赵严冬；刘潘虹；王晓彤；李健玲；王华东；陆大祥；戚仁斌
目的：研究内毒素血症“瘀滞络脉”急性肺损伤大鼠的Rho／ROCK机制及川芎嗪的保护作用。方法：以内毒素“二次打击”建立大鼠内毒素血症“瘀滞络脉”急性肺损伤模型，分别设正常对照组、模型组、川芎嗪低剂量组、高剂量组，测定呼吸频率、肺泡灌洗液中性粒细胞（ PMN）百分率、肺湿／干重比、肺组织髓过氧化物酶（ myeloperoxidase，MPO）活性、ROCK mRNA表达量，并观察、评估肺组织损伤严重程度。结果：与模型组相比，川芎嗪显著降低呼吸频率、PMN百分率、肺湿／干重比、MPO活性、ROCK mRNA表达量，减轻大鼠急性肺损伤病理改变。结论：川芎嗪可能通过抑制Rho／ROCK通路对内毒素血症“瘀滞络脉”大鼠急性肺损伤有较好的保护作用。
作者：李言 刊期： 2015年第10期
目的：探索CPBL在病理生理学教学中的应用。方法：（1）随机抽取5年制临床医学专业2个班为实验组（n＝55），采用以CPBL为主的教学法，抽取2个班为对照组（n＝61），以传统教学为主。（2）教师将案例提前发给学生，给学生一个熟悉、思考过程。然后带实验组赴医院接触患者，体会患者病痛，增强学习责任感。在教师的引导下，学生带着问题与患者互动，从中感受临床实际问题的复杂。随后开展学生为主体的案例分析讨论。后教师进行总结，确保学生准确掌握知识要点。结果：问卷调查显示：98．2％学生认为以CPBL为主的教学法提高了学习责任感；91％学生认为能激发学习兴趣；92．7％学生提高了听课效率，增强了求知欲；87．3％学生认为能提高综合分析能力和临床思维的培养。期末测试平均成绩实验组（86．22±7．59）分，对照组（83．47±8．35）分，经U检验差异显著（P＜0．05）。结论：CPBL教学法能激发学生的求知欲、增强学习的责任感，能培养学生的临床思维、提升解决临床问题的能力，为临床阶段学习做好铺垫。也给从事基础医学教学的教师提供了与临床实践相接触的平台，促进教学水平的提高。
作者：陈维亚 刊期： 2015年第10期
目的：研究3R－tau和4R－tau对学习记忆的影响及其机制。方法：将0N3R、1N3R和2N3R 等体积混合为3R－tau病毒；将0N4R、1N4R和2N4R等体积混合为4R－tau病毒。采用脑立体定位技术在小鼠海马CA3区注射混合的3R／4R病毒，水迷宫实验检测小鼠学习记忆能力，LTP检测CA3到CA1的突触传递，免疫化学检测学习记忆相关蛋白及DNA损伤标志分子γH2A．X的表达。结果：过表达3R－tau小鼠学习记忆能力降低，突触传递减弱。4R－tau组PSD95、NR2A和NR2B含量增高，3R－tau组γH2A．X含量增高。结论：过表达3R－tau明显损伤小鼠学习记忆能力，其机制可能与DNA双链损伤有关。
作者：徐诚 刊期： 2015年第10期
目的：探讨PCSK9在高脂血症apoE－／－小鼠海马神经元凋亡中的作用及机制。方法：18只6周龄apoE－／－小鼠，分为正常和高脂饮食组。喂养12周后取出海马进行冰冻切片，用HE染色、油红O染色、Hoechst 33258染色、免疫组化染色和改良Bielschowsky染色观察海马改变。结果：与正常饮食组相比，高脂饮食组apoE－／－小鼠海马锥体细胞排列稀疏紊乱，细胞间隙增大，胞体肿胀，细胞核体积变小及浓染，呈核固缩，尤以CA3区明显；神经细胞荷脂及凋亡增加，Aβ沉积略有增多；PCSK9、BACE1、caspase－3和Bax表达增加显著，Bcl－2表达增加。结论：高脂血症诱导apoE－／－小鼠海马神经元凋亡增加，其机制可能与脑组织PCSK9表达上调激活Bcl－2／Bax－caspase－3、增加BACE1表达和Aβ含量有关。
