乔雪；郑铭
目的：探讨Neuro－2a细胞株用于A型肉毒毒素重链（ botulinum neurotoxin serotype A heavy chain， BoNT／A HC）体外细胞模型的可行性。方法：体外培养Neuro－2a细胞检测HC相关受体，确定是否可用于HC作用的体外模型；后于Neuro－2a细胞培养液内加入一定浓度的HC，于不同时点在相差显微镜下摄取图片观察HC对细胞突起生长状况的影响，包括有突起细胞的百分比、细胞突起的长度以及突起总数。结果：（1）培养一定时间的Neuro－2a细胞表达HC的高亲和力（synaptic vesicle 2，SV2）和低亲和力（trisialoganglioside 1b，GT1b）受体。（2）培养液内加入一定剂量的HC可促进Neuro－2a细胞突起再生及增长。在HC影响下，有突起的Neuro－2a细胞百分比、神经突起的总数量以及平均突起的长度皆较对照组明显增加，且差异具有统计学意义（ P＜0．05）。结论：Neuro－2a细胞可用于HC体外研究的细胞模型；Neuro－2a对HC比较敏感；一定剂量的HC能够促进神经突起的生长。
作者：王红；李夏青 刊期： 2015年第10期
目的：探讨N－乙酰半胱氨酸（ NAC）是否通过影响心肌细胞内抗氧化通路蛋白的氧化还原状态从而在心肌细胞氧化应激中发挥保护作用。方法：用H2 O2刺激H9c2心肌细胞导致氧化应激损伤。采用CM－H2 DCFDA荧光染料检测细胞内ROS变化情况；谷胱甘肽试剂盒检测细胞内GSH和GSSG的水平；非还原Western blot技术检测Trx1、GR、Prx1和PTEN的氧化还原状态；还原Western blot检测ASK1和AKT的磷酸化。结果：NAC预处理组明显增加心肌细胞氧化应激时的细胞活力和GSH／GSSG比值，并且降低细胞内ROS水平。非还原Western blot显示H2 O2刺激使还原型Trx1明显减少，氧化型GR、Prx1和PTEN显著增多，NAC预处理可以增加还原型Trx1，减少氧化型GR、Prx1和PTEN。还原Western blot发现，NAC预处理之后， H2 O2诱导的ASK1磷酸化明显减少，而H2 O2诱导的AKT磷酸化明显增加。结论：NAC通过减少胞浆内抗氧化蛋白的氧化从而保护心肌细胞氧化应激损伤。
作者：刘协红；蔡姣迪；肖献忠；张华莉 刊期： 2015年第10期
探讨与医学相关的社会热点问题，如对WHO提出的各种世界“疾病日”的认识，结合多媒体展示融入病理生理学教学的意义。以认识“世界肾脏病日”、“世界COPD日”等为例，从话题提出到相关知识引入，再到体现“以学生为中心”，借助不同教学模式，如Sandwich或PBL教学对历年“疾病日”主题的深入探讨和相关知识延伸，引导学生对所学知识融会贯通。不但能激发学生的学习热情，提高探究问题的兴致和积极性，培养科学的临床思维、自主学习和创新能力，增强其自信心和社会责任感，而且使授课形式多样化，知识掌握更易形成系统，并能拓宽师生知识视野，从而提高病理生理学教学效果。
作者：赵爽；蒙山；卢露碧；高洁；朱名毅 刊期： 2015年第10期
