尹善浪；陈善成；郑阳；叶泽亮
目的建立实时定量PCR检测小鼠胸腺及脾脏T淋巴细胞中信号结合T细胞受体删除环(sjTRECs)水平的方法,推测其中的初始T细胞的数目,评价胸腺功能,从而为胸腺功能研究及胸腺研究模型的建立提供研究依据和方法.方法提取小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞基因组DNA,PCR扩增目的片段.纯化构建标准质粒的RAG2片段,构建标准重组质粒并鉴定.优化PCR体系后,实时定量PCR反应建立标准曲线,并检测不同品系(BALB/c和C57BL/6)成年小鼠胸腺及脾脏淋巴细胞siTRECs含量.结果成功构建标准质粒.确定适实时定量PCR反应条件后,在实时定量PCR中建立可信度高的标准曲线.建立的方法分析表明,这两个不同品系的sjTRECs含量统计学差异不显著.结论成功建立定量检测小鼠T淋巴细胞中sjTRECs含量从而推测其中的初始T细胞数目的方法,为胸腺功能研究及胸腺研究模型的建立提供研究依据和方法.
作者：张华华；曾耀英；何贤辉；刑飞跃 刊期： 2006年第01期
目的探讨海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸微囊在胰岛细胞冷冻保存过程中的作用.方法将分离纯化后的大鼠胰岛细胞分为微囊化组和游离组.经冷冻保存1月后在RPMI 1640中培养过夜,分别测定两组的胰岛细胞回收率、胰岛细胞直径并进行胰岛素刺激释放试验.结果微囊组胰岛细胞回收率为98.2%±1.4%,较游离组71.6%±2.9%显著提高(P＜0.05).在高糖(16.7mmol/L)刺激下,微囊组胰岛素分泌量较游离组高(22.6±1.8mU/L vs 11.7±1.5mU/L,P＜0.05).在含有茶碱的高糖溶液中,微囊组的刺激指数为游离组的3倍.结论海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸微囊可显著提高胰岛细胞冷冻保存后的回收率,并改善胰岛细胞的功能.
作者：侯军；薛武军；田小辉；庞新路；藤焱；冯新顺 刊期： 2006年第01期
目的测定9种药材中有机氯农药的残留量.方法以正已烷/丙酮(8/2)混合溶剂,在Florisil固相萃取柱上净化提取,采用毛细管气相色谱柱分离样品和电子捕获检测器进行检测.结果11种农药能较好地分离,峰面积与其浓度均具有良好线性,两个水平的加样回收率分别为79.9%～89.0%和86.3%～104.8%,相对标准偏差为1.8%～7.1%,检测限为2g/kg;广藿香和三七中有机氯农药残留超过国家标准.结论所建GC-EC'D法能满足药材中有机氯农药残留量的检测,药典应制订药材中农药残留量的标准.
作者：杨雪梅；钟怀宁；严佚琛；易容；徐江平 刊期： 2006年第01期
目的探讨脑卒中后患者焦虑与抑郁状况,为临床心理护理提供依据.方法采用Zung氏焦虑自评量表(SAS)和抑郁自评量表(SDS)对69例脑卒中患者进行问卷调查.结果和结论69例脑卒中患者中存在抑郁状态39例(占56%),焦虑状态30例(占44%),进行统计分析,脑卒中SAS、SDS的评分结果均高于国内常模.了解脑卒中患者的心理状况,开展有针对性的心理护理,有助于提高患者的生活质量.
作者：刘丽红；张文静；徐清秀 刊期： 2006年第01期
目的观察寡聚脱氧核苷酸(ODN)对THP-1细胞NF-κB核转位及细胞核内结合活性的抑制作用.方法用脂质体将寡聚脱氧核苷酸转入细胞后,以细菌脂多糖(LPS)刺激30min,分别通过免疫细胞化学、电泳迁移率分析(EMSA)和RT-PCR检测细胞NF-κB的核移位和细胞核内NF-κB结合活性.结果免疫细胞化学显示转入ODN后以LPS刺激,NF-κB表达仍位于细胞浆内,EMSA显示ODN可明显抑制细胞核内结合活性,RT-PCR显示ODN能够明显抑制NF-κB相关炎性因子TNF-αmRNA的合成.结论ODN能有效抑制THP-1细胞NF-κB的核移位和细胞核内NF-κB结合活性,从而抑制相关炎性基因的启动和转录.
