庹清章；孙旭莹；刘杨震宇；王建枝；刘蓉
目的：应用TBL为中心的多元教学方法，以提高学生自主学习、团队协作能力，促进高质量、高素质的创新型医学人才的培养。方法：病理生理学理论性强、难教、难懂，学生学习起来比较吃力，这要求教师采用灵活的教学方法、科学先进的教学手段激发学生对病理生理学的学习热情；以2013级口腔和麻醉专业学生为研究对象，口腔专业采用常规多媒体教学；麻醉专业采用TBL为主导有机结合多媒体教学、案例教学法的多元教学法，首先学生通过课前自学提出问题，在课堂上教师引用典型性、相关性和实用性病例通过案例教学法解决学生的问题，将抽象的内容感性化，理论与临床相结合，激发学生学习兴趣，培养学生临床思维能力与综合运用知识的能力。通过形成性评价进行综合分析评价。结果：多元教学的麻醉专业的考试成绩均优于常规多媒体教学的口腔专业，经t检验差异有显著意义（P＜0．01）；两组的问卷调查结果经χ2检验，多元教学优于常规多媒体教学。结论：以TBL为中心的多元教学优于常规多媒体教学；同时培养了学生独立思考、提出问题、分析问题、解决问题的能力，提高了教学质量。
作者：王顺蓉；张春梅；陈蓉；唐华；邹平；黄珀 刊期： 2015年第10期
病理学是基础医学和临床医学的桥梁，对学生医学知识的增加具有重要的作用。教师以课本为中心的传统讲授法，学生被动机械的记忆学习模式，使得病理学的教学效率较低。本文在程序教学法理论的指导下，进行病理学的教学尝试，探究《病理学》教学中程序教学法应用的有效策略。
作者：唐彩云 刊期： 2015年第10期
作者： 刊期： 2015年第10期
目的：尿素通道蛋白B（ urea transporter B， UT－B）是介导尿素快速跨膜转运的膜蛋白，UT－B基因敲除后可导致老龄小鼠发生心肌肥大，本研究拟探讨UT－B基因敲除后对小鼠线粒体功能的影响。方法：应用试剂盒检测线粒体呼吸链复合体的活性， PCR检测mtDNA 基因D－loop区域多态性／突变情况，流式细胞术检测线粒体膜电位和ROS水平。结果：与野生型小鼠相比， UT－B基因敲除小鼠线粒体复合体I和IV活性明显下降，通过复合体Ⅴ产生的ATP量明显降低；线粒体mtDNA发生多处突变，线粒体损伤标志线粒体DNA／核DNA的比率显著下降。 UT－B基因敲除小鼠线粒体膜电位水平较野生型小鼠明显下降，而心肌ROS水平增加约31．42％。结论：UT－B基因敲除后可导致小鼠线粒体功能障碍，这可能是其老龄后发生心肌肥大的机制之一。
作者：杜艳伟；付双；刘莲勤；杨方圆；赵雪俭；杨宝学；张灵；孟艳 刊期： 2015年第10期
作者： 刊期： 2015年第10期
施加于内皮细胞的血流剪切力可调控血管平滑肌细胞的表型，对血管稳态维持和动脉粥样硬化发生有重要影响。但这一力学信号由内皮细胞向平滑肌细胞的传递机制待阐明。前期工作中我们发现microRNA可作为信号分子介导内皮细胞与平滑肌细胞的交互作用。我们推测：作用于内皮细胞的流体剪切力通过诱导流场特异性的microRNA分泌，调控平滑肌基因表达和表型转换以及血管功能。利用体外流体剪应力加载模型、共培养合并流体加载模型、小鼠血流扰流模型等研究系统，我们发现保护血管的层流和损伤血管的扰流可差异性地调控miR－126、miR－143／－145、miR－155等microRNA的分泌；层流抑制miR－126的分泌，扰流则促进其分泌，其机理涉及剪切力对分泌相关蛋白的表达和细胞内转位的调控；内皮细胞分泌的miR－126可促进平滑肌细胞增殖和去分化表型、促进小鼠颈总动脉新生内膜增厚。研究结果确认了胞外microRNA在血管病理生理过程中的作用，增进了对动脉硬化发生机制的了解。
作者：朱娟娟；Yi-shuan LI；钱煦；周菁 刊期： 2015年第10期