目的：观察姜黄素对gp120 V3环所致大鼠海马神经元突触可塑性损伤的作用及机制。方法：制备离体大鼠海马脑片，1 mol／L姜黄素或10 mol／L尼莫地平单独或分别与1 nmol／L gp120 V3环共同作用于大鼠海马脑片1h后，采用细胞外微电极记录技术，分别记录Schaffer侧支－CA1区神经元的输入／输出曲线（input－output curve，I／O curve）、场兴奋性突触后电位（field－ex－citatory postsynaptic potential，fEPSP）、长时程增强（ long－term potentiation，LTP）和双脉冲易化（ paired－pulse facilitation，PPF）。结果：各组药物对大鼠海马CA1区神经元突触的基本传递、突触前膜效应未产生明显影响（ P＞0．05），但gp120 V3环可显著抑制LTP的诱发，抑制神经元突触可塑性（ P＜0．05）；尼莫地平与姜黄素可拮抗gp120 V3环对海马脑片LTP的抑制作用，改善神经元突触可塑性（ P＜0．05）。结论：姜黄素可能是通过减少Ca2＋内流拮抗gp120 V3环对大鼠海马脑片CA1区神经元LTP的抑制作用，维持LTP稳定，改善突触可塑性。
作者：陈桂玲；刘思思；江明亮；行妍妍；林丽清；董军 刊期： 2015年第10期
目的：β－肾上腺素受体（β－ARs）介导的心脏炎症反应是导致心脏损伤重要原因，但机制不明。本研究观察了β－ARs激动后心脏炎症反应和细胞因子的动态变化，并明确了启动炎症反应的关键因子。方法：雄性10周龄C57BL／6野生型小鼠皮下注射β－ARs非选择性激动剂异丙基肾上腺素（ isoprotenerol， ISO；5 mg? kg－1? d－1），于不同时点进行心脏取材。利用组织化学染色等方法评价心脏炎症反应及纤维化情况。利用细胞因子芯片分析细胞因子动态变化情况。结果：心脏炎性细胞浸润开始于给ISO后24 h，3 d达高峰。7 d后出现明显纤维化。给予ISO后12 h和24 h，心脏细胞因子增加以趋化因子为主。给予ISO后1 h，白细胞介素18（IL－18）及炎性小体就被激活。利用IL－18及炎性小体NLRP3基因敲除小鼠，证明了IL－18和炎性小体的激活介导了ISO引起的趋化因子增加和炎性细胞浸润。给予ISO后1 h再给予IL－18中和抗体，可阻断ISO引起的趋化因子增加、炎性细胞浸润及纤维化。结论：IL－18是急性β－ARs激动引起心脏炎症反应及纤维化的关键启动因子。
作者：肖晗；李昊；安祥博；王晶晶；张幼怡 刊期： 2015年第10期
三磷酸腺苷结合盒转运体A1（ABCA1）能介导细胞内脂质流出，形成高密度脂蛋白（HDL），抑制动脉粥样硬化的发生发展，起到心血管保护作用。在转录和转录后水平，ABCA1的表达均受到严密调控。研究发现，在非人类灵长类动物，miR－33能靶向结合ABCA1，调控体内脂质代谢，即升高HDL，降低极低密度脂蛋白（ VLDL）水平。本课题组研究结果显示，GDF－15通过PI3K－PKCζ－SP1通路上调THP－1巨噬细胞ABCA1蛋白水平，从而促进细胞内胆固醇流出；ELK－2A2K2E通过ABCA1经JAK2－STAT3信号途径促进TTP的表达，进而抑制巨噬细胞源性泡沫细胞的炎症因子；miR－27a／b能够通过靶向沉默ABCA1减少细胞内的游离胆固醇流出；NF－κB通过上调SREBPs的内含子型miR－33s，抑制ABCA1的表达和胆固醇流出，导致巨噬细胞脂质蓄积；tBHQ通过激活Nrf2／HO－1信号途径，抑制calpain活性，减少ABCA1蛋白降解，从而增加ABCA1的蛋白水平，促进细胞内胆固醇流出。因此各种因素共同调控ABCA1的表达，终影响胆固醇流出和动脉粥样硬化的发生发展。
作者：唐朝克 刊期： 2015年第10期