作者：崔忠林；周杰 刊期： 2006年第01期
背景和目的双链RNA特异性地降解相应序列的mRNA,导致转录后水平的基因沉默.肺耐药相关蛋白的过度表达与白血病细胞多药耐药密切相关.本研究旨在探讨自行设计的LRP特异性siRNA能否发挥特异性降解LRPmR-NA、抑制蛋白质表达的作用.方法构建LRP真核表达载体pcDNA3.0/LRP.以pcDNA3.0/LRP、pEGFP-C1、二者的特异性siRNA分别组和,转染K562细胞.以RT-PCR方法和流式细胞术检测LRPmRNA和蛋白质水平的变化,以荧光显微镜检测GFP的表达的变化.结果K562细胞转染pcDNA3.0/LRP后,LRP mRNA水平明显升高,蛋白质表达由阴性转为阳性,阳性率30%;LRP特异性siRNA与pcDNA3.0/LRP共同转染K562细胞,LRP mRNA和蛋白质表达均明显降低,由阳性转为阴性;LRP特异性siRNA与pEGFP-C1共同转染K562细胞,GFP的表达与pEGFP-C1单独转染无差异;GFP特异性siRNA与pcDNA3.0共同转染K562细胞,LRP mRNA水平和蛋白质表达与pcDNA3.0/LRP单独转染无差异.结论LRP特异性siRNA在K562细胞中能够特异性地降解LRP mRNA、抑制其蛋白质表达.该研究将为利用siRNA逆转LRP引起的白血病细胞MDR奠定理论基础.
作者：李宁；钱新华；王志远 刊期： 2006年第01期
目的观察头电针对于Hoehn-Yahr分级1.5～3.0级的帕金森病患者的临床疗效.方法将30例患者随机分为治疗组15例,在接受美多巴等常规西药治疗的同时,利用头电针针刺患肢对侧顶颞前斜线(MS6)、额旁3线(MS4),顶旁1线(MS8)、顶旁2线(MS9)、枕下旁线(MS14),双侧病变针双侧,深度达到帽状腱膜;对照组15例,口服美多巴,按照病人常规剂量服药分级.利用Webster量表和UPDRS运动部分对疗效进行评分.结果治疗组和对照组患者在震颤、强直、运动障碍等方面均有明显改善(P＜0.05);Webster评分示两组之间疗效差异无显著性意义(P＞0.05),但对于运动症状的改善治疗组优于对照组(P＜0.05).结论头电治疗帕金森病疗效肯定,尤其在运动症状的改善方面优于对照组,且无副作用,为治疗帕金森病的安全有效的辅助方法.
作者：姜雪梅；黄泳；卓鹰；高彦平 刊期： 2006年第01期
目的体外分离培养狗的骨髓基质细胞(BMSCs),诱导其向成骨细胞分化,初步鉴定其成骨潜能和生物学特性.方法抽取毕格犬髂骨骨髓体外分离培养获得BMSCs,DMEM、新生牛血清培养基进行原代培养,部分传代细胞以含10mmol/L地塞米松、50μg/ml抗坏血酸和10 mmol/L β-甘油磷酸钠的矿化培养液诱导其向成骨细胞增殖分化.倒置相差显微镜进行细胞形态学和细胞生长增殖观察,Von Kossa法染色检测体外矿化结节形成,细胞碱性磷酸酶染色检测BMSCs的成骨活性.结果体外分离培养的BMSCs经条件培养基诱导后表现出明显的成骨活性,体外矿化(骨样)结节的VonKossa染色阳性;传代BMSCs碱性磷酸酶染色阳性.结论体外分离培养的BMSCs中含有骨源性前体细胞,传代细胞具有较强的成骨潜能.
