陈蕾;曾位森;郑航
目的 建立基于环介导等温扩增(LAMP)技术的肠出血性大肠埃希菌(EHEC) O157:H7快速简便检测方法,并与PCR进行比较.方法 针对EHEC O157:H7保守的rfbE基因序列,设计特异性引物,建立LAMP和PCR榆测技术并优化其反应条件,比较这两种检测方法的灵敏度、特异性和对实际样品的检测结果.结果 成功建立了LAMP和PCR榆测体系,灵敏度检测结果显示,LAMP检测限低至10 cfi/ml,PCR检测限为102 cfu/ml,LAMP检测灵敏度高于PCR;对39株近源菌进行检测,结果显示,LAMP法仅7株EHEC O157:H7得到阳性结果,非EHEC O157:H7菌株均为阴性,PCR产物则出现非特异性条带,LAMP法特异性比PCR法高.对于32份猪肉样品的检测,LAMP和PCR与常规检测结果一致,3份样品检测阳性.结论 LAMP检测技术的特异性和灵敏度较PCR高,并且操作简便、检测成本低,耗时短,更有望发展成为快速准确检测EHEC O157:H7的有效手段.
作者:姜容;龙北国;曾桂芬;王丹;范宏英;吴娴波 刊期: 2012年第07期
目的 研究HBeAg阳性慢性乙型肝炎病毒(HBV)携带者的中医证型及病性与HBV DNA的关系.方法 将185例HBeAg阳性慢性HBV携带者中医证型概括为单一证型(肝气郁结,肝肾亏虚,脾肾亏虚,湿热内蕴,瘀血阻络)、复合证型和无证可辨型.病性划分为实证、虚证及虚实夹杂证.同时检测其血清HBVDNA水平,并分析其与中医证型及病性的关系.结果 无证可辨型、单一证型及复合证型之间HBV DNA无统计学差异(F=0.910,P=0.404).单一证型之内的不同证型之间HBV DNA亦无统计学差异(x2=4.672,P=0.323).不同病性之间HBV DNA无统计学差异(F=0.631,P=0.596).结论 HBV DNA不宜作为HBeAg阳性慢性HBV携带者中医证型的微观辨证指标.
作者:谢和平;杨宏志;吴伟康;关卫兵;柯千山;李永伟;戴敏;肖阁敏;李杨湄;张炯善 刊期: 2012年第07期
目的 探讨黄芩总黄酮(Total flavonoids of Scutellaria baicalensis Georgi,TFSB)对甲型流感病毒核蛋白(NP)的干预作用.方法 本实验设HeLa细胞组、pcDNA3.1(+)空载体组、pcDNA3.1(+)、NP组、TFSB组,其中pcDNA3.1(+)空载体组、pcDNA3.1(+)/NP组分别通过瞬时转染将重组质粒pcDNA3.1(+)、pcDNA3.1(+)/NP转染到HeLa细胞中;TFSB组在将重组质粒pcDNA3.1(+)、NP转染到HeLa细胞的同时使用TFSB进行药物干预.转染48 h后,采用胶体金免疫层析试纸法测维持液中NP的表达,荧光定量RT-PCR测NP基因起始核酸量.结果 胶体金免疫层析试纸法测NP表达示:pcDNA3.1(+)/NP组、TFSB组为阳性;荧光定量RT-PCR示:pcDNA3.1(+)/NP组和TFSB组NP基因起始拷贝数分别为(8.90±2.53)×106 copies/μ1、(6.15±1.49)×106 copies/μl,采用t检验进行统计学分析:差异无统计学意义(P>0.05).结论 黄芩总黄酮对甲型流感病毒NP基因和NP的表达没有影响.
作者:张清;杨斌;王农荣;段林建;何士勤;孙坚 刊期: 2012年第07期
从大量的胶囊内窥图像中人工寻找出病变图片是一件非常费时费力的事情,因此利用计算机进行胶囊内窥病变图像智能识别研究具有重要意义.在对大量胶囊内窥正常图像和肿物图像的分析基础上,本文提出在图像的各个分量上将纹理和颜色相结合提取图像特征向量,分别输入BP(back propagation,后向传播)神经网络进行训练和识别,对不同分量图像的识别结果采用投票原则确定终识别结果.实验表明该方法可以有效地区分内窥图片中的正常图片和肿物图片,有效减少了医生的判读时间,辅助临床医生快速筛查出病变图片.
