吕永波；汪洋；牟建军
目的：建立体外培养人肺内微小动脉的方法，并观察其收缩的基本特性，为研究药物及各种活性因子对人肺血管的长期作用提供有效的实验模型。方法：取癌旁5 cm以上的肺组织，于冰浴和无菌条件下，利用显微操作分离出肺内微小动脉，制备成1．8～2．0 mm长的血管条，分2组，一组急性分离组（新鲜组）马上进行血管张力测定；另一组（培养组）置于含DMEM－F12培养基（内含10％胎牛血清、1％青链霉素）的培养皿内，通以95％O2、5％CO2混合气，在37℃的条件下培养48 h。进行血管张力测定时，用2根直径40μm的不锈钢丝平行穿过血管腔，钢丝的4个端分别固定于微血管张力测定仪浴槽内钳夹的4个螺丝上，采用累积给药法，分别给予血管受体依赖性收缩剂血栓素A2类似物U46619和内皮素－1（ET－1），血管非受体依赖性收缩剂60 mmol／L KCl，然后测定血管的张力变化。结果：培养组对血管收缩剂U46619和ET－1能产生浓度依赖性收缩，U46619的pD2为7．60±0．10，Emax为（136．40±6．17）％；ET－1的pD2为（7．17±0．22），Emax为（137．14±5．52）％，结果类似于新鲜组， U46619的pD2为7．78±0．11，Emax为（131．29±3．79）％；ET－1的pD2为7．53±0．15，Emax为（139．11±6．66）％，两组比较均无显著差异。培养组对血管非受体依赖性收缩剂60 mmol／L KCl产生的收缩力Emax为（7．67±0．85） mN；新鲜组的Emax为（7．73±0．97） mN，两组比较无显著差异。结论：采用血管器官培养的方法培养人肺内微小动脉48 h，能维持血管平滑肌的基本收缩特性，可作为研究各种物质对血管长效作用的有效模型。
作者：邝素娟；杨慧；李晓红；刘晓颖；饶芳；单志新；林秋雄；杨敏；余细勇；吴书林；邓春玉 刊期： 2016年第08期
目的：探讨儿茶酚抑素（ CST）对间歇低氧高血压大鼠的作用及机制。方法：健康雄性SD大鼠随机分为3组：control组、IH （间歇低氧组）组和IH＋CST组（于低氧前3 d皮下埋植含CST 20 nmol? kg －1? d－1的微量渗透泵）。后2组置于间歇低氧舱中，舱内氧浓度为（5±0．5）％～（21±0．5）％，低氧－复氧循环时间为120 s（60 s＋60 s），8 h／d，共3周。颈总动脉插管测收缩压（SP）、舒张压（DP）和平均压（MP），检测血浆中氧化／抗氧化损伤指标，Western blot 法检测主动脉和肾组织中核因子E2相关因子2（Nrf2）蛋白表达的变化。结果：SP、DP及MP，IH组均比control 组高（P＜0．01），而IH＋CST 组则显著低于IH 组（P＜0．01）。 IH组的MPO和MDA含量显著高于control组（P＜0．05），而SOD和羟自由基抑制率显著低于control组（P＜0．01）；IH＋CST组的MPO和MDA明显低于IH组（P＜0．05），SOD和羟自由基抑制率显著高于IH组（P＜0．01）。与control组相比， IH组大鼠主动脉和肾组织胞浆、胞核中Nrf2蛋白的表达均显著下调（P＜0．05）；IH＋CST组与IH组相比，胞浆中Nrf2蛋白的表达显著下调（P＜0．05），而胞核中Nrf2蛋白的表达显著上调（P＜0．05）。结论：CST有减轻间歇低氧致大鼠高血压的作用，该作用可能与其通过Nrf2－ARE信号通路调节氧化应激反应有关。
作者：陈然；范小芳；郑青青；丁露；薛峰；王永煜；龚永生 刊期： 2016年第08期
目的：探讨白藜芦醇对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞肥大的保护作用及对心肌肥大时内质网应激相关因子GRP78和GRP94表达的影响。方法：利用异丙肾上腺素诱导乳鼠心肌细胞建立心肌肥大细胞模型，将心肌细胞分为正常对照组、模型组（加入异丙肾上腺素0．3 mg／L作用48 h），白藜芦醇＋异丙肾上腺素组（加入异丙肾上腺素0．3 mg／L和白藜芦醇11．4 mg／L作用48 h）和白藜芦醇对照组（加入白藜芦醇11．4 mg／L）。检测心肌细胞表面积和心肌肥大标志物ANP表达评价心肌细胞肥大程度，检测细胞培养液中乳酸脱氢酶（ LDH）活性和丙二醛（ MDA）含量； Western blot 分析GRP78和GRP94的蛋白表达。结果：模型组与正常组比较，异丙肾上腺素作用心肌细胞48 h诱导心肌细胞肥大，内质网应激相关因子GRP78和GRP94蛋白表达均增高；白藜芦醇＋异丙肾上腺素组与模型组比较，白藜芦醇（11．4 mg／L）干预可以有效抑制异丙肾上腺素诱导的细胞肥大，同时降低GRP78和GRP94的蛋白表达，减少细胞培养液中乳酸脱氢酶LDH和MDA的释放。结论：白藜芦醇通过抑制内质网应激相关因子GRP78和GRP94表达，减轻自由基生成发挥对心肌肥大的保护作用。
