尹春艳;周敬珍;吕小燕;黄小鹏;何桂华;陈建飞
目的 探索白细胞介素-1β(IL-1β)激活后的许旺细胞与人发角蛋白复合培养构建人工神经桥接体,修复神经缺损.方法 体外培养纯化的许旺细胞经IL-1β激活前、后与细胞外基质凝胶修饰的人发角蛋白进行三维方向的共培养而构建成人工神经桥接体,移植入SD大鼠坐骨神经缺损处.S-100蛋白免疫组化染色鉴定许旺细胞,倒置显微镜和扫描电镜下观察许旺细胞与人发角蛋白共培养情况,原位杂交法观察人发角蛋白降解及神经生长因子(NGF)在坐骨神经内的表达,移植术4周后检测坐骨神经功能指数.结果 经IL-1β激活后的许旺细胞能更好地黏附于人发角蛋白表面,进行分裂、增殖.3~4周,桥接体内的人发角蛋白开始降解,其周围可见IL-1β激活后的处于增殖分裂期的许旺细胞NGF表达强阳性,坐骨神经功能恢复时间提前.结论 经IL-1β激活后的许旺细胞与细胞外基质凝胶修饰的人发角蛋白复合培养构建成人工神经桥接体,具有修复神经缺损的同时还能够加速坐骨神经损伤后功能的恢复.
作者:杨俊;邱小忠;余磊;朴英杰;秦建强 刊期: 2006年第11期
目的 利用细菌内同源重组法构建带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标签的γ-干扰素诱导蛋白10(IP-10)重组腺病毒载体并制备重组腺病毒.方法 将IP-10编码序列克隆入带有EGFP示踪的腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV中,形成转移载体pAdTrack-CMV/IP-10,将其在大肠杆菌BJ5183内与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1同源重组,得到重组腺病毒载体pAd/IP-10;酶切鉴定正确后转染HEK293细胞.收集病毒上清,PCR鉴定正确后,扩增并再次感染HEK293细胞检测病毒感染能力.结果 重组质粒经酶切、PCR和测序鉴定正确无误,并在HEK293细胞中包装成有感染活性的病毒颗粒.结论 成功地构建了表达IP-10蛋白的重组腺病毒载体并制备了重组腺病毒Ad/IP-10,为研究IP-10的蛋白功能提供了一个重要工具.
作者:邵紫韫;刘志锋;彭毅;徐佳;邓鹏;姜勇 刊期: 2006年第11期
目的 检测正常豚鼠及庆大霉素致耳聋豚鼠在清醒和麻醉两种状态下的听性脑干反应(ABR),比较两种状态下ABR波形、反应阈及潜伏期等的差别.方法 杂色豚鼠40只(正常组和庆大霉素致耳聋组各20只)分别在麻醉前后记录ABR各数据,用配对t检验进行统计学分析.结果 正常豚鼠在清醒和麻醉状态下ABR波形,反应阈,Ⅰ、Ⅲ波峰潜伏期,Ⅰ-Ⅲ波峰间期无显著差异(P>0.05);庆大霉素致耳聋豚鼠在清醒和麻醉状态下ABR各参数亦无显著差异(P>0.05).结论 豚鼠(正常或耳聋)在清醒或麻醉状态下测试ABR无显著差异,因此为保证实验成功和减少误差可采用非麻醉方法.