医学留学生教育已成为我国高等医学教育的重要组成部分，如何提高留学生教育教学质量的改革是当前形势所需，病理生理实验教学评价体系是实验教学改革的重要内容之一。目前对留学生病理生理实验教学的评价方式仅限于单一、主观的终极性评价，这不符合留学生积极主动、思维活跃的特点，使学生忽视实验课的学习，纵容了学生懒惰、被动学习的不良情绪，压抑了他们探求知识的欲望和能力，而且评价范围窄，代表性差，难以客观、全面地评价教学效果和学生的学习质量，使能力培养这一环节的作用不能充分发挥出来。新评价体系的构建与实施，强化形成性评价在整个评价体系中的比重，不但使实验课程的评价更加科学、客观，而且对于培养学生的知识应用能力、信息获取和选择能力、动手实践能力、创新能力，都起到了积极的促进作用，是监督和检查学生学习效果及应用能力，提高实验教学质量的有效手段，值得全面推广。
作者：张彩华；邢嵘 刊期： 2015年第10期
目的：观察WDR26过表达对大鼠心肌细胞缺氧所致线粒体自噬的影响，探讨其作用机制。方法：构建真核表达载体pcDNA3．1，克隆入WDR26ORF，转染H9c2心肌细胞株；实验分为对照组和实验组（转染pcDNA3．1－WDR26）；建立H9c2心肌细胞缺氧模型；采用免疫荧光、Western blot等技术检测缺氧后心肌细胞线粒体自噬情况及PINK1、Parkin线粒体自噬相关蛋白的表达情况。结果：（1）WDR26过表达时可以促进H9c2心肌细胞缺氧时线粒体自噬；（2）WDR26过表达时可以促进缺氧所致的Parkin向线粒体聚集。结论：WDR26参与心肌细胞缺血所致的线粒体自噬，并且通过与线粒体蛋白发生相互作用形成复合物，影响PINK－Parkin信号通路，从而调控线粒体自噬，在心肌缺血过程中起到内源性保护作用。
作者：赵佳 刊期： 2015年第10期
目的：观察CMKLR1过表达在大鼠非酒精性脂肪性肝炎脂肪组织中的作用及意义。方法：制备携带大鼠CMKLR1基因的慢病毒载体。12周龄雄性SD大鼠随机分4组：对照12只；模型12只；转染12只，空转染6只。对照普通饮食；余高脂饮食；第1天转染组尾静脉注射病毒液100μL，空转染组注射空病毒液100μL，余注射PBS 100μL。分批处死空转染组评价转染效率。第8、12周，分批处死大鼠，留肝、脂肪组织。结果：（1）肝HE示：对照大鼠肝细胞条索清晰；模型组8周出现单纯性脂肪肝；12周出现非酒精性脂肪性肝炎；转染组肝病理程度比同期模型组轻。（2）模型组与同期对照组相比脂肪组织中CMKLR1 mRNA和蛋白表达增加，但差异无统计学意义，转染组比同期模型组显著增高（ P＜0．05）；模型组大鼠与同期对照组相比脂肪组织中脂联素基因和蛋白表达降低，转染组比同期模型组显著增高（P＜0．05）。结论：（1）高脂饮食12周成功建立了大鼠非酒精性脂肪性肝炎模型；（2）脂肪组织中CMKLR1过表达可显著改善大鼠非酒精性脂肪性肝炎时肝组织病理学改变。
作者：刘近春 刊期： 2015年第10期
目的：紧密连接是调控颌下腺分泌的重要途径，但其机制尚不清楚。本研究探讨腺苷酸活化蛋白激酶（ AMPK）经紧密连接分子claudin－4调控颌下腺分泌的作用机制。方法：选用AMPK激动剂AICAR刺激SMG－C6细胞，检测跨上皮电阻（ TER）的改变，Western blot检测相关信号分子表达的改变，免疫共沉淀检测claudin－4分子的磷酸化，免疫荧光观察claudin－4分子的分布。结果：用AICAR刺激SMG－C6细胞显著降低TER值，提示AMPK激活增加了SMG－C6细胞旁细胞通透性。 AICAR特异性诱导claudin－4分子从细胞膜向细胞浆转位。 AICAR刺激显著增强了SMG－C6细胞ERK磷酸化，使用ERK1／2抑制剂U0126和ERK1／2 siRNA后抑制了AICAR对TER的影响。免疫共沉淀结果显示AICAR激活claudin－4丝氨酸199位点的磷酸化并且增加了claudin－4和occludin之间的相互作用。结论：AMPK激活后通过调节claudin－4分子的磷酸化及分布增加了SMG－C6细胞紧密连接的通透性，促进颌下腺的分泌，该作用可能通过ERK信号通路。