作者:李凯旋;刘哲星;刘思德;何丽君;罗志冲;王华峰 刊期: 2012年第07期
目的 探讨抗人卵巢癌/抗人CD3单链双特异性抗体(BHL-1)介导的αβT细胞CDR3谱系漂移,为双特异性抗体介导的T细胞免疫应答机制提供理论基础.方法 采用免疫扫描谱型分析技术,分析6例正常献血员T细胞在人卵巢癌SKOV3细胞联合BHL-1刺激前后的TCR库多样性变化(CDR3谱型分布特征)及刺激后T细胞TCRα、β链CDR3优势利用情况,对克隆性增生T细胞的CDR3区进行序列分析.结果 刺激前6例正常献血员TCR CDR3谱型均呈高斯分布,刺激后发生CDR3谱系漂移,部分TCR Vα、Vβ家族出现优势增生,明确了BHL-1介导下单克隆增生T细胞的α、β链 CDR3序列.结论 SKOV3联合BHL-1诱导的T细胞CDR3谱系出现明显漂移,提示CDR3的选择性表达可能与BHL-1介导的特异性T细胞免疫反应有关,特异应答T细胞TCR CDR3序列的确定.将为卵巢癌的T细胞免疫治疗提供基础.
作者:罗微;温茜;周明乾;马骊 刊期: 2012年第07期
目的 探讨C-IAP2 mRNA和蛋白在肝细胞癌中的表达及其与临床预后的关系.方法 采用荧光定量PCR和免疫组化方法检测肝细胞癌组织及对应的非癌组织中C-IAP2 mRNA和蛋白的表达水平并分析肝癌组织中C-IAP2的表达和临床病理特征之间的关系.结果 肝细胞肝癌中C-IAP2 mRNA的表达是非癌组织的2.70倍(P<0.001).C-IAP2蛋白在肝癌组织阳性表达率为70.8%,显著高于非癌组织中的阳性表达率27.8%(P=0.001).C-IAP2 mRNA和蛋白在肝癌组织中的表达与术前有无癌栓、有无淋巴结转移、甲胎蛋白水平、肿瘤病理分化类型、TNM分期以及术后复发转移时间有关(P<0.05),而与患者性别、年龄、乙型肝炎表面抗原、肿瘤大小、肿瘤数目、肝硬化以及包膜完整性无关(P>0.05).结论 C-IAP2表达水平与原发性肝癌的转移、复发有关,可作为原发性肝细胞癌预后的新生物学指标.
作者:毕民平;杨定华;李湘竑;钟克波;刘延;李光辉;廖晓明;刘萧 刊期: 2012年第07期
目的 探讨CASP8在鼻咽癌中的表达及临床意义.方法 利用基因芯片比较了8组鼻咽癌组织与混合的非癌鼻咽组织之间的差异表达基因.荧光定量PCR和免疫组化鉴定CASP8基因表达结果的可靠性,并分析CASP8在鼻咽癌中的表达与临床参数之间的相关性.结果 荧光定量PCR确证CASP8 mRNA在鼻咽癌组织中表达下调(P<0.0001),与芯片结果相一致.免疫组化结果显示,与非癌鼻咽组织相比,CASP8蛋白在鼻咽癌组织中表达明显下调(P=0.02),且下凋的表达与淋巴结转移(P=0.002)及临床分期(P=0.026)呈负相关.结论 CASP8表达下调作为不利因素促进了鼻咽癌的发生发展.
