杨旭辉；夏添；余伟华；卢晓芳；项鹏；何峰
目的 观察部分肝切除联合D-氨基半乳糖(D-GaIN)、脂多糖对肝损伤后再生修复的影响.方法 40只BALB/c雄性小鼠随机均分为2组.D-GaIN/脂多糖/肝脏部分切除组:腹腔注射D-GaIN(500 mg/kg),1h后注射脂多糖(50 μg/kg);肝脏部分切除组:生理盐水代替D-GaIN和脂多糖,同样方法注射；两组小鼠在第2次腹腔注射24 h后行肝脏1/3切除.观察两组小鼠术后肝脏体质量比值、肝再生率、肝细胞损伤、增殖与肝卵圆干细胞增生.结果 肝脏部分切除组术后第9天肝大体结构基本恢复正常,肝再生率为(22.26±105.93)％,而D-GaIN/脂多糖/肝脏部分切除组第14天肝质量较术前仍偏小,肝再生率为(9.49±32.55)％,P＜0.001.D-GaIN/脂多糖/肝脏部分切除组术后肝窦和中央静脉充血,库普弗细胞增多；肝脏部分切除组术后第7天有明显肝细胞增殖,D-GaIN/脂多糖/肝脏部分切除组肝细胞增殖甚少.D-GaIN/脂多糖/肝脏部分切除组肝脏术后第3天开始出现肝卵圆干细胞增生,从汇管区开始向肝小叶内延伸以修复损伤.结论 D-GaIN联合脂多糖可部分抑制肝部分切除后小鼠成熟肝细胞增殖,D-GaIN/脂多糖/肝部分切除可诱导肝卵圆干细胞增生.
作者：李劲；张健；刘光泽；刘犇；孔祥平 刊期： 2012年第01期
目的 探讨Slit-Robo信号对粘液表皮样癌细胞系Mc3细胞生长与增殖作用的影响及其作用机制.方法 免疫组织化学方法及流式细胞术细胞内因子检测法检测Mc3细胞Slit2及Robol蛋白的表达；在Robol受体胞外区的单克隆抗体R5作用下,以细胞计数法与软琼脂克隆形成实验观察Mc3细胞生长变化及用流式细胞术细胞内因子检测法检测增殖相关蛋白PCNA的表达.结果 Mc3细胞表达Slit2及Robol蛋白,并且在R5单克隆抗体作用下,Mc3细胞体外生长能力受到抑制,增殖能力明显减弱,PCNA蛋白表达水平下降.结论 Slit-Robo信号可能影响Mc3细胞的生长增殖能力,对肿瘤细胞内的PCNA有正调控作用,提示该信号可能参与粘液表皮样癌的发生及发展过程.
作者：韩冰；王丽京；王静；张洁；赵媛；亓翠玲 刊期： 2012年第01期
目的 探讨IL-17对博来霉素诱导肺纤维化形成中的肺成纤维细胞增殖、转化、胶原合成作用.方法 用5 mg/kg博来霉素气管内注入的方法诱导肺纤维化形成,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测IL- 17/IL- 17RmRNA在肺纤维化形成中表达的变化,选择表达IL-17RmRNA佳时间的肺成纤维细胞进行原代培养、鉴定.使用四氮唑蓝比色法检测不同浓度的IL-17对肺成纤维细胞的增殖.使用RT-PCR和Western Blotting检测肌成纤维细胞标志物α-SMA以及Ⅰ和Ⅲ型胶原的表达.结果 (1)IL-17/IL-17RmRNA在肺纤维化形成中明显升高,在第14天表达高.(2)不同浓度IL-17能够促进肺成纤维细胞的增殖,佳浓度为50 ng/ml.(3)IL-17促进肺成纤维细胞表达α-SMA增加.(4)IL-17促进肺成纤维细胞I和III型胶原合成.结论 IL-17具有促进小鼠肺纤维化形成中肺成纤维细胞增殖、转化和胶原的合成作用,可能在肺纤维化形成中起重要作用.