作者：涂小丽；刘宏伟；李才良；任肖华 刊期： 2006年第01期
目的探讨积雪草苷对人增生性瘢痕中转化生长因子β(TGF-β)mRNA和基质金属蛋白酶及其组织抑制剂(MMPS/TIMPS)表达的影响.方法临床上收集烧伤后5～8个月经积雪草苷治疗和非积雪草苷治疗的增生性瘢痕标本各9例.采用原位杂交和免疫组织化学方法,分别检测增生性瘢痕中TGF-β1mRNA、TGF-β2mRNA、TGF-β3mRNA及MMP1、MMP2、TIMP1、TIMP2和Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达水平,并利用图象分析方法进行结果分析.结果TGF-β mRNA在增生性瘢痕中主要表达于成纤维细胞胞质,经积雪草苷治疗的增生性瘢痕中TGF-β1mRNA表达明显减少,胞质淡染,统计学上与非积雪草苷治疗组TGF-β1mRNA表达有显著性差异(P＜0.01);而TGF-β3mRNA在积雪草苷治疗的增生性瘢痕中表达增多,明显高于非积雪草苷治疗组的TGF-β3mRNA表达(P＜0.05).MMPS/TIMPS在增生性瘢痕中也表达于成纤维细胞胞质,经积雪草苷治疗的增生性瘢痕中TIMP1表达明显减少,与非积雪草苷治疗组TIMP1表达有显著性差异(P＜0.01);而MMP1、MMP2、及TIMP2在上述两组中表达无显著性差异(P＞.05).Ⅰ、Ⅲ型胶原在增生性瘢痕中表达,经积雪草苷治疗的增生性瘢痕中Ⅰ型胶原排列整齐,含量较少,与非积雪草苷治疗组有显著差异(P＜0.05);而Ⅲ型胶原在两组增生性瘢痕中表达无显著性差异(P＞0.05).结论积雪草苷通过降低TGF-β1mRNA表达和增加TGF-β3mRNA的表达,引起TIMP1表达明显减少,从而MMP1/TIMP1相对比例增加,达到促进Ⅰ型胶原降解,减轻瘢痕增生的作用.
作者：张涛；荣新洲；杨荣华；利天增；徐盈斌 刊期： 2006年第01期
目的利用RNAi技术抑制鼻咽癌细胞5-8F表皮生长因子受体(EGFR)表达,观察细胞生长变化,探讨EGFR与鼻咽癌发生发展之间的相关性.方法利用体外转录法合成EGFR特异性siRNA,将其瞬时转染5-8F,收集转染后细胞总RNA和蛋白,利用RT-PCR和Westem blot法测定EGFR表达水平的变化,并检测EGFR表达抑制后细胞生长速度和生长周期的变化.结果合成的3对siRNA中,有一对使EGFRmRNA表达下降67.5%,蛋白表达下降77%.EGFR表达抑制后5-8F生长速度减慢,并诱导细胞周期停止在G1期.结论RNAi沉默EGFR表达可抑制鼻咽癌细胞生长,并诱导癌细胞停止在G1期,RNAi可作为探索鼻咽癌发生发展机制和基因治疗的有效工具.
作者：翁德胜；吴正蓉；王爽；丁彦青 刊期： 2006年第01期
目的研究TGF-β1mRNA在皮肤创伤愈合中的表达变化规律及其在损伤时间推断中的价值.方法用实时PCR技术检测不同造创时间(生前伤15 min～2周,死后伤1～6h)小鼠皮肤切创创缘组织TGF-β1mRNA含量,并同时检测GAPDH含量对结果进行均一化.结果TGF-β1mRNA于伤后24 h显著增高(和对照组比较P＜0.01),48 h和72 h时还保持在较高水平.死后伤1 h和3 h时,TGF-β1mRNA的表达有增高的趋势,6 h则降至对照水平.结论TGF-β1mRNA在小鼠皮肤创伤后有明显的规律性表达,能作为一种代表性细胞因子参与有一定存活时间(6 h以上)的生前伤损伤时间的推断.实时PCR技术能对mRNA的表达水平进行较为精确的检测,是目前损伤时间推断研究中用于细胞因子定性和定量研究的有效方法.
作者：李学锋；王慧君；罗红 刊期： 2006年第01期
目的比较口服水杨酸柳氮磺胺嘧啶(SASP)与合用珍珠粉、黄连素混合液(以下简称珍黄液)保留灌肠治疗活动期溃疡性结肠炎(AUC)的疗效.方法64例AUC患者,按确诊先后随机分为治疗组33例,口服SASP,每次2 g,3次/d,珍黄灌肠液保留灌肠,1次/d.对照组31例,口服SASP,每次2 g,3次/d,疗程4周.第5周复查肠镜并根据临床症状、肠镜表现、病理活检综合评价疗效.结果总有效率:治疗组93.5%,对照组48.1%(P＜0.01).结论珍黄液保留灌肠,能明显提高AUC的治疗疗效.
