丁朝霞；杨少锋；吴启富；鲁莹；陈育尧；聂晓莉；接红宇；戚晶敏；王繁盛
目的 检测nestin基因在8种鼻咽癌细胞中的表达差异,寻找高表达的细胞株.构建nestin基因的shRNA表达载体,建立nestin稳定干扰的鼻咽癌细胞株.方法 应用Real-time PCR和免疫荧光技术检测nestin在鼻咽癌细胞株中的表达水平.构建带GFP的重组靶向nestin shRNA慢病毒表达质粒,筛选阳性克隆,测序鉴定.293T细胞包装病毒,收集病毒上清,测定滴度.经Real-time PCR内源筛靶,选择佳靶点.将重组慢病毒感染5-8F细胞,Western blotting和Real-time PCR检测nestin的表达.结果 在8种鼻咽癌细胞株中,5-8F细胞中nestin表达较高.PCR和测序验证重组质粒构建成功.慢病毒感染5-8F细胞后,与阴性对照组和空白组相比,nestin的mRNA和蛋白水平明显受到抑制.结论 成功构建了干扰nestin的慢病毒重组质粒,并建立了稳定靶向干扰nestin表达的5-8F鼻咽癌细胞株.
作者：李川；马纪；张越；安靓 刊期： 2011年第04期
目的 探讨降脂药氟伐他汀抑制外源性溶血磷脂酰胆碱(LPC)致心律失常作用的机理.方法 20只雄性SD大鼠,随机分为LPC组和氟伐他汀处理组,应用Langendorff装置行离体心脏灌注.LPC 5 μmol/L灌注5 min后冲洗30 min;氟伐他汀组先灌注10 μmol/L氟伐他汀30 min,然后灌注5 μmol/LPC 5 min.细胞膜电流测定部分:采用全细胞膜片钳技术,测定LPC对大鼠心室肌细胞膜电流的影响,并观察氟伐他汀的拮抗LPC的作用.结果 LPC可引起离体心脏严重的心律失常,以短阵室速和室颤常见,氟伐他汀可基本拮抗LPC的致心律失常作用;LPC可诱发心肌细胞的巨大非选择性阳离子电流(INSC),这一作用可被氟伐他汀显著抑制;LPC诱发的INSC.亦可被小分子G蛋白Rho的抑制剂和Rho激酶抑制剂所拮抗.结论 氟伐他汀通过抑制LPC诱发的非选择性阳离子电流来拮抗LPC的致心律失常作用,LPC的致心律失常作用与小分子G蛋白Rho/Rho激酶信号途径有关.
作者：李力兵；王洪叶；马兰；高长青 刊期： 2011年第04期
目的 探讨ck2β蛋白在正常大肠粘膜、大肠腺瘤和大肠癌组织中的表达及其在大肠癌发生及转移中的作用.方法 采用免疫组化方法检测46例正常大肠粘膜组织、20例大肠腺瘤及66例大肠癌组织中ck2β蛋白的表达.用RNA干扰技术沉默大肠癌细胞中ck2β蛋白表达,Western blot实验检测干扰效果;平板克隆形成实验检测细胞增殖能力的变化;Transwell侵袭小室实验检测细胞侵袭能力的变化.结果 ck2β在正常大肠粘膜组织中不表达或弱表达,核表达阳性率为8.7%,浆表达阳性率为13.0%;在大肠腺瘤组织中中度表达,60%呈核阳性表达,40%呈浆阳性表达;而在大肠癌组织中,ck2β呈强阳性表达,核表达阳性率为75.8%,浆表达阳性率为62.1%,三者间差异有统计学意义(P＜0.05).ck2β蛋白表达与大肠癌的淋巴结转移密切相关,伴发淋巴结转移的大肠癌组织ck2β阳性表达明显高于无淋巴结转移者(P＜0.05).体外实验发现,沉默大肠癌细胞中ck2β的表达能显著抑制细胞的增殖及侵袭能力.结论 ck2β蛋白的表达与大肠癌的发生和转移密切相关.
