学术投稿

优化的预包被式多探针荧光原位杂交技术可提高白血病细胞遗传学异常的检测效率

曹睿;宋兰林;吴福群;廖立斌;左媛;刘晓力

关键词:多探针FISH, 优化, 细胞遗传学异常
摘要:目的 探讨对预包被式多探针荧光原位杂交(FISH)技术进行优化在检测白血病细胞遗传学异常的意义.方法 141例初诊为ALL或AML/MDS的患者骨髓标本,行预优化的包被式多探针FISH流程检测(在原始流程的基础上增加了调整细胞密度、蛋白酶消化步骤),其中35例行常规流程检测,对比优化前后对白血病细胞遗传学异常的检测成功率与阳性位点检岀率.结果 对多探针FISH实验流程进行优化后,ALL的检测成功率南85.3%提高到100%,阳性位点检出率由5.1%提高到8.6%;AML/MDS的检测成功率由67.4%提高到99.8%,阳性位点检出率由3.5%提高到6.0%,差异均具有统计学意义(P<0.01).结论 通过对常规预包被式多探针FISH系统检测流程进行优化,显著提高了白血病细胞遗传学异常的检测效率,增强了该技术的临床实用性.
南方医科大学学报杂志相关文献
  • 大学生自杀态度与生活目的、生命意义感的关系

    目的 了解大学生自杀态度的现状,应用结构方程模型分析生命意义感、生活目的在大学生自杀态度形成中的作用.方法 采用自杀态度问卷、生活目的量表、生命意义感问卷对1050名大学生进行测评,并对变量间的关系进行结构方程模型分析.结果 大学生对自杀总体持否定和排斥态度.男生比女生更能客观理性地看待自杀行为,农村生源大学生比城镇生源学生对安乐死更持排斥态度.大学生自杀态度四个维度与生活目的、生命意义感总分及各因子分存在不同程度的显著相关.结构模型拟合指数良好(x2/df=1.924,GFI=0.936,AGFI=0.915,NFI=0.937,CFI=0.940,RMSEA=0.045).生命意义感和生活目的对大学生自杀态度具有直接预测作用,多因素影响假设得到结构方程模型的有力支持.结论 生活目的和生命意义感对大学生自杀态度产生重要影响,应开展有针对性的生命教育对大学生自杀态度进行引导.

    作者:谢杏利;邹兵;黄中岩 刊期: 2012年第10期

  • 支气管扩张症并发原发性纤溶亢进2例报告

    咯血是支气管扩张的常见并发症,但部分患者并发原发性纤溶亢进症非常罕见且易漏诊,按咯血常规止血治疗无效,容易延误病情致患者死亡.本文对2例支气管扩张并发原发性纤溶亢进症临床特征进行归纳分析.患者均有支气管扩张病反复间歇咯血史,此次入院皆有中等量以上咯血,经垂体加压素和云南白药等常规止血治疗疗效不佳.经实验室检查确诊原发性纤溶亢进症.予纤维蛋白原、冷沉淀输注及止血芳酸等对症治疗,维持纤维蛋白原在1.5 g/L以上,患者均好转出院.

    作者:魏丹;黄国华;苏瑾;程远雄 刊期: 2012年第10期

  • 链亲和素标记的人粒细胞巨噬细胞-集落刺激因子融合蛋白的制备

    目的 制备链亲和素(SA)标记的人粒细胞巨噬细胞-集落刺激因子(hGM-CSF)融合蛋白SA-hGM-CSF和hGM-CSF-SA,并鉴定其生物学活性.方法 构建原核表达质粒PET24a-6His-SA-L-hGM-CSF和PET24a-hGM-CSF-L-SA-6His,转化大肠杆菌Rosetta(DE3),用镍金属螯合(Ni-NTA)层析柱进行纯化,并对其进行复性.复性后蛋白用DEAE-Sepharose FF阴离子交换层析进一步纯化.MTT法检测融合蛋白对人红白血病细胞(TF-1)的增殖活性.流式细胞仪分析融合蛋白对生物素化的MB49细胞锚定修饰效率.结果 SA-hGM-CSF和hGM-CSF-SA两种融合蛋白在大肠杆菌中实现了高效表达,目标蛋白占菌体蛋白的20%以上,纯化后纯度达到96%以上.两种融合蛋白均具有双功能活性,即同时具有hGM-CSF的促进人红白血病细胞增殖的活性和SA介导的高效结合至表面生物素化的MB49细胞的功能(锚定修饰率大于99%).结论 研制的SA/hGM-CSF融合蛋白具有双重活性,可为研制hGM-CSF表面修饰的新型肿瘤细胞疫苗提供基础.