作者:方唯意;张千兵;刘真;江庆萍 刊期: 2012年第07期
目的 探讨血管紧张素(1-7)[Ang-(1-7)]对胆管结扎(BDL)大鼠肝纤维化的抑制作用.方法 18只Wister雄性大鼠随机分为假手术(SHAME组)组,BDL组和Ang-(1-7)治疗组.假手术组:行开腹术再关腹,在腹腔埋注射泵,以25μg·kg-1·h-1的速度持续注射生理盐水;BDL组:开腹结扎胆总管建立肝纤维化模型,在腹腔埋注射泵,以25 μg·kg-1·h-1的速度持续注射生理盐水;Ang-(1-7)治疗组:BDL建立肝纤维化模型,同时在腹腔埋注射泵,以25 μg·kg-1·h-1的速度持续注射Ang-(1-7).4周后宰杀动物、取肝组织,行Masson胶原染色,肝纤维化评分,测定羟脯氨酸含量,免疫组织化学检测α-肌动蛋白(α-SMA)的表达.结果 与BDL组相比,Ang-(1-7)治疗组肝纤维化评分(2.33±0.52vs 5.17±0.75)、胶原面积(23.71±3.43vs 89.77±9.92)、羟脯氨酸含量(0.36±0.03 vs 0.52±0.04)、α-SMA的表达(54.11±17.55vs 191.84±31.72)均减少,有统计学意义(P<0.01).结论 Ang-(1-7)对胆总管结扎所致的肝纤维化具有抑制作用.
作者:李旭;宁佐伟;罗薇;张文雍;余常辉;孟莹 刊期: 2012年第07期
目的 研究SATB1在不同侵袭潜能的人肝癌细胞株表达状况.方法 分别用荧光定量PCR,RT-PCR,Western blotting及免疫荧光方法,检测人永生化肝细胞株HL-7702及肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721、MHCC97L、MHCC97H、HCCLM3中SATB1的表达.结果 相对于HL-7702,SATB1 mRNA在其余5种肝癌细胞株中都有较高程度的表达,其中高侵袭性HCCLM3、MHCC97H表达高,MHCC97L次之,SMMC-7721、HepG2低(P<0.001);Western blotting分析HepG2、SMMC-7721、MHCC97L、MHCC97H、HCCLM3肝癌细胞株的蛋白相对表达量分别为0.271±0.002;0.351±0.023;0.621±0.026;0.878±0.026;1.236±0.006,高侵袭性HCCLM3相当于HepG2的4.6倍(P<0.001);免疫荧光显示SATB1在5种肝癌细胞株的胞浆和胞核内均有分布,高侵袭性细胞株HCCLM3、MHCC97H表现强阳性染色.结论 SATB1在不同侵袭潜能肝癌细胞株中的表达有差异,与肝癌转移密切相关.
作者:李光辉;杨定华;李湘竑;钟克波;刘萧;毕民平;刘延;廖晓明;林梁 刊期: 2012年第07期
目的 利用TiO2的抗菌特性,开发一种能够应用于口腔的无机抗菌材料.方法 采用射频磁控溅射法在医用不锈钢表面制备TiO2xNx薄膜,用XRD、SEM、EDS等测试手段表征薄膜的结构、形貌、组成,并通过覆膜法利用口腔常见致病菌考察TiO2-xNx薄膜的抗菌性能.结果 纳米TiO22-xNx抗菌薄膜为锐钛矿相结构,氮元素质量比为0.13%,表面结构均匀致密,对变形链球菌、粘性放线菌及白色念珠菌的抗菌率分别为97.79%、49.42%和96.84%.结论 纳米TiO2-xNx抗菌薄膜对口腔常见致病菌具有较强的抗菌效果,可作为一种新型抗菌剂应用于口腔临床.
作者:李娜;曹宝成;王育华;刘斌 刊期: 2012年第07期
目的 研究慢病毒介导生存素基因特异性短发夹状RNA(shRNA)对子官内膜异位症异位内膜生长及新生血管形成的影响.方法 建立鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)子宫内膜异位症模型,随机分成单纯接种组、shRNA慢病毒组、空载慢病毒组和空白载体组,每组30只.通过Image-proplus软件测量新生血管面积与鸡胚尿囊膜面积比(VA/CAM)评价沉默survivin基因对CAM血管生成的影响,TUNEL检测异位内膜细胞凋亡,组织病理学观察异位内膜病灶生长行为.结果 shRNA慢病毒处理组种植内膜存活率低,该组VA/CAM明显低于单纯接种组、空载慢病毒组和空白载体组(P<0.001),后3组间比较无显著性差异(P>0.05).shRNA慢病毒处理组种植内膜细胞凋亡率明显高于其他3组(P<0.05),另3组间比较无显著性差异(P>005).shRNA慢病毒处理组病灶在光镜下可见腺体结构不完整,间质伴有不同程度的坏死.结论 慢病毒介导survivin基因特异性shRNA能够显著抑制人子宫内膜异位症种植CAM模型的新生血管形成,抑制子官内膜在CAM上的种植生长.