作者：董昭兴；康庆鑫；雷雯；钟红；邰文琳；王殿华 刊期： 2012年第01期
目的 构建来自华南不同慢性丙型肝炎(CHC)患者的HCV NS5A的复制子重组质粒并测序分析,探索HCV NS5A在抗病毒应答中生物学特性.方法 以能够高效复制的1b型HCV复制子质粒为骨架,构成带有MIuⅠ和BclⅠ双酶切位点的开关质粒,采用逆转录-聚合酶链反应从不同CHC患者血清中扩增获得HCV 1b亚型NS5A全长片段,克隆到pMD-18载体中,测序分析其中的PKRBD、ISDR、V3和IRRDR区域的变异情况.扩增产物中无MIu Ⅰ和Bcl Ⅰ酶切序列的,在引物中引入相关酶切序列后再扩增,双酶切后将NS5A区段置换入HCV 1b复制子骨架中.结果 成功扩增出NS5A全长片段并克隆测序,将NSSA区ISDR-V3区域置换入复制子中,测序结果正确.序列比对显示应答株的ISDR和PKRBD氨基酸变异数目比无应答株高；V3和IRRDR区域存在较高氨基酸突变率.结论 成功构建包含华南HCV 1b亚型NS5A核心区域的复制子插入式重组质粒,为研究HCV NS5A生物学特性、干扰素抵抗的机制以及难治性CHC患者的个体化抗病毒治疗分析奠定了基础.
作者：李京涛；周斌；周元平；曾艳丽；李威；王俊洁；张健；张浩；刘叔文 刊期： 2012年第01期
目的 评估促红细胞生成素(EPO)预处理对重症急性胰腺炎促炎抗炎失衡的干预效果及探讨其可能机制.方法 健康雄性SD大鼠随机分成3组:假手术(SO)组、重症急性胰腺炎(SAP)组和EPO预处理组,每组各30只.SAP组和EPO组建立逆行胆胰管注射3.5％牛黄胆酸钠法(1 ml/kg) SAP模型,EPO组建模前1h予静脉注射促红细胞生成素(3000 U/kg,1000 U/ml),而SO组和SAP组予静脉注射等体积生理盐水.术后第1、3、6、12、24小时取血清和胰腺标本.检测血清淀粉酶活性；ELISA法检测血清IL-18水平,放射免疫法检测血清IL-10水平.免疫荧光法检测胰腺组织核因子-kappaB转运激活情况；胰腺组织石蜡切片HE染色,进行胰腺病理学评分.结果 与SAP组相应时点比较,EPO组核因子-kappaB激活率(除12h外)显著降低(P＜0.05)；血清淀粉酶活性显著降低,3、6、12 h(P＜0.05)；血清IL-18水平显著降低,3、6、24 h(P＜0.05),血清L-I0水平无明显降低；病理总评分降低,6、12、24 h(P＜0.05).结论 EPO预处理可通过抑制核因子-kappaB激活,减少促炎细胞因子产生,而对抗炎细胞因子影响不明显,进而调控促炎-抗炎失衡状态,改善SAP病情.
作者：李接兴；罗羽宏；李震东；刘勇；刘朝祥 刊期： 2012年第01期
目的 优化处方,以期得到疗效确切,低毒的抗肝纤维化复方.方法 运用硫代乙酰胺诱导大鼠肝纤维化模型,采用均匀设计法(二因素五水平)分组实验,并设有正常组,模型组,以大鼠肝组织羟脯氨酸含量作为检测指标,经均匀设计软件3.0处理分析得佳处方；运用相同方法诱导大鼠肝纤维化模型,设正常组,模型组,秋水仙碱组,佳处方组,通过观察肝组织羟脯氨酸含量,大鼠血清HA,AL,AST,ALB含量以及肝组织纤维化变化,对于佳处方的疗效进行比较和验证实验.结果 经实验筛选的佳处方为甘草甜素70 mg/kg,苦参碱70 mg/kg;验证实验中,佳处方组抗肝纤维化作用显著(P＜0.05),与秋水仙碱组无显著性差异(P＞0.05).结论 均匀设计在处方优化中作用显著,明显减少实验次数,结果可靠；苦参碱与甘草甜素合用抗肝纤维化作用明显.