作者：向若兰；梅梅；丛馨；李静；丁冲；吴立玲；俞光岩 刊期： 2015年第10期
目的：探讨omega－3多不饱和脂肪酸（ polyunsaturated fatty acid， PUFA）对动脉粥样硬化斑块稳定性的作用及可能机制。方法：采用低密度脂蛋白受体敲除（Ldlr－／－）小鼠喂养西方饮食（western diet， WD）6周诱导动脉粥样硬化，并在饮食中添加或不添加3％omega－3 PUFA进行干预。使用液相质谱联用检测血浆中PUFA及其代谢产物浓度。油红O染色分析测定动脉树斑块面积及主动脉根部斑块脂质含量，HE染色分析主动脉根部斑块大小，天狼星红染色分析主动脉根部斑块胶原纤维含量，免疫荧光检测主动脉根部斑块巨噬细胞和平滑肌细胞含量。结果：（1）与WD组相比，omega－3组小鼠动脉树斑块面积比例显著降低。（2）Omega－3处理组与对照组相比，主动脉根部斑块面积、脂质含量和巨噬细胞含量显著降低；同时胶原纤维和平滑肌细胞含量显著上升，斑块不稳定指数下降（P＜0．05）。（3）Omega－3处理组血清中omega－3 PUFA显著增加，分析代谢产物发现EEQ和18－HEPE水平显著增加。结论：Omega－3处理减少动脉粥样硬化斑块面积、增加斑块稳定性，其机制可能与其代谢产物水平变化相关。
作者：刘亚晋；李丹；张栩；艾玎；朱毅 刊期： 2015年第10期
目的：以彩超多普勒M型检测法，探讨不同剂量法舒地尔对大鼠心梗后心室重构保护作用疗效。方法：用结扎LAD法制备AMI大鼠模型40只，随机分为AMI组、法舒地尔低、中、高剂量组（2．5、5、10 mg? kg－1? d－1）、卡维地洛对照组（20 mg?kg－1? d－1），另设假手术组。给药4周后，M－model超声测心功能指标。结果：（1）与假手术组比较，AMI组的EF、FS、LVAWd、LVAWs和LVSV显著降低。（2）与AMI组比较，法舒地尔各治疗组均有改善心室重构作用，以中剂量组效果佳：EF、FS等明显增加（ P＜0．01）。（3）与卡维地洛组比较，低、高剂量治疗组EF、FS等明显减少（ P＜0．05）。而中剂量组EF、FS等略有降低。结论：中剂量法舒地尔能改善AMI后大鼠心功能，对AMI后心室重构具有明显抑制作用。
作者：符永恒；李桃；张梦珍；林秋雄；朱杰宁；单志新；杨敏 刊期： 2015年第10期
创新性人才的培养是当前教育教学改革的重要目标，在中职医学生的培养中也逐渐由知识型人才向创新性人才转变。但是，中职医学教育受到中国传统知识观和应试教育的影响，中职学生的片面发展阻碍着学生创新能力的产生，而采取新型的知识观、教育观，改革教育教学成为医学教育的重要任务。
作者：唐彩云 刊期： 2015年第10期
高原肺水肿（ HAPE）和低氧性肺动脉高压（ HPH）是严重威胁高原人群健康的急、慢性高原病。有关其发病机制至今尚不十分清楚。我们研究发现，不同时间（2～28 d）模拟高原低氧均可诱导小鼠肺组织中ICAM－1、E－selectin等细胞黏附分子（CAMs）表达增加，炎症细胞浸润增多，炎症介质Annexin A1、TNF－α、MCP1、IL－6等表达上调。细胞实验也发现低氧（1％ O2）可直接上调内皮细胞中CAMs的转录和表达，并增强炎症细胞与内皮细胞的黏附。进一步研究发现，巨核细胞白血病因子1（ MKL1）可协同染色质重构蛋白Brg1／Brm及H3K4甲基转移酶复合物COMPASS介导血管内皮细胞中CAMs的转录活化，从而调节CAMs的表达，影响小鼠肺组织中炎症细胞的聚集及肺血管炎症反应。上述结果说明低氧可直接诱导内皮细胞中CAMs基因的转录激活，增强血管内皮细胞和循环炎症细胞的相互作用，在肺血管周围形成促炎微环境，增加炎症因子的表达，进一步介导或促进肺血管收缩乃至肺血管结构改建，这可能是HAPE和HPH形成重要的共通的炎症机制。