作者：王珺；肖薇；李波；金莉；王国忠；林岩 刊期： 2016年第08期
目的：我们的前期实验发现，腺病毒中介的peroxiredoxin II （ Prx II）过表达可保护心肌细胞防止氧化应激所致的损伤，尽管这样，Prx II在器官和整体动物水平是否具有心肌保护作用，而且这一保护作用是否通过内质网应激发挥作用尚不清楚。方法：应用Langendorff系统构建离体心肌缺血再灌注损伤模型；结扎冠状动脉左前降支，缺血30 min再灌注30 min／3 h／24 h构建体内心肌缺血再灌注损伤模型。结果：离体心肌缺血再灌后，Prx II过表达小鼠心肌收缩大速率（＋dp／dtmax ）和心肌舒张大速率（－dp／dtmax ）恢复较正常对照组明显得到改善；Prx II心肌特异性过表达小鼠与野生型相比，离体和在体心肌缺血再灌后，心肌梗死面积均分别降低了69．13％和60．86％；体内心肌缺血再灌注，与野生型小鼠相比，Prx II心肌特异性过表达小鼠心肌细胞凋亡率降低了52．10％±5．32％；与野生型小鼠相比，Prx II心肌特异性过表达小鼠中内质网通路伴侣分子Hsp90、GRP94、PDI和p－eIF2α的表达量均明显降低（P＜0．05），但cleaved ATF6和XBP－1的表达量在2组小鼠中无明显差异。 p－Akt （Ser473）和p－Akt（Thr308）水平在野生型小鼠明显降低，在Prx II过表达小鼠中仍维持高表达水平（P ＜0．05）。结论：Prx II对缺血再灌注损伤心肌具有保护作用，其机制可能与拮抗p－eIF2α表达、增加p－Akt表达、阻断内质网应激启动的凋亡通路有关。
作者：王慧敏；石晓静；周文娟；耿雪鹏；姬亚歌；肖悦；黄欣；刘宏民；赵文 刊期： 2016年第08期
AIM:MicroRNAs ( miRNAs) were recognized to play significant roles in cardiac hypertrophy .But, it remains unknown whether cyclin/Rb pathway is modulated by miRNAs during cardiac hypertrophy .This study investigates the potential roles of microRNA-1 (miR-1) and microRNA-16 (miR-16) in modulating cyclin/Rb pathway during cardiomyocyte hypertrophy .METHODS:An animal model of hypertrophy was established in a rat with abdominal aortic constriction (AAC).In addition, a cell model of hypertrophy was also achieved based on PE-promoted neonatal rat ventricular cardiomyocyte .RESULTS:miR-1 and-16 expression were markedly de-creased in hypertrophic myocardium and hypertrophic cardiomyocytes in rats .Overexpression of miR-1 and -16 suppressed rat cardiac hypertrophy and hypertrophic phenotype of cultured cardiomyocytes .Expression of cyclins D1, D2 and E1, CDK6 and phosphorylated pRb was increased in hypertrophic myocardium and hypertrophic cardiomyocytes , but could be reversed by enforced expression of miR-1 and -16.CDK6 was validated to be modulated post-transcriptionally by miR-1, and cyclins D1, D2 and E1 were further validated to be modulated post-transcriptionally by miR-16.CONCLUSION: Attenuations of miR-1 and -16 provoke cardiomyocyte hypertrophy via derepressing the cyclins D1, D2, E1 and CDK6, and activating cyclin/Rb pathway.
