王建辉
目的：观察环黄芪醇对脑缺血再灌注大鼠神经元凋亡和端粒酶逆转录酶（ telomerase reverse transcriptase， TERT）表达的影响。方法：制作大鼠右侧大脑中动脉栓塞模型，缺血2 h再灌注24 h。用免疫组织化学法和蛋白印迹法检测大鼠缺血侧皮质中TERT蛋白的表达。用TUNEL染色法检测大鼠缺血侧半暗带区神经元的凋亡指数。结果：模型组较假手术组TERT的表达升高（P＜0．05）。环黄芪醇组较模型组TERT表达升高（P＜0．05）。模型组、端粒酶抑制剂组、端粒酶抑制剂＋环黄芪醇组的凋亡指数较假手术组均上升（P＜0．01）；环黄芪醇组凋亡指数较模型组明显降低（P＜0．05）；与环黄芪醇组相比，端粒酶抑制剂＋环黄芪醇组凋亡指数上升（P＜0．05）；与抑制剂组比较，抑制剂＋环黄芪醇组凋亡指数无显著差异（P＞0．05）。结论：环黄芪醇能抑制脑缺血再灌注大鼠神经元凋亡，该作用是通过促进TERT表达来实现的。
作者：高维娟 刊期： 2015年第10期
目的：高盐膳食是高血压等心血管疾病的主要危险因子。咖啡因是咖啡中的主要成分，具有急性利尿、利钠的作用，而长期使用咖啡因后对血压和尿钠排泄的影响还不清楚。本研究的目的是观察慢性咖啡因干预对血压和尿钠排泄的作用，并探讨其机制。方法：通过手术在盐敏感大鼠体内植入血压传感器，8％高盐饲料（对照组）或8％高盐饲料＋0．1％咖啡因饮用水（咖啡因组）干预大鼠15 d。检测大鼠血压变化，血管功能，心脏结构和功能，尿电解质。健康志愿者喝含咖啡因的咖啡（含300 mg咖啡因）或去咖啡因的咖啡，测量24 h尿钠排出和动态血压。结果：（1）慢性咖啡因干预减轻高盐膳食导致的盐敏感大鼠血压升高而不影响其交感神经活性。（2）慢性咖啡因干预增加大鼠尿钠排泄总量而不影响排尿量，该作用与激活皮质集合管AMPK从而抑制上皮钠通道（α－ENaC）重吸收钠离子有关。（3）摄入咖啡增加健康志愿者尿钠排泄56 mmol，相当于3．27 g NaCl，而对心率和血压没有显著影响。结论：（1）慢性咖啡因干预通过促进尿钠排泄拮抗盐敏感性高血压。（2）饮用含咖啡因的咖啡对盐敏感性人群来说可能是值得提倡的生活方式。
作者：杨涛；于浩；高鹏；魏星；张和轩；熊诗强；路宗师；黎黎；韦晓；陈静；刘道燕；祝之明 刊期： 2015年第10期
目的：研究环境致癌物甲基硝基亚硝基胍（ MNNG）转录激活人核糖核苷酸还原酶小亚基M2（ RRM2）参与DNA损伤修复的分子机制。方法和结果：MNNG刺激显著激活RRM2基因的表达。γ－H2AX、细胞周期分布及凋亡的改变显示表达上调的RRM2转位入核参与DNA损伤修复。通过RRM2启动子探针介导的DNA pulldown、LC－MS／MS 及 ChIP－PCR分析发现MNNG刺激后，E2F3直接结合到RRM2启动子上，激活其表达。另外，转录因子NFY与E2F3相互作用，增强MNNG诱导的RRM2转录激活。 MNNG处理上调E2F3蛋白水平依赖于ATR－CHK1信号通路介导的其S124位磷酸化。结论：MNNG通过激活ATR／CHK1磷酸化E2F3 S124，增加其蛋白稳定性。上调的E2F3与NFY转录共调控RRM2基因的表达，参与DNA损伤修复过程。
作者：宫朝举；邵吉民 刊期： 2015年第10期
2型糖尿病（T2DM）作为代谢性疾病，严重威胁着人体健康。血管病变是T2DM的重要并发症，是T2DM致残和致死的首要原因。高密度脂蛋白（ HDL）及其主要成分载脂蛋白A－I对血管内皮具有多重保护功能，与T2DM血管病变风险呈负相关，但在T2DM状态下这种保护功能受损。 T2DM HDL保护功能受损影响血管内皮细胞代谢，可能导致血管并发症，其分子机制不明。