廖文婷；刘宝；陈建；崔建华；高伊星；刘福玉；徐刚；孙滨达；张二龙；袁志兵；张钢；高钰琪
传统的课程考试都是根据教师所讲授的内容出题，局限于教材、课堂笔记。这类考试主要考查学生对知识点的记忆情况，无法真正考查学生综合应用所学知识发现问题、解决问题的能力。为改变“一考定成绩”的状况，应该加强平时考核在总成绩中的权重，将考核贯穿平时课程教学的全过程。我们已经连续3年利用学校网络平台进行案例分析测验。根据讲授内容，将课程分成4个阶段，在每个阶段的学习之后，对相应的理论知识进行阶段性考核。具体的考核形式是选择一个临床真实病例，提出相应问题（如病例中所涉及的病理过程、发病机制等），让学生进行综合分析。学生在规定时间内提交报告，由老师判阅，4次报告成绩以20％计入总成绩。在学生提交完报告后，我们在网上公布正确答案及学生的报告，便于学生对相应知识正确理解，同时也利于学生相互监督、防止抄袭。这种形式测验要求学生首先对学习过的病理生理学知识有很好的理解和记忆，其次具备运用所学知识分析及解决问题的能力，让学生充分体会病理生理学与临床知识的紧密联系，从而使学生在平时的学习中对病理生理学产生浓厚的兴趣。
作者：徐海；刘利梅；窦豆；向若兰；吴立玲 刊期： 2015年第10期
目的：观察和探讨乌头碱诱导的心房颤动（房颤）对内皮素1（ ET－1）分泌及其受体表达的影响，并观察ET－1下游的信号通路的变化。方法：采用大鼠左心房离体灌流模型，利用放射性免疫技术检测ET－1分泌的水平；利用蛋白免疫印迹法分析心房肌缝隙连接蛋白40（Cx40）、43（Cx43）、ETA型受体（ETRA）、ETB型受体（ETRB）蛋白水平的变化以及MAPK／ERK和PI3K／Akt的磷酸化作用。结果：房颤时Cx40和Cx43表达明显下调（P＜0．01）；房颤明显促进心房ET－1的分泌（P＜0．01）；房颤时ET受体表达呈现异常，ETRA 明显上调（P＜0．05），而ETRB 则显著下调（P＜0．01）；房颤时ET－1下游的MAPK／ERK及PI3K／Akt信号转导发生变化，pERK及pAkt明显上调（ P＜0．01，P＜0．05）。结论：房颤明显增加心房ET－1的分泌，并导致其受体及其下游ERK和Akt信号通路的异常表达，这可能与房颤诱导的心房肌结构重构相关。
作者：刘丽萍；赵凤娟；张博；洪兰；刘霞；崔勋 刊期： 2015年第10期
目的：采用Urotensin II（ UII）体外诱导法建立HepG2细胞胰岛素抵抗模型，并探讨其机制。方法：采用含不同UII浓度的DMEM培养基培养HepG2细胞，后半小时与1×10－7 mol／L insulin共孵育，葡萄糖－己糖激酶法检测不同时点培养基中葡萄糖含量，以HepG2细胞蛋白进行定量，确定胰岛素抵抗佳作用浓度及时间；多功能酶标仪检测UII诱导hepG2细胞内活性氧（ ROS）变化；Western blot法检测胰岛素受体结合物IRS－1及Akt蛋白的表达。结果：hepG2细胞产生胰岛素抵抗的佳作用时间为24 h，佳UII浓度为1×10－7 mol／L。与空白对照相比，UII刺激hepG2细胞后ROS增高明显（ P＜0．05）；且UII孵育组IRS－1及Akt蛋白的表达明显降低（P＜0．05），提示UII可能通过增高hepG2细胞中ROS而使hepG2细胞产生胰岛素抵抗。结论：采用UII体外诱导的方法，UII浓度为1×10－7 mol／L，作用24 h后，可建立HepG2细胞胰岛素抵抗模型，且UII可能通过诱导HepG2细胞ROS的增高而引起胰岛素抵抗。
作者：李莹莹；禹晓童；王学江 刊期： 2015年第10期
