王齐；王建；李庆华；庞天翔
目的：观察超声心动图斑点追踪能否早期发现和诊断异丙基肾上腺素（ ISO）引起的心脏功能异常。方法：将成年C57雄性小鼠分为对照、ISO给药后3 d和ISO给药后7 d组。 ISO组为一次性给予ISO 5 mg／kg皮下注射，分别于给药后3 d和7 d应用传统超声心动图及斑点追踪评价小鼠心脏功能。结果：（1）应用传统超声心动图方法测得ISO给药后3 d组FS和E／Em均无明显差异，给药后7 d FS仍无明显差异，而E／Em显著增加（P＜0．05）。超声心动图斑点追踪方法在给药后3 d即观测到心脏径向应变（ radial strain，RS）和纵向应变（ longitudinal strain，LS）均较对照组显著降低（ P＜0．05）；给药后7 d组的RS和LS亦显著低于对照组（ P＜0．05）。结论：相对于传统超声心动图方法，斑点追踪方法能够早期诊断ISO引起的心脏功能异常。
作者：安祥博；张幼怡；宋峣 刊期： 2015年第10期
目的：我们的前期结果表明，CD38缺失可显著抵抗高脂饮食诱导的小鼠肥胖，本文旨在探讨CD38在脂肪细胞分化中的作用及其机制。方法：制备野生型及CD38基因敲除的小鼠胚胎成纤维细胞（ MEF），诱导MEF向脂肪细胞分化，油红O染色检测脂肪细胞分化过程中脂质堆积的情况，同时采用real－time PCR检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ（ PPARγ）和脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白（ aP2） mRNA水平表达，Western blot检测PPARγ、Sirt1以及脂质合成相关蛋白SREBP1、FASN的表达水平。结果：3T3－L1、野生型MEF及C3H10T1／2细胞分化过程中CD38的表达随分化显著升高。 CD38缺失的MEF细胞分化后脂滴明显少于WT，PPARγ及aP2表达显著下调，脂质相关蛋白SREBP1和FASN的表达也显著下调，而Sirt1表达升高。在对野生型及CD38缺失小鼠的MEF诱导分化脂肪细胞时给予Sirt1抑制剂尼克酰胺，与野生型相比CD38缺失鼠MEF细胞PPARγ及aP2的表达明显抑制。高脂饮食喂养发现，CD38缺失小鼠脂肪含量明显少于野生型小鼠，同时分化相关基因的表达也显著下调。经Sirt1抑制剂尼克酰胺处理8 d后，3T3－L1前脂肪细胞中PPARγ、aP2和FASN的mRNA水平均上调，Sirt1激动剂白藜芦醇则可下调以上基因的表达。结论：CD38缺失主要通过Sirt1／PPARγ信号通路抑制脂肪细胞分化。
作者：汪玲芳；苗连杰；汪小女；邓立彬；金万洙；王小磊；邓柯玉；辛洪波 刊期： 2015年第10期
目的：探讨血栓素A2（ TXA2）受体TP拮抗剂对2种多发性骨髓瘤细胞系RPMI－8226及U266细胞增殖的影响及其作用机制。方法：利用多种抑制剂及激动剂刺激RPMI－8226及U266后，采用试剂盒检测细胞的增殖率及caspase－3活性；采用流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞周期；通过real－time PCR检测DP1－2、EP1－4、FP、IP、TP及CDK1、cyclin B1的mRNA变化；采用Western blot检测COX－1、COX－2、CDK1、cyclin B1、p－JNK、T－JNK、p－p38 MAPK、T－p38 MAPK的蛋白表达；LC／MS／MS方法检测PG产量。结果：（1）在COX下游受体中，只有TP拮抗剂能够明显抑制2种骨髓瘤细胞的增殖（P＜0．