目的：通过构建小鼠Omi／HtrA2基因启动子萤光素酶报告载体并进行转录活性分析，深入研究小鼠Omi／HtrA2转录调控发生的机制。方法：本实验构建覆盖小鼠Omi／HtrA2基因5’侧翼区（－1205 bp～＋93 bp）区域的一系列启动子萤光素酶报告基因载体，将其转染至小鼠成纤维细胞NIH3T3、大鼠心肌细胞H9c2和人胚肾细胞HEK293，并进行萤光素酶活性检测。结果：小鼠Omi／HtrA2启动子在－1205 bp～－838 bp和－146 bp～＋93 bp区域活性高，生物信息学分析这些启动子区域可能存在HSF1、SP1、AP、p53等转录因子结合位点。结论：初步证实－1205 bp～－838 bp和－146 bp～＋93 bp区域为CFL2启动子的活性区域。
作者：刘丹；武烨；刘鑫；刘慧荣 刊期： 2015年第10期
目的：动脉外膜所产生的活性氧和新生血管形成，可能导致和促进病理性血管重构的形成。本课题研究NADPH氧化酶在同种异体主动脉移植模型的外膜血管动态表达和新生血管形成。方法：将F344大鼠胸主动脉移植到Lewis腹主动脉造模。于移植后0．5、3、7和14 d收集移植血管，进行形态学分析、免疫组化和定量PCR检测。结果：血管外膜移植后3 d、内膜7 d增厚。移植血管外膜NADPH氧化酶亚基gp91phox和p47phox蛋白和mRNA表达水平3 d开始升高，14 d达高峰。免疫组化显示，巨噬细胞浸润可能是NADPH氧化酶表达的主要来源。而淋巴细胞浸润在各时点无显著差别。移植血管外膜分离、培养的原代成纤维细胞NADPH氧化酶表达也增加。 siRNA－p47phox沉默p47phox基因后，BrdU掺入和Transwell迁移实验显示，移植血管外膜成纤维细胞的增殖和迁移能力显著受抑制。此外，移植14 d，移植血管外膜增厚伴有新生血管形成明显增加，外膜中微血管密度和血管内膜厚度呈正相关。结论：移植损伤可诱导血管外膜NADPH氧化酶表达和新生血管的形成，移植引起的外膜活性提高可能成为预防、治疗血管病变的靶点。
作者：孙梦瑶；郭晓彤；罗坤；刘雪峰；王瑞；王牧川；张恩浩；王建丽 刊期： 2015年第10期
为了研究在缺氧条件下，L型前列腺素D合成酶（ L－PGDS）对心房钠尿肽（ ANP）分泌的影响，以及其是否参与了内源性内皮素1（ ET－1）调控ANP分泌的过程，本实验采用左心房离体灌流模型，利用放射性免疫检测ANP和ET－1分泌水平，利用蛋白免疫印迹分析L－PGDS蛋白水平的变化。发现在急性缺氧条件下，ET－1和ANP 分泌量增加的同时，L－PDGS蛋白的表达也出现了上调现象。使用内皮素A型受体和B型受体抑制剂可以明显地减弱缺氧条件下ANP和L－PGDS的增长程度。而经L－PGDS的酶抑制剂处理之后，缺氧对ANP分泌的促进作用也得到了部分消弱。因此，在急性缺氧条件下ET－1促进心房ANP的分泌主要是通过与其A型和B型受体结合以及对L－PGDS活性的激活。
作者：崔百日；卞超超；洪兰；刘丽萍；崔勋 刊期： 2015年第10期
作者： 刊期： 2015年第10期
目的：观察DNA甲基化修饰酶TET2对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）中CSE／H2S体系的影响。方法：用不同浓度（0、25、50、75、100 mg／L） ox－LDL处理HUVEC不同时间（0、12、24、48 h），RT－PCR和Western blot检测细胞TET2和CSE表达变化，改良亚甲基蓝分光光度法检测培养液中H2 S含量；用TET2过表达和TET2干扰质粒分别转染HUVEC，再用75 mg／L ox－LDL处理24 h，RT－PCR和Western blot检测细胞TET2和CSE表达，改良亚甲基蓝分光光度法检测培养液中H2 S含量。