    作者:白莉;胡志明;王菲;许晓玲;夏昶;金丽琴;李金龙;高基民 刊期: 2012年第10期

  • 宫颈病变患者人乳头瘤病毒16亚型E2基因多态性检测

    目的 分析宫颈病变中人乳头瘤病毒(HPV) 16亚型E2基因的多态与宫颈病变的关系,了解E2基因变异情况及其与宫颈病变的相关性.方法 应用PCR和高分辨率熔解曲线方法针对379例HPV高危亚型阳性宫颈脱落细胞样本进行HPV16感染情况及HPV16亚型E2基因68位点和133位点多态分布情况进行检测.结果 379例HPV高危亚型阳性宫颈标本共检出78例HPV 16亚型附性,其在宫颈癌、CINⅡ~Ⅲ、CIN Ⅰ、炎症患者中的检岀率分别为44.8%、31.5%、24.1%和9.6%;HPV16 E2基因68C和133G的频率在中重度宫颈内瘤样病变和宫颈癌中明显高于轻度上皮内瘤样病变和炎症患者(P<0.05).结论 HPV16是导致宫颈恶性病变的重要致病因素;随着病理类型的进展,HPV16感染率也逐渐增加;同时基因位点改变说明HPV 16 E2基因单核苷酸变异可能使致癌能力发生改变.

    作者:邱峰;袁丽娜;黄宪章 刊期: 2012年第10期

  • 体外冲击波碎石致尿脓毒症的临床分析

    目的 提高体外冲击波碎石(ESWL)术后并发尿脓毒症的临床认识及诊疗水平.方法 对经ESWL后并发尿脓毒症的4例患者的临床资料进行回顾性分析.4例肾结石或输尿管结石患者在接受ESWL术后6~36 h内出现尿脓毒症的临床表现,尿细菌培养2例为大肠埃希菌感染,1例肺炎克雷伯杆菌,1例大肠埃希菌并恶臭假单胞菌.结果 4例患者经心电、血压及氧饱和度监测,吸氧、补液、抗炎、升压等治疗,分别在术后5~11 d(平均6.75 d)生命体征恢复平稳,3例行输尿管镜下气压弹道碎石,1例紧急行膀胱镜下DJ管置入引流肾盂液体,经保守治疗11d后结石排岀,4例病人均痊愈出院.结论 ESWL术前伴有泌尿系感染的患者更易发生尿脓毒症;临床发现尿脓毒症时需要及早诊断,积极治疗,以保守治疗为主.

    作者:齐桓;罗超;刘成山 刊期: 2012年第10期

  • 染色体核型为45,X/46,XY的Turner综合征2例报道

    本文对2例表型女性、染色体核型为45,X/46,XY的Turner综合征患者进行报道,并从发生率、发生机理、临床表现及治疗等方面进行相关文献的复习,以引起临床对此类患儿更多了解和关注.

    作者:毛晓健;刘丽 刊期: 2012年第10期

  • 蛋白激酶CK2β在食管癌中的表达及其临床意义

    目的 探讨蛋白激酶CK2β在食管癌组织中的表达及其在食管癌发生发展中的临床意义.方法 采用免疫组化方法检测含60对食管癌及其癌旁正常粘膜组织芯片中CK2β的表达水平.同时收集南方医院胸外科2012年2~4月期间手术切除的食管组织标本10例,并提取蛋白和RNA,通过Western blot和实时荧光定量PCR的方法检测其CK2β的表达变化.结果 CK2β在食管癌组织中表达为:1.79%表达阴性,1.79%表达弱阳性,10.71%表达中阳性,85.71%表达强阳性;而正常粘膜组织96.67%表达阴性,3.33%弱阳性.CK2β在肿瘤及癌旁正常组织中阳性表达的分布有显著差异(P<0.001).CK2β蛋白在食管癌中的表达水平与TNM分期显著相关(P=0.010).Western blot及荧光定量PCR同样证实了食管癌组织中的蛋白激酶CK2β的表达水平明显升高.结论 蛋白激酶CK2β的表达与食管癌的发生发展及其恶性程度显著相关.