作者：高钰琪；高文祥；袁志兵；陈德伟；陈建；徐刚；张钢；生宝亮；刘福玉 刊期： 2015年第10期
目的：探讨泛素特异性蛋白水解酶33（USP33）在肺癌中作用及分子机制。方法：采用real－time PCR及免疫组织化学方法检测肺癌及癌旁组织中USP33的表达水平；利用Kaplan－Meier法分析USP33的表达水平与临床预后的关系；采用细胞划痕实验检测USP33在Slit2抑制肺癌细胞迁移中的作用；通过免疫共沉淀技术探讨USP33与Slit2受体Robo1的相互作用及方式。结果：qRT－PCR及免疫组化的检测结果显示，与癌旁组织相比，肺癌中USP33的mRNA及蛋白水平明显下调（ P＜0．01）；生存分析结果显示，高表达USP33的肺癌患者生存时间较长；细胞划痕实验发现，特异性下调USP33时，能阻断Slit2抑制肺癌细胞迁移的作用；免疫共沉淀实验显示，肺癌细胞中USP33能与Robo1相互作用，当下调USP33能显著降低Robo1蛋白水平，相反，当抑制蛋白酶体降解途径时，该作用减弱。结论：肺癌中USP33的表达水平降低，与患者预后有关。此外，USP33参与调节Slit2信号通路对肺癌细胞迁移的抑制作用，而这种作用是通过USP33抑制Robo1蛋白依赖蛋白酶体降解途径来实现的。
作者：普帅；孔瑞瑞；吴瑛 刊期： 2015年第10期
目的：通过测定乳腺癌组织中调节性T淋巴细胞（ regulatory T cells，Treg）的计数，探讨其与乳腺癌临床病理特征的关系，阐明在乳腺癌中Treg的分布表达与其临床预后的相关性。方法：应用免疫组织化学方法检测60例乳腺癌组织中Treg表达。结果：CD127＋染色颗粒主要定位于Treg的胞膜和／或胞浆，细胞外形呈卵圆形，主要分布在肿瘤间质。 Treg的计数随着乳腺癌组织分化程度增高而减少，且高分化组与中分化组、高分化组与低分化组、中分化组与低分化组之间的Treg计数相比具有显著差异（P＜0．05）。无淋巴结转移组Treg计数低于淋巴结转移组，两者相比具有显著差异（P＜0．05）。但Treg计数在患者年龄、绝经状况及乳腺癌的病理学分类无显著差异。 Treg计数与患者生存期的相关性分析显示乳腺癌中Treg与患者预后呈负相关（ P＜0．05）。结论：Treg的计数随着乳腺癌组织分化程度增高而减少，Treg在乳腺癌淋巴结转移组的数目高于无淋巴结转移组，其数目与乳腺癌患者生存期呈负相关。
作者：成媛 刊期： 2015年第10期
目的：从代谢调节角度探讨高原环境对人体血浆代谢的影响及可能机制。方法：分别采集60名健康成年男性在平原和进入高原（海拔5300 m）第4天的血浆样本，高效液相色谱－质谱联用和气相色谱－质谱联用结合多变量统计分析筛选进入高原前后的差异代谢物，Metabo Analyst 3．0数据库进行代谢通路富集分析，ELISA测定代谢通路中关键调节酶。结果：进入高原后受试者血浆中50个代谢物、8条代谢通路和5种关键酶发生了显著的变化。8条代谢通路涉及炎症反应相关代谢、能量代谢、胆酸代谢和血红素代谢。 ELISA结果显示调节以上代谢通路的5种关键酶进入高原后发生显著变化。结论：人类习服高原早期血浆中代谢物组、相关代谢通路和关键调节酶发生了重要变化，研究结果对寻找促进高原习服措施具有重要意义，通过阻断或修饰相关代谢通路将有望减轻急性高原反应症状、促进高原习服。
作者：廖文婷；刘宝；陈建；崔建华；高伊星；刘福玉；徐刚；孙滨达；张二龙；袁志兵；张钢；高钰琪 刊期： 2015年第10期
