洪斌；沈学远；陈江勇
目的：探讨止血带性缺血再灌注损伤后血小板线粒体的变化，为临床止血带的应用提供指导依据。方法30只SD大鼠随机分为对照组（6只），缺血再灌注组（24只，再随机均分为4组，分别在再灌注后2、6、12、24 h取血检测）。采用自制止血带环绕白兔大腿根部（压力280 mmHg）模拟止血带性缺血，4h后松开止血带。相应时间点取血分离血小板。采用全自动血球计数仪测定血小板数量；荧光素-荧光素酶试剂盒测定血小板ATP含量；JC-1线粒体膜电位试剂盒探测线粒体膜电位（△ym）变化；细胞色素C凋亡试剂盒检测血小板胞质细胞色素C含量；过氧化脂质试剂盒检测血小板中过氧化脂质。结果与对照组比较，缺血再灌注损伤组血小板内ATP含量在2、6 h显著降低（P<0.05或P<0.01），而低线粒体膜电位的血小板含量、胞质细胞色素C含量、过氧化脂质含量均在2、6 h逐渐增加并具有统计学差异（P<0.05或P<0.01）；在12 h时，以上改变有所恢复但仍有统计学差异（P<0.05或P<0.01）；24 h时基本恢复正常（P>0.05）。血小板计数在两组间无统计学差异（P>0.05）。结论止血带性缺血再灌注损伤可以导致血小板线粒体功能的受损，且主要发生在缺血再灌注早期（6h），在后期逐渐恢复，而对血小板数量无明显影响。
作者：张建杏；李红英；周国斌；王庆；李真 刊期： 2014年第07期
目的：3-三氟甲基苯甲酰胺类衍生物作为新的抗流感药物能否抑制H5N1流感病毒进入靶细胞。方法对先导化合物进行改构，发现并合成具有进入抑制活性的3个化合物，同时从Specs公司化合物库挑选购买了一些化合物，同样发现了4个有抑制活性的化合物，利用建立在细胞水平的H5N1假病毒活性检测方法测试了这些化合物的抑制活性。结果和结论化合物1a，1b，1e和1f对源自A/AnHui/1/2005的H5N1假病毒毒株有明显的抑制作用。化合物1a的活性好，其IC50达到4.7±0.3μmol/L。
作者：朱志博；蔡云；杨洁；李湘潋；李润明；刘叔文 刊期： 2014年第07期
目的：在建立实验性大鼠阿尔茨海默氏病动物模型基础上探讨淀粉样变性脑血管病变的脑组织病理变化特点。方法在立体定向仪引导下向大鼠双侧海马内注射Aβ1-42纤维，建立阿尔茨海默氏病动物模型，应用水迷宫试验评价大鼠高级认知功能情况，应用HE染色、刚果红染色以及α-actin、Aβ双重标记免疫荧光染色观察淀粉样蛋白在大鼠脑内沉积与淀粉样变性脑血管病变的动态变化情况。结果模型组与假手术对照组相比逃避潜伏期时间和平台探索次数均有显著性差异。HE染色可见模型组大鼠海马区颗粒细胞减少，细胞变性，胶质细胞增生，海马内小血管壁变性。刚果红染色可见Aβ纤维逐渐沉积在小血管壁，管壁增厚，小血管狭窄或闭塞；免疫荧光染色可见模型组脑组织内Aβ纤维逐渐向小动脉迁移。结论淀粉样变性脑血管病变是阿尔茨海默氏病的主要病理变化。
作者：吕田明；梁彦珊；史翠丽；黄小玉；潘志勇；凌容；张文玲；郝梦淅；郭秋瑶；曾宇；尹恝 刊期： 2014年第07期
目的：探讨晚期胃癌DCF方案一线化疗后继续替吉奥维持化疗疗效及不良反应。方法随机将60例既往DCF方案一线化疗4~6周期后疗效评价为无疾病进展的晚期胃癌患者分为维持组与对照组。维持组予替吉奥维持化疗（40 mg/m2，连续14 d，每21 d为一个周期），持续至疾病进展或者出现不能耐受毒性为止。对照组予佳支持治疗。结果维持组的近期有效率（CR+PR）为33.3%，疾病控制率（CR+PR+SD）为73.3%，对照组的近期有效率为3.33%，疾病控制率为46.7%，两组比较差异有统计学意义（P<0.05）。维持组的中位疾病进展时间7.9月，较对照组6.8月延长（P<0.05）。两组中位生存期分别为13.8月和11.7月（P>0.05）。维持组主要毒副反应为恶心、呕吐、白细胞减少、手足综合征，无治疗相关死亡。结论 DCF方案一线治疗后继续替吉奥维持治疗晚期胃癌患者，提高近期有效率及疾病控制率，延缓疾病进展，不良反应可以耐受，值得临床进一步研究应用。