目的：血管平滑肌细胞的增殖是2型糖尿病患者心血管并发症的主要诱因。线粒体分裂和融合失衡可能与细胞增殖相关。高血糖可诱导过量的ROS产生，这可能引起线粒体的分裂。我们假设外源性H2 S降低ROS的产生，抑制线粒体分裂，降低血管平滑肌细胞的增殖。方法和结果：2型糖尿病患者肾动脉和db／db小鼠主动脉中H2 S的水平低于对照组，能够使PCNA （proliferating cell nuclear antigen）、cyclin D1和Drp1（dynamin－related protein－1）蛋白的表达增加，Mfn－2（mitofusion－2）表达降低。外源性H2 S（100μmol／L NaHS）通过BrdU和划痕实验证明抑制高血糖中血管平滑肌细胞的增殖和迁移，增殖相关蛋白表达降低，DCFH及MitoSox染色证实H2 S可降低胞浆和线粒体中ROS产生。 NaHS、线粒体分裂抑制剂（ Mdivi－1）及Drp1 siRNA抑制高糖诱导的血管平滑肌细胞的线粒体的分裂和片段化。结论：外源性H2 S通过减低血管平滑肌细胞中Drp1的表达抑制线粒体的分裂，从而抑制平滑肌细胞的增殖。
作者：张伟华；卢方浩；孙爱丽；刘佳琦；徐长庆 刊期： 2015年第10期
作者： 刊期： 2015年第10期
G蛋白偶联受体（ GPCR）与心血管疾病病、肿瘤、免疫和感染性疾病等重要疾病的发生、发展密切相关。同时，约50％药物都是以受体为靶点。但目前对受体精密调控机制尚不清楚。利用蛋白质组学、活细胞单分子荧光成像等方法，我们研究发现多种G蛋白偶联受体新调控机制。发现了肾上腺素受体新的调控子HIP－55（ hematopoietic progenitor kinase 1［ HPK1］－in－teracting protein of 55 kD）。 HIP－55通过蛋白质相互作用调控肾上腺素诱导转位激活、双相激活等受体激活方式。 HIP－55通过cAMP非依赖途径调控肾上腺素受体介导的p38、ERK1／2等重要信号通路。 HIP－55通过调控受体Clathrin内吞途径介导受体内吞、减敏及下游信号。此外，我们还发现另外一个生长分化因子15（growth differentiation factor－15，GDF－15）。 GDF－15通过抑制MMP途径，负调控肾上腺素诱导EGFR转位激活信号通路。基于G蛋白偶联受体信号调控机制的研究，我们也探索新的受体功能选择性药物研究开发，获得了一些候选化合物。
作者：李子健 刊期： 2015年第10期
本研究探讨CA改善I／R引起的大鼠肝脏微循环障碍和肝损伤的作用及其机理。取体重为180～220 g的SD雄性大鼠，结扎肝脏门管区30 min后再通。部分大鼠经由股静脉连续滴入CA （15 mL? kg－1? d－1）。计算大鼠24 h生存率。观察肝微循环动态。在再灌注120 min时，记录肝脏表面血流量，取肝组织，观察组织学和超微结构变化，分析其分子生物学机理。 CA可以改善大鼠生存率和肝脏微循环障碍，抑制肝过氧化物产生和肝损伤；可与Sirt3结合，改善Sirt3活性、改善Complex I、 II、IV和V的表达，改善SDHA、SDHA、NDUFA9乙酰化、NAD／NADH的变化。 CA还可抑制大鼠肝脏组织的NADPH oxidase亚基p47phox、Rac1和PKC的膜转位，抑制胞膜gp91phox及p22phox的表达。结论：CA能够抑制I／R引起的大鼠肝氧化应激，改善肝脏微循环障碍和肝损伤，该作用与其结合蛋白Sirt3，增加Sirt3活性，提高大鼠线粒体呼吸链活性相关，也与其抑制PKC膜转位，抑制NADPH oxidase亚基p47phox和Rac1的转位相关。
作者：韩晶岩 刊期： 2015年第10期
目的：探讨n－3多不饱和脂肪酸（ n－3 PUFA）对早期非酒精性脂肪肝（ NAFLD）的治疗作用，并通过靶向代谢组学测定n－3 PUFA代谢谱，以期寻找有效的代谢产物并研究其机制。方法：将C57BL／6雄性小鼠分为3组，分别给予正常饮食（ ND）、45％的高脂饮食（ HFD）和添加3％n－3 PUFA的高脂饮食（ HFD＋n－3 PUFA）喂养4 d。结果：短期HFD增加了小鼠肝脏的甘油三酯和血浆中的胆固醇含量，均被n－3 PUFA显著改善。用液相色谱串联质谱法（ LC－MS／MS）靶向检测小鼠血浆的n－3与n－6 PUFA代谢谱发现，高脂饮食可降低EPA的代谢产物HEPEs与EEQs的含量，而n－3 PUFA可显著增加这些代谢产物，提示n－3 PUFA可能通过HEPEs和EEOs发挥其保护作用。然而在原代肝细胞中，EPA、HEPEs或EEQs不能改善软脂酸诱导的脂质沉积。脂肪炎症在HFD引起的代谢紊乱中发挥着重要的作用。 n－3 PUFA可显著改善短期高脂饮食所致的脂肪炎症。巨噬细胞的浸润及活化在HFD诱导的脂肪炎症中至关重要，HEPEs和EEQs可以明显抑制软脂酸刺激诱导的巨噬细胞炎症因子表达及JNK信号通路激活。结果：n－3 PUFA可以通过增加其代谢产物HEPEs与EEQs的含量，改善短期高脂饮食引起的脂肪炎症，继而改善肝脏中的脂质沉积。