作者:彭冬先;何援利;丘立文 刊期: 2012年第07期
目的 评估将支气管内超声(EBUS)两种简易的回声特征应用于判断肺周围型病灶良恶性的可行性.方法 分析102名接受EBUS检查的肺周围型病变患者的EBUS图像,了解这两种回声特征对周围型肺癌诊断的敏感性和特异性.结果 晕环征,实性低回声是提示周围型病灶为恶性的两种同声特征.实性低回声在诊断恶性病变时敏感性较高(89.46%),特异性也较高(83%),晕环征的敏感性为69.51%,特异性为65%.只要存在任何一种回声特征,诊断恶性的敏感性可达94.6%;两种回声特征同时存在时,诊断恶性的特异性可达93%.结论 对于常规支气管镜检查未能显示的周围型病灶,我们通过EBUS的这两种回声特征可较为快速、准确的诊断周围型肺癌.
作者:黄禹;陈正贤;任红岩;何碧芳;黎秀玉 刊期: 2012年第07期
目的 初步研究依帕司他保护高糖诱导的血管内皮细胞损伤的作用.方法 体外培养脐静脉血管内皮细胞HUVEC,高糖刺激8h后利用化学发光法检测细胞培养上清中NO的含量,利用Rcal time PCR和Western blot分别检测细胞中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的mRNA和蛋白表达水平,以同浓度的甘露醇作为对照.给予依帕司他(0.1 μmol/L)预处理30 min,随后再进行高糖培养,检测NO的含量以及eNOS的mRNA和蛋白表达,同时检测依帕司他的靶向基因醛糖还原酶(AR)以及NO的上游基因NADPH氧化酶4(NOX4)的蛋白表达水平.结果 高糖培养8h之后,血管内皮细胞分泌NO下降,eNOS的mRNA和蛋白表达水平下降,与甘露醇对照组相比,具有统计学差异(P<0.05);预先给予依帕司他处理后再进行高糖培养,细胞中eNOS的mRNA和蛋白表达水平均升高,NO表达上调,与单独高糖培养组相比,具有统计学差异(P<0.05).同时,细胞中AR和NOX4的蛋白表达下降.结论 高糖可以诱导内皮细胞损伤,表现为NO的分泌水平降低.依帕司他可能是通过抑制AR和NOX4的表达而发挥对血管内皮细胞损伤的保护作用.
作者:王芳;洪权;刘皈阳 刊期: 2012年第07期
目的 观察重组人血小板生成素(rhTPO)预防应用治疗恶性肿瘤患者化疗后血小板减少的临床疗效.方法 采用随机交叉自身对照研究,24例恶性肿瘤患者随机分为A、B两组,每组12例,接受方案和剂量相同的两个周期化疗.A组:第1个周期(对照周期)不注射rhTPO,第2个周期(用药周期)化疗前3d开始注射rhTPO;B组:第1个周期(对照周期)不注射rhTPO,第2个周期(用药周期)化疗后6~24 h内注射rhTPO.结果 24例恶性肿瘤患者用药周期与对照周期血小板减少程度和持续时间差异有显著性;A、B两组用药周期与对照周期血小板减少程度和持续时间差异有统计学意义.结论 恶性肿瘤患者化疗前提前给予国产rhTPO可明显提高化疗后血小板的低值,以及缩短化疗后血小板恢复时间.
作者:李秋文;叶明;肖文华;朱建华;张淑芳 刊期: 2012年第07期
目的 探讨内囊后肢梗死后中央后回皮质下白质纤维的各向异性分数(FA)与体感诱发电位(SEP)的关系.方法 31例累及内囊后肢梗死的患者,通过放置兴趣区(ROI)的方式获得定量部分各向异性分数(FA).ROI放置区为:中央后回皮质下白质区.通过对患者行SEP及感觉功能检测并进行分级.结果 SEP分组后各组患侧中央后回皮质下白质纤维FA值显著低于健侧FA值(P<0.05),患侧SEP分.组后的各组FA值差异具有显著性(P<0.05),SEP异常程度越高,FA值越低;感觉功能程度与SEP的分级呈正相关(r=0.520,P<0.05).结论 急性内囊后肢梗死后患者患侧中央后回质下白质区FA值变化在评价患者预后方面与SEP具有相关性,一致性和互补性.