在本研究中，我们基于NMR的代谢组学技术，通过提取临床T2DM患者及非糖尿病患者HDL，作用于人脐静脉内皮细胞，分析细胞代谢模式；通过多变量分析技术，系统研究T2DM状态下HDL对血管内皮的代谢模式和代谢网络的影响，并筛选特征性代谢物，确定关键代谢通路，阐明T2DM HDL功能受损影响血管内皮代谢网络的分子机制。经研究发现，HDL对内皮细胞的调控主要体现在甘油脂质代谢、胆碱代谢、氨基酸循环、肌酸代谢及支链氨基酸代谢等通路上，其中以甘油脂质代谢和胆碱代谢的变化为显著；2型糖尿病HDL功能受损对这5条代谢通路均有较大的影响。该研究将为揭示T2DM血管病变的发病机理提供理论依据，也为防治血管病变提供潜在的药靶，具有重大的科学意义和潜在的应用价值。
作者：周恩臣；黄子成；潘兵；林东海；郑乐民 刊期： 2015年第10期
杂色曲霉素（ sterigmatocystin， ST）是一种致癌性真菌毒素，在人类食物中污染非常广泛。我们前期研究发现，ST可诱导人胃黏膜上皮细胞G2期阻滞。普遍认为各种理化因素引发的DNA损伤与细胞周期阻滞和细胞凋亡关系密切。为了进一步探讨ST诱发GES－1细胞G2期阻滞的机制，本实验研究了ST诱导的DNA损伤及损伤下游的ATM／p53信号通路的激活情况。我们通过彗星实验检测到了ST引发的GES－1细胞的DNA损伤；同时发现了ATM及其下游分子Chk2和 p53的激活；通过ATM阻断剂咖啡因的预处理，我们发现咖啡因可以阻断ST诱导的GES－1细胞G2期阻滞和p53及下游分子的激活；另外，我们发现p53 siRNA转染至GES－1细胞可有效阻断ST诱导的GES－1细胞G2期阻滞的作用；ST还能诱导GES－1细胞凋亡。因此，通过实验我们得出结论，ST能够引起GES－1细胞的DNA损伤，并激活损伤下游由ATM／p53依赖的信号通路，进而影响G2／M期相关调控因子及凋亡相关蛋白的表达，终诱导GES－1细胞发生G2期阻滞和凋亡。
作者：张东辉 刊期： 2015年第10期
本研究探讨硫化氢（ hydrogen sulfide， H2 S）是否通过调节SIRT1信号拮抗动脉粥样硬化。在ApoE敲除动脉粥样硬化模型，给予H2 S供体，显著减少了斑块面积、斑块中巨噬细胞浸润。在HepG2细胞、HUVECs以及小鼠腹腔巨噬细胞，H2 S供体显著上调SIRT1蛋白表达；腺病毒过表达或siRNA沉默硫化氢生成酶胱硫醚γ－裂解酶也增加或减少SIRT1表达。应用Biotin－switch方法检测到SIRT1存在内源性的硫氢化修饰，NaHS增加了SIRT1硫氢化显著上调了SIRT1活性，而使用GSNO增加SIRT1亚硝基化修饰则抑制SIRT1活性。 HepG2细胞中，NaHS显著抑制了SIRT1靶基因P53和SREBP2蛋白的乙酰化且抑制胆固醇从头合成；HUVECs中，NaHS也抑制了P53和NF－κB乙酰化，抑制炎症；巨噬细胞中，NaHS也抑制了P53和组蛋白H3的乙酰化，抑制了胆固醇的摄取。进一步通过点突变SIRT1的387和390半胱氨酸位点，SIRT1硫氢化减弱，NaHS刺激的SIRT1活性增加也消失。因此，H2 S可通过促进SIRT1硫氢化拮抗动脉粥样硬化。
作者：耿彬 刊期： 2015年第10期
目的：探讨沉默CIAPIN1基因对慢性粒细胞白血病K562细胞向粒系分化的影响。方法：针对CIAPIN1基因构建短shRNA真核表达载体并转染细胞。瑞氏染色观察细胞形态学变化；电镜观测细胞超微结构的改变；real－time PCR方法检测粒系分化标志基因mRNA水平的改变；Western blotting检测ERK1／2、JNK、p38 MAPK及Akt磷酸化水平的改变。结果：CIAPIN1基因沉默后，K562细胞的形态和超微结构趋向成熟粒细胞，表面分化抗原CD11b、NCF1、ORM1、C／EBPα和HIF1α的mRNA表达水平升高，ERK1／2磷酸化水平升高。结论：抑制CIAPIN1基因表达能促进K562细胞分化，ERK1／2磷酸化水平的升高可能参与了该分化过程。