作者：刘雯丽；王春炅；姚柳；艾玎；朱毅 刊期： 2015年第10期
目的：当今社会微波的广泛应用及其生物效应引起医学关注，课题组前期证实遍布全身的微血管是微波损伤的重要靶点和影响脏器损伤、修复及预后的重要原因，本工作旨在探讨外源性钙网蛋白（ calreticulin， CRT）对微波所致急性损伤微血管的保护作用及其分子机制；方法：实验用KM小鼠于微波辐射前1天，腹腔给予重组CRT蛋白，辐射后1天行活体耳廓、骨骼肌微循环观察、血浆及骨骼肌活性物质测定、HE及TUNEL染色及Western blot检测。结果：微波辐射可引起微动静脉管径变细、血流减慢、组织水肿、炎细胞浸润等急性广泛性微血管损伤，而外源性CRT明显减轻微血管损伤，血管组织FAK表达及FAK （Tyr397）磷酸化、纤维状肌动蛋白（F－actin）与球状肌动蛋白（G－actin）比例增加。结论：证实外源性CRT促进FAK（Tyr397）磷酸化，调节肌动蛋白排布，维持细胞骨架正常结构，改善微血管功能，减轻微波辐射致急性微血管损伤。
作者：徐菲菲；刘秀华；李玉珍；宋丹丹；刘蜜；陶天琪；李冬 刊期： 2015年第10期
目的：研究长链非编码RNA SNHG5在胃癌中的表达、功能及机制。方法：实时荧光定量 PCR检测SNHG5在胃癌和癌旁组织中的表达差异；在人胃癌细胞中研究过表达或敲低SNHG5对细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响；建立裸鼠皮下及转移瘤模型，研究SNHG5在体内对肿瘤发生发展及转移的影响；利用RNA－pulldown联合质谱的策略寻找SNHG5的相互结合蛋白，再通过RIP进行验证。结果：发现SNHG5在胃癌组织中表达异常增高，其表达水平与肿瘤的TNM分期和癌栓的形成显著相关。 SNHG5可以抑制胃癌细胞在体内外的增殖和转移。此外还发现，SNHG5主要通过阻止其结合蛋白MTA2从细胞质到细胞核的易位而发挥功能。过表达SNHG5能够促进组蛋白H3和p53的乙酰化水平，这也提示SNHG5可能通过捕获细胞质中的MTA2，从而干扰核小体的重塑和组蛋白去乙酰化酶复合物的形成，进而调节其功能。结论：SNHG5是一个影响胃癌细胞增殖和转移的关键分子，可能成为胃癌的预防、诊断和治疗的新靶标分子。
作者：史娟 刊期： 2015年第10期
目的：探讨靶向干扰 CIAPIN1基因表达对慢性粒细胞白血病（ CML）细胞系K562细胞增殖能力的影响。方法：针对CIAPIN1基因构建shRNA真核表达载体并稳定转染K562细胞系。 Real－time PCR及Western blotting技术鉴定干扰效率；CIAP－IN1基因沉默之后，改良MTT法检测细胞活力的变化；甲基纤维素集落形成实验观察细胞集落形成大小和数量的变化；流式细胞术检测细胞周期的改变；将K562细胞接种到裸鼠体内皮下，观察细胞在裸鼠体内成瘤能力的变化。结果：CIAPIN1基因表达下调后，K562细胞的活力下降；集落形成数量减少和集落减小；G1期细胞数量增加；小鼠体内成瘤能力明显降低。结论：下调CIAPIN1基因表达能够抑制K562细胞在体外及体内的增殖能力。
作者：王齐；王建；李庆华；庞天翔 刊期： 2015年第10期
目的：探讨靶向干扰SIRT2基因表达对急性粒细胞白血病（ AML）多药耐药细胞株HL60A细胞增殖的影响。方法：针对SIRT2基因构建shRNA真核表达载体，制备慢病毒并感染HL60A细胞。沉默SIRT2基因之后，改良MTT法检测对HL60A细胞活力的影响；甲基纤维素集落形成实验观察对HL60A细胞集落形成能力的影响；采用流式细胞术检测分析对HL60A细胞的细胞周期的影响。结果：干扰组SIRT2基因的表达量被有效抑制；干扰SIRT2基因表达量后，HL60A细胞的细胞活力明显下降，集落形成数量减少及集落的形状减小，细胞被明显阻滞于G1／S期。结论：shRNA靶向干扰SIRT2基因的表达可有效抑制急性粒细胞白血病耐药细胞系HL60A细胞的增殖。