作者:陈浩;李永贺;钱宇虹;郭梦和 刊期: 2006年第11期
目的 自新生大鼠心脏中分离得到心肌干细胞,体外培养并观察其向心肌细胞分化的能力.方法 无菌操作取下新生鼠心脏,经反复消化后,弃去消化液,所得残余组织块进行培养,视生长情况进行传代.传代细胞采用诱导分化培养液进行培养,细胞生长至镜下可见搏动细胞时,分别对原代细胞和传代细胞进行流式细胞鉴定及免疫组化染色.结果 从消化后残留心肌组织块中成功培养出原代细胞,经流式细胞仪鉴定其表型为c-kit、CD31阳性,CD34、CD45阴性,心肌钙蛋白T(CTnT)阴性.细胞经传代培养两周后,单个细胞开始出现搏动,亦可见成团细胞的同步收缩.再次流式鉴定,表型有所改变,主要是CD31转阴性,CTnT阳性,而c-kit、CD34、CD45无明显变化.免疫组化再次证实,原代细胞并不表达心肌细胞结构蛋白CTnT,而在部分传代细胞内可见CTnT表达.结论 成功自心脏中分离得到一类表型为c-kit+CD31+CD34-CD45-CTnT-的细胞,经使用不同成分培养液传代培养,可分化为可搏动的心肌细胞,并表达心肌结构蛋白.
作者:陆东风;吴昊;黄璟;李妍 刊期: 2006年第11期
目的 研究食管鳞癌组织中RhoC和OPN蛋白的表达及其与食管鳞癌生物学行为之间的关系.方法 采用免疫组织化学方法(二步法)检测80例食管鳞癌组织中RhoC和OPN蛋白的表达情况,探讨它们与食管鳞癌肿瘤大小、组织分化程度、TNM分期、淋巴结转移和预后的关系.结果 (1)RhoC蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达率为66.25%,其表达与淋巴结转移有关(rs=-2.115,P<0.05),而与肿瘤大小、组织分化程度和TNM分期无关(P>0.05);RhoC蛋白阳性表达组患者的术后生存时间较阴性表达组短,(P<0.001);(2)OPN蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达率为100%,OPN蛋白的表达水平与组织分化程度(χ2=10.766,P<0.05)及淋巴结转移有关(rs=-2.289,P<0.05),而与肿瘤大小和TNM分期无关(P>0.05);OPN蛋白的表达水平越高,患者术后生存时间越短(P<0.05);(3)RhoC蛋白和OPN蛋白在食管鳞癌组织中的表达之间存在正相关性(rs=0.408,P<0.001).结论 食管鳞癌组织RhoC和OPN蛋白的表达与淋巴结转移情况及患者的预后有密切关系,RhoC蛋白和OPN蛋白可作为食管鳞癌预后评价的参考指标.
作者:张惠忠;刘金耿;魏益平;吴澄;曹永科;王梅 刊期: 2006年第11期
目的 探讨悬雍垂腭咽成型术的麻醉方法及麻醉并发症的防治.方法 回顾性分析我院2000年10月~2005年10月786例全麻下行悬雍垂腭咽成型术的麻醉情况.结果 6例因术前存在严重上呼吸道梗阻行预防性气管切开后实施麻醉;5例麻醉清醒拔除气管导管后仍出现呼吸道梗阻;2例手术后2~3 h口咽腔水肿导致上呼吸道不完全梗阻行紧急气管切开.以上麻醉并发症均得到及时有效处理,无一例产生不良后果.结论 悬雍垂腭咽成型术麻醉诱导应充分估计呼吸道梗阻及气管插管的难易程度,麻醉复苏应待患者完全清醒后方可拔除气管导管,且应常规准备正压通气和气管插管设备.
作者:李申一;雷毅;徐世元;王晓军;赵涛;赵华;彭铖;李杉 刊期: 2006年第11期
目的 建立扩增片段<130bp,包括CSF1PO、TH01和TPOX及性染色体amelogenin基因座的miniCTTA扩增系统.方法 采用不同荧光染料标记引物,通过PCR扩增,利用ABI3100遗传分析仪进行片段长度分析,对100份无关个体血样,10个家系样本以及30份高度降解检材进行检测.结果 miniCTTA系统DNA分型结果与AmpFLSTR(R)Identifiler(R)试剂盒完全一致.结论 miniCTTA系统可以应用于个人识别和亲权鉴定,为降解DNA样本分型提供了新的方法.