作者：陈敬华；申维玺；夏俊贤；许瑞莲；朱美琴；徐敏 刊期： 2014年第07期
目的：通过评估亚甲蓝单独和联合99mTc-硫胶体核素示踪法在早期非小细胞肺癌（NSCLC）前哨淋巴结（SLN）定位的可行性，探讨SLN概念在NSCLC中的适用性。方法选择我院2008年3月~2011年5月收治的早期NSCLC 61例为研究对象，术中行SLN示踪剂注射并切除，其中注射亚甲蓝35例，亚甲蓝联合99mTc-硫胶体26例，并行肺叶切除+肺门及纵隔淋巴结清扫术，术后所有淋巴结均石蜡切片，行HE染色和抗细胞角蛋白抗体免疫组化检查。结果单独使用亚甲蓝组的SLN检出率60.0%，准确性76.19%，灵敏度58.33%，阴性预测值和假阴性率分别为90.0%和8.33%；亚甲蓝联合99mTc-硫胶体组在检出率96.15%，准确性96.0%，灵敏度92.86%，阴性预测值和假阴性率分别为91.67%和7.14%。结论（1）SLN的状态能够反映NSCLC肺门纵隔淋巴结是否转移；（2）亚甲蓝联合99mTc-硫胶体核素示踪法较单独使用亚甲蓝在前哨淋巴结导航中具有更高的检出率、准确性及灵敏度，是较好的肺癌SLN示踪方法，可能运用于临床。
作者：洪斌；沈学远；陈江勇 刊期： 2014年第07期
胎盘是胎儿生长发育、代谢循环及维持母胎生理平衡的重要脏器。血管形成是胎盘发育的关键，其不仅包括胎儿血液循环，还包括子宫内膜和胎盘的血管变化。血管的形成与血管生成因子如血管内皮生长因子（VEGF）、胎盘生长因子（PLGF）等密切相关。胎儿生长受限（FGR）属严重高危妊娠，不仅对胎儿在妊娠期的健康造成威胁，还会增加分娩后远期多种疾病的发病率。目前已有关于血管生成因子与胎儿生长受限之间的研究，现将两者之间的关系作一综述。
作者：黄赟博；刘倩倩；余艳红 刊期： 2014年第07期
目的：利用siRNA抑制CDK6表达后对鼻咽癌细胞生长及细胞周期的影响及分子基础。方法实时荧光定量PCR检测CDK6在30例鼻咽癌与18例鼻咽组织中的表达差异。siRNA转染鼻咽癌细胞CNE2，靶向抑制CDK6表达。利用MTT和流式细胞仪分别检测细胞增殖和细胞周期改变。Western blot检测细胞周期相关因子的表达改变。结果与鼻咽组织相比，CDK6基因mRNA在鼻咽癌组织中表达明显增高。siRNA在鼻咽癌细胞中靶向抑制CDK6表达后，细胞生长能力明显降低，且细胞周期也明显阻滞在G1期，S期细胞减少。机制分析显示在抑制CDK6表达后，细胞周期促进因子CDK4、CCND1和E2F1表达显著下降，而细胞周期抑制因子p21表达明显提升。结论 CDK6在鼻咽癌中表达升高。siRNA靶向抑制CDK6之后通过下调CDK4、CCND1和E2F1以及上调p21表达后，能明显抑制鼻咽癌细胞增殖能力及细胞周期转化。
作者：罗小鹏；夏琼；覃继新；黄永秩；刘津；王莹；王怀飞；陈家军 刊期： 2014年第07期