作者：邹金金；罗何三；黄志勇；董忠谊；曾钦；吴德华 刊期： 2011年第04期
目的 在体外观察白藜芦醇抗肠道病毒71的作用效果.方法 将白藜芦醇作用于Vero细胞,CCK-8法检测其细胞毒性.以利巴韦林作为对照药物,分别在病毒感染细胞的不同阶段加入白藜芦醇,观察细胞病变(CPE),CCK-8法检测并计算病毒抑制率、半数有效浓度(IC50)及选择指数(SI),评价白藜芦醇的抗病毒效果.结果 低浓度的白藜芦醇对细胞是无毒性的,细胞半数毒性浓度(TC50)为307.6 mmol/L.白藜芦醇只在预处理细胞后具备抗病毒效果,药物半数有效浓度(IC50)为20.2 mmol/L,白藜芦醇抗EV71的选择指数(SI)为15.2.而在病毒吸附细胞后,以及白藜芦醇直接与病毒液混合,均无抗病毒作用.结论 白藜芦醇具有一定的抗肠道病毒71的作用.
作者：高璐璐；陈清；李建栋；朱文昌；郭江；俞守义 刊期： 2011年第04期
目的 观察右旋美托咪啶对老年患者全髋关节置换术后芬太尼静脉自控镇痛效果的影响.方法 ASAI～Ⅱ级择期全髋置换手术后老年患者40例,随机分为对照组和试验组,术后启动PCA时分别以0.2 μg/(kg·h)持续输注右旋美托咪啶和生理盐水至PCA结束.记录两组自觉伤口疼痛PCA启动时(0)、4、8、12、24h时VAS评分、芬太尼累积用量、Ramsay评分等;记录术后镇痛24 h期间的不良反应和异常情况及治疗措施.结果 两组术后镇痛效果良好,但试验组PCA后各时点VAS评分小于对照组(P＜0.05或0.01),而Ramsay镇静评分大于对照组(p＜0.05).试验组术后12 h和24 h芬太尼累积用量少于对照组(P＜0.05或0.01),减少21.4%.试验组PCA恶心/呕吐等不良反应发率生低于对照组(P＜0.05).结论 持续输注右旋美托咪啶联合芬太尼PCA模式用于老年患者静脉镇痛安全有效,可减少芬太尼用量,不良反应发生率降低.
作者：邬子林；周志飞；许立新；佘守章 刊期： 2011年第04期
目的 探讨自体外周血抽提单核细胞宫腔灌注联合冻融胚胎移植治疗反复着床失败的可能性.方法 采用单核细胞经HCG培养48 h后与新鲜抽提单核细胞共同宫腔灌注并联合冻融胚胎移植治疗3例反复着床失败患者,并进行文献复习.结果 3例患者进行上述治疗后均获得妊娠并顺利分娩活产儿,母婴追踪至今未见明显异常.结论 外周血单核细胞宫腔灌注联合冻融胚胎移植可试用于反复着床失败患者.
作者：陈雷宁；全松；李红；陈思梅；张为青；罗琛；宋亚丽；邢福祺 刊期： 2011年第04期
目的 观察滋阴清嗓汤对咳嗽变异性哮喘(CVA)发作期患儿血清IL-4、IL-5的影响.方法 咳嗽变异性哮喘发作期患儿30例,给予中药滋阴清嗓汤治疗2周,用酶联免疫吸附实验(ELISA法)检测治疗前后患儿外周血单个核细胞(PBMC)内IL-4、IL-5水平以及咳嗽、咽痛、喉痒等症状的变化.结果 治疗前患儿PBMC IL-.4水平为89.69±13.82 ng/l、IL-5为12.17±0.43 ng/ml,治疗后患儿PBMC IL-4水平为72.18±14.89 ng/l、IL-5为5.81±0.31 ng/ml,治疗后血清IL-4、IL-5的水平明显下降,患儿咳嗽、咽痛、喉痒等症状均有改善,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 滋阴清嗓汤治疗咳嗽变异性哮喘发作期患儿的作用机制可能与降低血清IL-4、IL-5的水平有关.