作者：黄亮；漆林艳；陈志良；李亦蕾；文志勇 刊期： 2012年第01期
目的 探讨多层CT在胰腺黏液性囊性肿瘤和浆液性囊性腺瘤诊断和鉴别诊断中的价值.方法 回顾性分析于2003年5月～2009年12月在我院经手术病理证实的黏液性囊性肿瘤患者(19例)和胰腺浆液性囊腺瘤(13例)的多层CT图像.图像分析包括肿瘤位置、形态、囊腔直径、囊壁、分隔、钙化、实性成份、胰腺萎缩、主胰管扩张、边界情况等.结果 胰腺黏液性囊性肿瘤与胰腺浆液性囊腺瘤囊腔直径大小比较有统计学意义(P=0.009)；囊腔直径大于2 cm多见于黏液性囊性肿瘤,与浆液性囊腺瘤之间差异统计学意义(P=0.01)；肿瘤实性成分多见于浆液性囊腺瘤,与粘液性囊性肿瘤比较有统计学意义(P=0.029).结论 多层CT在胰腺黏液生囊性肿瘤和浆液性囊性腺瘤诊断和鉴别诊断中具有重要的临床价值.
作者：鞠志国；鲁宏；朱晖；李清海；章士正 刊期： 2012年第01期
目的 研究携带结核杆菌热休克蛋白70(mtHSP70)、人单纯疱疹病毒一胸苷激酶(HSV-TK)双基因的重组沙门菌瘤内注射抗小鼠黑色素瘤的抑瘤效应.方法 构建重组沙门菌SL7207/PCMV-mtHSP70-IRES-TK,建立小鼠黑色素瘤动物模型,瘤内注射重组沙门菌观察其抑瘤效应、荷瘤鼠的生存期并进行安全性评估.结果 瘤内注射重组沙门菌,实验组抑瘤率显著高于对照组,延长荷瘤鼠生存期,重组菌治疗后荷瘤小鼠的生存状态良好,无腹泻,治疗期间体质量无明显改变.结论 减毒沙门菌携带的mtHSP70/HSV-TK双基因真核共表达质粒瘤内注射对B16肿瘤细胞具有显著抑制作用.
作者：曾曙光；刘启才；王素文；彭细毛；章锦才；张积仁 刊期： 2012年第01期
目的 探讨常压高浓度氧暴露对N9小胶质细胞功能的影响.方法 体外培养N9小胶质细胞,分别在900 ml/L高浓度氧中暴露2、6、12、16、24、48 h后(1)流式细胞术检测细胞存活率及凋亡率；(2)DCFH-DA荧光探针检测活性氧(ROS)含量的变化；(3)RT-PCR检测Toll样受体4(TLR4)mRNA表达变化；(4)ELISA检测N9细胞培养上清中IL-1β和TNF-α的含量；(5)免疫荧光化学染色检测TLR4蛋白的表达变化.结果 流式细胞术结果示,细胞凋亡率在高氧暴露12h后明显高于空气对照组(P＜0.05),16h达高峰(P＜0.01)；高氧暴露2h后,细胞内ROS含量明显增加,呈一定时间依赖性；TLR4 mRNA及蛋白表达水平明显高于空气对照组(P＜0.05)；高氧暴露后细胞上清中TNF-α及IL-1β含量随暴露时间延长而增加,均在6h开始升高,12～16 h达高峰(P＜0.05),IL-1β增高较TNF-α更为明显.结论 高氧暴露后N9小胶质细胞TLR4通路激活,产生大量神经毒性因子(ROS、IL-1β及TNF-α),细胞凋亡增加.
