陈蓉；万英；李著华；冯志强；赵成涛；左伟
目的：通过CPBL（基于临床问题的学习）教学实践，探索高等中医药院校临床医学专业病理生理学教学新模式。方法：在我校临床医学专业开展CPBL教学，并以传统教学作为对照。 CPBL教学根据教学进度选择休克、心功能不全、肾功能不全等章节的教学以临床典型病例学生分组讨论的形式进行，其他章节则在教学过程中灵活运用临床小病例与临床小问题。开展问卷调查，观察学生学习能力及教学效果的变化。结果：开展CPBL教学的学生在课程认同、自主学习能力、分析问题解决问题能力、沟通表达能力、临床思维及学习成绩等方面较传统教学有明显改善，CPBL教学能活跃课堂气氛、增强师生互动、提高学习积极性，而对教学进度、学生学习压力无明显影响。结论：CPBL教学模式能针对病理生理学课程与临床实际联系紧密的特点，明显提高临床医学专业学生学习能力和兴趣、增强师生互动、提高教学质量，有效解决高等中医院校PBL教学改革与课时不足、难以实施之间的矛盾，值得深入研究。
作者：林信富；郑海音；陈素娟；袁明洲；武一曼；黄秀榕 刊期： 2015年第10期
目的：探讨中药清血消脂片含药血清（QXXZ）对游离脂肪酸诱导的3T3－L1前脂肪细胞炎症干预作用。方法：采用3－异丁基－1－甲基黄嘌呤异丁基－3－甲基黄嘌呤、地塞米松和胰岛素诱导3 T3－L1前脂肪细胞的分化。用油酸诱导细胞代谢性炎症；采用CBA法和RT－PCR法分别观察QXXZ对细胞炎症因子和NF－κB mRNA的影响；用3－甲基腺嘌呤（3－MA）抑制细胞自噬，免疫荧光观察药物对炎症的调节作用。结果：与同浓度的正常血清比较， QXXZ组IL－6、 MCP－1及NF－κB mRNA表达显著降低（P＜0．05）；加入3－MA抑制细胞自噬后，IL－6 mRNA的表达水平比阻断自噬前明显上升（P＜0．01），而QXXZ依然能降低其IL－6 mRNA及NF－κB mRNA表达（ P＜0．05）。结论：清血消脂片可明显降低3T3－L1前脂肪细胞炎症模型炎症因子的表达；抑制自噬活性促进了细胞炎症因子表达，而QXXZ仍可通过调节NF－κB mRNA表达水平来抑制炎症。
作者：张蕾；贾丽超；解欣然；康群甫；刘卫红 刊期： 2015年第10期
目的：再灌注初期活性氧的大量释放被认为是造成这一损伤的主要因素之一。然而，ROS也作为启动者介导了缺血预处理和后处理等措施对I／R损伤心肌的保护作用。如何界定ROS起损伤或保护作用的浓度界限目前尚无明确的研究结论。因此，本实验旨探讨ROS 这种相互矛盾的双重作用及其潜在机制。方法：利用大鼠离体心脏全心缺血／复灌模型来探讨不同浓度过氧化氢（ H2 O2）预处理和后处理模型验证ROS 诱导心肌保护作用的浓度依赖关系。进一步利用Western blot 方法研究ROS在心肌缺血／再灌注损伤及其保护中对保护性信号通路及内质网应激通路不同的浓度依赖的调控模式。结果：研究发现证明了浓度是决定ROS不同作用的重要因素之一，揭示了ROS导致心肌I／R损伤和保护作用的浓度阈值和其内在机制，其终表现是不同浓度ROS启动／激活的损伤与保护通路博弈的结果。研究发现还为解释ROS矛盾作用的机理提供了新的视角，并为开发基于ROS的缺血性心脏病的治疗措施提供了新的实验证据。
作者：刘金龙；王志华；顾珊珊；谭吉良；杨黄恬 刊期： 2015年第10期