目的：探讨血小板参数变化与肾移植术后早期移植肾功能延迟性恢复（DGF）的关系。方法对我院2009年1月~2013年9月的232例肾移植受者术前至术后2个月内临床资料进行回顾性分析，以术后发生DGF的29例受者作为研究组，同期未发生DGF的203例受者作为对照组，收集病人术前和术后血小板常规实验室检查资料，进行统计学分析。结果肾移植术后第1天患者血小板数量（PLT）、血小板比容（PCT）开始降低，术后第5天降至低且明显低于术前水平（P<0.05），然后缓慢升高，术后第15天升至高并明显高于术前水平（P<0.05），然后又缓慢降低，术后第30-60天接近术前水平（P>0.05）。平均血小板体积（MPV）、血小板体积分布宽度（PDW）和大型血小板比值（P-LCR）术后第1天开始升高，术后第7天升至高，且明显高于术前水平（P<0.05），之后缓慢降低并于术后第15天降至接近术前水平（P>0.05），然后又缓慢升高，MPV、P-LCR至术后30~60 d明显高于术前水平（P<0.05），PDW至术后45~60 d明显高于术前水平（P<0.05）。发生DGF组受者与未发生DGF组受者相比，术后第2天起DGF组受者血小板数量始终低于非DGF组受者，其中第7~10天二组受者血小板计数差异有统计学意义（P<0.05）；PCT二组无明显统计学意义（P>0.05）；DGF组受者MPV、PDW、P-LCR始终高于非DGF组受者，其中术后第7、10、15天二组MPV、PDW、P-LCR的差异均有统计学意义（P<0.05）。结论血小板不仅是肾移植术后围手术期的重要凝血因子，而且是参与移植肾血管内皮细胞损伤再修复过程重要的炎性细胞，本研究提示临床上监测血小板参数的变化可为肾移植术后DGF的发生和逆转提供新的疾病检测指标。
作者：付绍杰；郭彬彬；于立新；王亦斌；杜传福；肖露露；周敏捷；罗敏 刊期： 2014年第07期
目的：探讨沉默Bmi-1表达在逆转人肺癌顺铂耐药性的作用及机制。方法以siRNA沉默Bmi-1表达，MTT法检测细胞顺铂敏感性，流式细胞术检测细胞周期分布与凋亡，β-半乳糖酐酶染色法检测细胞的衰老，Western blot法检测Bmi-1、P14ARF、P16INK4a、P53、P21、Rb、ubi-H2AK119蛋白表达。结果肺癌顺铂耐药株A549/DDP细胞的Bmi-1表达明显高于A549细胞；沉默Bmi-1的表达显著增加耐药株对顺铂的敏感性（IC50从40.3±4.1μmol/L降到18.3±2.8μmol/L，P<0.01），细胞G0/G1期比值显著升高[从（48.9±2.3）%升到（78.7±7.6）%，P<0.01]；细胞β-半乳糖酐酶染色阳性，呈衰老特征。细胞衰老通路的P14ARF、P16INK4a、P53、P21、Rb表达上调，ubi-H2AK119表达下调。结论沉默Bmi-1表达能诱导A549/DDP细胞衰老，逆转对顺铂的耐药性，其作用机制可能与降低ubi-H2AK119表达、调节INK4a/ARF/Rb衰老通路有关。
作者：毛楠；何关生；饶进军；吕琳 刊期： 2014年第07期
目的：构建肝外胆管供血动脉三维可视化模型，研究基于亚毫米CT数据精细管道分割新方法。方法把基于体绘制交互的图像分割新算法作为一个分割插件整合到医学图像三维可视化系统（MI-3DVS）中，再将10名受检者的腹部64层亚毫米CTA数据导入MI-3DVS，程序化构建肝外胆管及供血动脉的3D模型。然后对3D模型进行缩放、旋转、融合拆分以及透明化显示等操作，观察、分析3D模型中的肝外胆管供血动脉来源、走行、分布特点。结果10例肝外胆管血供3D模型立体感强，可精确显示肝动脉的4到5级分支、胆囊动脉的2级分支、胰十二指肠动脉弓及门静脉后动脉；胆道3D模型可清晰显示肝内胆管、左右肝管、胆囊、肝总管、胆总管等胆道各部分。结论基于体绘制交互的分割方法能够对肝外胆管供血小动脉进行分割、提取；使用MI-3DVS重建的3D模型能够真实反映个体化的肝外胆管及供血动脉立体解剖结构。