作者:刘超;王会品;孙宏钰;王慧君 刊期: 2006年第11期
目的 克隆和表达人的神经元特异性烯醇化酶(HuNSE)基因,制备HuNSE多克隆抗体,以期用于朊病毒病及相关疾病的临床诊断.方法 经RT-PCR扩增HuNSE基因和测序验证后,将其克隆于原核表达载体pQE30,在大肠杆菌M15中诱导表达HuNSE蛋白,蛋白经Ni-NTA亲和纯化后,免疫兔子,所制备的抗血清用ELISA、Western blotting和免疫组化鉴定.结果 所表达的HuNSE蛋白相对分子质量约为22000,以其为抗原制备的HuNSE特异性抗血清具有良好的免疫反应性.Western blotting和免疫组化结果显示抗血清可识别重组和不同哺乳动物脑组织中的NSE蛋白.结论 NSE基因在大肠杆菌中获得了高效表达,所制备的NSE特异性抗血清可用于朊病毒病及其他神经退行性疾病的诊断和研究.
作者:肖新莉;韩俊;张琳;陈岚;张瑾;陈新林;周伟;姜惠英;张宝云;刘勇;董小平 刊期: 2006年第11期
目的 克隆mTLR-2基因氨基端序列,并表达和纯化N端融合蛋白,制备抗mTLR-2 N末端的多克隆抗体.方法 采用PCR技术扩增编码mTLR-2N端1~153氨基酸的基因,并将其克隆到pET32A载体中,测序验证;用大肠杆菌表达融合蛋白,并以Probond树脂柱纯化;免疫家兔制备多克隆抗体,采用免疫组化、流式细胞术及间接ELISA检测抗体特异性及效价.结果 成功构建了融合表达载体pET-N,表达和纯化了相应的融合蛋白,所制备多克隆抗体可与pGEX-N表达的融合蛋白反应,并可结合表达TLR-2的RAW264.7及转染mTLR-2全长基因的CHO细胞.结论 获得了mTLR-2 N末端重组融合蛋白及其可与天然mTLR-2结合的多克隆抗体.
作者:杨翠兰;赵文忠;刘艳君;朱平;富宁 刊期: 2006年第11期
目的 研究早孕妇女生殖道中胎儿细胞的存在情况,用免疫细胞化学法确证胎儿细胞来源,寻找无创或微创的产前诊断取材方法及时机.方法 将健康早孕妇女宫颈取材标本分为两组:HE染色组(Ⅰ)和免疫细胞化学组(Ⅱ);选择通水术中输卵管通畅的健康妇女为对照,分为两组:HE染色组(Ⅲ)和免疫细胞化学组(Ⅳ).无菌棉拭子术、宫颈粘液吸引术、宫颈管灌洗术和官腔内灌洗术采集标本,HE染色和免疫细胞化学染色后观察滋养细胞存在情况.结果 (1)早孕妇女经宫颈细胞中存在可代表胎儿细胞的滋养细胞;(2)宫颈管灌洗术和官腔内灌洗术取材方法较好,获得胎儿细胞较多;(3)取材时机为妊娠50~79 d.结论 早孕妇女生殖道中存在胎儿细胞,在妊娠50~9 d用宫颈灌洗术或官腔内灌洗术取材,是一种较为安全有效的产前诊断技术.
作者:黄莺莺;余艳红 刊期: 2006年第11期
目的 探讨三脑室区肿瘤的显微手术方法.方法 156例病人分别采用胼胝体-侧脑室-脉络裂入路、胼胝体一侧脑室一室间孔入路、终板-翼点联合入路等6种不同的术式,均在显微镜下操作,术后观察其手术效果.结果 采用不同的显微手术方法,其肿瘤手术全切除率为56.41%,次全切除率为25.64%,部分切除率为12.82%,死亡8例,死亡率为5.13%.结论 对三脑室区肿瘤的手术,要根据肿瘤所在的不同位置,选择相应的手术入路,且在显微镜下操作,可以减少并发症,降低术后致残率和死亡率,提高生存质量.