作者：张印；冯晨；曹科 刊期： 2011年第04期
目的 探讨人工髋关节置换术后假体周围感染二期翻修手术疗效和假体再植入时机.方法 回顾性分析自2006年1月～2010年1月在我院采用二期翻修术治疗人工髋关节术后感染15例(15髋).一期手术彻底清创,取出感染假体,植入自制万古霉素骨水泥占位器;3～6月后二期手术,再次清创,取出骨水泥占位器后,9例植入骨水泥型,6例植入非骨水泥型假体.术后随访9～46个月(平均25个月).结果 15例患者均未发现感染复发、假体松动和脱位等.治疗前Harris评分平均为40.3分(22～55分),一期手术后Harris评分平均为54.0分(45～65分).二期翻修后Harris评分平均为88.2分(68～94分).结论 二期翻修手术治疗人工髋关节置换术后假体周围感染,能有效控制感染,关节功能明显改善,临床效果满意.一期手术后间隔3～6月再二期手术为恰当的手术时机.
作者：邹勇根；冯宗权；邢基斯；彭智浩；罗璇 刊期： 2011年第04期
目的 研究间歇性缺氧时结肠癌SW480细胞其晚期氧化蛋白产物(AOPP)的水平和其他氧化应激指标的关系,以及与血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子β1(TGFβl)的相关性.方法 建立细胞缺氧模型,SW480细胞按缺氧条件的不同分为:间歇性缺氧组(A组)、持续性缺氧组(B组)、常氧对照组(C组).采用ELISA方法检测AOPP和VEGF,黄嘌呤羟胺法测定超氧化物岐化酶(SOD),分光光度法测定丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX),用免疫荧光染色方法及Western blok方法测定TGFβ1的表达.结果 ①与对照组C组比较,A组和B组的AOPP、MDA均升高(P均＜0.05);SOD、GSH-PX下降(P均＜0.05).A组与B组比较时两者的差异也具有统计学意义(P均＜0.05),间歇性缺氧较持续缺氧时AOPP、MDA明显升高,SOD、GAH-PX显著下降(P均＜0.05).②间歇性缺氧时AOPP水平与MDA、VEGF、TGFβ1呈正相关(P均＜0.05),与SOD为负相关关系(P均＜0.05),而与GSH-PX无明显相关性.结论 间歇性缺氧时SW480细胞的蛋白氧化损伤增强,较持续缺氧时明显,并且与氧化应激状态有关.缺氧时血管生成因子VEGF和TGFβ1均表达,以间歇性缺氧时显著,且其表达与AOPP水平密切相关.
作者：冼乐武；李涛平；韦伊尔；伍思培；马磊 刊期： 2011年第04期
目的 研究和建立以细胞为基础的结合钠离子荧光探针检测雪卡毒素的方法,为快速、敏感检测雪卡毒素提供科学的实验依据.方法 采用雪卡毒素标准品(p-CTX-1)结合乌苯苷和黎芦定处理小鼠脑神经瘤细胞(N-2A),用钠离子荧光探针(CoroNaTM Green)标记细胞,利用多功能酶标仪检测荧光强度,建立雪卡毒素浓度与荧光强度的标准曲线关系式;同时,采用CCK-8法和酶标仪检测毒素处理组细胞的存活率,建立细胞毒性实验的标准曲线关系式;分析比较两种方法的灵敏度.以两种方法分别对采集的33份深海珊瑚鱼样品进行毒素检测,对检测结果作分析比较.结果 以细胞为基础的荧光检测法检测样品中毒素的检出限为10-13g/ml,而细胞毒性试验检测法检测样品中毒素的检出限为10-12g/ml,其结果具有一定的相关性,且荧光检测法灵敏度比细胞毒性试验高;同时钠离子荧光探针检测法的实验终点比CCK-8法缩短2～4 h.结论 以细胞为基础的结合钠离子荧光探针检测法能快速、敏感地检测雪卡毒素,可作为雪卡毒素检测初筛方法推广应用.