在AD病人脑内增加神经发生可有效改善认知功能，饮食限制（ DR）能够增加成年哺乳动物脑内的神经发生，而机制不明。为明确饮食限制促进3×Tg－AD小鼠海马DG区神经发生并改善认知功能障碍，进一步阐明GSK－3β激活在饮食限制促进神经发生中起重要作用，为AD的防治提供新的策略，我们合成了降低小鼠GSK－3β表达的shRNA，并将其连接入慢病毒转染载体，注射入小鼠双侧海马DG区，小鼠饮食限制或正常饮食12周。结果发现：限制饮食后血糖明显下降，恢复饮食后血糖回到正常，饮食限制能够增强胰岛素的敏感性；饮食限制可明显增强小鼠的学习和记忆能力，促进海马DG区神经发生，并增强GSK－3β活性，而降低GSK－3β的表达后，新生神经元的数量减少；饮食限制可抑制PI3K／Akt通路，也可增强AMPK活性；而GSK－3β活性升高可能通过增加CREB的表达。结论：饮食限制通过激活GSK－3β进而增加海马DG区的神经发生，其机制可能通过胰岛素信号通路抑制PI3K／Akt通路，也可能通过激活AMPK信号通路，进而抑制PI3K／Akt通路，结果导致GSK－3β的激活，并进一步增加CREB的表达和活性。
作者：魏伟 刊期： 2015年第10期
目的：研究局部热激对大鼠睾丸生精细胞凋亡和增殖的动态变化及二者相关性的影响，以探索生精细胞凋亡与增殖的关系。方法：HE染色分析各组大鼠曲细精管形态变化；TUNEL法检测各组生精细胞凋亡情况；免疫组化法分析各组大鼠曲细精管Ki－67表达与分布的变化。结果：与对照组相比，热激后生精细胞逐渐脱落、缺失，至第4天为严重，而第5天生精细胞有所恢复；热激后各组的TUNEL凋亡信号显著增加（ P＜0．01），2 d组达到高峰，3～5 d组凋亡信号逐渐降低；热激后各组的Ki67表达显著下降（ P＜0．01），1 d组很少见到Ki67表达，2～5 d组Ki67表达逐渐增加；比较各组Ki67与TUNEL的比值，发现1～2 d组比值小于1，3 d组比值几乎等于1，4 d组比值大于1。结论：睾丸局部热激可导致生精细胞凋亡，生精细胞增殖抑制，热激后早期凋亡过程胜于增殖，热激后期增殖强于凋亡过程，表明凋亡过程的可逆可能在于增殖活性增强。
作者：张婷婷；何萌萌；李悦；郭健 刊期： 2015年第10期
作者： 刊期： 2015年第10期
目的：研究Chk1在杂色曲霉素（sterigmatocystin，ST）诱导人胃黏膜上皮细胞（GES－1）G2／M期阻滞中的作用。方法：采用流式细胞术（FCM）、荧光实时定量PCR（real－time PCR）和蛋白免疫印迹（Western blot）等方法，观察不同浓度ST（3μmol／L、6μmol／L、12μmol／L）处理24 h后，体外培养GES－1细胞周期分布、Chk1及p－Chk1的表达；随后给予Chk1 siRNA干扰后，观察细胞周期分布的变化。结果：FCM结果提示ST能够诱导GES－1细胞发生G2／M期阻滞；real－time PCR结果显示ST可以提高Chk1在mRNA水平的表达；Western blot结果显示ST可以增加Chk1及p－Chk1的蛋白表达；FCM结果显示与control siRNA＋ST处理组相比，Chk1 siRNA＋ST处理组G2／M期细胞比例明显下降（ P＜0．05）。结论： Chk1的激活是ST引发GES－1细胞G2／M期阻滞的重要原因。
作者：姜秀娟 刊期： 2015年第10期