作者：许华；王齐；李元叶；李庆华；庞天翔 刊期： 2015年第10期
目的：研究低压低氧对大鼠血清碱性成纤维细胞生长因子（ bFGF）和血管内皮细胞生长因子（ VEGF）表达的影响，探讨bFGF和VEGF在低氧性肺动脉高压发生中的作用。方法：60只健康雄性SD大鼠随机分为常氧组以及低氧1 d、7 d、14 d、21 d和30 d组（n＝10）。除常氧组外，余5组大鼠置于模拟海拔5000米的低压氧舱中饲养，各时点取血清，运用ELISA方法检测血清中bFGF和VEGF含量。结果：各低氧组血清bFGF的表达均高于常氧组（ P＜0．05），随低氧时间的延长，血清bFGF表达量呈逐渐升高趋势（P＜0．05）；低氧1 d，血清VEGF表达明显升高（P＜0．05），低氧时间延长，血清VEGF含量呈逐渐下降趋势（ P＜0．05）。结论：低压低氧在致肺动脉高压形成过程中，可引起血清bFGF的表达明显上调，急性缺氧可导致血清VEGF水平升高，bFGF在低氧性肺动脉高压形成过程中起主要作用。
作者：刘川川；刘杰；庞明泉；苏婷婷；张宁；王生兰 刊期： 2015年第10期
病理生理学是一门联系基础医学与临床医学的桥梁学科，其理论性、实践性均很强。但传统的病理生理学教学中，教师只是枯燥地按教材讲授理论知识，与临床实践及科研实践严重脱节。再加之中医院校本学科教学时数少，有的学校只把它作为选修课，中医学生的西医基础相对薄弱等，使得病理生理学实验教学在中医院校处于尴尬的境地。鉴于此，教师正努力寻求适合中医院校的病理生理学教学模式。与传统教学模式不同，以团队为基础的教学（ team－based learning，TBL）模式强调以团队为基础，以学生为主体，以教师为引导，倡导互助式和讨论式学习，其大的优势在于这种基于团队的学习模式不仅仅局限于课堂上，学生在课外可以获得更多的学习时间和空间。我校开展了多种病理生理学相关课外TBL教学，以团队为基础开展“疾病专题论坛”活动、以团队为基础参加国家及省级科技挑战竞赛、以团队为基础撰写科研论文及参加论文比赛等，通过课外TBL教学激发学生学习病理生理学的兴趣，提高学生学习的积极性、主动性、创造性，同时又能培养学生的团队协作能力和人际交往能力。
作者：高原；王哲；井欢；王莹；潘茜；于丹；刘春英 刊期： 2015年第10期
目的：发掘在乳腺癌耐药性细胞中表达错调的长链非编码RNA（ long noncoding RNA， lncRNA）。方法：对敏感和耐药性乳腺癌细胞中的lncRNA表达分别进行芯片检测。检测后结果经生物信息统计学分析对lncRNA进行归类和功能网络预测。结果：与敏感细胞相比，他莫昔芬和曲妥珠单抗耐药细胞中表达上调和下调的lncRNA分别为2107、611、1154和2141种，其中在2种耐药细胞株中共同表达错调的有93种。对共同表达上调的69种lncRNA的功能预测发现2种与在乳腺癌耐药性中发挥作用的蛋白编码基因或microRNA相关，2种参与有丝分裂节点或DNA损伤引发的细胞死亡。结论：本研究发现大量在他莫昔芬与曲妥珠单抗耐药细胞中异常表达的lncRNAs，但同时在2种细胞中异常表达的数量极少，提示lncRNAs在肿瘤药物耐药性中具有较强特异性。本研究还通过生物信息学分析，建立了一种新型的基于功能预测的靶基因筛选方法。
作者：张秀磊；王志宇；朱涛；汪香婷 刊期： 2015年第10期
作者： 刊期： 2015年第10期