作者：杨剑；方驰华；范应方；彭戈；项楠；祝文；刘军；鲍苏苏 刊期： 2014年第07期
目的：研究中国人群乳腺癌患者发生真空辅助旋切系统活检（VABB）针道种植转移的几率及新辅助化疗对其产生的影响。方法将通过VABB诊断为乳腺癌的病人分为两组，一组直接进行外科开放性手术（直接手术组），一组先进行新辅助化疗后再进行外科开放性手术（新辅助化疗组）。分析两组病人发生针道种植转移的几率，以及两组病人的无病生存（DFS）和总生存（OS），并采用相应的统计学方法进行两组间的比较。结果共有214名患者入组，其中直接手术组94名，新辅助化疗组120名，中位随访时间为29.2月，两组发生针道转移的几率分别为3.2%和0.8%，两者相比无显著性差异（P=0.206，χ2检验）；DFS和OS亦无显著差异（DFS P=0.221，OS P=0.531，Log-rank检验）。结论经VABB后两组乳腺癌患者的针道种植转移率低，新辅助化疗不会导致VABB后的针道种植转移率的增加。
作者：任重阳；廖宁；张国淳；安胜利；温灵珠；钱学珂；吕海通 刊期： 2014年第07期
目的：探讨人胚胎源性人绒毛促性腺激素（HCG）在第3天胚胎培养液中的表达及其与早期胚胎发育间的关系。方法收集IVF-ET患者体外第3天单个培养胚胎培养液，通过ELISA方法检测培养液中HCG浓度，比较其与胚胎数目、分级、碎片等传统评分间的关系。结果在60个病人的163份第3天胚胎培养液标本中，胎源性HCG的检测率是93.8%（153/163），表达浓度是0.85±0.43 mIU/ml。HCG浓度与胚胎卵裂球细胞数呈正相关。随着细胞数增加，培养液中HCG表达也提高（P<0.05）。随着胚胎形态评分级别的下降，培养液中HCG表达下降（P<0.05）。结论 ELISA方法能检测出第3天胚胎培养液中胎源性HCG的微量表达。胚胎培养液中胎源性HCG水平与传统胚胎形态评估有相关性，提示它有可能作为新的评估胚胎发育的无创性方法。
作者：王海英；张仁礼；韩冬；刘彩霞；蔡佳杰；毕燕玲；闻安民；全松 刊期： 2014年第07期
目的：小鼠进行重组蛋白与树突状细胞（DC）联合免疫，观察其对系统性白假丝酵母菌免疫保护效果。方法原核表达并诱导表达白假丝酵母菌Sap2蛋白；将白假丝酵母菌孢子、菌丝混悬液致敏小鼠DC后，分5组小鼠行3次免疫接种重组蛋白及致敏DC、致敏DC、DC、Sap2、PBS，再造系统性白假丝酵母菌感染模型观察小鼠生存期、肾病理切片、肾负菌量、检测CD4+、CD8+百分率观察保护性。结果成功构建pET32a-Sap2原核表达载体，目的蛋白被诱导表达并收集纯化。重组蛋白与致敏DC、DC、Sap2蛋白均能有效延长系统性白假丝酵母菌感染小鼠生存期、保护小鼠肾脏、增强小鼠的免疫力，其中多组分联合免疫效果更佳。结论多组分联合免疫能很好地抵抗系统性白假丝酵母菌感染，这为研究新型多组分联合疫苗奠定基础。
作者：徐美兰；刘金星 刊期： 2014年第07期
目的：比较大肠杆菌K1株E44敲除ppk1基因后与野生株之间差异并探讨ppk1基因在E.coli K1株致脑膜炎机制中的作用。方法（1）将野生株与敲除株置于56℃2、4、6 min，以比较二者对热刺激的抵抗力差异；（2）利用电子显微镜直接观察以及采用经典的粘附、侵袭率定量实验比较二者对脑微血管内皮细胞（HBMEC）的粘附和侵袭能力；（3）将细菌与脑微血管内皮细胞共同孵育后，利用激光共聚焦观察二者诱导脑微血管内皮细胞的细胞骨架重排现象。结果与野生株E44相比，ppk1敲除株对于56℃热刺激的抵抗力明显下降；电子显微镜可以观察到，敲除株粘附和侵袭入HBMEC的数量均少于野生株，定量粘附、侵袭实验也进一步证实；借助激光共聚焦发现敲除株诱导HBMEC细胞骨架重排的能力要弱于野生株。结论 ppk1对于脑膜炎大肠杆菌K1株抵抗热刺激、粘附和侵袭HBMEC以及诱导HBMEC的细胞骨架重排具有重要作用。