结果：ox－LDL呈浓度和时间依赖性下调HUVEC中TET2和CSE mRNA和蛋白表达，减少培养液中H2 S含量，以75 mg／L ox－LDL 处理24 h效果为明显；TET2过表达可逆转ox－LDL引起的HUVEC中TET2和CSE表达下调以及培养液中H2 S含量的降低，TET2干扰则作用相反。结论：DNA甲基化修饰酶TET2可上调HUVEC的CSE／H2 S体系，有望成为CSE／H2 S体系一个新的内源性调控靶点。
作者：彭娟；唐志晗；任重；刘录山；危当恒；姜志胜 刊期： 2015年第10期
目的：研究铁超载对大鼠肝星状细胞增殖和凋亡的影响以初步证实铁超载对肝纤维化的促进作用。方法：大鼠肝星状细胞HSC－T6给予硫酸亚铁2μmol／L负载24 h，正常对照组给予DMSO 2μmol／L。免疫荧光染色法观察铁在HSC－T6中的分布面积，流式细胞术检测HSC－T6增殖， TUNEL法检测HSC－T6凋亡，Western blot检测HSC－T6基质金属蛋白酶1（MMP－1）和金属蛋白酶组织抑制剂1（TIMP－1）蛋白表达水平。结果：与正常对照组相比，铁超载组HSC－T6内铁染色阳性的平均面积为39．02％±2．03％，平均增殖率为61．02％±2．21％，平均凋亡率为13．01％±0．95％，MMP－1和TIMP－1的蛋白平均表达水平分别增加了38．82％±7．62％和179．88％±17．52％。结论：铁超载导致肝星状细胞的增殖率大于其凋亡率，并且肝星状细胞基质金属蛋白酶抑制剂的表达水平高于其基质金属蛋白酶的水平，因此推断铁超载促进了肝星状细胞的活性，从而促进了肝纤维化的进程。
作者：张颖 刊期： 2015年第10期
传统的课程考试都是根据教师所讲授的内容出题，局限于教材、课堂笔记。这类考试主要考查学生对知识点的记忆情况，无法真正考查学生综合应用所学知识发现问题、解决问题的能力。为改变“一考定成绩”的状况，应该加强平时考核在总成绩中的权重，将考核贯穿平时课程教学的全过程。我们已经连续3年利用学校网络平台进行案例分析测验。根据讲授内容，将课程分成4个阶段，在每个阶段的学习之后，对相应的理论知识进行阶段性考核。具体的考核形式是选择一个临床真实病例，提出相应问题（如病例中所涉及的病理过程、发病机制等），让学生进行综合分析。学生在规定时间内提交报告，由老师判阅，4次报告成绩以20％计入总成绩。在学生提交完报告后，我们在网上公布正确答案及学生的报告，便于学生对相应知识正确理解，同时也利于学生相互监督、防止抄袭。这种形式测验要求学生首先对学习过的病理生理学知识有很好的理解和记忆，其次具备运用所学知识分析及解决问题的能力，让学生充分体会病理生理学与临床知识的紧密联系，从而使学生在平时的学习中对病理生理学产生浓厚的兴趣。
作者：徐海；刘利梅；窦豆；向若兰；吴立玲 刊期： 2015年第10期
目的：探讨纤连蛋白／整合素β对短期高脂饮食诱导的脂肪肝的作用及其机制。方法：ATN161为整合素β的拮抗剂。将雄性C57BL／6小鼠分为4组，正常饮食（ND）组，ND＋ATN161组，高脂饮食（HFD）组，HFD＋ATN161组，处理5 d后检测脂肪肝表型及脂代谢相关基因的表达。并用纤维连接蛋白（ FN）和ATN161处理HepG2细胞后检测相关基因的表达。结果：HFD组小鼠肝脏甘油三酯（ TG）和胆固醇（ CHO）含量增加；HFD＋ATN组肝脏TG和CHO含量进一步增加。 HFD组小鼠肝脏FN表达量升高，肝脏X受体（ LXR）下游靶基因（ CHREBP、SREBP1、SCD1、ACC和FAS）表达量下降；HFD＋ATN组小鼠上述基因表达量均有所回升。予FN处理的HepG2细胞中，LXR下游靶基因表达量下降，表明LXR活性被抑制；ATN处理可恢复FN导致的LXR活性抑制。结论：FN与整合素β结合可抑制LXR活性，抑制整合素β可进一步增加高脂饮食诱导的肝脏脂质沉积。