作者：王齐；王建；李庆华；庞天翔 刊期： 2015年第10期
作者： 刊期： 2015年第10期
目的：探讨心脏彩超在老年床旁临时起搏器植入中的应用价值。方法：采用回顾性分析回顾分析2009年7月至2013年2月共63例老年患者（≥70岁），其中男36例，女27例，分为彩超组22例，常规组41例，比较各组间植入时间、起搏器脱落例数、并发症等。结果：在两组临时起搏器安植术中，彩超组的植入时间明显少于常规组，在总并发症中彩超组明显少于常规组。结论：心脏彩超可以运用于老年床旁临时起搏器植入中。
作者：宋国林；谭旭宏；王再群 刊期： 2015年第10期
目的：研究蛋白激酶C（ PKC）抑制剂对人胃肠道间质瘤GIST细胞株生长抑制与诱导凋亡作用，并对其细胞凋亡机制进行研究。方法：体外培养人胃肠道间质瘤GIST细胞。采用MTT法测定了不同浓度PKC抑制剂在不同时间下对GIST细胞生长的抑制率。流式细胞术检测细胞凋亡率，分析细胞周期分布。采用倒置显微镜及荧光染色法下观察不同浓度药物作用下GIST细胞形态学变化。 Western blot法检测内质网应激相关蛋白GRP78与GADD153的表达。结果： PKC抑制剂对GIST细胞有明显的抑制增殖及促进凋亡的作用，并与时间和剂量呈正相关。倒置显微镜及荧光显微镜下可见胞浆内出现空泡，细胞核固缩等现象。经PKC抑制剂作用后，GIST细胞的GRP78与GADD153蛋白表达上调。结论： PKC抑制剂能显著抑制人胃肠道间质瘤GIST细胞的增殖，并在内质网应激参与下促进其细胞的凋亡。
作者：方学森；李香丹；杨莎莎；金头峰 刊期： 2015年第10期
目的：研究低压低氧对大鼠血清碱性成纤维细胞生长因子（ bFGF）和血管内皮细胞生长因子（ VEGF）表达的影响，探讨bFGF和VEGF在低氧性肺动脉高压发生中的作用。方法：60只健康雄性SD大鼠随机分为常氧组以及低氧1 d、7 d、14 d、21 d和30 d组（n＝10）。除常氧组外，余5组大鼠置于模拟海拔5000米的低压氧舱中饲养，各时点取血清，运用ELISA方法检测血清中bFGF和VEGF含量。结果：各低氧组血清bFGF的表达均高于常氧组（ P＜0．05），随低氧时间的延长，血清bFGF表达量呈逐渐升高趋势（P＜0．05）；低氧1 d，血清VEGF表达明显升高（P＜0．05），低氧时间延长，血清VEGF含量呈逐渐下降趋势（ P＜0．05）。结论：低压低氧在致肺动脉高压形成过程中，可引起血清bFGF的表达明显上调，急性缺氧可导致血清VEGF水平升高，bFGF在低氧性肺动脉高压形成过程中起主要作用。
作者：刘川川；刘杰；庞明泉；苏婷婷；张宁；王生兰 刊期： 2015年第10期
目的：持续缺氧可通过激活PI3K／Akt／Rho激酶信号通路引发冠状动脉痉挛，同型半胱氨酸（ Hcy）的血浆浓度升高是心血管疾病的一个重要危险因素，本研究旨在探讨Hcy对缺氧诱导猪冠状动脉痉挛的影响及其可能机制。方法：离体血管环灌流实验测定猪离体冠状动脉的张力变化；免疫印迹检测磷酸化与总的MLC、Akt和MYPT1蛋白表达水平。结果：持续缺氧15 min以上可引起猪冠状动脉的持续收缩，预孵育Hcy（0．1～1 mmol／L）30 min，可以浓度依赖性地抑制缺氧诱导的冠脉收缩；而预孵育相同浓度的Hcy对该收缩无影响。缺氧15 min时冠状动脉p－MLC （ Ser19）蛋白水平显著降低，持续缺氧60 min时p－MLC （Ser19）水平较缺氧15 min时升高。预孵育Hcy（1 mmol／L）30 min，对缺氧15 min引起的p－MLC（Ser19）蛋白水平降低无影响，但抑制了缺氧60 min时p－MLC（Ser19）的升高。预孵育Hcy（1 mmol／L）30 min对持续缺氧引起p－Akt（Ser473）的变化影响不大。结论：Hcy可能通过激活Rho激酶改善缺氧诱导猪冠状动脉非内皮依赖的收缩。