05）。（2）同时，其还能够促进细胞停滞在G2／M期，并导致cyclin B1／CDK1的mRNA和蛋白水平明显下调（P＜0．05）。（3） p38 MAPK及JNK抑制剂能够明显抑制TP激动剂导致的细胞增殖增加，并下调其导致的p38 MAPK／JNK磷酸化及cyclin B1／CDK1的蛋白增加（ P＜0．05）。（4）TP拮抗剂能够提高骨髓瘤细胞凋亡率，并显著增加caspase－3活性（P＜0．05）。结论：（1） TP拮抗剂能够抑制2种骨髓瘤细胞的增殖。（2）这种抑制是通过p38 MAPK／JNK通路下调cyclin B1／CDK1蛋白表达从而使细胞阻滞在G2／M期实现的。（3）也可通过促进细胞凋亡实现。
作者：刘倩；余鹰；于昱；熊红 刊期： 2015年第10期
目的：活性氧（ ROS）调节诱导性多能干细胞（ iPSCs）向内皮细胞分化的分子机制还不清楚。本研究旨在探讨NADPH氧化酶2（Nox2）来源的ROS在iPSCs向内皮细胞分化中的作用和分子机制。方法和结果：我们利用野生型和Nox2基因缺失型小鼠胚胎成纤维细胞，诱导生成小鼠iPSCs，发现Nox2基因缺失的小鼠iPSCs分化的血管内皮细胞（ Nox2－／－miPSC－ECs）中， ；ROS水平、VEGF表达、内皮和动脉内皮细胞标志物以及Notch信号通路分子的表达均明显下调，且这种下调能被Nox2或Notch1过表达所逆转。外源性低浓度的H2 O2或过表达Nox2激活Notch信号通路，促进动脉内皮细胞标志物的表达，这种作用可被ROS抑制剂或抑制Notch1表达所阻断。 Nox2基因缺失导致iPSCs分化的内皮细胞存活、增殖、迁移及管腔形成能力下降。将Nox2－／－miPSC－ECs移植到小鼠缺血下肢肌肉中，缺血肢的毛细血管和小动脉密度明显低于对照ECs组， VEGF和Notch1表达下降。结论：Nox2产生的ROS通过激活Notch信号通路促进iPSCs向动脉内皮细胞分化。
作者：魏香香；康雪玲；蒋丽；牛琮；王新红；陈思锋；孟丹 刊期： 2015年第10期
目的：研究急性粒细胞白血病（AML）患者的间充质干细胞（MSC）对骨髓单个核细胞增殖及耐药性的影响。方法：分离AML患者及对照MSC与骨髓单个核细胞共培养，阿糖胞苷药物处理，检测骨髓单个核细胞的增殖活性；流式细胞术检测骨髓单个核细胞凋亡；超速离心提取MSC的外泌体（ exosome），电镜及Western blot检测外泌体；还将外泌体与患者骨髓单个核细胞共培养，检测其对骨髓单个核细的增殖和凋亡的影响。结果：与AML患者的MSC及其外泌体共培养的骨髓单个核细胞，被药物诱导凋亡细胞的数量减少，细胞存活率增高。结论：AML来源MSC对正常骨髓单个核细胞和病人的骨髓单个核细胞有一定的药物耐受性诱导作用，外泌体可能作为载体在此过程中运输某些信号传递分子。
作者：许华；陈龙；李元叶；王齐；李庆华；庞天翔 刊期： 2015年第10期
目的：探讨白藜芦醇（ Res）对低氧内皮细胞炎症反应的影响及机制。方法：人脐静脉内皮细胞（ HUVEC）分为常氧组、低氧组（1％O2培养48 h）、低氧＋Res（15μmol／L）组。分别采用qRT－PCR法检测SIRT1、IL－6和ICAM－1 mRNA的表达；Western blot法检测SIRT1、PGC－1α、磷酸化NF－κB p65蛋白表达，流式细胞术检测活性氧（ ROS）表达。结果：低氧致HUVECs SIRT1 mRNA和蛋白、PGC－1α蛋白表达均显著下调（ P＜0．01）， IL－6、ICAM－1 mRNA和磷酸化NF－κB p65蛋白表达显著升高（ P＜0．01），促进ROS生成（P＜0．01）。 Res可上调低氧HUVEC SIRT1 mRNA和蛋白、PGC－1α蛋白表达（P＜0．01），下调IL－6、ICAM－1 mRNA和磷酸化NF－κB p65蛋白表达（ P＜0．01），抑制ROS 生成（ P＜0．01）。结论：低氧可促进HUVEC炎症反应， Res可抑制低氧HUVEC炎症反应，其机制可能与Res通过促进低氧HUVEC SIRT1表达，进而促进PGC－1α表达致ROS生成减少，ROS生成减少抑制了NF－κB p65的激活，进而抑制炎症反应有关。