作者：张菲菲；张学娇；姚柳；王春炅；艾玎 刊期： 2015年第10期
目的：结肠癌是消化系统常见恶性肿瘤之一，开发新的抗结肠癌药是提高结肠癌治疗效果的关键之一。中药在抗肿瘤方面的作用是目前国家中药开发的重要课题之一，复方木鸡颗粒（简称木鸡）由云芝、山豆根、菟丝子、核桃楸皮等组成，具有扶正清热解毒功效，能抑制甲胎蛋白升高和调节免疫功能，已用于临床治疗原发性肝癌、肝硬化、肝炎等肝脏疾病。但在抗结肠癌的研究方面较少。本研究观察木鸡对不同p53基因型的人结肠癌细胞（HCT116p53wt、SW620p53mt和SW480p53mt）的抑制作用，初步探讨木鸡的抑瘤机制。方法：MTT法检测木鸡对细胞的生长抑制作用，光镜观察细胞形态，DAPI染色观察细胞凋亡情况。结果：木鸡对不同p53基因型的人结肠癌细胞有明显的生长抑制作用，5％的浓度抑制率可达92．7％。光镜下可见木鸡处理的结肠癌细胞变圆、浮起，细胞边缘呈发泡状，DAPI染色显示木鸡处理的细胞染色质浓缩，核边集，提示凋亡样改变，且p53野生型的人结肠癌细胞变化更明显。结论：木鸡对人结肠癌细胞有明显的抑生长作用，这种作用在p53野生型的人结肠癌细胞上更显著，提示木鸡的抑瘤作用机制与p53抑癌基因可能存在一定联系。
作者：于向洋；王玉；万山荣；刘花丽；张雪；邢嵘 刊期： 2015年第10期
瞬间外向钾电流（Ito，f）是心肌细胞AP复极化1期的重要电流。 Ito，f由形成电流孔道的α亚基Kv4和调节β亚基KChIP2组成。研究发现，MG53是一种肌特异性的TRIM家族蛋白，在心电稳定性维持中起重要作用。我们研究发现，用重组腺病毒载体使MG53在培养的乳鼠心肌细胞过表达，Ito，f显著增大；而通过RNAi降低心肌细胞MG53表达时，Ito，f明显减小。相应地，MG53对心肌细胞 KChIP2的mRNA和蛋白表达水平具有双向调节作用，过表达MG53增加KChIP2的mRNA和蛋白水平，而MG53低表达则减少KChIP2的mRNA 和蛋白水平，但不影响Kv4的表达。过表达MG53，抑制NF－κB活化，而抑制MG53的表达，则促使NF－κB活化入核。过表达NF－κB激活剂 IKKβ抑制了MG53过表达引起的KChIP2表达增加。而过表达NF－κB抑制剂IκBα则抑制MG53低表达引起的KChIP2表达降低。这一发现率先揭示MG53作为一种新的心脏内在的Ito，f调节分子，在正常与疾病心脏电生理稳定性中发挥重要的作用，可为临床治疗提供依据。
作者：刘杰 刊期： 2015年第10期
目的：研究蛋白激酶R样内质网激酶（ PERK）／核因子红系相关因子2（ Nrf2）途径介导的内质网应激反应在不同浓度的毒胡萝卜素（thapsigargin， TG）和衣霉素（tunicamycin， TM）诱导的H9c2细胞凋亡中的作用。方法：在不同浓度TG和TM诱导的H9c2细胞模型上，采用Annexin V／PI双标法和TUNEL法检测细胞凋亡，CCK－8法检测细胞活力；以Western blot检测磷酸化PERK、Nrf2及活化转录因子4（ ATF4）等蛋白水平，免疫荧光法检测Nrf2的核转位。结果：与对照组比较，TG浓度为20 nmol／L、TM浓度为160μg／L处理H9c2细胞48 h时可诱导H9c2细胞凋亡，增加PERK磷酸化、Nrf2核转位和ATF4的表达；内质网应激抑制剂牛磺酸和熊去氧胆酸处理细胞后明显减轻TG和TM诱导的H9c2细胞凋亡，并下调PERK磷酸化、Nrf2核转位和ATF4的表达。结论：PERK／Nrf2途径参与TG和TM诱导的H9c2细胞内质网应激相关细胞凋亡。