作者:王齐琦;宋志彬;周雁玲;董延江;梁海毛 刊期: 2012年第07期
目的 应用超声造影技术评价颈动脉粥样硬化斑块内血管新生,应用PET/CT技术评价颈动脉粥样硬化斑块内巨噬细胞炎症活性,整体评估颈动脉粥样硬化斑块的稳定性.方法 运用超声造影技术对17例颈动脉粥样硬化患者的21个斑块进行斑块内新生血管检测,根据斑块性质分为软斑+混合斑组(14个)和硬斑+钙化斑组(7个),比较组间斑块相对管腔的大增强强度(IMAX)及大增强密度(DMAX).同期行颈部PET/CT检查,比较组间相应位置颤动脉斑块处反映18F-FDG摄取的平均标准化摄取值(SUVmean).并对超声造影与PET/CT的检查结果进行对比分析.结果 软斑+混合斑组颈动脉粥样硬化斑块的DMAX值(4.26±3.65)明显高下硬斑+钙化斑组(1.41±1.47)(P<0.05).软斑+混合斑组颈动脉粥样硬化斑块内的IMAX值(26.83±19.61)高于硬斑+钙化斑组(24.73±29.85),软斑+混合斑组颈动脉粥样硬化PET/CT检查的SUVmean值(1.70±0.45)高于硬斑+钙化斑组(1 47±0.12),但无统计学差异.超声造影的IMAX、DMAX结果与PET的定量指标SUVmean间无关联(P>0.05).结论 超声造影可以敏感地显示斑块内新生血管的增强情况,PET/CT可以显示颈内动脉粥样硬化斑块炎症程度,两种影像技术可以从不同角度观察和评价斑块的稳定性.
作者:李娟;刘宏斌;智光;尹大一;王晶;盖泾兢;谢雷星;刘家金;张雄伟 刊期: 2012年第07期
目的 探讨携带Bcl-2基因的慢病毒对磷酰胺氮芥诱导体外培养的原代人卵巢颗粒细胞凋亡的保护作用.方法 利用分子生物学技术,成功构建携带Bcl-2基因慢病毒载体,包装成高滴度慢病毒,将重组慢病毒体外感染人卵巢原代颗粒细胞,再加入浓度30 μmol/L的磷酰胺氮芥诱导细胞凋亡.分为4组进行实验:(a)实验组:pGC-FU-Bcl-2+酰胺氮芥(PM);(b)空载对照组:pGC-FU-EGFP+ PM;(c)实验对照组:只加PM;(d)空白对照组:不加PM及病毒.采用流式细胞仪、Hoechst 33258染色检测卵巢颗粒细胞凋亡情况;利用Western blot检测Bcl-2蛋白的表达情况.结果 空白对照组(GCs),凋亡峰不明显,颗粒细胞凋亡率为(1.93±0.28)%,实验组(GCs+PM+pGC-FU-Bcl-2)出现微弱的凋亡峰,颗粒细胞凋亡率为(6.99±0.55)%,比实验对照组(GCs+PM)及空载对照组(GCs+PM+pGC-FU-EGFP)显著低,但显著高于空白对照组(P<0.05).实验组Bcl-2蛋白的表达明显增高,显著高于其余各对照组(P<0.05).结论 携带Bcl-2基因的慢病毒感染靶细胞后可以过度分泌Bcl-2蛋白,显著抑制卵巢颗粒细胞的凋亡,保护PM对颗粒细胞的理化损伤.