作者： 刊期： 2016年第08期
目的：探究张应变条件下microRNA－33（miR－33）调控移植静脉内膜增生的机制，为缓解静脉移植内膜增生提供潜在治疗方法。方法：SD大鼠进行“套管法”自体静脉移植，Elastin－van Gesion染色观察内膜增生情况。使用FX4000细胞应力加载装置（ Flexcell International ）对静脉平滑肌细胞加载频率1．25 Hz、幅度10％的张应变以模拟静脉在动脉环境受到的张应变力学刺激。 qRT－PCR检测miR－33表达，Western blotting检测相关蛋白，BrdU增殖实验和CCK－8试剂盒检测细胞增殖。双萤光素酶报告基因验证miR－33与靶基因的作用关系。骨形态发生蛋白3（BMP3）特异性siRNA干扰片段、重组蛋白以及miR－33 in－hibitor和mimics用于研究细胞功能和相关信号通路。在体局部注射miR－33 agomir和antagomir来验证miR－33在静脉移植内膜增生中的作用。结果：移植静脉出现明显内膜增生，miR－33显著降低，而BMP3、p－Smad5和p－Smad2表达明显上升；牵拉条件下得到与移植静脉中相同的结果。双萤光素酶报告基因实验证明BMP3是miR－33的靶基因。 miR－33 mimics抑制BMP3及下游信号分子p－Smad2、p－Smad5表达和细胞增殖； miR－33 inhibitor 或者BMP3重组蛋白得到类似结果。在体注射miR－33 agomir降低BMP3及下游信号分子表达，亦可缓解静脉移植内膜增生。结论：miR－33－BMP3－Smad信号通路参与移植静脉平滑肌细胞增殖；miR－33可以缓解静脉移植内膜增生过程，具有潜在临床应用前景。
作者：黄凯；包晗；严志强；王璐；张萍；姚庆苹；施茜；陈小虎；王凯旋；沈宝荣；齐颖新；姜宗来 刊期： 2016年第08期
目的：研究全反式维甲酸（ all－trans retinoic acid，ATRA）对胃癌细胞SGC－7901存活率与放射敏感性的影响，并讨论其可能的机制。方法：MTT法检测细胞存活率；平板克隆形成实验和流式细胞术分别检测细胞的放射敏感性和细胞周期；实时荧光定量PCR（ RT－qPCR）检测细胞中Bax、Bcl－2、survivin与NF－κB的mRNA表达。结果：ATRA可降低SGC－7901细胞存活率，当浓度到达8μmol／L时，抑制作用达到大；ATRA联合X射线处理后，与单纯放射处理相比，平均致死剂量（D0）和准阈剂量（Dq）显著变小（P＜0．05），且拟合的生存曲线明显下移；ATRA能显著降低放射诱导的细胞G2／M期阻滞，下调SGC－7901细胞Bcl－2与survivin的mRNA表达（ P＜0．05），上调Bax与NF－κB的mRNA表达（P＜0．05）。结论：ATRA能够增加胃癌细胞SGC－7901的凋亡及放射敏感性，可能与抑制细胞周期G2／M期的阻滞作用、下调Bcl－2与survivin mRNA表达和上调NF－κB与Bax mRNA表达有关。
作者：王艳萍；赵先群；张向东；许威；向晓辉 刊期： 2016年第08期
目的：探究心脏心肌细胞与成纤维细胞间通过远距离连接———膜纳米管直接传输线粒体的生理学意义以及具体的传输机制。方法：通过激光共聚焦仪器的活细胞追踪功能，实时观测线粒体的运动及传输；利用免疫荧光双染的方法，观察线粒体与微管、微丝等结构的共定位，并使用微管抑制剂Nocodazole ，阻断微管的存在，以观察微管对线粒体传输的作用；使用West－ern blot、real－time PCR方法检测KIF5B蛋白的表达，继而通过使用转染KIF－5B－siRNA慢病毒方法敲减细胞中KIF5B，探究KIF5B的作用；运用TUNEL染色及高内涵检测的方法，检测心肌细胞的凋亡。结果：原代乳大鼠心肌细胞与成纤维细胞间形成的膜纳米管可以传输线粒体，线粒体在其中的平均运动速度（17．5±2．1） nm／s。在膜纳米管中，线粒体与微管存在共定位，线粒体的传输依赖于微管，并且KIF5B是膜纳米管中推动线粒体传输的马达蛋白，使线粒体可以从成纤维细胞中传输到心肌细胞中。在心肌细胞的缺氧－复氧模型的病理模型中，成纤维细胞通过将自身的线粒体传输到心肌细胞中，起到减少心肌细胞凋亡的保护作用。结论：作为一种新型的细胞连接，心肌细胞与成纤维细胞间形成的膜纳米管可以通过直接传输线粒体，从而减少受损心肌细胞的凋亡，这种传输依赖于微管及马达蛋白KIF5B。
作者：张江晖；沈静；吴济民；肖晗；何康敏；吕志珍；李子健；徐明；张幼怡 刊期： 2016年第08期