作者：李明红；袁志兵；高钰琪 刊期： 2015年第10期
目的：探讨糖基化终末产物（ AGEs）激活上皮细胞钠通道（ ENaC）的作用，及H2 S对抗AGEs引起ENaC异常激活的机制研究。方法：应用膜片钳记录爪蟾肾皮质集合管上皮细胞ENaC电流，研究H2 S对抗AGEs引起ENaC激活的机制；应用共聚焦显微镜技术观察H2 S对AGEs引起胞内活性氧水平升高的调节作用；应用分子生物学实验检测AGEs处理后过氧化氢酶的表达水平变化。结果：AGEs通过抑制过氧化氢酶的表达引起胞内活性氧水平升高进而上调ENaC活性；H2 S通过削弱AGEs引起活性氧水平增高从而逆转AGEs引起ENaC的激活；PTEN／PI3 K通路参与了AGEs上调ENaC活性。结论：AGEs通过抑制过氧化氢酶的表达上调胞内活性氧水平，并通过PTEN／PI3K途径调节ENaC活性，该作用可被H2 S逆转，并且AGEs上调ENaC活性具有代谢记忆现象。
作者：梁辰；张志仁 刊期： 2015年第10期
Intermedin（ IMD）是2004年发现的肾上腺髓质素家系的新成员。 IMD具有抗氧化、抗炎、调节内分泌代谢、调节免疫等生物学效应，是新的内源性心血管、肾脏保护因子。我们及国外实验室均报道，IMD可以显著抑制动脉粥样硬化以及巨噬细胞向泡沫细胞的转变；IMD还可以通过抑制内质网应激以及上调基质Gla蛋白抑制血管钙化的发生发展。近期我们在ApoE－／－小鼠用微量渗透泵给予血管紧张素II（ Ang II）诱导的腹主动脉瘤（ AAA）及血管平滑肌细胞（ VSMC）上发现IMD可以降低腹主动脉瘤的发生率和腹主动脉大直径，抑制主动脉内活性氧（ ROS）的产生，降低NADPH氧化酶的活性及其亚单位Nox1、Nox2和Nox4的蛋白表达。另外，IMD显著抑制基质金属蛋白酶的激活，减轻CD68阳性巨噬细胞的浸润和炎症因子表达，抑制VSMC凋亡。 IMD抑制Nox1和Nox4蛋白表达的作用可被IMD特异性受体抑制剂IMD17－47和cAMP／PKA通路阻断剂H89所阻断。这些结果提示IMD可能通过cAMP／PKA通路抑制Nox4介导的氧化应激抑制AAA的发生发展。
作者：齐永芬 刊期： 2015年第10期
目的：创伤后应激障碍（ PTSD）是心血管疾病的独立危险因素，但PTSD导致心肌损伤的分子机制尚不明确。方法：48只SD大鼠随机分为control组（n＝18）和PTSD组（n＝30），采用单一延长刺激法复制PTSD大鼠模型，通过旷场实验检测行为学改变，TUNEL法检测心肌细胞凋亡率，应用透射电镜观察心肌细胞超微结构，Western blotting方法分析心肌ERS分子的表达及活化。结果：造模后第14天，与control组大鼠比较，PTSD大鼠在旷场中直立次数及穿行格数均显著减少（ P＜0．01）；通过TUNEL染色及透射电镜观察发现PTSD大鼠心肌细胞出现典型凋亡特征；PTSD大鼠心肌组织中Bcl－2／Bax显著下降（ P＜0．01），葡萄糖调节蛋白78（GRP78）及钙网蛋白（CRT）表达上调，CCAAT／增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）表达上调、caspase 12剪切活化增加以及蛋白激酶样内质网激酶（ PERK）磷酸化增加（ P＜0．05）。结论：心肌细胞ERS相关凋亡的PERK／CHOP和caspase 12途径可能介导PTSD大鼠心肌损伤。