    作者:陈勃;董忠谊;曹传辉;吴德华;黄志勇 刊期: 2012年第10期

  • 脓毒症患者血清IL-6与脑损伤的相关性分析

    目的 探讨脓毒症患者血清白细胞介素-6(IL-6)水平与中枢神经损伤的关系.方法 选择符合脓毒症诊断标准同时无中枢神经系统疾病的患者22例作为研究对象,检测血清IL-6和神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平,并根据IL-6的水平分为低中高3个浓度组,比较3个浓度组NSE水平及急性生理和慢性健康(APACHEⅡ)评分的差异,分析血清IL-6与NSE及APACHEⅡ的相关性.结果 IL-6低中高3个浓度组NSE水平具有显著性差异(P<0.001),浓度分别为(10.29±4.05)、(16.06±5.84)、(23.97±3.28) μg/L.IL-6三个浓度组的APACHEⅡ评分同样具有显著性差异(P=0.009),分值分别为14.17±4.67、16.40±4.84和24.00±6.26.相关性分析显示IL-6与NSE和APACHEⅡ评分均具有显著的正相关性,相关系数分别为r=0.788 (P<0.001)和0.733 (P<0.001).结论 脓毒症患者血清IL-6的浓度同患者危重程度和中枢神经损伤均有显著地相关性,可以作为动态监测脓毒性脑损伤的标志物.

    作者:刘占国;谭晓莹;蔡靓;杨祥锐;常平 刊期: 2012年第10期

  • MRI增强扫描在高强度聚焦超声治疗脾功能亢进症疗效评估中的价值

    目的 探讨MRI增强扫描在脾功能亢进症高强度聚焦超声(HIFU)治疗后疗效评估中的价值.方法 回顾性分析15例脾功能亢进症患者HIFU治疗前后的MRI平扫和增强图像,观察病灶HIFU治疗前后的信号变化和强化特点.结果 HIFU治疗后脾脏靶区在T1WI上无特异性,高、等、低信号区都可代表凝固性坏死;在T2WI上,凝固性坏死表现为低信号;增强扫描示靶区无强化,病灶范围较T1WI和T2WI广泛.结论 T2WI对脾亢HIFU消融脾脏后的凝固性坏死有较高的特异性;动态增强扫描可以敏感地反映HIFU消融靶区的血供情况及其强化特征.MRI是临床上HIFU治疗脾亢后随访监测病灶变化无创、有效的手段,能准确反应其组织学变化.

    作者:朱婧;朱辉;梅浙川;佘朝堃 刊期: 2012年第10期

  • 经口腔超声检测烟雾病患者颈内动脉颅外远段血流变化

    目的 探讨经口腔超声检测烟雾病患者颈内动脉颅外远段血流变化的应用价值.方法 14例经DSA证实为烟雾病患者,用经颈超声检测颈内动脉近段和颈总动脉、经口腔超声检测颈内动脉颅外远段,检测指标包括内径、收缩期峰值流速、舒张末期血流速度.结果 14例均为单侧烟雾病患者.患侧颈内动脉颅外远段内径、收缩期峰值流速、舒张末期血流速度均低于对侧,且差异有统计学意义(P<0.05).患侧颈内动脉近段与远段相比,内径、收缩期峰值流速、舒张末期血流速度均无显著差异.患侧颈总动脉内径与对侧相比差异无统计学意义,但收缩期峰值流速、舒张末期血流速度显著低于对侧,且有统计学意义(P<0.05).结论 经口腔超声能够获得颈内动脉颅外远段血流信息,有助于烟雾病的准确诊断.