目的：探讨miR－130a在血管紧张素II（angiotensin II， Ang II）诱导心脏间质纤维化中的作用及分子机制。方法：埋植Ang II微渗泵制备小鼠心室重塑模型，超声心动检测小鼠心功能；离体培养乳鼠心脏成纤维细胞，real－time PCR和Western blot检测分子的基因及蛋白表达。结果：在埋植Ang II微渗泵的小鼠心肌组织以及Ang II刺激的乳鼠心脏成纤维细胞，Ang II可上调miR－130a的表达。小鼠腹腔注射25 mg／kg miR－130a 抑制剂锁核酸（locked nucleic acid， LNA）－anti－miR－130a可显著抑制Ang II引起的心肌组织中miR－130a表达增加，改善Ang II引起心脏间质纤维化及舒缩功能障碍。转染miR－130a mimic可进一步促进Ang II引起的纤维化相关分子的表达增加以及肌成纤维细胞转化，miR－130a inhibitor则可抑制Ang II的上述作用。过表达PPAR－γ可抑制Ang II以及Ang II和miR－130a mimic联合应用引起的纤维化相关分子的表达。结论：miR－130a通过调控PPAR－γ的表达参与Ang II的促纤维化效应。
作者：李丽；张城林；赵茜；吴立玲 刊期： 2016年第08期
AIM:The direct renin inhibitor aliskiren displays antihypertensive and antialbuminuric effects in humans and in animal models . Emerging evidence has shown that aliskiren localizes and persists in medullary collecting ducts even after treatment was discontinued . The purpose of the present study was to investigate whether aliskiren regulates renal aquaporin expression and improves urinary concen -trating defect induced by lithium .METHODS:The mice were either fed with normal chow or LiCl diet (40 mmol/kg dry food per day for first 4 days and 20 mmol/kg dry food per day for last 3 days ) for seven days .Some mice were intraperitoneally injected aliskiren ( 50 mg/kg BW per day in saline ) .RESULTS:Mice injected aliskiren developed decreased urine output and increased urine osmolal -ity when compared with controls .Aliskiren significantly increased protein abundance of AQP 2 and phosphorylated-S256 AQP2 in the kidney inner medulla .Immunohistochemistry and immunofluoresence showed increased apical and intracellular labeling of AQP 2 and pS256-AQP2 in collecting duct principal cells of kidneys in mice treated with aliskiren .Aliskiren treatment prevented urinary concen-trating defect in lithium-treated mice , and improved the downregulation of AQP 2 and pS256-AQP2 protein abundance in inner medulla of the kidney .In primary cultured rat inner medulla collecting duct cells , aliskiren dramatically increased AQP 2 protein abundance which was significantly inhibited either by PKA inhibitor H 89 or by adenylyl cyclase inhibitor MDL 12330, indicating an involvement of the cAMP signalling pathway in mediating aliskiren-induced increased AQP 2 expression .CONCLUSION: The direct renin inhibitor aliskiren upregulates AQP 2 protein expression in inner medullary collecting duct principal cells and prevents lithium -induced nephro-genic diabetes insipidus ( NDI) likely via PKA-cAMP pathways .