作者：唐志晗；吴琪；彭娟；任重；赵雪珊；何妮娅；高亚；姜志胜；刘录山 刊期： 2015年第10期
目的：观察超声心动图斑点追踪能否早期发现和诊断异丙基肾上腺素（ ISO）引起的心脏功能异常。方法：将成年C57雄性小鼠分为对照、ISO给药后3 d和ISO给药后7 d组。 ISO组为一次性给予ISO 5 mg／kg皮下注射，分别于给药后3 d和7 d应用传统超声心动图及斑点追踪评价小鼠心脏功能。结果：（1）应用传统超声心动图方法测得ISO给药后3 d组FS和E／Em均无明显差异，给药后7 d FS仍无明显差异，而E／Em显著增加（P＜0．05）。超声心动图斑点追踪方法在给药后3 d即观测到心脏径向应变（ radial strain，RS）和纵向应变（ longitudinal strain，LS）均较对照组显著降低（ P＜0．05）；给药后7 d组的RS和LS亦显著低于对照组（ P＜0．05）。结论：相对于传统超声心动图方法，斑点追踪方法能够早期诊断ISO引起的心脏功能异常。
作者：安祥博；张幼怡；宋峣 刊期： 2015年第10期
目的：本研究拟探讨SENP1、VEGF以及CARD14交互作用在预测移居汉族男性高原红细胞增多症遗传易感性的作用。方法：纳入234例移居汉族男性高原红细胞增多症（ HAPC）患者与250例移居汉族男性正常对照， PCR－高分辨率熔解曲线法判定SENP1基因rs726354、VEGF基因rs3025033及CARD14基因rs8065364等多态性位点的基因型，多因子降维软件分析基因之间的交互作用。结果：rs726354多态性位点以及rs3025033多态性位点基因型与等位基因频率在HAPC组与正常对照组的分布无差异；CARD14基因rs8065364的3种基因型在HAPC组与正常对照组的频率分布存在差异，HAPC组与正常对照组C等位基因与T等位基因频率存在差异。基因交互作用提示上述3个多态性位点的不同组合可影响移居汉族男性HAPC的易感性。结论：CARD14基因rs8065364多态性与移居汉族男性HAPC的发生存在相关性，C等位基因是汉族男性HAPC的危险因素，SENP1基因、VEGF基因以及CARD14基因的交互作用可能参与了移居汉族男性HAPC的发生。
作者：陈郁；蒋春华；罗勇军；刘福玉；高钰琪 刊期： 2015年第10期
高原肺水肿（ HAPE）和低氧性肺动脉高压（ HPH）是严重威胁高原人群健康的急、慢性高原病。有关其发病机制至今尚不十分清楚。我们研究发现，不同时间（2～28 d）模拟高原低氧均可诱导小鼠肺组织中ICAM－1、E－selectin等细胞黏附分子（CAMs）表达增加，炎症细胞浸润增多，炎症介质Annexin A1、TNF－α、MCP1、IL－6等表达上调。细胞实验也发现低氧（1％ O2）可直接上调内皮细胞中CAMs的转录和表达，并增强炎症细胞与内皮细胞的黏附。进一步研究发现，巨核细胞白血病因子1（ MKL1）可协同染色质重构蛋白Brg1／Brm及H3K4甲基转移酶复合物COMPASS介导血管内皮细胞中CAMs的转录活化，从而调节CAMs的表达，影响小鼠肺组织中炎症细胞的聚集及肺血管炎症反应。上述结果说明低氧可直接诱导内皮细胞中CAMs基因的转录激活，增强血管内皮细胞和循环炎症细胞的相互作用，在肺血管周围形成促炎微环境，增加炎症因子的表达，进一步介导或促进肺血管收缩乃至肺血管结构改建，这可能是HAPE和HPH形成重要的共通的炎症机制。