作者：蒋朴；徐颖；胡良安；刘杨；邓世雄 刊期： 2012年第01期
目的 了解1例肺栓塞患者及其家系成员发生蛋白C缺陷症的分子发病学机制.方法 收集先证者及其家系成员的枸橼酸钠抗凝血,采用发色底物法检测PC活性(PC∶A)、蛋白S活性(FPS∶ A)和抗凝血酶活性(AT:A),采用ELISA方法检测PC抗原(PC∶Ag)水平.采用PCR方法对先证者PC基因所有9个外显子及其侧翼序列进行扩增、测序,发现突变后,对先证者家系成员的PC基因有关外显子片段进行PCR扩增和测序.结果 先证者及其父亲、母亲和妹妹均为Ⅱ型PC缺陷症患者.PC基因测序结果显示先证者的PC基因分别出现了位于3号外显子第5540位碱基的G→A的杂合突变和位于第7号外显子第10230位碱基C→T的杂合突变,导致PC E29K和R147W双杂合突变.先证者父亲携带PC E29K杂合突变,而先证者母亲和妹妹均为PCR147W杂合突变的携带者.结论 先证者为PC E29K和R147W基因复合杂合突变携带者,且这两种突变分别遗传自其父母.其中,PC E29K错义点突变为目前国际上尚未见报道的新突变,而PC R147W是一种已报道的常见于遗传性易栓症患者的可导致Ⅱ型PC缺乏的错义点突变.
作者：叶絮；刘晓力；冯莹；丁秋兰；周旭红；王学锋 刊期： 2012年第01期
报道2例发生在脊柱和颅内具有幼稚性特征的透明细胞型脑脊膜瘤(CCM)患者,与经典的透明细胞型脑脊膜瘤不同的是2例患者肿瘤都有显示罕见的细胞核异型性、分裂活跃、坏死等原始化现象.肿瘤细胞对上皮膜抗原和Vimtine有免疫反应,MIB-1指数高达40％.对2例患者均实行肿瘤完整切除术.其中男性患者后3个月有局部复发和心室外侧转移.本文对脑脊膜病临床病理特点、诊断及预后进行探讨,并建议术后进行辅助放疗或化疗,并且在随访第1阶段每3～6个月复查磁共振.
作者：武彤彤；杨清绪；李智；蔡方；朱淑玲；张发仁 刊期： 2012年第01期
目的 观察安神方颗粒的抗焦虑作用,并研究其机制.方法 60只雄性Wistar大鼠随机分为6组(10只/组):正常对照组、模型组、地西泮组和安神方高、中、低剂量组.采用慢性情绪应激的方法建立焦虑大鼠模型,同时给予药物干预,以高架十字迷宫试验对其行为学进行评价.行为学观察后,麻醉处死正常对照组、模型组、地西泮组及安神方中剂量组大鼠,冰台上分离大鼠海马,冷冻离心后分离上清液,高效液相色谱法测定谷氨酸、γ-氨基丁酸(GABA)含量；用免疫组织化学法测定γ-氨基丁酸受体(GABAAR)、N-甲基-D-天冬氨酸受体1(NMDAR1)的表达.结果 与正常对照组比较,模型组大鼠进入开臂的时间百分率、次数百分率明显减少；地西泮组与安神方高、中、低剂量组大鼠进入开臂的时间百分率、次数百分率较模型组显著上升,以安神方中剂量组上升明显；模型组大鼠海马组织中谷氨酸的表达量较正常对照组显著上升,GABA的表达量明显下降；地西泮组和安神方中剂量组同模型组比较,大鼠海马组织中谷氨酸的表达量显著降低和GABA的表达量明显提高,安神方中剂量组与地西泮组比较差异不显著；模型组与正常对照组比较,GABAAR免疫阳性细胞表达减少,NMDAR1免疫阳性细胞表达表达增多；地西泮组和安神方中剂量组同模型组比较,NMDAR1的表达水平降低,GABAAR的表达水平提高,安神方中剂量组与地西泮组比较无明显差异.结论 安神方具有抗焦虑的作用,可以提高中枢GABA的含量,增强GABAAR的表达,降低谷氨酸含量,减少NMDAR1的表达.
作者：张雪；黄仕营；张燊；丁秀芳；陈宝田 刊期： 2012年第01期
目的 探讨不同压力CO2气腹对大鼠肾功能的影响,为临床上改善移植后肾功能提供依据.方法 选用SD大鼠120只,建立气腹模型,按不同CO2气腹压和不同的CO2气腹作用时间分为0.67 kPa 30 min组、0.67 kPa 60 min组、0.67 kPa 120 min组；1.33 kPa 30 min组、1.33 kPa 60 min组、1.33 kPa 120 min组；2.0 kPa 30 min组、2.0 kPa 60 min组以及2.0 kPa 120 min组,同时设立对照组,各组术后检测血尿素氮、血肌酐、尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)水平.结果 随着手术时间的延长以及气腹压力的增加,血肌酐,血尿素氮及尿NAG均逐渐升高,各组差异有统计学意义(P＜o.05).结论 随着手术时间延长及气腹压力的增加,肾功能损害逐渐加重.提示临床上实施后腹腔镜活体供肾切取术时应尽量缩短手术时间,降低气腹压力.