作者： 刊期： 2016年第08期
目的：心肌肥厚是心脏对于压力负荷或者容量负荷所产生的适应性反应。细胞色素P450表氧化酶2J2（CYP 2J2）及其代谢产物EETs可以发挥抵抗心肌肥厚的作用，而其中的机制仍有待进一步探索。方法和结果：在体内研究中，我们采用PPARα缺陷小鼠以及野生小鼠为研究对象，并采用血管紧张素II（ Ang II）诱导小鼠发生心肌肥厚。结果表明，Ang II可以明显诱导心肌肥厚，具体包括心脏肥大、心脏功能减低和心肌肥厚标志物表达增加。而在野生小鼠中，CYP 2J2过表达可以抑制Ang II所诱导的心肌肥厚，但是这一抑制作用在PPARα缺陷小鼠则没有体现。在离体研究中，我们以大鼠乳鼠心肌细胞作为研究对象并采用Ang II作为诱导因子。研究表明，外源性加入11，12－EET可明显抑制Ang II所诱导的心肌肥大，而PPARα特异性阻断剂GW6471可以阻断11，12－EET的作用，并且这一作用可能与Ras／MAPK以及NF－κB通路有关。另外，我们通过荧光报告基因系统以及染色质免疫沉淀实验证实， PPARα可以直接结合到caveolin－1的转录子区，并诱导caveolin－1的表达，而且采用siRNA介导caveolin－1的沉默，可以抑制11，12－EET抵抗Ang II的效应。结论：CYP 2J2及其代谢产物EETs可以通过PPARα缓解Ang II诱导的心肌肥厚，这一作用可能与其在转录水平上调caveolin－1的表达，并进一步抑制Ras／MAPK和NF－κB通路有关。
作者：赖金胜；陈琛；唐家荣；汪道文 刊期： 2016年第08期
目的：观察硫化氢对大鼠急性心肌缺血组织细胞凋亡的影响及其作用机制。方法：健康雄性SD大鼠，随机分成7组：假手术组；心肌缺血组；心肌缺血＋NaHS 低剂量组；心肌缺血＋NaHS 中剂量组；心肌缺血＋NaHS 高剂量组；心肌缺血＋SB216763组；心肌缺血＋1％DMSO组。结扎大鼠冠状动脉左前降支复制急性心肌缺血模型。记录各组大鼠MAP、LVDP、LV－EDP、dp／dtmax和dp／dtmin ，测定LDH活性、心肌细胞凋亡率、p－GSK－3β、t－GSK－3β、β－catenin、Bax和Bcl－2蛋白表达以及心肌组织形态学变化。结果：大鼠心肌缺血后MAP、LVDP、dp／dtmax和dp／dtmin降低，LVEDP升高，血清LDH活性增强，心肌细胞凋亡率和Bax表达增强，Bcl－2表达降低，p－GSK－3β、p－GSK－3β／t－GSK－3β和β－catenin表达降低。心肌纤维横纹不齐或消失，核偏移甚至裂解消失。给予NaHS后，大鼠MAP、LVDP、dp／dtmax和dp／dtmin均升高，LVEDP降低，血清LDH活性降低，心肌细胞凋亡率和Bax表达降低，Bcl－2表达增强，心肌p－GSK－3β、p－GSK－3β／t－GSK－3β和β－catenin表达均增强，心肌细胞变性程度明显减轻。结论：硫化氢可通过GSK－3β／β－catenin信号途径介导心肌损伤后抗细胞凋亡作用。
作者：张建新；葛宁；刘超；解丽君；张勤增 刊期： 2016年第08期
AIM:To investigate whether KCNE 2 participates in the development of pathological hypertrophy .METHODS:Bidirectional ma-nipulations of KCNE2 expression were performed by adenoviral overexpression of KCNE 2 or knockdown of KCNE2 with RNA interfer-ence in PE-induced neonatal rat ventricular myocytes .Then overexpression of KCNE 2 in mouse model of left ventricular hypertrophy in-duced by transverse aortic constriction (TAC) by ultrasound microbubble-mediated gene transfer were used to detect the therapeutic function of KCNE2 in the development of hypertrophy .RESULTS:KCNE2 expression was significantly decreased in PE-induced hy-pertrophic cardiomyocytes and in hypertrophic hearts produced by TAC .Knockdown of KCNE2 in cardiomyocytes reproduced hypertro-phy, whereas overexpression of KCNE2 attenuated PE-induced cardiomyocyte hypertrophy .Knockdown of KCNE2 increased calcineurin activity and nuclear NFAT protein level , and pretreatment with nifedipine or FK 506 attenuated decreased KCNE 2-induced cardiomyo-cyte hypertrophy .Overexpression of KCNE 2 in heart by ultrasound microbubble-mediated gene transfer suppressed the development of hypertrophy and activation of calcineurin-NFAT and MAPK pathways in TAC mice .CONCLUSION:These findings demonstrate that cardiac KCNE2 expression is decreased and contributes to the development of hypertrophy via activation of calcineurin -NFAT andMAPK pathways .
