已烯雌酚对去卵巢大鼠骨骼生长及代谢的影响

活塞型人工镫骨及镫骨高度测量器的制备与应用

目的制备镫骨高度测量器和活塞型人工镫骨,用于人工镫骨手术治疗耳硬化症.方法用细不锈钢丝和特氟隆制作活塞型人工镫骨,用7号长注射针头和银针制作镫骨高度测量器.结果经手术中实际应用,效果十分满意.结论本方法制备的镫骨高度测量器和活塞型人工镫骨简便实用.

作者：谢南屏 刊期： 2003年第08期

SD大鼠乳鼠胰岛细胞体外培养方法探讨

目的探讨一种获得足量、纯度高和功能良好的大鼠胰岛细胞的体外培养方法.方法采用胶原酶对胰腺组织进行分次短时间消化;细胞接种18 h时,倒置显微镜下观察细胞生长情况;将细胞转入新的培养板培养,定期收集培养液上清.分别检测胰岛素、淀粉酶含量及葡萄糖刺激下的胰岛素分泌水平.结果SD大鼠乳鼠原代培养的胰岛细胞中成纤维细胞明显减少,双硫腙可染率85%～90%,锥虫兰染色细胞活力90%以上,培养7～11d的细胞分泌功能正常.结论用胶原酶反复短时间消化胰腺组织,细胞接种后及时转板的方法可获得纯度较高、生长良好、适合实验研究的胰岛单层细胞.

作者：姜一真；薛耀明；程宝鸾；朱姿英；沈洁；周琳 刊期： 2003年第08期

抗人肺表面活性物质相关蛋白A单克隆抗体的制备及其特性的鉴定

目的制备抗人肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)单克隆抗体并对其特性进行鉴定.方法以自行制备的SP-A蛋白作为抗原免疫Balb/c小鼠,建立分泌抗人SP-A单抗的杂交瘤细胞株,诱发小鼠产生单抗腹水,用(NH4)2SO4盐析纯化腹水,用间接ELISA法测定单抗效价,用Western blotting测定抗体特异性.结果建立了3株能持续分泌抗SP-A单抗的杂交瘤细胞株,其中2B6杂交瘤细胞株抗体效价高,其染色体数目均大于100条.间接ELISA法测定腹水和细胞培养上清效价,分别为1:50 000和1:10 000.用Western blotting在SP-A蛋白泳道上相对分子质量31 000左右位置出现明显的一条染色条带.结论自行制备的抗人SP-A单抗,其具有特异性强、效价高的特点.

作者：刘咏梅；封志纯；杜江；吴秉义；谭月儿；王鲜艳 刊期： 2003年第08期

产毒性大肠杆菌的致病机制

目的深入分析产毒性大肠杆菌(ETEC)的致病机制.方法建立ETEC感染豚鼠模型,采用免疫组织化学染色及流式细胞术,观察豚鼠肠组织的病理形态并测定细胞内游离Ca2+、细胞质pH、细胞膜电位及线粒体膜电位.结果豚鼠对人源ETEC菌株敏感,ETEC可导致豚鼠小肠充血、水肿和炎细胞浸润,未发现细菌入侵小肠上皮细胞,但电镜下可见小肠上皮细胞空泡样变性,线粒体增生;不耐热肠毒素(LT)和耐热肠毒素(ST)在回肠组织中分布弥漫;LT和ST均可使豚鼠小肠离体上皮细胞内游离Ca2+、细胞浆pH和细胞跨膜电位上凋,使线粒体跨膜电位下降.结论ETEC可导致豚鼠小肠充血、水肿和炎细胞浸润等炎症反应;LT和ST的作用也不限于上皮细胞,对肌细胞也有影响;对肠毒素作用的分析提示,LT与ST的作用部位与机制可能相似,ETEC腹泻与细胞主动排水过程有关.