作者：袁建辉；杨慧；唐焕文；黄薇；徐新云；刘建军；柯跃斌；程锦泉；庄志雄 刊期： 2011年第04期
目的 分析我院行心脏手术的EuroSCORE高危患者围术期应用主动脉内球囊反搏(IABP)的效果,评价中期预后的相关危险因素.方法 总结回顾我科2000年3月～2009年3月共58名EuroSCORE评分大于6分在围术期行IABP支持的患者既往资料.有29例患者于术前应用IABP支持,21例患者术中应用IABP支持,8例患者术后应用IABP支持.对于术后生存的患者进行常规随访.结果 IABP并发症发生2例(3.45%);院内死亡患者4例(6.89%),54例患者完成了1年随访,并且记录到4例患者死亡,1年生存率为86.21%.术前应用组患者有更多的急诊、不稳定性心绞痛及近期心梗;术中应用的患者更多表现为心功能NYHA3-4级及较低的左室射血分数(LVEF).术中及术后应用组在重症监护室(ICU)时间明显长于术前应用组;1年生存率在术中及术后应用组明显低于术前应用组.结论 高危心脏病患者围术期接受IABP支持是一种有效的治疗手段,术前应用IABP不会额外增加患者的死亡率及其中期风险,术中计划预防性应用IABP可以明显提高治疗效果,早期在EuroSCORE的指导下预防性应用IABP支持作为外科治疗的一部分可以提高治疗结果.
作者：张林；高长青；李伯君；姜胜利；肖苍松；任崇雷 刊期： 2011年第04期
目的 采用反相高效液相色谱法测定根皮苷原料药含量,以满足质量控制的要求.方法 采用Rp-HP LC法,色谱柱为Inertsil ODS-3柱(4.6×150mm,5 μm).流动相为乙腈-0.15%磷酸(25:75),柱温30℃,流速1.0ml/min,检测波长285nm.结果 此条件下根皮苷分离良好,在0.4950～49.50 μg·mL-1浓度范围内线性关系良好,回归方程为:Y=46.370X-0.673(r＝0.9999,n=3),平均回收率为99.40%,相对标准偏差为0.67%.结论 建立根皮素原料药含量测定的HPLC方法专属性强、灵敏度高,为根皮素质量控制提供参考依据.
作者：贺建荣；刘雪英；王庆伟；叶子晨；畅敏 刊期： 2011年第04期
目的 探讨介入治疗恶性梗阻性黄疸的新方法:经皮肝穿刺胆道射频消融内支架置入术的临床经验.方法 经临床筛选2例晚期恶性梗阻性黄疸患者,其中肝门部胆管癌1例,胰头癌1例.采用经皮肝穿刺胆道内肿瘤射频消融,然后置入相匹配的金属内支架.结果 2例患者均完成手术,血清总胆红素明显下降,其中一例CA-199降至正常,临床症状显著改善.结论 经皮肝穿刺胆道内射频消融内支架置入术率先在国内开展,是一种安全可行的新的手术方式.相对于传统的介入治疗方式,射频消融能减少操作时肿瘤的出血,进一步阻止肿瘤的局部增长,从而延长内支架的通畅期和患者的存活期,改善患者生存质量.
作者：何国林；徐小平；周陈杰；程远；潘明新；高毅；蒋泽生 刊期： 2011年第04期
目的 观察白芍总苷(TGP)对MRL/Ipr小鼠狼疮性肾炎的影响.方法 将MRL/lpr狼疮肾炎小鼠随机分为模型组和TGP组.考马斯亮蓝法检测尿蛋白含量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清IgG型抗dsDNA抗体、ANA水平,HE染色光镜下观察肾组织病理改变,称脾脏和胸腺湿重,并计算脾脏和胸腺指数.结果 ①与模型组相比,TGP组用药后15、30 d尿蛋白含量显著下降(P＜0.05),用药后30 d抗dsDNA抗体、ANA水平和脾脏质量及其指数均显著下降(P＜0.05),肾脏组织病理损害明显减轻.②TGP组用药后15、30 d与用药前相比,尿蛋白含量、抗dsDNA抗体水平、ANA水平显著下降(P＜0.05),而模型组抗dsDNA抗体水平显著上升(P＜0.05),尿蛋白含量、ANA水平无显著差异;TGP组用药后30d与用药后15d相比尿蛋白含量显著下降(P＜0.05),抗体水平无显著差异.结论 白芍总苷可以降低尿蛋白含量和血清抗dsDNA抗体、ANA水平,明显改善肾组织病理损害,对MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎具有一定疗效.