作者： 刊期： 2016年第08期
目的：本研究拟探讨平滑肌蛋白22α（ SM22α）对血管平滑肌细胞（ VSMC）表面血小板源性生长因子受体β（ PDGFR－β）胞吞的影响，进而揭示SM22α对PDGFR－β活性调控的关键步骤———胞吞和泛素化动态平衡的影响及其对血管重构过程的调控作用。方法：PDGF刺激体外培养大鼠VSMC，考察siRNA敲低SM22α蛋白后不同时点的细胞中，激光共聚焦显微镜观察PDGFR－β在细胞膜分布的异同；利用活细胞工作站实时观察SM22α的表达对PDGFR－β在细胞内内吞体和溶酶体分布的异同；SM22α对c－Cbl或TRAF6等E3泛素连接酶活性的影响；siRNA敲低早期内吞体标志蛋白Rab5、再循环内吞体标志蛋白Rab4和Rab11、多泡体（ MVB）标志蛋白Rab7，观察SM22α对PDGFR－β亚细胞定位的变化及其与血管重构的关系。结果：研究发现，SM22α表达下调促进细胞表面的PDGFR－β的再循环过程，使PDGFR－β在细胞表面的分子数显著减少，激活信号分子Akt和p42／44磷酸化，促进PDGF诱导的VSMC生长、增殖和迁移过程，SM22α对PDGFR－β再循环的调控与血管重构过程密切相关。结论：PDGFR－β调控异常诱发的生物学行为改变是心血管疾病的主要细胞和分子生物学基础，我们的结果表明， SM22α可能通过影响PDGFR－β胞吞和泛素化动态平衡而影响其活性的调控，进而参与血管重构的病理生理过程，阐明其分子机制可为发掘基于影响PDGFR－β功能的心血管疾病药物设计提供新靶点。
作者：麻晓婷；窦永青；李晓坤；孟泽祺；韩梅；聂磊 刊期： 2016年第08期
目的：研究巨噬细胞移动抑制因子（ MIF）缺失对皮下注射苯肾上腺素（ PE）诱导的小鼠心肌肥厚的影响。方法：利用MIF敲除（ MIF－KO）小鼠及其野生型对照小鼠，分别建立皮下注射PE诱导的小鼠心肌肥厚模型。小动物心脏B超检测小鼠心脏的结构功能改变。末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP 缺口末端标记（ TUNEL）法检测小鼠心肌细胞凋亡。分别用荧光定量PCR和Western blot方法分别检测SOD1、SOD2和Trx2的表达。结果：连续3 d皮下注射20 mg? kg－1? d－1 PE可诱导小鼠发生心肌肥厚，注射PE诱导MIF－KO小鼠发生心肌肥厚的程度高于野生型对照小鼠。 TUNEL结果显示，注射PE诱导MIF－KO小鼠心肌发生凋亡的程度高于野生型对照小鼠。注射PE诱导MIF－KO小鼠心肌中SOD1和Trx2表达降低，而且MIF－KO小鼠心肌中Trx2水平显著低于野生型对照小鼠。结论：MIF缺失降低SOD1和Trx2表达，进而加重苯肾上腺素诱导的小鼠心肌细胞凋亡和心肌肥厚。
作者：林秋雄；朱杰宁；肖珍；唐春梅；胡志琴；张灼；符永恒；张梦珍；单志新 刊期： 2016年第08期
AIM:Atherosclerosis primarily involved systemic arteries .Luminal surface , a monolayer of endothelial cells , of artery directly exposes to blood and is susceptible to active substances in the blood .Exosomes contain significantly amount of proteins and RNAs .Ex-osomes can be good and bad for cells , depending on their component .Thus, exosomes may contribute to atherosclerosis by affecting endothelial cells .This study analyzed the relationship of exosome proteins and atherosclerosis .METHODS: Fifty-six patients and healthy subjects were recruited and divided into two comparisons:healthy subjects vs atherosclerosis ( HS vs AS) , and hypertension vs hypertension plus atherosclerosis ( HT vs HT+AS) .Serum exosomes were decoded by protein mass spectrometry .The protein profile and function were analyzed by gene ontology ( GO) .RESULTS:It was found that five child terms repeatedly appeared in “response to stimulus” and “immune system process” of BP of the two categories ( HS vs AS and AS vs HT+AS):“positive regulation of innate immune response”,“immune response-activating signal transduction”,”activation of innate immune response”,“innate immune re-sponse-activating signal transduction” and “innate immune response activating cell surface receptor signaling