作者：安苑铭；吴立玲；窦豆 刊期： 2015年第10期
目的：研究腺苷A2A和A2B受体是否参与NECA的抗心肌缺血再灌注损伤作用及其相关机制。方法：利用H9c2心肌细胞建立模拟缺血／再灌注损伤模型，给予非选择性腺苷受体激动剂5’－N－乙基酰胺基腺苷及选择性腺苷A2A、A2B受体拮抗剂，采用CCK－8法测定细胞活性，JC－1染色检测细胞线粒体膜电位（ΔΨm ），Amplex Red过氧化氢／过氧化物酶试剂盒测定细胞内H2O2水平，活性氧试剂盒检测细胞内活性氧（ROS）水平，MitoSox Red超氧化物指示剂检测线粒体内活性氧水平。结果：5’－N－乙基酰胺基腺苷明显改善缺血／再灌注损伤引起的细胞活性和线粒体膜电位的降低，显著抑制缺血／再灌注损伤导致的细胞和线粒体内活性氧含量的升高，腺苷A2A及A2B受体拮抗剂均可阻断5’－N－乙基酰胺基腺苷的上述作用。结论：5’－N－乙基酰胺基腺苷可减轻H9c2心肌细胞的缺血／再灌注损伤，腺苷A2A和A2B受体共同参与5’－N－乙基酰胺基腺苷的心肌保护作用，其机制可能与调节线粒体通透性转换孔（ mPTP）的开放及线粒体活性氧的产生有关。
作者：赵萌 刊期： 2015年第10期
目的：探讨红花黄色素注射液对急性心肌梗死大鼠的梗死边缘区血管生成的影响。方法：采用结扎SD大鼠冠状动脉左前降支的方法复制急性心肌梗死动物模型，腹腔注射花黄色素注射液（2．5 mg? kg－1? d－1）3 d、7 d、14 d，末次给药24 h后称取体重处死，测心指数；观察心电图的变化；Masson染色法测定心肌梗死边缘区微血管数；免疫组化法检测血管内皮生长因子蛋白的表达情况。结果：与模型组比较，治疗7 d组和14 d组心指数下降（ P＜0．05）。7 d和14 d治疗大鼠的心电图基本恢复正常。各组的梗死边缘区血管数均明显增长（ P＜0．05）。心肌梗死边缘区VEGF蛋白在给药组表达逐渐增多，14 d组（ P＜0．05）具有统计学差异。结论：红花黄色素注射液能促进梗死边缘血管的生成，其作用机理可能是促进VEGF蛋白增高有关。
作者：王晓敏 刊期： 2015年第10期
目的：探讨转录因子ZBTB20在小鼠腺垂体发育中的作用。方法：利用Zbtb20基因全身敲除（ Zbtb20－／－）小鼠模型，观察腺垂体及其靶腺发育；应用RT－PCR、Western blot和ELISA方法分析腺垂体组织中6种促激素的表达分泌；应用免疫组化方法检测腺垂体5种内分泌细胞的数量和分布，并进一步通过多重免疫组化标记方法分析ZBTB20在催乳素细胞群分化发育中的作用。结果：（1）Zbtb20－／－小鼠腺垂体体积明显小于正常对照，同时肝脏及血清IGF－1水平下降，乳腺和性腺发育障碍。（2） Zbtb20－／－小鼠腺垂体催乳素细胞群出生后缺失，生长激素细胞群增殖减少，催乳素（ PRL）和生长激素（ GH）的mRNA和蛋白水平不同程度减少。（3）Zbtb20－／－小鼠胚胎期垂体中存在PRL／GH双阳性前体细胞，而出生4 d后PRL阳性细胞完全缺失。结论：（1）Zbtb20基因敲除可导致严重的小鼠垂体发育不全。（2）ZBTB20参与小鼠腺垂体催乳素细胞的终末分化过程。（3） Zbtb20基因敲除可使腺垂体生长激素细胞增殖障碍，从而减少GH的表达分泌。
作者：曹冬梅；麻献华；蔡娇；章卫平 刊期： 2015年第10期
目的：我们在病理生理学理论教学中尝试加入美国职业医师考试相关的病例，从病例出发提出问题，以改进理论课教学效果。方法：从病例相关的临床表现出发，提出问题进行理论教学，并进行反馈调查。结果：75份反馈结果中，男生34人（45．3％），女生41人（54．7％）；来自斯里兰卡的学生21人（28．0％），印度学生52人（69．3％），其他国家2人（2．6％）。92．9％的学生认为病例结合的问题式教学方法有助于学生积极参与病理生理学的理论学习，81．0％的学生认为有助于理解和掌握疾病的相关临床表现及其机制，85．7％的学生认为运用理论知识分析病例的能力有所提高，且男、女生之间意见无显著差别。83．3％的同学认为，病例相关的学习对未来的临床工作将会有重要帮助，其中男生的认同率明显高于女生（ P ＜0．05）。反馈结果在斯里兰卡和印度学生之间无明显差别。结论：与病例结合、从临床问题出发的留学生病理生理学教学普遍受到学生欢迎。