癌细胞中葡萄糖代谢的方式为细胞的快速增殖提供了物质和能量基础。去乙酰化酶SIRT3在癌细胞葡萄糖代谢重排和凋亡调控的过程中发挥着重要的作用，有可能成为一个有效的癌症治疗靶点。在本研究中，我们发现BH3－only模拟物S1能够抑制卵巢癌SKOV3裸鼠移植瘤的生长，同时能够上调SIRT3的表达。为了探讨S1对卵巢癌细胞糖代谢的影响及其分子机制，通过检测SKOV3细胞在S1作用下线粒体氧耗率（ OCR）、胞外泌酸率（ ECAR）以及葡萄糖摄入能力的改变，我们发现S1能够损伤线粒体呼吸链和抑制葡萄糖摄取。通过siRNA干扰SIRT3的表达，能够逆转S1对葡萄糖摄入的抑制作用，同时还能缓解S1对SKOV3细胞增殖的抑制效应。合用糖酵解抑制剂2－DG能够加剧SIRT3的活化，同时进一步促进S1对SKOV3细胞增殖的抑制作用和细胞凋亡的发生。综上所述，S1在卵巢癌细胞中抑制细胞增殖作用，可能是通过活化SIRT3以及扰乱葡萄糖代谢来实现的。
作者：项喜艳；孙连坤 刊期： 2015年第10期
目的：探讨银杏叶提取物（ GBE）对阿尔茨海默病（ AD）的预防与治疗作用及其机制。方法：大鼠尾静脉注射高半胱氨酸（ Hcy）2周构建AD模型。实验分为对照组（生理盐水）、模型组（ Hcy）和预防组（ Hcy＋GBE），治疗组（ Hcy注射2周后给予GBE 1周）。水迷宫检测大鼠学习记忆。 Western blot检测大鼠海马和皮质中tau及其磷酸化、GSK－3β及其磷酸化、PP2A及其甲基化、PSD95、synapsin I的变化。结果：（1）水迷宫提示模型组大鼠潜伏期显著高于其它3组。（2）大鼠海马和皮质中tau、GSK－3β和PP2A表达无变化，tau磷酸化和PP2A甲基化模型组显著高于其它3组，GSK－3β磷酸化和PSD95、synapsin I表达模型组显著性低于其它3组。结论：GBE能通过调节GSK－3β和PP2A活性预防和治疗Hcy导致的大鼠学习记忆障碍和tau过度磷酸化。
作者：曾宽；黄芳；包建；李梦珠；王小川 刊期： 2015年第10期
目的：研究黄芪注射液联用丹参酮ⅡA磺酸钠注射液对单侧输尿管梗阻（UUO）模型大鼠肾脏骨形态发生蛋白7（BMP－7）及其受体（ BMPR－Ⅰa）和Smad5的表达影响。方法：36只清洁级雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和治疗组，在术后14和28 d分批处死动物。 HE和Masson染色观察肾形态变化，实时荧光定量PCR和免疫组化检测BMP－7及其受体和Smad5的mRNA和蛋白表达。结果：形态学染色见假手术组肾组织结构正常；模型组肾小管上皮细胞变性、坏死，小管管腔扩张或萎缩，间质炎细胞浸润及纤维组织增生，病变随时间延长加重；治疗组病变较模型组减轻。模型组与治疗组肾组织BMP－7及其受体、Smad5的蛋白表达低于假手术组，但与模型组相比，治疗组表达增多。与假手术组相比，模型组BMP－7及其受体和Smad5的mRNA表达明显降低；治疗组BMP－7及其受体和28 d Smad5的mRNA表达明显高于模型组。结论：黄芪注射液联用丹参酮ⅡA磺酸钠注射液可减轻UUO模型大鼠肾组织病变，这可能与增加肾组织BMP－7及其受体和Smad5的表达有关。
作者：李姝玉；吴莹；赵福健；许红；高誉珊；张淑静；贾德贤；王谦 刊期： 2015年第10期