pathway ”.Two child terms repeatedly showed in “binding” of MF of the two categories:“antigen binding” and “enzyme binding”.Two proteins, PSMA6 and PSMA7, were repeatedly shown in the two categories .CONCLUSION:GO analysis was utilized for structure hierarchy “tree” to illustrate these proteins involved in various terms in BP , CC and MF.The PPI analysis supplied proteins which may play potentially im-portant roles in AS process .Innate immune system and blood coagulation pathway contribute to AS formation .The proteins, PSMA6, PSMA7 and Annexin A2, may can be the new target proteins for prevention and treatment of AS .
作者： 刊期： 2016年第08期
AIM:Programmed necrosis ( necroptosis ) and apoptosis are crucially involved in multiple severe cardiac pathological conditions , including myocardial infarction, ischemia/reperfusion (I/R) injury, and heart failure.Whereas apoptotic signaling is well defined, the mechanisms underlying cardiomyocyte necroptosis remain elusive .METHODS AND RESULTS:Here we show that both mRNA and protein levels of receptor-interacting protein 3 (RIP3) in the hearts are increased by I/R injury and doxorubicin (Dox) treatment. In mice, RIP3 deficiency ameliorates myocardial necroptosis and heart failure induced by I /R (30-min ischemia/4-h or 8-week reper-fusion) or Dox treatment (20 mg/kg or 5 mg/kg ×4, i.p.).RIP3 overexpression induces cardiomyocyte necroptosis evidenced by de-creased intracellular ATP level and increased lactate dehydrogenase concentration in cell culture medium .RIP3 triggers myocardial ne-croptosis via activation of Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase II (CaMKII), rather than the well-established RIP3 partners, RIP1 and MLKL (mixed lineage kinase domain-like protein).Specifically, our data indicate that I/R and Dox markedly activate myo-cardial CaMKII in wild-type but not RIP3-deficient mice , and that CaMKII inhibition or RIP 3 deficiency protect the heart from I/R-and Dox-induced cardiomyocyte necroptosis , cardiac remodeling and heart failure .Mechanistically , RIP3 activates CaMKII via both di-rect phosphorylation and indirect reactive oxidative species-dependent oxidation , and subsequently triggers opening of the mitochondrial permeability transition pore ( mPTP) and myocardial necroptosis .CONCLUSION: These findings identify CaMKII as a novel RIP 3 substrate and delineate a RIP3-CaMKII-mPTP myocardial necroptosis pathway , a promising target for the treatment of cardiac ischemic and oxidative damage , and heart failure .