作者：陶天琪 刊期： 2015年第10期
目的：探讨程序性细胞死亡分子5（PDCD5）在心肌肥厚发生发展过程中的作用及机制。方法：腹主动脉缩窄术（AAC）建立大鼠心肌肥厚病理模型；苯肾上腺素（ PE）刺激分离培养的乳鼠心肌细胞肥大；RT－PCR和蛋白印迹实验分别检测mRNA及蛋白表达；含PDCD5 cDNA腺病毒或PDCD5 shRNA腺病毒转染心肌细胞以过表达或敲低PDCD5；萤光素酶报告基因系统及染色质免疫沉淀技术检测活化T细胞核因子（ NFAT）与PDCD5启动子区的结合。结果：在AAC所致肥厚心肌组织及PE刺激的肥大心肌细胞中，PDCD5表达量均显著增加；PDCD5过表达可抑制PE诱导的心肌肥大，而敲低PDCD5则诱导心肌细胞肥大并加重PE刺激的心肌肥大。肥大心肌细胞中NFAT表达量增高，升高的NFAT可与PDCD5启动子结合，上调PDCD5表达量。结论：心肌肥大过程通过NFAT信号通路上调PDCD5表达量，增高的PDCD5反馈性抑制心肌肥大，从而对心肌起保护作用。
作者：叶菁菁；郑铭 刊期： 2015年第10期
目的：研究O6－甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶（ MGMT）在N－甲基亚硝基脲（ MNU）诱导的人胃正常黏膜上皮细胞GES－1恶性转化中的表达变化，明确其转录激活的分子机制。方法：建立MNU诱导的GES－1细胞恶性转化模型，动态分析MGMT的表达、启动子转录激活、DNA甲基化、组蛋白修饰变化及其表达改变在GES－1细胞恶性转化中的作用。结果：MNU暴露持续激活MGMT的表达。 MGMT高表达细胞的增殖和克隆形成能力显著下降。甲基化特异性PCR显示MGMT基因甲基化水平下降，亚硫酸氢盐基因组测序证实其启动子区呈显著低甲基化。免疫共沉淀分析发现DNA甲基化转移酶（ DNMT1）与MGMT基因的结合减少，组蛋白特异性修饰H3K9met3和H3K4met2均参与调控其表达。结论：MGMT的表达上调抑制化学致癌剂MNU诱导的细胞恶性转化，MGMT的持续激活依赖于其启动子区DNA的低甲基化。
作者：陈月霞；齐宏妍 刊期： 2015年第10期
目的：研究孤束核ghrelin对化疗呕吐大鼠胃运动的影响，探讨下丘脑外侧区的可能调控作用。方法：腹腔注射顺铂制备化疗呕吐大鼠模型；荧光免疫组化和Western blot法检测化疗呕吐大鼠孤束核ghrelin和ghrelin受体GHSR－1a的表达变化；神经元逆行追踪结合免疫组化观察下丘脑外侧区－孤束核ghrelin能纤维联系；在体胃运动记录观察孤束核微量注射ghrelin、电刺激下丘脑外侧区对化疗呕吐大鼠胃运动的影响。结果：化疗呕吐大鼠孤束核ghrelin表达低于正常大鼠，而GHSR－1a表达高于正常大鼠，且胃运动显著减弱（ P＜0．05）；下丘脑外侧区有神经元投射至孤束核，且有部分神经元是ghrelin免疫阳性神经元；孤束核注射ghrelin和电刺激下丘脑外侧区可显著促进正常大鼠和化疗呕吐大鼠胃运动（ P＜0．05）；孤束核微量注射ghrelin受体阻断剂［ D－Lys－3］－GHRP－6对正常大鼠电刺激下丘脑外侧区胃运动效应无影响，而对化疗呕吐大鼠电刺激下丘脑外侧区胃运动效应显著减弱（ P＜0．05）。结论：孤束核ghrelin可促进化疗呕吐大鼠胃运动，并受下丘脑外侧区调控。
作者：公衍玲；徐珞；郭菲菲 刊期： 2015年第10期
中国病理生理杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国病理生理学会