作者：刘蜜；徐菲菲；陶天琪；宋丹丹；李冬；李玉珍；郭渝成；刘秀华 刊期： 2015年第10期
目的：检测SLC14a1基因在小鼠脑组织的表达定位；探讨SLC14a1基因缺失小鼠给予高盐饮食后脑脊液钠离子浓度的变化。方法：（1）以野生型小鼠为研究对象，检测SLC14a1 mRNA和蛋白在小鼠脑组织中表达及定位。（2）以SLC14a1基因缺失小鼠为研究对象，以野生型小鼠为对照，分别给予普通饮食（0．4％NaCl）和高盐饮食（8％ NaCl）2周；观察各组动物血压的变化；（3）对比观察2组动物脑脊液钠离子浓度。结果：（1）RT－PCR方法显示SLC14a1 mRNA在小鼠脑组织；免疫组织化学染色方法及Western blot方法检测SLC14a1蛋白表达于小鼠脑组织脉络丛；（2）给予高盐饮食2周后，SLC14a1基因缺失小鼠组小鼠血压显著增高（P＜0．05 vs普通饮食）；（3）给予高盐饮食后，SLC14a1基因缺失小鼠脑脊液钠离子浓度显著高于野生型小鼠（P＜0．05）。结论：SLC14a1基因表达于小鼠脑组织脉络丛，SLC14a1基因的缺失能增加高盐饮食小鼠脑脊液钠离子浓度。
作者：王松；林子琦；林海雪；李金燕；郭丽荣 刊期： 2015年第10期
目的：观察A型肉毒素重链（ botulinum neurotoxin serotype A heavy chain， BoNT／A HC）对Neuro－2的促神经再生作用。方法：（1）在细胞培养液中加入不同浓度的BoNT／A HC，于3个时点收集细胞做免疫荧光检测轴突长度和有突起细胞的百分比。（2）在培养液中加入同一浓度的BoNT／A HC，分别作用不同时间收集细胞，通过免疫荧光检测平均吸光度对磷酸化ERK1／2进行半定量分析。结果：BoNT／A HC作用3个时点后轴突长度及有突起细胞百分比与对照组相比，低浓度效果不显著，其余浓度皆显著增高（ P＜0．05）；BoNT／A Hc组平均吸光度与对照组比较，10 min 差异无统计学意义，其余时点均有意义（ P＜0．05）。结论：一定剂量的BoNT／A HC不仅可以促进神经细胞轴突增长，还可以促进细胞长出突起，并使再生信号蛋白磷酸化ERK1／2的表达增加，表明A型肉毒素重链对Neuro－2细胞的促神经突起再生作用可能与ERK1／2的磷酸化有关。
作者：高美玲；李夏青 刊期： 2015年第10期
目的：以线粒体保护剂环孢菌素A（ CsA）作为干预因素，观察线粒体功能障碍在失血性休克淋巴管低反应性中的作用。方法：建立失血性休克大鼠模型（40 mmHg，3 h），休克＋CsA组在低血压1 h后注射CsA（6 mg／kg）。观察CsA对胸导管组织淋巴管平滑肌细胞（ LSMCs）线粒体超微结构的影响；制备胸导管组织匀浆，应用高效液相色谱方法检测与线粒体功能相关的能量代谢指标；制备淋巴管环，应用微血管压力－肌动仪观察CsA对离体淋巴管收缩性及其对P物质反应性的影响。结果：休克组LSMCs线粒体出现水肿，有明显的电子透亮区，部分呈空泡状，有特殊包囊物质生成；CsA可减轻失血性休克导致的LSMCs线粒体结构损伤。休克组淋巴管组织ATP、ADP、AMP及总腺苷酸量（ TAN）含量均显著低于、能荷（ EC）高于假手术组；休克＋CsA组淋巴管组织ATP、ADP、AMP及TAN的含量均显著高于休克组。失血性休克大鼠离体淋巴管收缩性及反应性降低，CsA提高了失血性休克后淋巴管的收缩性与反应性。结论：线粒体功能障碍在失血性休克淋巴管低反应性发生中发挥一定的作用。