    作者:王宝平;吴凤林;罗利红 刊期: 2012年第10期

  • 从肺脾肾不同组织水通道蛋白变化研究中医“水液代谢理论”的实验基础

    目的 从肺脾肾不同组织水通道蛋白变化研究中医“水液代谢理论”的实验基础.方法 通过2%腺嘌呤混悬液灌胃4周制备肾阳虚大鼠模型,并予肉苁蓉煎液进行干预6周,检测尿17羟皮质醇值含量、尿肌酐和尿渗透压,检测水通道蛋白1(AQP1)基因在肺、脾、肾的表达量的变化,及AQP1蛋白在各组织的表达情况.结果 腺嘌呤模型大鼠尿17羟皮质醇值含量较正常组降低,符合肾阳虚,同时尿肌酐和尿渗透压降低.AQP1基因在腺嘌呤模型大鼠脾、肾组织的表达下调,肉苁蓉干预组AQP1基因在肺、肾组织的表达较模型组显著上调.AQP1蛋白在腺嘌呤模型组肺脾肾各组织中表达均增加,经肉苁蓉干预的大鼠肺肾组织中AQP1蛋白表达减少.结论 肺、脾、肾均参与水液调节,AQP1是其分子基础之一,补益肾阳药物肉苁蓉有上调AQP1基因的作用,AQP1蛋白的表达还受到其他因子的调控.

    作者:张昕贤;吴锋;林日阳;张新志;刘楠楠;李颉;何立群 刊期: 2012年第10期

  • 老年患者二尖瓣反流水平与左室射血分数相关性的随访研究

    目的 研究老年患者(年龄>60岁)不同程度二尖瓣反流(MR)与随访2年后左室射血分数(LVEF)变化的相关性.方法 选取522名具有轻度或以上的慢性器质性MR老年患者,按病因分为缺血性MR(IMR)组和非缺血性MR(NIMR)组.对入选患者建立详细的医疗档案,要求患者每年到我院复查超声心动图、复诊并电话随访.随访2年后对收集完整的资料进行统计学分析.结果 (1)MR程度与LVEF均值成负相关,中、重度IMR患者LVEF均值均低于相同程度的NIMR患者(P<0.05);(2)随访2年后,在调整了年龄、性别、体质量指数、糖尿病、高血压病、房颤等多因素基础上,IMR组轻、中、重度MR患者LVEF降低程度分别为.7%(1.4~4.1),2.7%(1.3~4.0),5.2%(3.5~6.9),趋势P值=0.04; NIMR组轻度、中度、重度MR患者LVEF降低程度分别为3.2%(1.6~4.8),3.0%(1.4~4.5),1.7%(-0.5~3.9),趋势P值=0.30.结论 MR返流程度越大,LVEF均值越低,中、重度IMR患者LVEF均值低于相同程度的NIMR患者,针对重度IMR患者的分层管理将有助于改善其LVEF.

    作者:曾平;龙梅菁;周颖玲;陈勇驰;张璐;卓胜青;田相亭;杨辉剑;连环;靖林林 刊期: 2012年第10期

  • 星形胶质细胞中缝隙连接蛋白connexin 43的表达及其功能调控

    目的 研究星形胶质细胞中缝隙连接蛋白connexin 43 (Cx43)的表达及由其形成的缝隙连接通讯功能的药物调控.方法 实验分为正常对照组、全反式维甲酸组(10 μmol/L全反式维甲酸作用24 h)及油酸酰胺组(25 μmol/L油酸酰胺作用2 h).western blotting法检测各组星形胶质细胞中Cx43总蛋白的表达;细胞免疫荧光法检测各组星形胶质细胞Cx43胞膜蛋白的表达;荧光示踪法检测各组星形胶质细胞的缝隙连接通讯功能.结果 与正常对照组相比,全反式维甲酸能增强星形胶质细胞中Cx43总蛋白的表达(P<0.01),油酸酰胺则能减弱其表达(P<0.01);全反式维甲酸能增强Cx43胞膜蛋白表达,油酸酰胺能减弱其表达;全反式维甲酸能增强星形胶质细胞缝隙连接通讯功能(P<0.01),而油酸酰胺则可显著降低该功能(P<0.01).结论 药物全反式维甲酸及油酸酰胺可以对星形胶质细胞缝隙连接通讯功能进行调控,其机制可能与其影响星形胶质细胞Cx43总蛋白和胞膜蛋白的表达有关.