作者： 刊期： 2016年第08期
目的：血管内皮损伤是糖尿病血管并发症的重要病理基础，早期研究发现Ca2＋稳态失衡参与内皮损伤，但是何种钙通道参与尚不十分明确。高糖可诱导内皮细胞上钙池操控性钙内流增加，同时内质网应激水平升高，因此本研究旨在研究Orai1通道对内质网应激反应的调控在糖尿病血管内皮损伤中的作用。方法：在动物及细胞水平利用Western blot 和real－time PCR检测糖尿病状态下Orai1通道的表达变化及内质网应激反应水平；进一步利用Orai1 shRNA腺病毒抑制该通道表达，在细胞水平观察其对高糖状态下内质网应激反应相关蛋白及内皮细胞磷酸化eNOS、NO生成的影响；在动物水平，利用血管张力测定仪检测Orai1通道对糖尿病小鼠血管内皮依赖性舒张反应的影响。结果：糖尿病状态下，Orai1表达及内质网应激水平均显著升高，抑制Orai1的表达可减少内质网应激标志物ATF4、CHOP、BiP等的表达，同时逆转内皮细胞NO生成水平及内皮依赖性血管舒张功能障碍。结论：Orai1通道参与糖尿病内皮损伤，其机制与调控内质网应激反应有关。
作者：杨慧；邝素娟；饶芳；薛玉梅；单志新；林秋雄；杨敏；吴书林；邓春玉 刊期： 2016年第08期
目的：动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）是一种慢性炎症过程，其发病机制复杂，目前公认的是内皮损伤反应学说。有研究称，细胞骨架蛋白与内皮细胞功能及内皮相关信号通路密切相关。 Testin是一种新发现的细胞骨架蛋白，主要分布于黏着斑和细胞间连接的区域，参与细胞间的黏附，调节细胞的运动。然而，Testin在AS中的作用尚不明确。方法：利用家兔高脂饮食喂养16周建立冠脉AS模型，分离冠脉，免疫荧光染色观察Testin的分布，检测AS兔与正常兔Testin的表达水平；分离培养人脐静脉内皮细胞（HUVECs），分别予以1 mg／L LPS、40 mg／L ox－LDL刺激6 h，检测Testin表达水平的变化；于HUVECs过表达或下调表达Testin，观察其对细胞增殖、凋亡、迁移、招募单核细胞能力及AS相关因子表达的影响。结果：染色示Testin主要表达于血管内皮层并与内皮标志物CD31存在共定位，AS兔Testin mRNA和蛋白表达水平较正常兔降低（P＜0．05）；给予HUVECs刺激后，Testin mRNA和蛋白表达水平降低（ P＜0．05）；过表达或下调Testin，不影响细胞增殖和凋亡能力（ P＞0．05）；过表达Testin可促进HUVECs迁移而抑制单核细胞与其黏附，下调Testin则呈现相反作用（P＜0．05）；过表达Testin可升高一氧化氮合酶水平而降低单核细胞趋化因子1、基质金属蛋白酶2水平，下调Testin则呈现相反趋势（ P＜0．05）。结论：Testin可通过影响内皮功能发挥抗AS作用。
作者：袁梦；张跃；徐昭；李虹敏；劳咪；李广平 刊期： 2016年第08期
目的：房室传导阻滞是心脏电激动传导过程中，发生在心房和心室之间的电激动传导异常，可导致心律失常。前期，我们发现一个遗传性房室传导阻滞伴肥厚型心肌病家系，本次工作主要对其致病基因及机制进行研究。方法：采用候选基因测序的方法对已经确诊为房室传导阻滞的心脏病患者进行致病基因分析，对报道与心脏病相关的 TRP4、 SCN5A、 SCN1B、NKFX2．5、CLCA2和LMNA共6个基因测序并确定致病基因；构建致病基因的野生型和突变型质粒；克隆野生型和突变型，激光共聚焦显微镜检测野生和突变型蛋白在细胞定位，利用Western blot检测目的蛋白的表达情况对该突变功能进行分析。结果：遗传学分析显示在家系中患者LMNA基因第10号外显子缺失，并与疾病共分离。 Western blot结果显示突变型lamin蛋白表达水平正常，定位结果显示，野生型蛋白位于细胞核核膜，而突变型蛋白在核膜上和核内均有表达。 LMNA异常可引起房室结细胞死亡与纤维化，导致房室传导速率降低，并发生房室传导阻滞。自噬和凋亡是细胞死亡的重要形式，LC3－II是检测自噬的标志蛋白。应用Western blot检测LC3－II，结果显示LMNA突变不影响该蛋白表达。结论：本次研究中，我们发现了一个新的导致遗传性房室传导阻滞伴肥厚型心肌病的LMNA基因突变，该突变可使其编码的蛋白不能正确定位于细胞核膜，导致细胞核核纤层结构异常。核纤层在细胞分裂中呈现周期性的变化，因此核纤层的异常会对细胞正常周期产生重要影响从而导致细胞的异常死亡。这可能是导致该家族成员发生房室传导阻滞的原因。
作者：曹祝兵；李思思；臧小彪；凃欣 刊期： 2016年第08期
中国病理生理杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国病理生理学会
