13.26%、2.82%、0.59%;钩虫感染率依次为13.80%、0.68%、0.59%;12岁以下儿童蛲虫感染率依次为42.56%、37.90%、25.49%;华支睾吸虫感染率依次为1.68%、0.19%、4.42%.结论开平市蛔虫、鞭虫、钩虫感染率呈显著下降趋势,感染人数显著减少;蛲虫感染率稳步下降,但仍处于较高水平;华支睾吸虫感染率呈上升趋势.应加强蛲虫病和华支睾吸虫病的防治工作.
作者:张贤昌;方悦怡;张启明 刊期: 2006年第07期
目的以丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)F蛋白作为抗原,检测HCV感染者血清中的相应抗体,观察F抗体在国内HCV感染人群中的阳性率及其与HCV感染的相关性.方法基因工程重组表达的F蛋白经亲和柱纯化后,包被微量滴定板,以EL,ISA法检测35份HCV感染者、8份非HCV感染的肝病患者及10份健康者的血清标本.结合患者疾病资料,统计学分析F抗体与HCV感染的相关性.结果在35份HCV感染者血清标本中,F抗体的阳性率为43%(15/35),对照组(8份非HCV肝病患者及10份健康者)血清中无一例F抗体阳性,两组之间有显著的统计学差异(P<0.005).但未发现F抗体阳性与患者年龄、性别、病程及血清HCV载量之间的相关性.结论本研究首次报道了F抗体在国内HCV感染人群中的检出情况,将有助于F蛋白的致病性研究,也对探讨F蛋白的功能及进一步将其作为HCV感染检测指标的研究有促进作用.
作者:武文斌;邵圣文;栾洁;刘敏;丁惠;戚中田 刊期: 2006年第07期
目的探讨T淋巴细胞亚群及CD4+CD25+T细胞在SLE病人发病中的临床意义.方法采用流式细胞术检测了68例SLE患者(其中活动期病人38例,稳定期病人30例)以及30例健康体检者外周血CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4+CD45RA+、CD8+CD28+、CD8+CD28-T细胞亚群以及CD4+CD25+T细胞水平.结果与正常对照组相比,活动期SLE病人CD3+CD4+、CD4+CD45RA+细胞亚群的百分率明显降低(P=0.000,P=0.001),CD3+CD8+、CD8+CD28-细胞亚群的百分率明显升高(P=0.000,P=0.000).稳定期患者CD8+CD28+细胞水平明显高于活动期和对照组(P=0.011,P=0.435),CD3+CD4+、CD4+CD45RA+水平高于活动期,但无显著性差异(P=0.067,P=0.081),CD8+CD28-T细胞亚群无明显变化(P=0.997).活动期病人CD4+CD25+T细胞百分率明显低于正常对照组及稳定期病人(P=0.000,P=0.000),稳定期病人与对照组之间无显著性差异(P=0.572).结论SLE患者T淋巴细胞亚群的水平是异常的.病人外周血CD8+CD28-T细胞亚群的比例升高与疾病的病程和临床表现相关联,它的升高在疾病的稳定中起重要作用.CD4+CD25+T细胞水平降低可能是导致机体抑制自身免疫反应的功能减弱并引发SLE发生发展的重要因素.
作者:裘宇容;杨春莉;李娟;郑磊;王春燕;包杰 刊期: 2006年第07期
目的了解临床分离的金黄色葡萄球菌(SA)产肠毒素(SE)的情况及耐药现状.方法对从临床标本中分离出的260株SA,用反向间接血凝试验检测其肠毒素,按2005年美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)的标准,用K-B法对260株SA进行药物敏感性试验,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检测分别用检测头孢西丁及乳胶凝集检测PBP2a方法进行.结果260株SA中有172株携带肠毒素,占66.2%,主要为SEA型10.8%(28/260)、SEB型14.6%(38/260)、SEC型10.0%(26/260),同时携带二种或二种以上肠毒素的占23.8%(62/260);其中MRSA 134株,全部携带肠毒素,且以SEA、SEB和SEC为主,分别为19.4%、16.4%和13.4%;甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)126株,携带肠毒素率为30.0%(38/126),以SEB为主,占9.5%.用头孢西丁及检测PBP2a的方法检测MRSA,检出率无显著意义(P>0.05);SA对临床常用的抗菌素除万古霉素及替考拉宁较敏感(100.0%敏感),其它的抗菌素存在多重耐药性,且MRSA的耐药性比MSSA的强.结论临床分离的SA株大部分都携带肠毒素,MRSA的带毒率及耐药性均高于MSSA;临床应重视SA肠毒素和MRSA的检测,合理使用抗菌素.
作者:李红玉;龙军;徐霞 刊期: 2006年第07期
目的通过检测不孕症患者宫颈分泌物中沙眼衣原体(CT)、解脲支原体(UU)感染情况,探讨不孕与CT、UU感染的关系.方法采用聚合酶链反应(PCR)技术检测50例原发或继发不孕妇女(不孕组)及50例早孕妇女(对照组)宫颈分泌物中CT、UU感染情况.结果不孕组CT、UU感染率分别为28%、42%,显著高于对照组8%、12%(P<0.05).结论CT、UU感染是导致不孕的重要因素.
作者:何群双;杨云 刊期: 2006年第07期