目的：高盐膳食是高血压等心血管疾病的主要危险因子。咖啡因是咖啡中的主要成分，具有急性利尿、利钠的作用，而长期使用咖啡因后对血压和尿钠排泄的影响还不清楚。本研究的目的是观察慢性咖啡因干预对血压和尿钠排泄的作用，并探讨其机制。方法：通过手术在盐敏感大鼠体内植入血压传感器，8％高盐饲料（对照组）或8％高盐饲料＋0．1％咖啡因饮用水（咖啡因组）干预大鼠15 d。检测大鼠血压变化，血管功能，心脏结构和功能，尿电解质。健康志愿者喝含咖啡因的咖啡（含300 mg咖啡因）或去咖啡因的咖啡，测量24 h尿钠排出和动态血压。结果：（1）慢性咖啡因干预减轻高盐膳食导致的盐敏感大鼠血压升高而不影响其交感神经活性。（2）慢性咖啡因干预增加大鼠尿钠排泄总量而不影响排尿量，该作用与激活皮质集合管AMPK从而抑制上皮钠通道（α－ENaC）重吸收钠离子有关。（3）摄入咖啡增加健康志愿者尿钠排泄56 mmol，相当于3．27 g NaCl，而对心率和血压没有显著影响。结论：（1）慢性咖啡因干预通过促进尿钠排泄拮抗盐敏感性高血压。（2）饮用含咖啡因的咖啡对盐敏感性人群来说可能是值得提倡的生活方式。
作者：杨涛；于浩；高鹏；魏星；张和轩；熊诗强；路宗师；黎黎；韦晓；陈静；刘道燕；祝之明 刊期： 2015年第10期
目的：从代谢调节角度探讨高原环境对人体血浆代谢的影响及可能机制。方法：分别采集60名健康成年男性在平原和进入高原（海拔5300 m）第4天的血浆样本，高效液相色谱－质谱联用和气相色谱－质谱联用结合多变量统计分析筛选进入高原前后的差异代谢物，Metabo Analyst 3．0数据库进行代谢通路富集分析，ELISA测定代谢通路中关键调节酶。结果：进入高原后受试者血浆中50个代谢物、8条代谢通路和5种关键酶发生了显著的变化。8条代谢通路涉及炎症反应相关代谢、能量代谢、胆酸代谢和血红素代谢。 ELISA结果显示调节以上代谢通路的5种关键酶进入高原后发生显著变化。结论：人类习服高原早期血浆中代谢物组、相关代谢通路和关键调节酶发生了重要变化，研究结果对寻找促进高原习服措施具有重要意义，通过阻断或修饰相关代谢通路将有望减轻急性高原反应症状、促进高原习服。
作者：廖文婷；刘宝；陈建；崔建华；高伊星；刘福玉；徐刚；孙滨达；张二龙；袁志兵；张钢；高钰琪 刊期： 2015年第10期
目的：探讨双重特异性磷酸酶5（dual specificity phosphatase 5，DUSP5）在糖皮质激素抑制血管内皮细胞炎症反应中的作用。方法：体外培养人血管内皮细胞，观察糖皮质激素受体激动剂地塞米松对内皮细胞DUSP5表达的影响；运用siRNA技术降低内皮细胞中DUSP5的表达，观察肿瘤坏死因子α（ tumor necrosis factor alpha，TNF－α）刺激引起的炎性因子和黏附分子表达的变化以及地塞米松抗炎作用的改变。结果：（1）地塞米松明显上调内皮细胞中DUSP5的表达，呈时间和剂量依赖趋势。（2）降低DUAP5的表达使TNF－α引起的炎症因子和黏附分子（ IL－1α、IL－1β、LTβ、IL－6、IL－15、ICAM1、VCAM1和SELE）的表达减少。（3）地塞米松抑制TNF－α引起内皮细胞中包括IL－6在内的炎性因子合成，此抑制作用在DUSP5表达沉默后明显减弱。结论：糖皮质激素通过上调DUSP5表达，使炎性刺激活化的MAPK去磷酸化而失活，从而介导糖皮质激素对血管内皮细胞炎症反应的抑制作用。 DUSP5可能是治疗动脉粥样硬化等血管相关疾病的潜在靶点。
作者：丁怡 刊期： 2015年第10期