作者：高钰琪；高文祥；袁志兵；陈德伟；陈建；徐刚；张钢；生宝亮；刘福玉 刊期： 2015年第10期
目的：观察灯盏细辛注射液对大鼠急性缺血心肌的保护作用。方法：将30只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和灯盏细辛组，每组各10只。每组大鼠提前给药1周，灯盏细辛组剂量为50 mg? kg－1? d－1，正常组与模型组每天以相应量的生理盐水。后采用腹腔注射异丙肾上腺素（ ISO）造模，注射剂量2 mg? kg－1? d－1，连续注射2 d。造模后取血和心肌组织，检测超氧化物歧化酶（ SOD）和丙二醛（ MDA）的量。结果：模型组大鼠血清和心肌组织中SOD活性显著低于正常对照组（ P＜0．01），MDA的含量高于正常对照组（P＜0．05）。灯盏细辛组大鼠血清和心肌组织中SOD活性高于模型组（P＜0．05），MDA的含量显著低于模型组（ P＜0．01）。结论：灯盏细辛能提高急性心肌缺血大鼠SOD的活性，降低MDA的含量，表明灯盏细辛对急性缺血心肌有保护作用。
作者：苏娟；秦燕 刊期： 2015年第10期
目的：探讨白藜芦醇（ resveratrol，Res）对异丙肾上腺素（ isoproterenol，ISO）诱导的大鼠肥大心肌细胞的保护作用及机制。方法：ISO建立乳鼠心肌肥大细胞模型，分为control组、ISO组、Res干预组和Res对照组。检测心肌细胞表面积和ANP基因表达；流式细胞仪检测细胞凋亡率；电镜观察心肌细胞超微结构；检测培养液中乳酸脱氢酶（ LDH）和丙二醛（ MDA）含量；RT－PCR和Western blot分析GRP78、CHOP、Bcl－2和Bax的mRNA和蛋白表达。结果：Res有效抑制ISO诱导的心肌细胞表面积和ANP基因表达，心肌细胞凋亡率减少，同时下调GRP78、CHOP和Bax的mRNA和蛋白表达，上调Bcl－2 mRNA和蛋白表达，降低培养液中LDH和MDA含量。结论：Res明显减轻ISO诱导的心肌细胞肥大和凋亡，其机制可能通过抑制内质网应激因子GRP78和CHOP表达，逆转凋亡因子Bcl－2和Bax蛋白表达有关。
作者：林岩；王国忠；金莉；肖薇；李波；王珺 刊期： 2015年第10期
作者： 刊期： 2015年第10期
目的：观察高尿酸血症大鼠别嘌呤醇治疗过程中饮用含锶矿泉水对肾功能的影响。方法：给予大鼠含腺嘌呤和酵母干粉的混合饲料喂养，复制高尿酸模型。随后将高尿酸模型大鼠随机分为：别嘌呤醇治疗加饮自来水组，别嘌呤醇治疗加饮锶水组。测定血尿酸、肌酐和尿素氮指标的变化，并观察肾脏病理变化。结果：别嘌呤醇治疗加饮锶水组大鼠肾功能较别嘌呤醇治疗加饮自来水组好（P＜0．05），肾结构损伤较轻。结论：含锶量为4mg／L的锶矿泉水可明显减轻高尿酸血症大鼠别嘌呤醇治疗造成的肾损伤作用。
作者：陈蓉；万英；李著华；冯志强；赵成涛；左伟 刊期： 2015年第10期
目的：观察缬沙坦联合还原型谷胱甘肽对糖尿病大鼠血清血管紧张素II和血管内皮生长因子水平变化和肾损伤的影响。方法：采取链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型，随机分为以下5组：正常对照组、模型组、缬沙坦干预组、还原型谷胱甘肽干预组和缬沙坦联合还原型谷胱甘肽干预组。持续给药干预治疗8周后，腹主动脉采血，以ELISA法测定血清AngⅡ和VEGF的水平；处死大鼠并取双侧肾，观察肾组织病理变化；免疫组化方法测定Ⅲ型胶原表达。结果：与正常组比较，模型组血清血管紧张素II和血管内皮生长因子水平升高（P＜0．