作者：丁朝霞；杨少锋；吴启富；鲁莹；陈育尧；聂晓莉；接红宇；戚晶敏；王繁盛 刊期： 2011年第04期
目的 观察多西紫杉醇加顺铂化疗(DC)同步放疗与顺铂加氟尿嘧啶(PF)化疗同步放疗中晚期食管癌的疗效和毒副反应.方法 将48例食管鳞癌患者随机分成多西紫杉醇加顺铂化疗同步放疗组(DC组)和顺铂加氟尿嘧啶化疗同步放疗组(PF组)各24例.DC组采用多西紫杉醇75mg/m2 iv d1,+顺铂25mg/m2 iv d1-3,28d为一周期,共4周期.PF组采用顺铂25 mg/m2 iv d1-3、氟尿嘧啶500 mg/m2,连用5d,28 d为1周期,共4周期.两组放疗方法相同,采用普通放疗总剂量60.Gy/30 f/6周.结果 两组近期疗效比较无统计学意义(Z=1.106,P=0.269).DC组和PF组的3年中位生存时间分别为26个月(95%CI:24.579～27.421)、23个月(95%CI:21.896～24.104),log ranktest差异无显著性(x2=3.4041,P=0.065).DC组与PF组的放射性食管炎比较有统计学意义(P＝0.049),而骨髓抑制、胃肠道反应方面比较无统计学意义.结论 多西紫杉醇加顺铂同步放化疗可用于治疗中晚期食管鳞癌且安全可靠.
作者：陈斯泽；陈雪梅；丁颖；王希成；张帆；莫凯岚 刊期： 2011年第04期
目的 比较3种不同的荧光示踪技术标记人脂肪组织来源干细胞(ASCs)的效率,以寻找脂肪组织来源干细胞佳的标记示踪方法.方法 吸脂术获取人脂肪组织,胶原酶消化法后体外贴壁法培养,获得的长梭形细胞经鉴定为脂肪组织来源干细胞.分别使用5μlDiI,10μg/ml的脱氧尿苷BrdU及50 MOI的携带绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺病毒进行标记,荧光显微镜观察不同时间点及不同代数的脂肪干细胞的标记效率及形态变化.结果 成功分离获得ASCs,经鉴定其表达间充质干细胞表面标志,并能被成功实现成脂、成骨及成软骨的诱导分化.DiI标记ASCs 48 h后,荧光显微镜下观察可见100%细胞浆呈现红色荧光,胞核未染,保持了良好的正常形态.但细胞传代后荧光衰减迅速.10μg/ml BrdU标记ASCs 48h后,90%的胞核呈绿色荧光,传代后胞核荧光逐渐衰减.携带GFP重组腺病毒转染ASCs 24 h后胞浆内即可见绿色荧光,5 d后90%以上的细胞呈现绿色荧光.反复传代后未见明显的荧光衰减.结论 DiI,BrdU及携带GFP的重组腺病毒均能有效的标记人脂肪组织来源干细胞.DiI示踪技术为细胞膜标记,BrdU为细胞核标记,两项技术均操作简单,但传代后衰减迅速,适合于短期标记示踪.携带GFP的腺病毒标记方法较为复杂,但反复传代后仍不衰减,适合于长期的标记示踪观察.
作者：李科成；常强；鲁峰 刊期： 2011年第04期
目的 探讨外周血缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)mRNA表达与结直肠癌侵袭转移的关系.方法 采用荧光RT-PCR技术检测我院2010年1月～2010年10月间40例结直肠癌患者及20例健康对照者外周血中HIF-1αmRNA表达情况.结果 40例结直肠癌患者中检测出HIF-IαmRNA表达的17例,检出率为42.5%(17/40),两组比较差异有统计学意义(P＜0.01);且HIF-1αmRNA表达与肿瘤分期密切相关(P＜0.05).结论 外周血HIF-1omRNA可作为检测结肠癌患者肿瘤细胞转移的分子标志之一.