作者:陈立一;王东军 刊期: 2006年第11期
目的 研究急性心肌梗死时血管内皮细胞生长因子(VEGF)、基质细胞衍生因子(SDF-1)以及外周血CD34+细胞的动态改变,探讨其在心肌梗死(心梗)中的作用.方法 采集急性心梗患者发病第1、3、7、10、14天外周静脉血,应用酶联免疫方法检测心梗患者以及对照组患者血VEGF和SDF-1的水平.应用流式细胞仪检测心梗患者第1、7、14天外周血CD34+细胞的水平.同时对心梗患者进行心肌酶、肌钙蛋白、心电图及心脏超声等常规检查.结果 (1)心梗后第7天外周血CD34+细胞(个/μl)明显增高(2.35±0.72vs 1.48±0.49,P<0.05);(2)心梗后血VEGF(pg/ml)明显升高,于第14天达到高峰(197.56±39.87 vs 53.79±18.12,P<0.01);(3)心梗第1天血SDF-1(pg/m1)明显降低(1683.12±224.79 vs2178.67±265.34,P<0.01),以后渐恢复至与对照组相同水平;(4)心梗第7天VEGF水平与外周血CD34+细胞高峰值之间有明显相关性;(5)VEGF高峰值与CK-MB高峰值和肌钙蛋白Ⅰ之间均有明显相关性.结论 心肌梗死本身即可动员干细胞至外周血;心梗后VEGF明显升高至少可持续2周以上,SDF-1短暂降低;两者的动态变化可能与干细胞动员及促使更多干细胞归巢至损伤心肌有关.
作者:邓争荣;杨春;马爱群;陈新义;耿涛 刊期: 2006年第11期
目的 探讨经皮射频消融联合肝动脉栓塞化疗及酒精注射治疗复发性小肝癌的价值.方法 回顾性分析2001年3月-2005年3月我院采用经皮射频消融治疗52例复发性肝细胞癌(肿瘤≤5 cm)的临床资料,其中14例(肿瘤3~5 cm)联合肝动脉栓塞化疗及酒精注射治疗.结果 经皮射频消融治疗52例复发性小肝癌中,肿瘤<3 cm者38例,MRI或CT显示全部瘤灶完全凝固性坏死;肿瘤3~5 cm者14例,MRI或CT显示11例(78.6%)瘤灶完全凝固性坏死,联合肝动脉栓塞化疗及酒精注射治疗后全部瘤灶坏死.1、2、3、4年累积生存率分别为96.2%、69.4%、45.5%、30.0%.结论 经皮射频消融是局部治疗复发性小肝癌的有效方法,对于<3 cm的肿瘤可以完全灭活,对于3~5 cm的肿瘤联合肝动脉栓塞化疗及酒精注射治疗有助于增加肿瘤的坏死率及提高患者的生存率.
作者:许卓明;王军华;甄作均;陈焕伟;崔伟珍 刊期: 2006年第11期
目的 评价广州市危险化学品监控与应急救援体系建立的现状.方法 分析广州市天河区黄埔大道东路危险化学品工厂事故发生的原因、应急处置的方式.结果 事故发生的原因为企业经营者及其员工缺乏防范化学事故的意识;事故单位违反国家、行业有关危险化学品经营单位选址规定;事故发生后广州市能及时启动危险化学品事故应急救援预案,科学应对、社会联动、相关部门协同作战是成功控制事态扩大、避免大规模人员伤亡的关键.结论 广州市已具备科学应对和处置突发化学事故的能力,但应进一步加强对城市内重大危险源的辨识和监控工作,以期能从源头上遏制城市化学灾害事故的发生.