05），肾病理改变表现肾小管管腔有一定的扩张变宽，肾间质有大量被深染为蓝色的炎症细胞浸润，纤维化比较明显，Ⅲ型胶原的表达明显增多；各给药组与模型组比较，血清血管紧张素II和血管内皮生长因子水平、肾小管管腔增宽、炎症细胞浸润和纤维化改变的程度均有减轻（ P＜0．05），Ⅲ型胶原的表达明显减少，联合给药组各项指标均优于单一给药组（ P＜0．05）。结论：缬沙坦联合还原型谷胱甘肽可有效降低糖尿病大鼠血清血管紧张素II和血管内皮生长因子水平，减轻糖尿病大鼠肾脏损伤，一定的程度上延缓糖尿病肾病的进展。
作者：邹平；弓慧杰；陈蓉 刊期： 2015年第10期
目的：探讨CD73在乳腺癌血管新生中的作用，为抑制乳腺癌血管新生提供新靶点。方法：利用CD73基因敲除小鼠和野生型小鼠，进行肺微血管内皮细胞原代培养，检测2种基因型血管内皮细胞的增殖力、黏附力、侵袭力、运动力和管腔形成能力的差异；建立CD73－／－和CD73＋／＋小鼠乳腺癌模型，在体观察CD73－／－和CD73＋／＋荷瘤小鼠肿瘤大小及血管新生差异；蛋白组学检测CD73－／－和CD73＋／＋小鼠血管内皮细胞中差异蛋白。结果：CD73＋／＋小鼠血管内皮细胞增殖、侵袭、运动、血管形成数量明显高于CD73－／－小鼠，加入乳腺癌细胞条件培养基其现象更为显著；CD73降低血管内皮细胞黏附力；CD73＋／＋型小鼠肿瘤体积及早期肿瘤组织中血管新生能力明显大于CD73－／－型小鼠； CD73＋／＋型小鼠血管内皮细胞中β－actin表达明显高于CD73－／－型小鼠。结论：CD73调控血管内皮细胞生物学行为；在乳腺癌生长早期CD73促进乳腺癌血管新生；其作用机制可能与CD73调控β－actin有关。
作者：王丽；李录英；陆齐；周平 刊期： 2015年第10期
目的：探讨皖南蝮蛇毒血小板抑制因子（ AHV－PI）对动脉血栓形成的影响及其可能作用机制。方法：新西兰兔32只，随机分为空白对照、阳性对照、血栓模型和AHV－PI实验组；以70％FeCl3化学损伤法制备家兔颈总动脉血栓模型，AHV－PI实验组经耳缘静脉注入AHV－PI（0．1 mg／kg），模型组给予等量生理盐水，阳性对照组以PI3K阻断剂LY294002；1 h后经另侧颈动脉采血，测定凝血功能；ELISA法测定血浆纤溶酶、5－核苷酸酶（5－NT）和血小板膜糖蛋白Ib（GPIb）的含量；流式细胞术观测荧光标识的单克隆抗体CD61（FITC－CD61）与血小板膜糖蛋白IIb／IIIa（GPIIb／IIIa）结合率的变化；Western bloting测定血小板内Akt蛋白激酶磷酸化程度。结果：与模型组相比，AHV－PI实验组和阳性对照组颈动脉内膜比较平滑，管腔内未见血栓形成，血小板数目和蛋白激酶Akt磷酸化水平均明显下降（P＜0．05），部分凝血活酶时间（APTT）和凝血酶时间（TT）延长（P＜0．05），血浆FIB、纤溶酶和GPIb含量下降（P＜0．05），5－NT含量升高（P＜0．05）；FITC－CD61与血小板GPIIb／IIIa的结合率没有显著改变。结论：AHV－PI可通过降低蛋白激酶Akt磷酸化水平，阻碍Akt通路下游信号转导，抑制血小板聚集和动脉血栓形成。
作者：张根葆；季娜；周淑艳；桑金凤；吴娟 刊期： 2015年第10期