作者：陈清；俞守义；申洪；王雅贤；吴敏 刊期： 2003年第08期

谷氨酸脱羧酶抗体检测在2型糖尿病早期诊断中的意义

目的探讨谷氨酸脱羧酶抗体(GAD-Ab)检测在2型糖尿病患者早期诊断中的意义.方法比较2型糖尿病患者GAD-Ab阳性组12例与阴性组86例的临床特征、体重指数、C肽、糖化血红蛋白等指标.结果GAD-Ab阳性组发病年龄低于阴性组,空腹及餐后2 hC肽值较低,使用胰岛素者比例较高,酮症酸中毒发生率高.结论检测2型糖尿病患者的GAD-Ab可帮助临床上早期发现迟发自身免疫糖尿病病人,尽早采用胰岛素治疗,对保护残存的胰岛功能有重要意义.

作者：黄玉宇；黄萍；楼慧玲 刊期： 2003年第08期

肾小球系膜细胞的分离和培养

目的分离、培养和鉴定正常人肾小球系膜细胞.方法筛网滤过分离正常人肾小球系膜细胞,同时采用免疫荧光技术,利用异硫氰酸荧光素(FITC)间接标记单克隆抗体:抗Ⅷ因子相关抗原抗体、抗结蛋白抗体、抗角蛋白抗体、抗细胞角蛋白抗体、抗Ⅳ型胶原抗体、抗纤维连接蛋白抗体、抗层粘连蛋白抗体对系膜细胞特有的中间微丝进行鉴定.并采用同期培养的同一来源的肾小球内皮细胞作对照.结果抗Ⅷ因子相关抗原、抗角蛋白和抗细胞角蛋白抗体表达均为阴性,而抗结蛋白抗体、抗Ⅳ型胶原抗体、抗纤维连接蛋白抗体、抗层粘连蛋白抗体为阳性,说明培养的细胞为系膜细胞.结论该种方法分离培养的细胞经过免疫荧光染色鉴定为肾小球系膜细胞.

作者：孙晓艳；安靓；傅博；李进 刊期： 2003年第08期

平阳霉素对血管内皮细胞的生长抑制作用和细胞周期的影响

目的观察平阳霉素(PYM)对体外培养的人脐静脉血管内皮细胞株(ECV304)增殖和细胞周期的影响.方法采用MTT法检测不同浓度PYM(10-2～103μg/m1)作用不同时间(24、48、72 h)后对ECV304细胞的生长抑制率.利用流式细胞仪检测一定浓度PYM刺激下细胞周期分布.结果10μg/ml浓度PYM作用24、48、72 h后的细胞生长抑制率分别为44.7%、59.7%、74.4%,药物抑制效应表现为剂量依赖性和时间依赖性.药物作用24、48、72 h的半数抑制浓度(IC50)分别为32.94、2.56、0.75μg/ml.1μg/ml浓度PYM作用ECV304细胞24 h,实验组S期细胞比例较对照组明显下降,G2-M期细胞比例明显增加(P<0.01),细胞被阻滞在G2-M期.结论PYM对ECV304细胞的增殖具有较强抑制作用,其机制与细胞周期阻滞作用有关.

作者：孔伟东；李彦豪；曾庆乐；陈勇；何晓峰 刊期： 2003年第08期

组织多肽特异性抗原在乳腺癌中的临床研究

目的研究血清组织多肽特异性抗原(TPS)在乳腺癌患者血清中的表达水平及其对乳腺癌的临床应用价值.方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定30例健康体检者、40例乳腺良性病变患者和90例乳腺癌患者的血清TPS和CA153水平.结果乳腺癌患者的血清TPS和CA153水平及检测阳性率均明显高于乳腺良性疾病和正常对照组(P<0.01).TPS和CA153阳性率和浓度均随着临床分期的进展而升高,而TPS在临床期也有高水平表达.TPS对乳腺癌骨转移为敏感,远处淋巴结的乳腺癌患者水平高(P＜0.05).乳腺癌患者治疗有效后血清TPS和CA153水平均明显下降(P<0.05),尤其以TPS下降幅度较为显著(P<0.05).结论TPS是诊断乳腺癌的一项敏感性强的肿瘤标志物,尤其是骨转移患者,对乳腺癌诊断、病情判断和疗效评价等均有重要价值.