作者：姚小梅；孙舒雅；赵小玉 刊期： 2015年第10期
目的：探讨PTEN－Akt－FoxO3a信号通路在H2 S抑制oxLDL诱导的HUVECs凋亡中的作用。方法： HUVECs分为4组：①对照组；②NaHS组；③oxLDL组；④NaHS＋oxLDL组。 Hoechst 33258染色和AO／EB染色检测细胞凋亡，Western blot检测细胞PTEN、p－PTEN、Akt、p－Akt、FoxO3a、p－FoxO3a和Bim蛋白的表达。结果：NaHS＋oxLDL组较oxLDL组细胞凋亡明显减少。与oxLDL组相比，NaHS＋oxLDL组显著增加细胞PTEN、Akt和FoxO3a蛋白的磷酸化，减少Bim蛋白表达（ P＜0．05）；FoxO3a核转位显著减少（ P＜0．05）。结论：硫化氢可抑制oxLDL诱导的HUVECs凋亡，其机制与激活PTEN／Akt／FoxO3a信号通路有关。
作者：任重；唐蕙；彭娟；肖卫晋；任晓晴；王佐；刘录山；屈顺林；姜志胜 刊期： 2015年第10期
作者： 刊期： 2015年第10期
目的：已知低氧可以激活巨噬细胞，进而参与低氧导致的炎症反应。 RhoB是小G蛋白Rho家族的成员，其表达能被基因毒应激等诱导，但是RhoB是否参与低氧诱导的炎症反应还不清楚。本研究探讨了低氧对巨噬细胞RhoB表达的影响及在炎症反应中可能的作用。方法：用real－time PCR和Western blot方法研究基因的表达；用ELISA法检测促炎细胞因子的分泌；用Boyden小室检测细胞的迁移；用报告基因的方法检测NF－κB的活性。结果：低氧可在原代培养的小鼠腹腔巨噬细胞和RAW264．7巨噬细胞中上调RhoB的表达。低氧诱导因子1（HIF－1）和激活的JNK和ERK与低氧上调RhoB有关。干扰RhoB的表达可以明显抑制低氧时RAW264．7细胞NF－κB的转录活性和促炎细胞因子IL－1、IL－6和TNF－α的产生，并可抑制细胞黏附和增加细胞迁移，表明低氧上调RhoB参与了低氧增加巨噬细胞促炎细胞因子的生成，促进其黏附和抑制其迁移的作用。结论：Rho－NF－κB通路在低氧激活巨噬细胞及低氧诱导的炎症反应中发挥重要作用。
作者：黄高翔；张明焯；王燕；苏杰；卢建 刊期： 2015年第10期
目的：探讨亚临床甲状腺功能减退症（亚甲减）与冠心病危险因素之间的关系。方法：对排除应用抗甲状腺药、糖皮质激素和胺碘酮药物的125例冠心病患者进行病史、甲状腺功能、血生化检查及超声心动图结果分析。结果：根据甲状腺刺激激素（TSH）水平的高低分为甲状腺功能正常组（n＝43）、亚甲减组（n＝82）。与甲状腺功能正常组相比，亚甲减组中女性患病率显著增高（P＜0．05）；有吸烟史者及甲状腺过氧化物酶阳性率显著增高（P＜0．05）；且上述因素在TSH≥10．0 mU／L的重度亚甲减病人更加显著（ P＜0．05）；而空腹血糖、胆固醇、甘油三酯、B型尿钠肽水平及超声心动图检查在不同TSH水平间未见显著差别。结论：本组病例分析提示：女性、有吸烟史及甲状腺过氧化物酶阳性的冠心病患者，特别是伴TSH≥10．0 mU／L时，应同时关注甲状腺疾病。
作者：严庭智；丁瑾；常连青；苗莉；姚小梅 刊期： 2015年第10期
中国病理生理杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国病理生理学会