目的：通过测定乳腺癌组织中调节性T淋巴细胞（ regulatory T cells，Treg）的计数，探讨其与乳腺癌临床病理特征的关系，阐明在乳腺癌中Treg的分布表达与其临床预后的相关性。方法：应用免疫组织化学方法检测60例乳腺癌组织中Treg表达。结果：CD127＋染色颗粒主要定位于Treg的胞膜和／或胞浆，细胞外形呈卵圆形，主要分布在肿瘤间质。 Treg的计数随着乳腺癌组织分化程度增高而减少，且高分化组与中分化组、高分化组与低分化组、中分化组与低分化组之间的Treg计数相比具有显著差异（P＜0．05）。无淋巴结转移组Treg计数低于淋巴结转移组，两者相比具有显著差异（P＜0．05）。但Treg计数在患者年龄、绝经状况及乳腺癌的病理学分类无显著差异。 Treg计数与患者生存期的相关性分析显示乳腺癌中Treg与患者预后呈负相关（ P＜0．05）。结论：Treg的计数随着乳腺癌组织分化程度增高而减少，Treg在乳腺癌淋巴结转移组的数目高于无淋巴结转移组，其数目与乳腺癌患者生存期呈负相关。
作者：成媛 刊期： 2015年第10期
机体局部或全身失控性炎症反应是急性肺损伤（ acute lung injury， ALI）的重要病理生理特征。脂氧素（ lipoxin， LX）是机体重要的促炎症缓解物质。气道上皮细胞是组成气道屏障和气道环境刺激首先受累的细胞，外界刺激和肺组织内异常的活性氧引起气道上皮损伤在ALI中扮演重要角色。本研究发现，LX稳定气道上皮细胞钙黏蛋白（ E－cadherin）的表达保护其完整性，改善气道通透性，有效缓解脂多糖（ lipopolysaccharide， LPS）吸入引起的小鼠ALI。低温成像结果表明LX逆转LPS吸入引起的小鼠肺组织线粒体氧化还原状态失衡，并抑制LPS引起人气道上皮细胞16HBE中活性氧的产生。采用荧光共振能量转移技术监测16HBE细胞中调节抗氧化基因的重要转录因子Nrf2和其胞浆负性调节伴侣分子Keap1的解离，证实LX通过促进Nrf2蛋白ser40位点的磷酸化使其解离活化发挥其保护效应。转入显性负性突变的质粒pDN－Nrf2后，LX对16HBE钙黏蛋白表达的稳定作用几乎消失。综上所述，我们认为LX通过Nrf2调节气道上皮细胞E－cadherin的表达而保护LPS引起的ALI。
作者：程雪；苗烁；吴萍 刊期： 2015年第10期
目的：观察AS－1是否可通过调控肝组织慢性炎症和IR改善NASH，并阐明其调控机制。方法：在体实验，db／db小鼠MCD饮食4周复制NASH模型；体外实验，给予枯否细胞FFA与LPS共刺激，原代肝细胞IL－1β刺激。结果：与MCS对照饮食组相比，AS－1可明显降低MCD饮食组小鼠血浆中ALT水平，减少肝组织炎症细胞的浸润，抑制IRS1的丝氨酸磷酸化以及糖异生基因的mRNA水平增加。 AS－1可降低NADPH氧化酶mRNA水平和MDA含量。体外细胞实验发现，AS－1不仅可抑制FFA与LPS共刺激诱导枯否细胞pro－caspase－1裂解、caspase－1酶活化及IL－1β分泌。而且能够改善IL－1β诱导的肝细胞IR，抑制IL－1R与MyD88的结合及ERK／JNK／p38的磷酸化。结论：AS－1能够通过抑制肝组织炎症和改善IR，从而对NASH肝脏发挥保护作用，其机制与AS－1抑制IL－1R对MyD88的招募并影响MAPKs信号通路的激活，调控NADPH 氧化酶，抑制NALP3炎性小体活化以及IL－1β的分泌和功能的发挥有关。
作者：王晓露；高云；李建涛；宋娟；阙琳俐；李跃华 刊期： 2015年第10期