作者：郑航；何本夫；罗荣城；尤长宣；麦国丰；卢惠芳 刊期： 2003年第08期

肾移植群体反应性抗体检测641例分析

目的探讨群体反应性抗体检测(PRA)对于肾移植的意义.方法采用ELISA方法对641例肾移植患者进行PRA检测:术前570例、术后71例.结果570例术前检测PRA,阴性490例,术后发生急性排斥反应35例;弱阳性68例,术后发生急性排斥反应36例;12例阳性术后检测仍为阳性,发生急性排斥反应10例.71例术后检测PRA,阴性59例,发生急性排斥反应3例;阳性12例,发生急性排斥反应7例.结论肾移植患者术前检测PRA有助于减少排斥反应的发生.

作者：张泓；赵小兵；武大林 刊期： 2003年第08期

单核细胞活化与终末期肾病炎症反应状态的关系

目的研究终末期肾病(ESRD)炎症反应状态及其与单核细胞活化之间的关系.方法166例ESRD病人分为慢性肾功能不全非透析组(CRF,n=63)、持续性不卧床腹膜透析组(CAPD,n=16)和血液透析组(HD,n=87);测定各组以及血液透析前后血浆单核细胞活化指标,包括新喋呤、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β),以及血浆急性时相蛋白(APP)水平,包括C反应蛋白(CRP)和血清淀粉样A物质(SAA).结果3组ESRD病人血浆单核细胞活化指标及APP水平均比正常对照组升高(P均＜0.05),HD组血浆CRP和SAA含量高于CRF组(P均＜0.05),且SAA水平高于CAPD组(P<0.05);CRF组血浆TNFα、IL-1β、新喋呤以及CRP和SAA含量与血清肌酐水平呈正相关(P<0.05),与肌酐清除率(Ccr)呈负相关(P均＜0.05);在以Ccr矫正后进行相关分析,血浆CRP含量与新喋呤、TNF-α和IL-1β浓度呈正相关(r值分别为0.287、0.314、0.262,P<0.05),血浆SAA含量与新喋呤浓度呈正相关(r=0.306,P<0.05);糖尿病与非糖尿病患者相比上述指标均无显著性差异(P>0.05);单次透析后血浆TNFα、IL-1β以及CRP和SAA含量比透析前显著升高(P<0.05),新喋呤浓度无显著性变化(P>0.05).结论ESRD时存在以APP升高为特点的慢性炎症反应,血液透析具有进一步的促进作用,这种异常宿主反应可能与单核细胞活化有关.

作者：梁敏；王力；侯凡凡；刘俊；刘志强；田建伟 刊期： 2003年第08期

不同层次护士全面质量管理知识调查与分析

目的了解不同层次护士对全面质量管理(TQC)的掌握程度.方法参考TQC的相关知识,自行设计问卷,采用按护士层次比例分层随机抽样的方法抽取198位护士,采用统一发放、集中收回的调查方式.结果(1)在TQC基本知识方面,辅助护士TQC基本知识的得分低于其他层次的护士,责任护士的得分低于区护长、科护长的得分,主管护士的得分低于科护长的得分(P<0.05);3～10年护龄的护士的得分明显低于10年以上护龄护士的得分(P<0.05).(2)在TQC常用方法方面,辅助护士与主管护士、区护长、科护长之间有统计学意义(P<0.05),责任护士与主管护士、区护长、科护长之间有统计学意义(P<0.05),其他层次间两两比较无差异(P<0.05);护龄15年以下的护士TQC常用方法的得分无明显不同,但却明显低于护龄15年以上的护士(P<0.05).(3)不同学历的护士TQC知识的得分没有统计学意义(P>0.05).结论在本研究中,护士对全面质量管理知识的掌握程度因工作层次、护龄的不同而不同.

作者：徐朝艳；张振路；谢文；陈志群；王思琛；郑志惠 刊期： 2003年第08期

除皱术中防止面神经颧支损伤的解剖学研究

目的为除皱术中防止面神经颧支损伤提供解剖学依据.方法10例防腐固定标本和5例新鲜标本,解剖观察面神经颧支的走行、分布及毗邻,分析颧支的分布特点及预防其损伤的手术操作方法.结果(1)颧支从腮腺上缘或前缘穿出.发出2～3支,分为上、下部分支.(2)上部颧支细小、表浅,由颧弓内1/3处斜行跨越颧弓或走行在颧弓下缘,穿经颧骨韧带基部;下部颧支略粗,位置深,位于上部分支下方(1.0±0.3)cm.(3)颧支上、下部分支在颧大肌表面和深面相互吻合.结论经浅表肌肉腱膜系统(SMAS)下平面分离到颧大肌外缘时,或在骨膜下分离颧骨韧带时,是颧支易损伤部位,操作中避开神经分布的组织层次,勿使用锐性分离及过度牵拉等,可预防神经损伤.