作者：吴一平；袁瑜；吴礼浩；蔡洁毅 刊期： 2006年第01期
目的探讨CD25+细胞在鼻咽癌组织中的表达情况及EB病毒感染对CD25表达的影响.方法用免疫组织化学方法检测CD25+细胞在鼻咽癌组织和鼻咽慢性炎症组织中的表达情况,并用组织原位杂交技术检测EB病毒对其表达的影响.对照组选取鼻咽慢性炎症组织.结果CD25+淋巴细胞在鼻咽癌组织中比在鼻咽慢性炎症组织中的表达明显升高,差异具有显著性意义(P＜0.001),且在未分化癌中表达高于角化型癌和非角化型癌(P＜0.05).原位杂交显示EB病毒与CD25+淋巴细胞高表达有关.结论CD25+淋巴细胞在鼻咽癌组织中表达高于慢性炎症组织,EB病毒感染与CD25+淋巴细胞表达间存在相关性.
作者：刘巍；韩慧霞 刊期： 2006年第01期
目的探讨跨窦血肿与静脉窦损伤的关系及手术方法.方法通过对36例跨窦血肿回顾性总结,观察跨窦血肿合并静脉窦损伤的发生率及手术处理原则,并结合文献进行讨论.结果36例跨窦血肿中有29例合并各种静脉窦损伤,其发生率为80.56%,并且适当的手术处理可以取得较好疗效.结论颅内跨窦血肿大多数合并静脉窦损伤,术前要充分估计手术风险,以便从容应对各种静脉窦损伤,提高手术成功率.
作者：尹善浪；陈善成；郑阳；叶泽亮 刊期： 2006年第01期
目的建立热射病合并内毒素血症大鼠的动物模型,为进一步探讨重度热射病的发病机制奠定基础.方法雄性SPF级Wistar大鼠随机分为:常温生理盐水组(C组)、高温生理盐水组(H组)、常温细菌脂多糖组(L组)、高温细菌脂多糖组(HL组).持续监测动物肛温、心率、平均动脉压、呼吸频率的动态变化,观察致伤0、40、80、120min的外周血白细胞计数、肺病理改变.结果(1)HL组动物肛温上升到(43.04±0.11)℃,心率加快到(660±42)次/min,呼吸频率加快到(150±11)次/min,平均动脉压下降到(49.0±3.5)mmHg;其中动物肛温、心率、呼吸频率、平均动脉压与L组之间存在显著性差异,心率、平均动脉压与H组之间存在显著性差异;(2)L组、HL组白细胞计数显著下降而H组白细胞计数显著上升,L组、HL组白细胞计数与H组之间存在显著性差异;(3)HL组动物肺组织出现急性微血管损伤改变.结论本研究较好地模拟了临床热射病合并感染发展为重度热射病的过程,是重度热射病多器官损伤肺启动机制研究较好的模型.
作者：林晓静；邹飞；李亚洁；王斌；贺文静；赵志荣；朱顺芳 刊期： 2006年第01期
目的探讨骨髓干细胞移植对假肥大型肌营养不良症(DMD)模型鼠-mdx鼠膈肌的治疗效果.方法取雄性SD大鼠骨髓干细胞经尾静脉植入放疗处理后的8周龄雌性mdx鼠(n=18),于移植后4、8、12周各取6只mdx鼠的膈肌行HE染色、抗肌萎缩蛋白(dystrophin)免疫荧光检测以及dystrophin mRNA的RT-PCR分析,同时用正常C57鼠及放疗而未移植的mdx鼠作为对照,另进行PCR反应检测实验鼠膈肌内Sry(Y染色体的性别决定区)基因.结果移植后mdx鼠膈肌间质内炎性细胞浸润较放疗而未移植mdx鼠有所减少;移植后核中心移位纤维比例[移植后4、8、12周分别为(15.58±0.91)%、(12.50±1.87)%、(10.17%±1.17)%]较未移植mdx鼠(19.5±1.87)%显著减少.移植后dystrophin免疫荧光阳性细胞比例[移植后4、8、12周分别为(1.00±0.32)%、(6.00±1.05)%、(11.92±1.11%)]较未移植mdx鼠(0.17±0.41)%显著增加.RT-PCR结果显示C57鼠膈肌的dystrophinmRNA相对含量(0.63±0.04)高;而未移植mdx鼠的膈肌中未检测到dystrophinmRNA;移植后的mdx鼠膈肌中mRNA的表达水平(移植后4、8、12周分别为0.19±0.05、0.26±0.06、0.36±0.04)随时间推移逐渐增高;移植后各时间点mdx鼠膈肌Sry基因均为阳性.结论骨髓干细胞系统移植mdx鼠可以恢复部分膈肌的dystrophin表达,改善膈肌的病理,骨髓干细胞移植有希望成为全身治疗DMD的有效方法.