    作者:董淑英;童旭辉;蒋国君;谷昱琛;焦浩;李俊 刊期: 2012年第10期

  • 基于CTA影像数据的个体化颅内动脉瘤的流固耦合力学模型

    目的 建立基于CTA影像数据的个体化颅内动脉瘤的流固耦合力学模型.方法 用MIMICS软件读取1例患者颅内动脉瘤影像CTA影像DICOM数据,进行三维实体重建.应用ANSYS+CFX软件进行流固耦合模型的数值仿真.分析了模型的敏感性,并与刚性模型进行了比较.结果 建立了个体化颅内动脉瘤血流动力学流固耦合模型,直观地模拟动脉瘤壁剪切力以及瘤壁变形的变化过程,可以输岀压力、剪切力、范-米斯氏应力和壁变形程度等结果.小杨氏模量可以导致壁较大的变形,壁厚则变形程度小.与刚性模型比较,相对于壁剪切力和血流速度,压力变化不大.结论 流固耦合模型比刚性模型更接近真实情况,模拟的结果有利于进行动脉瘤发生、生长及破裂的研究.

    作者:王芙昱;许百男;孙正辉;刘磊;武琛;张小军 刊期: 2012年第10期

  • 食管支架置入失败后再植入技术探讨

    目的 通过分析食管支架置入失败的原因,探讨支架再置入的技术改良和置入效果.方法 根据支架置入失败的不同病情特点,选择更适当的食管支架类型,采用改良的置入技术,对32例次患者进行食管支架再次置入术,观察置入效果并随访.结果 本组支架再置入术成功率96.9%,有效解决了食管狭窄和食管瘘的问题;在半年随访期内,出现支架移位4例,占12.5%,出现再置入支架上缘食管瘘2例,发生率为6.3%,未见支架脱落、大出血、狭窄等情况.结论 改良的食管支架再置入技术可有效解决支架置入失败后的再置入难题,同时解决相关的食管疾病,减少食管支架置入并发症的发生.

    作者:陈群清;童健;张福伟;梁广行;吴源周;李少彬;闫玉生 刊期: 2012年第10期

  • 人工耳蜗的膜电位积分放电刺激方案及其数字信号处理

    目的 结合听觉生理刺激产生的机制,把经典的神经元漏积分放电模型运用于人工耳蜗信息处理编码,以期获得更好的听觉效果.方法 用数字信号处理器(DSP)进行算法仿真,并把结果输入到Matlab中进行分析对比.结果 在与CIS编码算法对比中,膜电位积分放电(MPIF)编码算法发放脉冲更自然,而且是伪随机的,更符合生理的结构特点.结论 MPIF方案能够有效的解决听觉信息发放序列的动态结构在听觉中枢的作用问题,使得刺激脉冲和时间编码有机的结合起来,有效的保证刺激脉冲时间的相干性和相关性.

    作者:杨一威;徐月晋;缪吉昌;周凌宏;肖中举 刊期: 2012年第10期

  • 辛醇预处理可减轻模拟缺血再灌注引起的心肌细胞水肿

    目的 探讨心肌连接蛋白43形成的半通道是否参与模拟缺血/再灌注心肌细胞容量的调节.方法 C57BL/6小鼠心脏分离的心肌细胞分为对照组、模拟缺血/再灌注组和模拟缺血/再灌注组+辛醇(半通道阻滞剂),于再灌注60 min时采用Calcein荧光染色和激光共聚焦显微镜分层扫描进行心肌细胞容量的分析;并用台盼蓝染色进行心肌细胞存活率的计算.结果 (1)应用荧光染色和激光共聚焦显微镜行细胞容量测定具有稳定性和可重复性;(2)和对照组相比,模拟缺血/再灌注诱导心肌细胞水肿明显[(126±6)%vs 100%,P<0.05].半通道阻滞剂辛醇减轻缺血/再灌注导致的细胞水肿明显减轻(113±6)%,P<0.05;(3)与对照组相比,缺血/再灌注组心肌细胞存活率明显降低[(19±2)%vs (45±3)%,P<0.01],而半通道阻滞剂辛醇明显降低了缺血/再灌注导致的心肌细胞的死亡(31±2)%,P<0.01.结论 在离体的小鼠心肌细胞中,半通道阻滞剂辛醇减轻了缺血/再灌注诱导的心肌细胞的水肿,从而减轻缺血再灌注导致的心肌细胞的死亡.