作者：雷涛；徐达传；高建华 刊期： 2003年第08期

异丙酚对新生大鼠延髓脑片吸气呼吸神经元活动的影响

目的观察异丙酚对延髓基本呼吸中枢吸气呼吸神经元放电活动的作用规律及其可能的作用机制.方法以改良的Kreb氏液灌流新生SD大鼠离体延髓脑片,随机分成Ⅰ～Ⅵ组(每组n=6).Ⅰ组为对照组(modified Kreb's solution,MKS组),第Ⅱ～Ⅴ组异丙酚浓度分别为5、20、50和100μmol/L持续灌流3 min,第Ⅵ组给γ-氨基丁酸A受体特异性阻断剂荷包牡丹碱(bicuculline,20μmol/L)与异丙酚20 μmol/L,观察给药后1、3、5、10、15、30 min时呼吸吸气神经元放电时程和峰值、呼气时程(吸气神经元放电静止期)和呼吸频率活动的变化.结果(1)第Ⅱ～Ⅴ组在1～30min内吸气神经元放电时程均表现为逐渐显著减小,15 min时作用显著,且各组与MKS灌流的对照组相比均有显著性差异.(2)Ⅲ、第Ⅱ～Ⅴ组1min内呼气时程无显著性变化,3～30min内呼气时程均表现为显著延长,5～15min内达到其大效应.(3)在给药后的30min内放电峰值呈现先增加然后降低的趋势,各组间放电峰值无显著性差异.(4)给予异丙酚3～30 min内呼吸频率逐渐减慢,5～15 min内达到其大抑制效应,各组间呼吸频率的变化无显著性差异.(5)Ⅵ+Ⅳ组的吸气时程与间给药前比无显著性差异.结论(1)异丙酚可抑制新生大鼠离体延髓脑片标本吸气神经元的放电时程,主要表现为吸气时程的缩短和呼气时程延长,且呼吸呈浓度依赖性.(2)GABAA受体在异丙酚对延髓基本呼吸中枢呼吸气吸神经元放电活动的抑制作用中可能起重要作用.

作者：史玥；吴中海；李自强 刊期： 2003年第08期

引用参考文献三原则

作者： 刊期： 2003年第08期

SARS病变组织细胞凋亡检测及其意义

目的检测SARS病变组织标本中的细胞凋亡情况和凋亡细胞类型,探讨细胞凋亡在SARS发病过程中的作用及可能机制.方法DNA片段原位末端检测和免疫组化碱性磷酸酶法单染和双染检测正常组织和SARS病变组织中的细胞凋亡以及白细胞分化相关抗原CD3、CD4、CD8、CD45RA、CD20、CD68的表达情况.结果与正常组织相比,SARS病人的脾脏、肺组织和淋巴结细胞凋亡明显增多,凋亡细胞包括肺泡上皮细胞、淋巴细胞和单核/巨噬细胞等;各病变组织内均有大量CD68+单核/臣噬细胞;病变肺组织基本没有CD45RA+/CD20+B细胞和CD44+/CD8+T细胞浸润,淋巴结和脾脏的CD4+/CD8+/T细胞、CD45RA+/CD20+B细胞也明显减少,现存的具有上述抗原特性的T细胞和B细胞较少凋亡.结论(1)细胞凋亡现象在SARS病变组织中普遍存在,提示细胞凋亡在SARS发病过程中起一定作用;(2)病变组织内浸润的炎细胞主要为单核细胞,说明单核细胞可能在SARS发病中起重要作用;(3)淋巴结和脾脏的细胞凋亡现象和CD4+/CD8+T细胞及CD45RA+/CD20+B细胞减少提示SARS病毒可能对免疫细胞有一定的杀伤效应.