作者:葛长荣;于德宪;俞守义 刊期: 2006年第11期
目的 探讨非小细胞肺癌全肺切除术后严重心肺并发症的相关风险因素.方法 收集1999年9月~2005年12月施行全肺切除手术的52例非小细胞肺癌患者的临床资料.对影响全肺切除术后严重心肺并发症的相关因素进行单因素和多因素分析.结果 围术期无死亡病例,11例(21%)术后出现严重心肺并发症.单因素分析时,胸膜外全肺切除、依据核素肺显像预测的术后FEV1.0%及MVV%是严重心肺并发症的相关风险因素.当预测的术后FVC%、FEV1.0%或MVV%<50%时,严重心肺并发症的发生率接近50%.多因素分析时,胸膜外全肺切除是严重心肺并发症的相关风险因素;忽略手术性质的影响时,预测的术后FEV1.0%和MVV%是严重心肺并发症的相关风险因素.结论 胸膜外全肺切除是非小细胞肺癌全肺切除术后严重心肺并发症密切的相关风险因素;不考虑胸膜外全肺切除因素时,预测的术后FEV1.0%及MVV%是严重心肺并发症的相关风险因素.
作者:翁毅敏;谷力加;钟文昭;黄邵洪;廖洪映;张健 刊期: 2006年第11期
目的 寻求一种简单有效的分离培养大鼠触须毛乳头细胞的方法.方法 将大鼠触须毛囊完整拔出后,在37℃缓慢搅拌的条件下加入0.2%胶原酶Ⅰ消化3 h,间断吹打使毛乳头游离,收集上清低速离心(300r/min)后收集毛乳头进行培养,计算其贴壁率,检测α-平滑肌肌动蛋白表达.结果 全毛囊消化法能显著降低工作强度,减少污染机会,具有毛乳头贴壁快和细胞迁出时间短的优点.α-平滑肌肌动蛋白染色阳性.结论 全毛囊消化法是一种简单有效的分离培养大鼠触须毛乳头细胞的方法.
作者:孙锡金;胡志奇 刊期: 2006年第11期
目的 通过体检及问卷调查,初步探讨老年人牙周病与冠心病的相关性.方法 选取2003-2005年西安市新城区和阎良区离退休老干部662名,其中男589名、女73名,平均年龄(72.5±8.9)岁,分为冠心病组357例(病例组),包括稳定型心绞痛(SAP)141例,不稳定型心绞痛(UAP)134例及急性心肌梗死(AMI)82例和非冠心病组305例(对照组),均设计相同的问卷进行调查,比较两组牙周指数(PI)及牙齿缺失数的差异.结果 (1)冠心病组PI明显高于对照组(P<0.01),在调整性别、年龄、体重指数、吸烟史、高脂饮食习惯、高血压病及心脑血管病家族史后,PI仍与冠心病显著相关(P<0.01).(2)AMI、UAP和SAP组的PI与对照组比较差异均有显著性(分别P<0.05,P<0.01和P<0.01);牙齿缺失数在冠心病各组与对照组之间差异无显著性.(3)吸烟(OR=0.638,P<0.01)和心脑血管病家族史(OR=0.678,0.01<P<0.05)亦为冠心病的危险因素.结论 老年牙周病与冠心病之间存在一定的相关性.