本研究探讨CA改善I／R引起的大鼠肝脏微循环障碍和肝损伤的作用及其机理。取体重为180～220 g的SD雄性大鼠，结扎肝脏门管区30 min后再通。部分大鼠经由股静脉连续滴入CA （15 mL? kg－1? d－1）。计算大鼠24 h生存率。观察肝微循环动态。在再灌注120 min时，记录肝脏表面血流量，取肝组织，观察组织学和超微结构变化，分析其分子生物学机理。 CA可以改善大鼠生存率和肝脏微循环障碍，抑制肝过氧化物产生和肝损伤；可与Sirt3结合，改善Sirt3活性、改善Complex I、 II、IV和V的表达，改善SDHA、SDHA、NDUFA9乙酰化、NAD／NADH的变化。 CA还可抑制大鼠肝脏组织的NADPH oxidase亚基p47phox、Rac1和PKC的膜转位，抑制胞膜gp91phox及p22phox的表达。结论：CA能够抑制I／R引起的大鼠肝氧化应激，改善肝脏微循环障碍和肝损伤，该作用与其结合蛋白Sirt3，增加Sirt3活性，提高大鼠线粒体呼吸链活性相关，也与其抑制PKC膜转位，抑制NADPH oxidase亚基p47phox和Rac1的转位相关。
作者：韩晶岩 刊期： 2015年第10期
随着大气臭氧层逐渐变薄，人类接触的紫外强度不断增加，由此引起的疾病日益增多，如皮肤癌、白内障、衰老等。紫外线照射细胞后，产生各种氧自由基，通过引起脂质过氧化而损伤多种细胞膜相结构，进而引发细胞凋亡和基因的改变或突变。寻找有效的抗氧化、抗紫外线制剂十分必要。枸杞多糖是从茄科植物宁夏枸杞中提取的生物活力多糖，含有多种单糖成分，通过预处理和作用于受紫外线照射的RAW264．7细胞，分别用MTT法、中性红吞噬法和Griess法检测RAW264．7细胞的存活率、细胞的吞噬能力和NO的分泌量。结果显示紫外线可以造成体外培养的RAW264．7细胞发生氧化损伤，经枸杞多糖处理的RAW264．7细胞的存活率和吞噬能力显著提高，NO的分泌水平明显降低，提示枸杞多糖可以减轻受紫外线照射的细胞损伤程度，其作用可能与抗氧化反应有关。 RAW264．7细胞是一种小鼠单核巨噬细胞白血病细胞，具有吞饮和抗体依赖分解绵阳红血球和肿瘤细胞的能力，枸杞多糖保护RAW264．7细胞的作用是否还影响了免疫细胞的功能，有待深入探讨。实验对枸杞多糖的临床应用提供了有力的依据。
作者：黄庚娣；贺芳；韩魁；霍佳宁；范琳琳；邢嵘 刊期： 2015年第10期
目的：观察新型气体信号分子二氧化硫（ SO2）对老年ALI大鼠肺泡巨噬细胞分泌和吞噬功能的影响。方法：将48只20～24月龄，体重758±47 g的老年大鼠随机分为3组：对照组、ALI组和SO2治疗组。 SO2治疗组和ALI大鼠气管内滴注脂多糖（LPS，每只200μg）后，分别立即腹腔注射SO2供体Na2SO3（0．54 mmol／kg）／NaHSO3（0．18 mmol／kg）和等体积生理盐水。对照组大鼠气管内滴注等体积无热原生理盐水。各组大鼠气管内滴注LPS或生理盐水6 h后，留取支气管肺泡灌洗液用于分离和培养大鼠肺泡巨噬细胞（ AM）。 ELISA测定AM培养上清炎症因子IL－1β、IL－6和IL－10的含量，并观察AM对白色念珠菌吞噬功能的变化。结果：气管内滴注LPS可使AM分泌IL－1β、IL－6和IL－10增多，同时使其对白色念珠菌的吞噬率降低。与ALI组相比，给予SO2溶液后可抑制IL－1β、IL－6的分泌而促进IL－10的分泌，同时使AM对曲霉孢子的吞噬率增加。结论：外源性给予SO2可调节老年大鼠急性肺损伤时AM分泌及吞噬功能的变化。
作者：黄新莉 刊期： 2015年第10期