目的：通过分析C57BL／6野生型小鼠和TRPV1基因敲除鼠热性惊厥行为学、脑内炎性因子表达变化，探讨TRPV1对热性惊厥发生及复发的致病机制。方法：高热诱导C57BL／6野生型小鼠和TRPV1基因敲除鼠热性惊厥后：比较两组间热性惊厥行为学、脑电图及核心温度的差异；ELISA检测两组间大脑及经辣椒素和高热处理后BV2细胞中炎性因子的表达差异。结果：（1）行为学评分显示，与野生型小鼠相比：TRPV1基因敲除鼠经高热诱导惊厥后，其潜伏期延长，惊厥持续时间缩短，发作等级降低；TRPV1基因敲除鼠热性惊厥发作时无明显惊厥脑电棘波；TRPV1基因敲除鼠惊厥发作时核心温度升高；（2）野生型小鼠大脑海马和皮质中炎性因子的表达水平较常温对照组明显升高，TRPV1基因敲除鼠中未检测到类似结果；（3）经辣椒素、高热处理后，永生小胶质细胞系BV2分泌炎性因子的水平显著增加。结论：激活TRPV1可刺激炎性因子分泌，促进反复热性惊厥的发生，提示TRPV1通道可能是热性惊厥发生的潜在易感基因。
作者：黄文先；余方；刘玉强；闵加威；胡江建；韩松；刘万红；彭碧文；何小华 刊期： 2015年第10期
目的：探讨游离脂肪酸（ free fatty acid， FFA）激活上皮细胞钠通道（ epithelial sodium channel， ENaC）的分子机制，以及H2 S对抗FFA引起ENaC异常激活的作用和机制。方法：应用肾皮质集合管上皮细胞，采用膜片钳技术研究H2 S对抗FFA引起ENaC异常激活的保护作用和分子机制；应用激光共聚焦显微镜技术观察FFA能否调节细胞内钙水平和细胞内ROS水平。结果：FFA通过胰岛素受体磷酸化、NADPH、PI3K和IP3受体介导的钙释放调节ENaC活性；H2 S通过氧化还原反应抑制FFA引起的ENaC的异常激活。结论：FFA通过诱导胰岛素受体磷酸化，引起细胞内钙释放，进而激活NADPH升高细胞内活性氧水平，引起ENaC异常激活。气体信号分子H2 S通过氧化还原反应抑制FFA引起的ENaC异常激活。
作者：王秋石；张志仁 刊期： 2015年第10期
目的：观察endostatin对小鼠巨噬细胞极化的影响。方法：Endostatin转染RAW264．7细胞和小鼠骨髓巨噬细胞（ BM－DMs）；RT－PCR、ELISA、HE染色和MTT检测其对RAW264．7细胞的影响；流式细胞术、ELISA、real－time PCR、Western blot和萤光素酶报告基因检测巨噬细胞极化标记物和NF－κB转录活性。结果：表达质粒能使RAW264．7细胞和BMDMs高表达en－dostatin；HE染色和MTT发现endostatin使RAW264．7细胞的形态发生变化并抑制其增殖；流式细胞术、ELISA和real－time PCR发现，endostatin能使RAW264．7细胞和BMDMs高表达NOS2、IL－6和IL－12p40（M1型巨噬细胞标志物），同时使CD206、IL－10和Arg－1（M2型巨噬细胞标志物）表达下降或不变；萤光素酶报告基因发现endostatin使NF－κB的转录活性增加；Western blot发现p－IκBα、p－p65和p－Stat1表达增加，而p－Stat3表达下降。结论：Endostatin可能通过调节NF－κB通路使小鼠巨噬细胞向M1型发生极化。
作者：郭花；刘莲勤；张平；顾俊莲；王玥；刘亚男；李扬 刊期： 2015年第10期
主线式PBL（ main－problem－based learning， M－PBL）是我们在多年教改实践中探索出以PBL为基础的一种创新的组合教学模式，包括主线式PBL，主线式单元串讲和病例讨论。主线PBL突出病理生理学课程内容的整体性和连贯性，主线单元串讲则强调各病理过程间的内在联系，病例讨论重在培养学生的临床综合思维能力。授课后对本校临床专业2012级1155名中国和外国本科生的问卷调查结果显示：80％的中国学生和78％的国外留学生喜欢并支持M－PBL组合教学模式，95％的中国学生和90％国外留学生认为该教学模式对病理生理学的学习和复习考试有很好的帮助。该年级《病理生理学》期末理论考试成绩分析结果亦表明，国内学生的及格率85％，优秀率30％，平均分75，外国留学生的及格率77％，优秀率45％，平均分80。国内学生，尤其留学生的成绩较往年提高。
作者：胡贞贞；周晓燕；蔡震宇；熊丽霞；朱俊；晏浩；黄永红；徐方云 刊期： 2015年第10期
中国病理生理杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国病理生理学会