作者：潘春球；韩述岭；余壁湘；曾灿辉 刊期： 2011年第04期
目的 探讨miR-221在结直肠癌细胞中的表达状况及特异性miR-221抑制剂对癌细胞增殖和凋亡的影响.方法 应用实时荧光定量PCR(real-time Q-PCR)检测四种人结肠癌细胞系HT-29、Lovo、SW-480、Cac02中miRNA-221表达状况,并以人脐静脉内皮细胞HUVEC作为正常对照;设计并合成miR-221、antl-miR-221(微小RNA抑制剂)寡核苷酸,以脂质体转染Cac02细胞系,以Real-timeQ-PCR再次检测转染后细胞中miR-221表达状况,并通过噻唑蓝(MTT)比色法及流式细胞仪观察细胞的增殖和凋亡状态.结果 与正常细胞相比,4种人结肠癌细胞系中miR-221表达均显著增高,差异具有统计学意义(P＜0.01);癌细胞转染antt-miR-221后,G0/G1期细胞比例明显增加,而S期细胞比例显著下降,并可见细胞凋亡的发生(P＜0.01).结论 miR-221特异性抑制剂可通过抑制细胞增殖同时诱导凋亡而抑制结直肠癌细胞生长,提示miR-221作为结直肠癌生物治疗有效靶点有进一步研究价值.
作者：王伟；孙凯；吴承堂；雷尚通；曾俊杰；伍颖君；李国新 刊期： 2011年第04期
目的 研制一个基于高性能计算机和Linux下运行的采用B/S模式的微阵列数据处理平台.方法 构建以Apache服务器为平台的WEB服务器,采用Perl语言编程,整合R语言与Bioconductor中的微阵列数据分析软件包,满足寡核苷酸微阵列和双色点样微阵列实验数据的处理和分析,用户可在网页上提交数据和设置参数,结果通过网页以图形化的方式返回.结果 该平台可处理寡核苷酸微阵列和双色点样微阵列的数据,实现了数据质量评估、预处理、注释、统计分析等功能,操作简单,分析速度快.运用本平台处理了结核杆菌不同临床分型的人类巨噬细胞寡核苷酸微阵列数据,即潜伏期、结核病、结核性脑膜炎,为识别结核杆菌的敏感基因提供了线索.利用本平台还分析不同条件下用异烟肼处理结核分支杆菌的效果,例如低氧条件和敲除katG基因的条件所获得的相关cDNA微阵列数据,发现用异烟肼处理的对数生长期调节的基因将不会在休眠期模型中被差异调节;并且在休眠期,被差异调节的基因总数将减少.结论 该平台功能资源整合较全面,克服了当前微阵列数据分析软件或工具包在操作使用方面的不足,应用界面友好,结果显示直观,为生物学家开展微阵列数据分析提供了方便.针对结核分支杆菌的案例研究验证了平台的有效性.
作者：孙显赫；郭云波；刘娜；马骊；邓亲恺 刊期： 2011年第04期
目的 观察大鼠胰岛细胞对高糖损伤是否存在记忆效应,并对其机制进行初步探讨.方法 以INS-1(大鼠胰岛瘤细胞株)细胞作为研究对象,观察INS-1细胞经历48 h持续高糖(33.3 mmol/L)刺激后,纠正高糖状态,以11.1 mmol/L糖浓度继续培养,检测细胞活力,凋亡相关基因(bax,caspase-3)的mRNA水平和活性氧(ROS)水平的变化.INS-1细胞处理组分为:对照组(11.1 mmol/L葡萄糖×7 d);高糖组(33.3 mmol/L葡萄糖×2 d);3 d记忆组(33.3 mmol/L葡萄糖×2 d+11.1mmol/L葡萄糖×3 d);5 d记忆组(33.3 mmol/L葡萄糖×2 d+11.1 mmol/L葡萄糖×5 d).Real-Time PCR检测bax,caspase-3的mRNA水平,Dihydrocthidium(DHE探针)检测ROS水平,MTT法测定细胞活力.结果 高糖组细胞活力较对照组显著降低(P＜0.001).而ROS水平,bax,Caspase-3的mRNA水平较对照组显著增高(P＜0.05).在3 d记忆组及5 d记忆组,细胞活力较对照组显著降低(P＜0.001),ROS水平,bax,Caaspase-3的mRNA水平较对照组显著增高(P＜0.05).结论 高糖对INS-1细胞的损伤存在记忆效应,主要表现为细胞活力的持续降低,促凋亡基因的持续高表达.ROS水平的持续升高可能与记忆效应产生有密切关系.
作者：魏伟平；薛耀明；高方；朱波；李晨钟 刊期： 2011年第04期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