    作者:罗育坤;方军;范林;林朝贵;陈昭阳;陈良龙 刊期: 2012年第10期

  • 血管回声跟踪技术评价弥漫性毒性甲状腺肿伴甲亢患者股动脉的内皮功能

    目的 探讨血管回声跟踪技术评价弥漫性毒性甲状腺肿伴甲亢患者股动脉内皮功能及弹性的诊断价值.方法 选择弥漫性毒性甲状腺肿伴甲亢患者34例及正常对照组30例,应用血管回声跟踪技术分别检测股总动脉内-中膜厚度(IMT)、僵硬度(β),压力应变弹性系数(Ep),顺应性(AC),脉搏波传导速度(PWVβ),增大指数(AI).结果 弥漫性毒性甲状腺胂伴甲亢患者股动脉β、Ep、PWVβ显著高于正常对照组(P<0.05),AC显著低于对照组(P<0.05),两组AI比较无显著性差异(P>0.05);股总动脉弹性参数β、Ep与FT3、FT4、TT3、TT4呈正相关性;PWVβ与FT3、FT4呈正相关性.结论 血管回声跟踪技术能够早期发现弥漫性毒性甲状腺肿伴甲亢患者外周动脉内皮功能改变,在评价血管弹性功能障碍方面能够提供较为准确的量化诊断依据,但检测中仍需注意影响其测值准确性的操作因素.

    作者:魏炜;汪靖园;赵巧玲;杨锦茹 刊期: 2012年第10期

  • 真核表达BMP4成熟肽及其对iPS细胞的分化抑制作用

    目的 研究BMP4因子在诱导型干细胞(iPS细胞)培养过程中的作用和起作用的相关通路.方法 通过RT-PCR的方法从小鼠的胎盘组织中扩增BMP4成熟肽,并且在其N末端连接IgK分泌肽,此融合的片段克隆至pPYCAG载体上.重组质粒pPYCAG-IgK-BMP4转染至293T17细胞中并进行嘌呤霉素的筛选.通过细胞免疫荧光和Western blot方法鉴定出表达BMP4的阳性克隆.为进一步检测上清中BMP4的生物活性,iPS细胞培养于含BMP4因子的细胞培养上清和LIF因子中,连续培养3代,并进一步观察细胞表型、三胚层细胞的分化潜能和多潜能相关基因的表达水平.结果 Smad1被分泌至上清中的BMP4磷酸化.当培养基中含BMP4同时加入LIF因子后,可以有效抑制iPS细胞分化.在此种方法培养3代后,不仅iPS细胞的表型可以有效维持,iPS细胞中多潜能相关的基因表达水平也未受到影响,同时这些iPS细胞仍具有向三个胚层分化的能力.结论 BMP4可高效表达在真核细胞中,有效地使培养iPS细胞保持其多向分化潜能.

    作者:丁道芳;王臻;徐浩;徐乐勤;梁倩倩;赵永见;施杞;王拥军 刊期: 2012年第10期

  • HSV-2 LAT过表达vero细胞中microRNA的表达谱变化

    目的 分析过表达疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)潜伏相关转录子LAT后vero细胞microRNA表达谱的表达变化.方法 通过化学合成的方法获得LAT基因的全长序列.构建HSV-2 LAT逆转录病毒表达载体pRetroQ-AcGFP1-C1,包装获得HSV-2 LAT基因过表达的逆转录病毒.利用microRNA芯片技术,分析感染逆转录病毒HSV-2 LAT后vero细胞microRNA表达谱的变化,得到因LAT基因过表达而产生变化的microRNA.结果 通过microRNA芯片分析,逆转录病毒HSV-2 LAT感染vero细胞后,可引起hsa-miR-23a*、kshv-miR-K12-3、hsa-miR-943、hsa-miR-634、hsa-miR-1270 5种microRNA2倍以上上调;使hsa-miR-181a-2* 、hsa-miR-450b-5p、hsa-miR-31、hsa-miR-24、kshv-miR-K12-12* 5种microRNA2倍以上下调.结论 LAT基因过表达后可引起vero细胞microRNA表达谱的变化.

    作者:王颖;樊建勇;杨慧兰;陈剑云 刊期: 2012年第10期

南方医科大学学报杂志

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