作者：张庆玲；丁彦青；贺莉；王蔚；张进华；王慧君；蔡俊杰；耿舰；陆药丹；罗元龙 刊期： 2003年第08期

有关相对数的误用

作者： 刊期： 2003年第08期

环孢霉素A抑制NIT-1胰岛β细胞胰岛素释放并下调线粒体氧化磷酸化酶系基因的表达

目的研究免疫抑制剂环孢霉素A(CsA)对NIT-1胰岛β细胞胰岛素分泌的影响及在基因水平上对线粒体氧化磷酸化水平的影响.方法体外培养NIT-1胰岛β细胞,用10μmol/LCsA处理24和48 h.放射免疫测定法(RIA)检测胰岛素释放,半定量RT-PCR检测CsA处理NIT-1胰岛β细胞后线粒体氧化磷酸化酶系中的几种主要成员(nuox23、Cox7c和Atp5K)在mRNA水平上的表达.结果CsA处理24和48 b可显著抑制胰岛素的释放并下调Nuox23、Cox7c和Atp5K基因mRNA表达.结论CsA下调线粒体氧化磷酸化酶系基因的表达可能是其降低ATP合成引起胰岛素释放下降的机制之一.

作者：余乐；雷林生；吴曙光 刊期： 2003年第08期

p38 MAPK通路在佛波酯诱导人绒癌JAR细胞体外侵袭中的作用

目的研究细胞内p38 MAPK信号传导通路在人绒癌JAR细胞体外侵袭中的作用.方法用ELISA法测定JAR细胞中p38 MAPK的活性变化;用Transwell细胞侵入系统检测细胞的侵袭作用;用MTT法评价细胞生长状况.结果佛波酯(PMA)呈浓度依赖性地激活JAR细胞中p38 MAPK.PMA能促进人绒癌JAR细胞的体外侵袭作用,而p38特异性抑制剂SB203580抑制了JAR细胞的侵袭能力.结论p38MAPK通路在人滋养细胞的侵袭行为以及人绒癌的形成中具有重要作用.p38 MAPK抑制剂可能会为人绒癌的防治提供新的途径.

作者：张曦倩；赵晓山；庞战军；李红；陈思梅；罗仁；陈士岭；邢福祺 刊期： 2003年第08期

乙型肝炎病毒多表位治疗性抗原基因的合成、表达及抗原性研究

目的研究乙型肝炎病毒多表位治疗性疫苗基因的合成、表达及其产物的抗原性.方法设计、并合成乙型肝炎病毒多表位抗原基因BPT,克隆入融合表达载体pWR450-1,构建重组质粒PWR/BPT.在大肠杆菌中表达乙型肝炎多表位抗原蛋白并纯化该蛋白,并用Westem-blotting方法初步检测该抗原蛋白的抗原性.结果成功构建了融合表达载体PWR/BPT,在大肠杆菌中表达出乙型肝炎多表位抗原蛋白,Western-blotting检测显示该蛋白具有良好抗原性.结论HBV多表位治疗性抗原基因的设计是成功的,其在大肠杆菌中表达的重组融合蛋白具有良好的抗原性,可能是较理想的HBV治疗性疫苗候选物.

作者：骆利敏；李明；夏虎；黄建生；陈百虹；王萍 刊期： 2003年第08期

创伤性休克时左旋精氨酸降低P-选择素的表达

目的探讨创伤性休克时血浆及重要脏器P-选择素的分布、变化及其意义.方法复制大鼠创伤性休克模型,24只大鼠分为实验对照组、创伤休克组、左旋精氨酸(L-Arg 100 mg/kg@b.w.)治疗组,采用免疫组化方法(SABC法)检测大鼠心脏、肝脏、肺及小肠P-选择素的表达,同时采用ELISA测定大鼠血清中P-选择素水平.结果对照组大鼠重要脏器中P-选择素除了在肺中有少量表达外,其他脏器未见阳性表达,血清中的P-选择素有表达.休克后4 h,大部分脏器及血清中的P-选择素表达显著升高,L-Arg治疗组较休克组P-选择素明显下降,有统计学意义.结论创伤性休克可导致体内血清及重要脏器P-选择素大量表达,这与休克时存在明显的微循环紊乱和内皮功能障碍有关.L-Arg减少了P-选择素的合成其原因可能是促进了内皮性NO的合成.

作者：黄宗海；林洪武；厉周；冯浩淼；孙英刚；张庆国 刊期： 2003年第08期