作者：徐战平；蒲小勇；杨浣情；郑祥光；刘久敏 刊期： 2012年第01期
目的 探讨ABCG1在高糖促进内皮细胞功能损伤中的作用.方法 不同浓度D-葡萄糖(5.6 mmol/L和30 mmol/L)干预血管内皮细胞24～72h,Real time PCR及Western blotting检测葡萄糖对血管内皮细胞ABCGl mRNA和蛋白水平的影响,液体闪烁仪分析细胞内胆固醇流出率,并测量葡萄糖干预后内皮细胞NOS活性；使用LXR内源性激活剂22(R)-hydroxycholesterol预先干预内皮细胞2h,再予不同浓度葡萄糖干预48 h,观察血管内皮细胞ABCG1表达、功能及内皮细胞NOS活性的改变.结果 高糖时间依赖性地抑制血管内皮细胞ABCGlmRNA和蛋白水平的表达,同时降低细胞内胆固醇向HDL流出,高糖也降低了内皮细胞eNOS活性.使用22(R)-hydroxycholesterol逆转高糖对ABCG1表达的抑制后,细胞内胆固醇流出率增加,高糖对内皮细胞eNOS活性的抑制也被部分逆转.结论 高糖损伤内皮细胞功能的机制可能与高糖降低内皮细胞ABCG1表达相关.
作者：薛嘉虹；牛小麟；魏瑾；董新；朱参战；党寅虎；宋安齐；黄惠梅 刊期： 2012年第01期
目的 对SDF-1进行遗传改造,将其第2位氨基酸由脯氨酸(P)突变为甘氨酸(G),且缺失其C-端α螺旋结构,以获得一种CXCR4特异性拮抗剂SDF- 1P2G54.方法 将PCR扩增的SDF-1突变体SDF-1p2g54的基因插入表达载体pET-30a(+),并转化BL21(DE3)菌株.IPTG诱导表达的重组蛋白SDF-1P2G54在变性条件下采用镍柱亲和层析纯化,并通过梯度稀释和超滤方法得以复性.利用趋化实验鉴定SDF-1P2G54对Jurkat细胞的趋化活性及对SDF-1趋化活性的抑制效应,流式细胞仪检测SDF-1P2G54诱导MOLT4细胞钙内流及细胞表面CXCR4内在化的能力.结果 SDF-1P2G54完全丧失激活CXCR4、趋化Jurkat细胞跨膜迁移和诱导MOLT4细胞钙内流的能力,却保持了与CXCR4的高亲和性,能有效抑制野生型SDF-1对Jurkat的趋化效应、诱导MOLT4细胞表面CXCR4的快速内在化.结论 SDF-1P2G54是一种新型的CXCR4特异性拮抗剂,具有开发成抑制HIV-1感染和癌细胞转移等重大疾病特效药物的潜在应用价值.
作者：杨飞华；龙北国；谭毅；龚雅；马伟峰 刊期： 2012年第01期
目的 提出一种精确有效的分割CT图像中的肝脏区域的算法.方法 在统计形状模型的基础上加入灰度模型,其中灰度模型包含了训练集中图像的统计灰度信息和测试集中病人的特异性信息.既从整体上对肝脏组织分割进行控制,又从边缘细节上加以优化.结果 对测试集中的10个数据进行测试,相较于传统方法,OE和ASD有明显的提高.结论 提出有效的灰度模型不仅提高了分割的精度,而且增强了稳定性.