目的：应用TBL为中心的多元教学方法，以提高学生自主学习、团队协作能力，促进高质量、高素质的创新型医学人才的培养。方法：病理生理学理论性强、难教、难懂，学生学习起来比较吃力，这要求教师采用灵活的教学方法、科学先进的教学手段激发学生对病理生理学的学习热情；以2013级口腔和麻醉专业学生为研究对象，口腔专业采用常规多媒体教学；麻醉专业采用TBL为主导有机结合多媒体教学、案例教学法的多元教学法，首先学生通过课前自学提出问题，在课堂上教师引用典型性、相关性和实用性病例通过案例教学法解决学生的问题，将抽象的内容感性化，理论与临床相结合，激发学生学习兴趣，培养学生临床思维能力与综合运用知识的能力。通过形成性评价进行综合分析评价。结果：多元教学的麻醉专业的考试成绩均优于常规多媒体教学的口腔专业，经t检验差异有显著意义（P＜0．01）；两组的问卷调查结果经χ2检验，多元教学优于常规多媒体教学。结论：以TBL为中心的多元教学优于常规多媒体教学；同时培养了学生独立思考、提出问题、分析问题、解决问题的能力，提高了教学质量。
作者：王顺蓉；张春梅；陈蓉；唐华；邹平；黄珀 刊期： 2015年第10期
主线式PBL（ main－problem－based learning， M－PBL）是我们在多年教改实践中探索出以PBL为基础的一种创新的组合教学模式，包括主线式PBL，主线式单元串讲和病例讨论。主线PBL突出病理生理学课程内容的整体性和连贯性，主线单元串讲则强调各病理过程间的内在联系，病例讨论重在培养学生的临床综合思维能力。授课后对本校临床专业2012级1155名中国和外国本科生的问卷调查结果显示：80％的中国学生和78％的国外留学生喜欢并支持M－PBL组合教学模式，95％的中国学生和90％国外留学生认为该教学模式对病理生理学的学习和复习考试有很好的帮助。该年级《病理生理学》期末理论考试成绩分析结果亦表明，国内学生的及格率85％，优秀率30％，平均分75，外国留学生的及格率77％，优秀率45％，平均分80。国内学生，尤其留学生的成绩较往年提高。
作者：胡贞贞；周晓燕；蔡震宇；熊丽霞；朱俊；晏浩；黄永红；徐方云 刊期： 2015年第10期
目的：动脉外膜所产生的活性氧和新生血管形成，可能导致和促进病理性血管重构的形成。本课题研究NADPH氧化酶在同种异体主动脉移植模型的外膜血管动态表达和新生血管形成。方法：将F344大鼠胸主动脉移植到Lewis腹主动脉造模。于移植后0．5、3、7和14 d收集移植血管，进行形态学分析、免疫组化和定量PCR检测。结果：血管外膜移植后3 d、内膜7 d增厚。移植血管外膜NADPH氧化酶亚基gp91phox和p47phox蛋白和mRNA表达水平3 d开始升高，14 d达高峰。免疫组化显示，巨噬细胞浸润可能是NADPH氧化酶表达的主要来源。而淋巴细胞浸润在各时点无显著差别。移植血管外膜分离、培养的原代成纤维细胞NADPH氧化酶表达也增加。 siRNA－p47phox沉默p47phox基因后，BrdU掺入和Transwell迁移实验显示，移植血管外膜成纤维细胞的增殖和迁移能力显著受抑制。此外，移植14 d，移植血管外膜增厚伴有新生血管形成明显增加，外膜中微血管密度和血管内膜厚度呈正相关。结论：移植损伤可诱导血管外膜NADPH氧化酶表达和新生血管的形成，移植引起的外膜活性提高可能成为预防、治疗血管病变的靶点。
作者：孙梦瑶；郭晓彤；罗坤；刘雪峰；王瑞；王牧川；张恩浩；王建丽 刊期： 2015年第10期
中国病理生理杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国病理生理学会