作者：彭亮；潘嘉韵；罗苏；杨正慧；黄慕芳；曹虹 刊期： 2014年第07期
目的：探讨低相对分子质量肝素（LMWH）联合多柔比星（DXRB）对肝癌细胞迁移能力的影响及其作用机制。方法实验分为阴性对照组、LMWH组、DXRB组、LMWH与DXRB联合应用组。用MTT法检测药物对HepG2细胞增殖的影响；用细胞划痕实验和Transwell小室法检测HepG2细胞的迁移能力；Western-blot和实时RT-PCR法检测基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）的表达；ELISA法检测肿瘤细胞培养液中乙酰肝素酶的表达。结果 MTT结果显示，LMWH和DXRB对肝癌HepG2细胞均有显著的增殖抑制作用。LMWH与DXRB联合用药时，对肝癌HepG2细胞的迁移抑制作用明显高于单用DXRB组。LMWH和DXRB均可下调MMP-9、MMP-2和乙酰肝素酶的表达，且合用时对乙酰肝素酶表达的抑制作用更明显。结论 LMWH具有增强DXRB抑制肝癌HepG2细胞迁移的作用，其机制可能与下调MMP-9、MMP-2和乙酰肝素酶的表达有关。
作者：杨克红；马琳艳；程秀；陈超；张梦晓；刘浩；蒋志文 刊期： 2014年第07期
目的：对广州市慢性乙型肝炎患者不同感染阶段表面抗原（HBsAg）水平进行定量检测，并结合乙型肝炎病毒DNA（HBV-DNA）等检测结果探讨HBsAg定量在慢性乙型肝炎患者诊断和治疗监测的临床意义。方法按照美国肝病学会慢性乙型肝炎分期规则标准将其分为免疫耐受期（IT）、e抗原阳性的慢性肝炎期（EPH）、非活动性携带期（IC）、e抗原阴性的慢性乙型肝炎期（ENH）。将珠江医院就诊的慢性乙型肝炎患者96例按要求分期，对其血清样本进行HBsAg、HBV-DNA和ALT检测，并对结果进行统计分析。结果广州市慢性乙型肝炎感染过程不同阶段HBsAg均值分别为：IT（4.12 log10 U/L）、EPH（4.02 log10 U/L）、IC （2.85 log10 U/L）、ENH（3.29 log10 U/L），差异显著。IT、IC、EPH、ENH期患者HBsAg水平与HBV-DNA拷贝数的相关系数分别是0.6828、0.5759、0.3280、0.1083，相关性逐步减弱。HBeAg（+）患者HBsAg定量水平明显高于HBeAg（-）患者。各期HBsAg的量与ALT水平均无相关性。结论不同感染阶段的慢性乙型肝炎患者HBsAg定量水平存在差异，HBsAg水平与HBV-DNA的不完全一致性表明HBsAg定量可以作为新的检测指标在诊断和治疗监测中发挥作用，更多的检测手段将有助于临床慢性乙型肝炎患者的个体化分类和治疗。
作者：曾磊；丁爱娇；江凌晓；曾静；林裕龙；袁小澎 刊期： 2014年第07期
目的：构建稳定过表达mir-101的SW620细胞亚株并鉴定mir-101的靶基因。方法运用荧光定量PCR技术检测结直肠癌细胞株中mir-101的表达水平。利用GV209-mir101慢病毒感染SW620细胞，建立稳定过表达mir-101的细胞株。扩增包含mir-101结合位点的RAC13'UTR基因片段并将其亚克隆至psiCHECK-2载体，对此重组载体进行定点突变构建psiCHECK-2-Rac1-Mut；并用双萤光素酶报告实验检测RAC13'UTR相对荧光素酶活性。结果稳定过表达mir-101的细胞株中，mir-101的表达明显高于对照组。双萤光素酶报告实验证实mir-101 inhibitors可以上调3'UTR相对荧光素酶活性。稳定过表达mir-101， RAC1表达下调；而干扰mir-101之后RAC1表达上调。结论成功构建稳定过表达mir-101的SW620细胞亚株。RAC1是mir-101的靶基因。