作者：李春丽；张久楼；冯前进 刊期： 2012年第01期
目的 使用两种不同方法提取人血清,研究对比得出快速、廉价、安全而有效的富含生长因子的人血清提取方法,以促进其在临床上的应用.方法 分离并培养人真皮成纤维细胞.分别使用全血凝固后离心法和Anitua法提取人血清.测定各血清样本中PDGF-AB及TGF-β1的含量.分别使用含有10％胎牛血清(FBS)和10％人血清(HS)的DMEM培养基培养成纤维细胞,比较不同培养基对细胞形态、活力、增殖的影响.结果 各组细胞形态正常,增殖活力良好.B组(全血凝固后离心组)细胞的数量及活力均明显高于其他各组(P＜0.05),且该法获得的血清中生长因子含量高(P＜0.05),与生长曲线及MTT曲线所示结果一致.结论 全血凝固后离心法提取的HS内所含生长因子浓度高,对细胞生长促进作用大,提取方法简单、廉价、有效.
作者：鲁华；鲁峰；刘戈；高建华 刊期： 2012年第01期
目的 探讨补肾活血方对大鼠成纤维细胞增殖及胶原表达的影响,为其抗心肌纤维化提供实验依据.方法 通过血清药理学方法制备补肾活血方含药血清,与DMEM配成细胞培养液.提取大鼠心脏成纤维细胞(CFs)并传代培养,将3,～4代CFs分为4组:A组为10％含药血清培养液培养,B组为20％含药血清培养液培养,C组为不含药血清培养液培养,D组为对照组,为常规胎牛血清培养液培养.培养72 h后CCK-8检测CFs增殖,RT-PCR检测胶原基因表达,Western blotting检测胶原蛋白表达.结果 与C组、D组相比,A组、B组CFs增殖明显降低,B组较A组进一步降低(P＜0.05)；Ⅰ型和Ⅲ型胶原mRNA在A、B两组表达较C、D两组明显下调(P＜0.05),Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达在A、B两组明显低于C、D两组(P＜0.05).结论 补肾活血方可以抑制大鼠成纤维细胞增殖及胶原表达.
作者：马新英；杨明会；陈劲松；刘毅；潘从泽；樊金灼 刊期： 2012年第01期
目的 建立应用高效液相色谱—质谱法(LC/MS)检测泌尿系结石中三聚氰胺含量的方法.方法 应用高效液相色谱—质谱法对17例因怀疑食用三聚氰胺污染奶粉在婴幼儿形成的泌尿系结石以及4例既往保存的成人尿酸结石进行三聚氰胺含量分析.采用正离子模式的电喷雾质谱检测.三聚氰胺低检出限为0.1 mg/kg.结果 4例已知成人尿酸结石标本中均未检测到三聚氰胺,17例疑似标本中应用液相色谱—质谱联用仪分析后共4例标本中检测出三聚氰胺,含量浓度分别为0.8、0.5、1.2和64 mg/kg.结论 高效液相色谱—质谱法准确度高、稳定性好,可以有效检测泌尿系结石中三聚氰胺含量,为进一步治疗和随访提供了帮助,但含三聚氰胺奶粉对患儿的长期影响还需进一步随访研究.
作者：吴文起；王露萍；欧莉莉；梁叶萍；麦赞林；李舒珏；单炽昌；袁坚；曾国华 刊期： 2012年第01期
目的 观察汉防己甲素(Tet)对体外培养的人眼Tenon囊成纤维细胞(tenon's capsule fibroblasts,TCFS)中bax、bcl-2、转化生长因子-β2(TGF-β2)mRNA表达的影响,探讨其可能的作用机制.方法 将体外培养的第3代TCFS分别置于浓度为10-5 mol/LTet的培养液和1640培养液中培养48 h,采用实时荧光定量PCR检测细胞中bax、bcl-2和TGF-β2 mRNA的表达变化.结果 同对照组比较,Tet实验组中bax mRNA的表达量明显升高,bcl-2、TGF-β2 mRNA的表达量显著下降,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 一定浓度的汉防己甲素可以通过降低bcl-2、TGF-β2 mRNA的表达量,同时提高bax mRNA的表达量来抑制TCFS的增殖,并可诱导其凋亡,可能成为一种潜在的抗青光眼滤过瘢痕药物.
作者：李岱；孙明；李青春；杨芳；林少春；吴开力 刊期： 2012年第01期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