目的：PPARγ激动剂被证实可限制动脉粥样硬化的进展，然而其潜在的病理机制仍不清楚。我们通过研究PPARγ下游AMPK分子对ox－LDL诱导的内皮细胞损伤和功能障碍的保护作用。方法：取4周龄SD大鼠心肌左室组织，分离微血管内皮细胞。 DMEM培养24 h后，再经ox－LDL刺激24 h，检测细胞eNOS蛋白、NO释放以及AMPK磷酸化变化，并比较GW9662或PPARγ－siRNA预处理前后的差异。通过细胞成管实验，检测抑制AMPK或PPARγ对于血管新生的影响。结果：ox－LDL诱导24 h后，eNOS、NO和磷酸化AMPK水平明显下调，抑制PPARγ有类似结果。 ox－LDL刺激血管内皮细胞24 h后，细胞凋亡和老化加重，血管新生减弱。在环格列酮预处理后，eNOS、NO和磷酸化AMPK的水平都明显上调，血管新生能力增强，然而此效应可以被PPARγ－siRNA或GW9662逆转。结论：我们的结果提示环格列酮等PPARγ激动剂有效拮抗ox－LDL诱导的血管内皮细胞损伤，其分子机制是通过AMPK磷酸化激活，进一步上调eNOS和VEGF表达，NO释放，从而减少内皮细胞凋亡和老化，促进血管新生和内皮舒张功能。
作者：王时俊 刊期： 2015年第10期
目的：Bach1是一个转录抑制因子，在内皮细胞表达。但是Bach1是否调控血管新生还不清楚。本研究旨在探讨Bach1在血管新生和Wnt信号通路中的作用。方法和结果：在小鼠下肢缺血模型，Bach1基因敲除小鼠缺血肢毛细血管和小动脉密度，以及促血管新生相关因子（IL－8和VEGF）增多。 Bach1基因敲除小鼠的原代内皮细胞增殖、迁移和管腔形成能力增强。Bach1过表达抑制小鼠缺血下肢血管新生，抑制Wnt3a刺激的内皮细胞血管新生反应以及Wnt下游靶基因IL－8和VEGF的表达。 Bach1与TCF4结合抑制β－catenin与TCF4的结合。 Bach1通过减少p300／CBP和β－catenin的结合抑制β－catenin的乙酰化。 Bach1招募组氨酸去乙酰化酶，结合在IL－8启动子区的TCF4结合位点上抑制基因转录。结论：Bach1抑制缺血损伤后的血管新生，Bach1通过招募组氨酸去乙酰化酶到TCF4靶基因的启动子区域，抑制β－catenin和TCF4的结合，抑制Wnt／β－cate－nin信号通路。
作者：蒋丽；刘俊许；魏香香；牛琮；徐洁；王新红；陈思峰；孟丹 刊期： 2015年第10期
目的：探讨omega－3多不饱和脂肪酸（ polyunsaturated fatty acid， PUFA）对动脉粥样硬化斑块稳定性的作用及可能机制。方法：采用低密度脂蛋白受体敲除（Ldlr－／－）小鼠喂养西方饮食（western diet， WD）6周诱导动脉粥样硬化，并在饮食中添加或不添加3％omega－3 PUFA进行干预。使用液相质谱联用检测血浆中PUFA及其代谢产物浓度。油红O染色分析测定动脉树斑块面积及主动脉根部斑块脂质含量，HE染色分析主动脉根部斑块大小，天狼星红染色分析主动脉根部斑块胶原纤维含量，免疫荧光检测主动脉根部斑块巨噬细胞和平滑肌细胞含量。结果：（1）与WD组相比，omega－3组小鼠动脉树斑块面积比例显著降低。（2）Omega－3处理组与对照组相比，主动脉根部斑块面积、脂质含量和巨噬细胞含量显著降低；同时胶原纤维和平滑肌细胞含量显著上升，斑块不稳定指数下降（P＜0．05）。（3）Omega－3处理组血清中omega－3 PUFA显著增加，分析代谢产物发现EEQ和18－HEPE水平显著增加。结论：Omega－3处理减少动脉粥样硬化斑块面积、增加斑块稳定性，其机制可能与其代谢产物水平变化相关。
作者：刘亚晋；李丹；张栩；艾玎；朱毅 刊期： 2015年第10期
中国病理生理杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国病理生理学会