作者：刘燕；陆滟霞；周敏；张超；李学农 刊期： 2014年第07期
目的：通过全细胞膜片钳技术研究新生SD乳鼠耳蜗核前腹核（AVCN）中丛细胞在发育过程中的电生理特性变化。方法运用全细胞膜片钳记录出生后5~21 d的SD乳鼠耳蜗核前腹核中丛细胞的动作电位（AP）反应及微小兴奋性突触后电流（mEPSC），再通过相关数据采集及分析软件分析动作电位半峰宽和mEPSC的10%~90%上升时间（10%~90%Risetime）及时间常数，并对此做进一步统计分析处理，进而比较不同年龄段新生SD乳鼠的耳蜗核前腹核中丛细胞的电生理反应特性。结果在丛细胞动作电位半峰宽的统计分析中发现，丛细胞动作电位的时间精确性随着出生后年龄的增加而增加，在听觉建立（出生后12 d）附近变化停止。丛细胞mEPSC的时间精确性也随着出生后年龄的增加而增加，在听觉建立附近变化停止。结论耳蜗核前腹核中丛细胞功能的修饰先于听觉的建立。
作者：钟圣辉；张正刚；傅鸣宇；杨娟；肖中举 刊期： 2014年第07期
目的：建立经腹部超声测量11~13+6周胎儿颅后窝结构的正常参考值范围，探讨其对开放性脊柱裂（OSB）筛查的临床价值。方法随机选取我院2013年1月~9月期间在孕11~13+6周时接受颈项透明层检查的正常组胎儿541例和OSB组胎儿3例，采用经腹超声从正中矢状切面和经前囟小脑横切面对胎儿的颅后窝结构进行观察及测量，建立11~13+6周胎儿颅后窝结构的正常参考值范围，比较两切面的测量差异并比较正常组与OSB组胎儿各参数的差异。结果两切面各测量参数值的差异无统计学意义（P>0.05）。正常组胎儿颅后窝可见两条强回声线，OSB组胎儿的颅后窝仅能看到一条明显的强回声线即脑干后缘与第四脑室顶部，第四脑室与小脑延髓池分界显示不清。正常组胎儿脑干前后径、第四脑室前后径、小脑延髓池前后径均随头臀长的增加呈线性增加。OSB组胎儿的脑干前后径均大于正常值的第95百分位数，第四脑室-小脑延髓池前后径均小于正常值的第5百分位数。OSB组脑干前后径与第四脑室-小脑延髓池前后径的比值明显大于正常组，且大于1。结论建立了11~13+6周胎儿颅后窝结构正常值范围，可能有助于对早孕期OSB的筛查。正中矢状切面或经前囟小脑横切面超声发现胎儿颅后窝第四脑室与小脑延髓池分界不清，且脑干前后径与第四脑室-小脑延髓池前后径的比值大于1，可能成为11~13+6周OSB的筛查指标。
作者：秦凤真；李胜利；华轩；欧阳玉容；郑琼；毕静茹 刊期： 2014年第07期
自从乳腺癌根治术被提出至今，以腋窝淋巴结清扫（ALND）为主的腋窝治疗就一直是乳腺癌根治性手术的重要组成部分，然而腋窝淋巴结清扫又对患者术后生活质量有较大影响。近年国内外多项研究均提示腋窝治疗并非所有乳腺癌患者所必需，对于临床早期的患者，腋窝治疗可能弊大于利；前哨淋巴结活检为指导是否施行ALND提供了很好的指导作用，但是近期的几项研究均提示，ALND并非对所有前哨淋巴结活检阳性患者预后有益。本文主要就此两个热点问题相关研究进展做一综述。
作者：杨翼鹏；嵇健；刘民锋；叶长生 刊期： 2014年第07期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