作者：王淮淮；张立民；张晓丽；白雪梅；赵自刚；牛春雨 刊期： 2015年第10期
目的：探讨纤连蛋白／整合素β对短期高脂饮食诱导的脂肪肝的作用及其机制。方法：ATN161为整合素β的拮抗剂。将雄性C57BL／6小鼠分为4组，正常饮食（ND）组，ND＋ATN161组，高脂饮食（HFD）组，HFD＋ATN161组，处理5 d后检测脂肪肝表型及脂代谢相关基因的表达。并用纤维连接蛋白（ FN）和ATN161处理HepG2细胞后检测相关基因的表达。结果：HFD组小鼠肝脏甘油三酯（ TG）和胆固醇（ CHO）含量增加；HFD＋ATN组肝脏TG和CHO含量进一步增加。 HFD组小鼠肝脏FN表达量升高，肝脏X受体（ LXR）下游靶基因（ CHREBP、SREBP1、SCD1、ACC和FAS）表达量下降；HFD＋ATN组小鼠上述基因表达量均有所回升。予FN处理的HepG2细胞中，LXR下游靶基因表达量下降，表明LXR活性被抑制；ATN处理可恢复FN导致的LXR活性抑制。结论：FN与整合素β结合可抑制LXR活性，抑制整合素β可进一步增加高脂饮食诱导的肝脏脂质沉积。
作者：张菲菲；张学娇；姚柳；王春炅；艾玎 刊期： 2015年第10期
目的：探讨银杏叶提取物（ GBE）对阿尔茨海默病（ AD）的预防与治疗作用及其机制。方法：大鼠尾静脉注射高半胱氨酸（ Hcy）2周构建AD模型。实验分为对照组（生理盐水）、模型组（ Hcy）和预防组（ Hcy＋GBE），治疗组（ Hcy注射2周后给予GBE 1周）。水迷宫检测大鼠学习记忆。 Western blot检测大鼠海马和皮质中tau及其磷酸化、GSK－3β及其磷酸化、PP2A及其甲基化、PSD95、synapsin I的变化。结果：（1）水迷宫提示模型组大鼠潜伏期显著高于其它3组。（2）大鼠海马和皮质中tau、GSK－3β和PP2A表达无变化，tau磷酸化和PP2A甲基化模型组显著高于其它3组，GSK－3β磷酸化和PSD95、synapsin I表达模型组显著性低于其它3组。结论：GBE能通过调节GSK－3β和PP2A活性预防和治疗Hcy导致的大鼠学习记忆障碍和tau过度磷酸化。
作者：曾宽；黄芳；包建；李梦珠；王小川 刊期： 2015年第10期
目的：观察缬沙坦联合还原型谷胱甘肽对糖尿病大鼠血清血管紧张素II和血管内皮生长因子水平变化和肾损伤的影响。方法：采取链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型，随机分为以下5组：正常对照组、模型组、缬沙坦干预组、还原型谷胱甘肽干预组和缬沙坦联合还原型谷胱甘肽干预组。持续给药干预治疗8周后，腹主动脉采血，以ELISA法测定血清AngⅡ和VEGF的水平；处死大鼠并取双侧肾，观察肾组织病理变化；免疫组化方法测定Ⅲ型胶原表达。结果：与正常组比较，模型组血清血管紧张素II和血管内皮生长因子水平升高（P＜0．05），肾病理改变表现肾小管管腔有一定的扩张变宽，肾间质有大量被深染为蓝色的炎症细胞浸润，纤维化比较明显，Ⅲ型胶原的表达明显增多；各给药组与模型组比较，血清血管紧张素II和血管内皮生长因子水平、肾小管管腔增宽、炎症细胞浸润和纤维化改变的程度均有减轻（ P＜0．05），Ⅲ型胶原的表达明显减少，联合给药组各项指标均优于单一给药组（ P＜0．05）。结论：缬沙坦联合还原型谷胱甘肽可有效降低糖尿病大鼠血清血管紧张素II和血管内皮生长因子水平，减轻糖尿病大鼠肾脏损伤，一定的程度上延缓糖尿病肾病的进展。
作者：邹平；弓慧杰；陈蓉 刊期： 2015年第10期