作者：张雅妮；张成；于美娟；王淑辉；李美山；黄慧；熊符；冯善伟；柳太云；卢锡林 刊期： 2006年第01期
目的采用LuxS缺失突变株模型对B型链球菌中数量感应相关分子LuxS的功能及与其相关的自诱导因子-2数量感应通路进行研究,以探索其毒力调控机制.方法采用RT-PCR法、菌落印迹分析、生长曲线测定、cAMP因子测定等方法对该缺失突变菌株的表型特性进行了研究.后应用哈氏弧菌作为报告菌株,通过生物发光测定法分析了突变株对B型链球菌诱导报告菌株中的生物发光活性的影响.结果发现此缺失突变可导致B型链球菌中scpB基因表达的上调;与野生株相比,突变株的生物发光诱导活性比野生株降低了大约两倍.结论本研究结果证实了LuxS在GBS中AI-2数量感应通路中的重要性,并为GBS中毒力调控机制的进一步研究提供了新的线索.
作者：欧阳谦；马文丽；刘翠华；石嵘；郑文岭 刊期： 2006年第01期
本文介绍一种基于Hermite微分算子用于MR图像分割的水平集方法.该方法采用Hermite微分算子来代替传统一阶差分算子,即在水平集曲线演化时函数微分用像素点的二阶邻域差值求得,而不是传统方法由一阶邻域决定.实验结果表明,对于相同的分割过程,运用了Hermite微分算子的水平集方法,其分割结果更加精确.尤其是对于由噪声等因素所引起的退化图像,其分割效果明显优于传统方法,而运算速度与传统方法相差无几.
作者：杨丰；金大年；陈武凡；罗敏 刊期： 2006年第01期
目的观察新型合成三肽[Arg(NO3)-Lys(OCH3)-Arg(NO3)]对巨噬细胞株(RAW264.7)左旋-精氨酸/一氧化氮(L-Arg/NO)途径的影响.方法培养的巨噬细胞(培养液中含L-Arg 0.5 mmol/L)加入脂多糖(LPS,1μg/L)随机分为3组(每组n=6),分别加入双蒸水、三肽(1×10-4mol/L)、NG甲基-L-精氨酸(L-NMMA,1×10 -4 mol/L),对照组只含L-Arg(n=6),作用24 h后,检测亚硝酸盐(NO2-)、3H-L-Arg转运量;培养的巨噬细胞[培养液中含L-Arg(0～2 mmol/L)]加入LPS(1μ/L)24 h后,检测NO2-;培养的巨噬细胞(培养液中含L-Arg 0.5mmol/L)加入LPS(1μg/L)后分别加三肽[(0～10)×10-4mol/L]24 h后,检测NO2-、3H-L-Arg转运量.结果LPS刺激细胞产生NO的量和L-Arg率转运分别为非刺激组的50倍和2.7倍,三肽(1×10-4mol/L)即可明显降低NO的生成及抑制L-Arg的转运(分别降低71%、67%),较L-NMMA(1×10.mol/L)作用要强(P＜0.05);NO的生成依赖于细胞外L-Arg,并成浓度依赖性,其米氏常数(Km):(0.162±0.015)mmol/L、大转运速率(Vmax):(91.2±2.3)μmol/(24 h·106cells);三肽成浓度依赖性的降低细胞L-Arg转运和NO的生成,半数有效抑制剂量(EC50)分别为0.21×10-4mol/L、1.27×10-4mol/L.结论LPS作用于巨噬细胞引起L-Arg转运增加;三肽通过抑制细胞L-Arg转运及与L-Arg竞争性结合一氧化氮合酶作用位点,影响NO的生成.
作者：王辉清；吴赛珠；阮云军；程宇宁；孙飞；容志毅；银孟卓 刊期： 2006年第01期
目的报道动脉化静脉皮瓣在修复手部软组织缺损中的临床应用.方法选取前臂远端及足背、趾蹼处静脉皮瓣用于修复手指及手背皮肤软组织缺损52例.结果其中50例皮瓣存活.其余2例皮瓣周缘皮肤0.5 cm宽坏死,约3周脱痂后,创面愈合.结论用动脉化静脉皮瓣修复手指及手背软组织缺损是一种比较适宜的术式选择.
作者：谢广中；李敬矿；陆晓强；王光耀；黄潮桐 刊期： 2006年第01期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