作者:李高中;徐琳;权正良;寇植;蔡乐农;苏联珍;李秀燕;种永峰 刊期: 2006年第11期
目的 观察小剂量氯氨酮复合芬太尼术后静脉镇痛应用于老年病人的临床效果和并发症,并与单纯芬太尼进行比较.方法 选择行胸腹部手术后老年(年龄≥65岁)患者80例,随机分为两组,每组40例.氯氨酮-芬太尼组(联合组):氯氨酮0.5 mg/ml+芬太尼5.0 μg/ml+咪唑安定50μg/ml;单纯芬太尼组:芬太尼7.5 μg/ml+咪唑安定50μg/ml.各组镇痛泵中药物均用生理盐水稀释至200ml.观察各组患者术后镇痛48 h内的静息镇痛评分、镇静评分以及恶心呕吐、皮肤瘙痒、幻觉的发生情况.结果 两组用药总量及PCA量均相似(P>0.05).两组术后各时段静息镇痛评分均无显著性差异(P>0.05).联合组在各时段的镇静效果明显地优于单纯芬太尼组(P<0.05).在术后镇痛48 h内,联合组的恶心、呕吐、皮肤瘙痒发生率明显低于单纯芬太尼组(P<0.05),两组患者均无幻觉发生.结论 小剂量氯氨酮用于老年病人术后镇痛可明显减少芬太尼的剂量,并使恶心呕吐、皮肤瘙痒的发生率降低,而镇痛效果并无差异.
作者:梁仕伟;陈晔明;林春水 刊期: 2006年第11期
目的 利用MR-DTI技术行三维脑白质成像,评价脑肿瘤对白质束的改变,探讨脑肿瘤对白质的改变与瘤周部分各向异性值(FA值)改变的量化对应关系.方法 12例脑内恶性肿瘤患者被成功地完成了常规MR检查及DTI检查,分别获得各自的常规MR图、相应感兴趣区(ROI)的部分各向异性图(FA图)、彩色编码张量图、脑白质三维示踪图、脑肿瘤侧和对侧内囊区的FA值.结果 彩色编码张量图、三维示踪图可清楚地显示目标脑白质的位置,走行和受损状况.将患者患侧FA1值与对侧FA2值之比从0~1等分为4个区间,相应地将肿瘤致脑白质束的改变分为4种,Ⅰ:两侧FA值之比>75%,脑白质正常或基本正常;Ⅱ:FA值之比>50%,但<75%,脑白质移位或/和轻度受损;Ⅲ:FA值之比>25%,但<50%,脑白质中度受损但未完全破坏;Ⅳ:FA比值<25%,此时相应脑白质束未见显示.结论 MR-DTI技术可进行脑白质纤维示踪,使其清晰地可视化.FA值的改变程度与脑白质纤维受损程度呈正相关.
作者:李贻卓;黄子林;魏大年;谢传森;何浩强;魏一飞;陈林;吴沛宏 刊期: 2006年第11期
目的 通过球囊损伤兔髂动脉造成动脉损伤的动物模型,观察四逆汤对损伤后动脉内膜的保护和修复作用,以及对氧化应激的影响.方法 雄性新西兰大白兔24只,随机分为对照组、模型组、四逆汤治疗组(四逆汤组),每组8只.对照组兔给予普通饲料,模型组、四逆汤组兔给予高脂饮食.饲养2周后模型组、四逆汤组兔行髂动脉内膜剥脱术.4周后,通过电镜观察髂动脉内膜的病变情况,光镜观察血管的病理变化,并检测血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和血脂的水平.结果 扫描电镜发现,对照组兔髂动脉内膜内皮细胞形态正常,排列整齐;模型组可见内皮细胞脱落,内皮细胞增生形态各异,内皮下胶原纤维暴露;四逆汤组内皮细胞排列基本正常.光镜发现,对照组兔髂动脉管腔和管壁厚度正常,管壁光滑;模型组管壁明显增厚,管腔明显狭窄,内膜增厚;治疗组血管病变程度明显减轻.四逆汤可明显改善血脂的紊乱.对照组兔血清SOD活性明显高于四逆汤组和模型组,四逆汤组SOD活性又明显高于模型组.对照组兔血清MDA水平明显低于四逆汤组和模型组,四逆汤组MDA水平又明显低于模型组.结论 四逆汤可减轻兔髂动脉剥脱术后的内膜增生和血管狭窄,其机制可能与抑制髂动脉剥脱术后兔的脂质过氧化反应、增强SOD活性有关.
作者:刘勇;钱孝贤;吴伟康;周彬;陈璘;刘金来 刊期: 2006年第11期