作者:王雪峰;何援利;付霞霏;彭冬先 刊期: 2012年第07期
目的 探讨创面坏死组织分解物对机体炎症因子的影响并分析其与内毒素的异同.方法 30只成年新西兰兔随机分成生理盐水组、坏死组织匀浆液组和内毒素组,于注射前及注射后2、6、12、24、30、36、48、60 h于兔耳朵中央动脉抽取血液标本2 ml,酶联免疫法动态观察血清标本炎症因子TNF-α、IL-1、IL-6的浓度变化,对比分析3组的差异.结果 (1)坏死组织匀浆液组腹腔注射后很快可见血清TNF-α、IL-1、IL-6含量升高,12h后达到高峰期,36h后开始出现回落.生理盐水组炎症因子浓度在观察期间无明显变化(p<0.01);(2)坏死组织匀浆液组中炎症因子的上升时间早于内毒素组(2~4 hvs 5~6 h),并且部分炎症因子在峰值期间(30 h)较内毒素组明显增高(P<0 05);(3)曲线拟合中匀浆液组中炎症因子浓度变化曲线明显有别于内毒素组.结论 创面坏死组织分解物中含有不同于甚至强于单纯内毒素毒性的能引起机体炎症反应的有害物质.
作者:樊桂成;荣新洲;王学敏;李庆辉;刘思容;周岳平;张涛 刊期: 2012年第07期
目的 观察石榴多酚对心肌缺血/再灌注损伤(I/R)大鼠的心功能的影响,并初步探讨其可能机制.方法 采用阻断大鼠左冠状动脉前降支45 min,再灌注180 min心肌缺血、再灌注损伤模型.50只雄性SD大鼠随机分为伪结扎组(Sham)、缺血/再罐注组(I/R)和石榴多酚(150、300、600 mg/kg)组.连续监测心功能变化,实验结束后检测血浆乳酸脱氢酶(LDH)磷酸肌酸激酶(CK)、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性,TTC染色法检测心肌梗死面积.结果 与伪结扎组相比,缺血/再灌后各组大鼠的心功能指标中,左室收缩压(LVSP)、左室内压大上升/下降速率(±dp/dtmax)明显降低(P<0.01),左室大舒张压(LVEDP)明显升高(P<0.01);与缺血再灌模型组相比,石榴多酚(150、300、600 mg/kg)组缺血再灌大鼠的心脏收缩和舒张功能(LVSP、LVEDP及±dp/dtmax)显著改善(P<0.05);LDH、CK和MDA含量降低(P<0.01),SOD活性增加(P<0.01),心肌梗死程度减轻(P<0.01).结论 石榴多酚对缺血/再灌注损伤大鼠的心功能有显著的保护作用,其机制可能与石榴多酚提高氧自由基清除能力、降低脂质过氧化损伤,减轻心肌梗死程度有关.
作者:董淑英;童旭辉;刘浩;高琴 刊期: 2012年第07期
目的 评价对伊马替尼耐药或不耐受的慢性粒细胞白血病(CML)患者接受尼洛替尼治疗的远期疗效和安全性.方法 26例对伊马替尼耐药或不耐受CML患者接受尼洛替尼400~800 mg/d治疗,随访观察近5年,定期监测血液学、细胞遗传学及分子生物学指标,记录用药后患者临床表现及各项生化指标,评价其疗效、不良反应.结果 26例对伊马替尼耐药或不耐受的CML患者,尼洛替尼中位治疗时间17个月,中位随访时间51个月.累计获得完全血液学缓解(CHR)16例(61.5%),获得主要细胞遗传学缓解(MCyR)13例(50.0%),获得完全细胞遗传学缓解(CCyR)9例(34.6%),获得主要分子生物学缓解(MMR)7例(26.9%).尼洛替尼治疗相关的非血液学不良反应多为1~2级,主要为胆红素升高(69 2%)和皮疹(57 7%).3~4级血液学不良反应包括血小板减少(53.8%)、中性粒细胞减少和贫血(分别为26.9%和19.2%).相比进展期患者,尼洛替尼对慢性期和缓解期的患者疗疗效更佳、血液学副作用更少.结论 尼洛替尼为对伊马替尼耐药和不耐受的CML患者提供了一个有效并安全的治疗选择,尤其对非进展期CML患者更为安全和有效.
作者:魏永强;张贤;陈伟伟;曹睿;阴常欣;冯茹;刘启发;孟凡义 刊期: 2012年第07期