目的：探讨酸中毒诱导大脑皮层GABA能神经元功能损伤的机理。方法：制备小鼠大脑冠状切片，灌流pH为7．35～7．45的人工脑脊液，选择感觉皮层GABA能神经元为正常组，全细胞电流钳模式记录其动作电位的阈电位（ Vts ）、绝对不应期（ ARP）和动作电位的锋间距（ ISI），电压钳模式记录兴奋性突触后电流（ sEPSCs）和抑制性突触后电流（ sIPSCs），将灌流人工脑脊液pH调为6．75，模拟胞外酸中毒为胞外酸中毒组；通过玻璃微电极胞内灌注酸性电极液，模拟胞内酸中毒为胞内酸中毒组，观察上述变化。结果：与正常组比较，胞内外酸中毒均能使GABA能神经元ISI和ARP延长（P＜0．01），Vts升高（P＜0．01）， sEPSCs幅度和频率增加（P＜0．01），sIPSCs幅度和频率减少（P＜0．01）。结论：酸中毒通过影响大脑皮层GABA能神经元内在特性和突触传递，进而诱导其功能损伤。
作者：黄丽 刊期： 2015年第10期
目的：建立小鼠流感性肺炎模型，明确呼吸道流感病毒感染过程中是否存在特异性的肠道病理损伤，并探讨了其在“肺与大肠相表里”研究中的应用。方法：BALB／c小鼠48只随机分为正常组、模型组。模型组给予25μL 50LD50病毒液滴鼻建立流感病毒感染的小鼠肺炎模型，感染后0、3、5、6 d分别取材，HE染色检测肺脏和大肠、小肠、心脏、肾脏和肝脏组织病理结果，血生化检测血清尿素氮（ BUN）、谷丙转氨酶（ ALT）和谷草转氨酶（ AST）水平。结果：流感病毒感染后，模型组小鼠肺组织出现明显的炎性病变外，随时间延长肺组织充血水肿出血加重；小肠黏膜腺体排列紊乱，绒毛粗大、部分脱落，黏膜固有层淋巴细胞大量浸润；大肠黏膜固有层、肌层大量淋巴细胞浸润，腺体结构消失、脱落；而心脏、肝脏和肾脏无明显病变；模型组小鼠血清BUN、ALT和AST较正常组相比，无显著差异。结论：小鼠流感病毒性肺炎模型中存在小肠、大肠特异性免疫病理损伤，是研究中医“肺与大肠相表里”理论及相关临床治法的理想模型。
作者：张淑静；吴莹；齐晓宇；葛东宇；李根茂；玄子男；王谦；李姝玉 刊期： 2015年第10期
目的：探究H2 S对HepG2细胞apo（ a）表达的影响及其机制研究。方法：培养HepG2细胞至70％密度，以NaHS（0、25、50、100、200μmol／L）培养24 h及用200μmol／L NaHS处理0、6、12、24 h；RT－PCR和免疫印迹分别检测apo（ a） mRNA和蛋白， ELISA测定apo（a）分泌水平。结果：外源性H2S剂量和时间依赖性下调apo（a）表达水平及apo（a）分泌水平，以100μmol／L和24 h的下降作用为显著。 H2 S显著上调FXR、M－PKCα及p－AKT表达，而下调HNF4α表达；抑制PKC α及AKT激活可以反转H2 S对HepG2细胞中apo（ a）蛋白表达的抑制作用；干扰FXR也可起到相同的效果；而干扰HNF4α后，由于HNF4α干扰后其上游的因子可能通过调节其它因子或是其竞争性抑制物FXR反应性增加，从而使apo（ a）增加不明显。结论：H2 S时间及剂量依赖性抑制apo（ a）表达，与其通过PKCα上调FXR和AKT下调HNF4α有关。
作者：何兴兰；张海；瞿凯；王佐；姜志胜 刊期： 2015年第10期
病理学是基础医学和临床医学的桥梁，对学生医学知识的增加具有重要的作用。教师以课本为中心的传统讲授法，学生被动机械的记忆学习模式，使得病理学的教学效率较低。本文在程序教学法理论的指导下，进行病理学的教学尝试，探究《病理学》教学中程序教学法应用的有效策略。
作者：唐彩云 刊期： 2015年第10期
中国病理生理杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国病理生理学会