目的：了解中国9个中心城市10家教学医院ICU内耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（ MRSA）的耐药性、同源性及分子流行病学特点。方法：收集鉴定出2010年10月至2011年12月间全国10家ICU内的MRSA菌株149株。检测其对18种抗菌药物的耐药性，利用脉冲场凝胶电泳（PFGE）技术进行同源性分析，并应用多位点序列分析（MLST）技术进一步进行序列型（ST）分型。结果：药敏试验结果显示万古霉素及利奈唑胺仍对MRSA敏感，氯霉素、利福平、复方新诺明及庆大霉素对MRSA的敏感性相对较高，而其它药物对MRSA的敏感性均较低；PFGE主要型别为J、C、G、F四型（ J、C、G集中在北方地区，F集中在南方地区）；全国MLST分型以ST－239为主，东北亚地区ST－5占比较高。结论：目前ICU内可选的对MRSA敏感的抗菌药物种类已经十分有限；ICU内MRSA的区域性同源性较高，可能存在同源性播散性感染，需要继续加强监测并采取有效的院感控制措施避免MRSA同源暴发流行。
作者：秦永新；李青栋；万献尧；毕丽岩；王晶 刊期： 2015年第10期
作者： 刊期： 2015年第10期
作者： 刊期： 2015年第10期
治疗性抗体赫赛汀可特异性地靶向Her2过表达的乳腺癌细胞，目前已成为乳腺癌临床治疗的一线用药，但耐药成为制约其临床疗效的关键问题。大量流行病学的研究结果表明，患者心理及情绪因素对肿瘤的进展及患者的预后产生重要影响。长期处于慢性应激反应状态的人群体内应激相关激素儿茶酚胺的水平持续升高。我们发现，儿茶酚胺的重要受体β2肾上腺素能受体（β2－AR）与Her2在乳腺癌细胞中可形成正反馈表达调控环路，增强促生存信号。由此推断β2－AR介导的信号通路激活可能影响Her2阳性乳腺癌细胞对赫赛汀的反应性。本研究对上述假设进行验证，并对其机制进行解析。临床样本检测的结果表明，β2－AR表达水平与Her2阳性乳腺癌患者赫赛汀反应性之间呈负相关，β2－AR高表达患者的赫赛汀病理完全反应率显著低于表达β2－AR低表达患者组。体内外实验亦证实，儿茶酚胺刺激通过激活β2－AR介导信号通路显著拮抗赫赛汀的抑增殖效应。儿茶酚胺刺激激活β2－AR介导信号网络，导致PI3K／Akt／mTOR信号通路异常活化，诱导乳腺癌细胞对赫赛汀产生抗性。本项研究对于乳腺癌新型治疗方案的建立具有潜在的临床意义。
作者：刘丹；杨争艳；王涛；郭靓；陈泓宇；邓悫；刘彦君；赵敏；王晓萌；杜楠；郭宁；施明 刊期： 2015年第10期
目的：探讨促红细胞生成素（ EPO）对压力超负荷大鼠心肌NADPH氧化酶的影响。方法：SD雄性大鼠，腹主动脉结扎复制高血压模型。随机分成3组：模型组（ model）；假手术组（ sham）：除不缩窄腹主动脉外，其余操作同腹主动脉缩窄组；重组人促红细胞生成素治疗组（ rhEPO，腹腔注射4000 U／kg，每周2次）。8周后，心动超声和血流动力学评价心功能； Masson染色观察心肌纤维化程度；实时荧光定量PCR检测Nox2和Nox4 mRNA 表达， Western blot 观察心肌Nox2、Nox4和炎性因子CD45、F4／80、TGF－β蛋白表达。结果：与模型组比较，EPO治疗组LVEF、LVFS、LVESP及±dp／dtmax升高， LVESD、LVEDD及LVEDP下降；同时，EPO可降低压力超负荷所致的心肌纤维化，降低心室肌中NADPH氧化酶活性及心肌炎性反应。结论：EPO通过降低NADPH氧化酶活性，抑制心肌氧化应激水平，减少心肌炎性反应，抑制压力超负荷所致大鼠心肌重构，改善心功能。
作者：王丽萍 刊期： 2015年第10期
中国病理生理杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国病理生理学会
