学术投稿

抗人肺表面活性物质相关蛋白A单克隆抗体的制备及其特性的鉴定

刘咏梅;封志纯;杜江;吴秉义;谭月儿;王鲜艳

关键词:肺表面活性物质相关蛋白A, 抗体, 单克隆, 杂交瘤
摘要:目的制备抗人肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)单克隆抗体并对其特性进行鉴定.方法以自行制备的SP-A蛋白作为抗原免疫Balb/c小鼠,建立分泌抗人SP-A单抗的杂交瘤细胞株,诱发小鼠产生单抗腹水,用(NH4)2SO4盐析纯化腹水,用间接ELISA法测定单抗效价,用Western blotting测定抗体特异性.结果建立了3株能持续分泌抗SP-A单抗的杂交瘤细胞株,其中2B6杂交瘤细胞株抗体效价高,其染色体数目均大于100条.间接ELISA法测定腹水和细胞培养上清效价,分别为1:50 000和1:10 000.用Western blotting在SP-A蛋白泳道上相对分子质量31 000左右位置出现明显的一条染色条带.结论自行制备的抗人SP-A单抗,其具有特异性强、效价高的特点.
南方医科大学学报杂志相关文献
  • 不同层次护士全面质量管理知识调查与分析

    目的了解不同层次护士对全面质量管理(TQC)的掌握程度.方法参考TQC的相关知识,自行设计问卷,采用按护士层次比例分层随机抽样的方法抽取198位护士,采用统一发放、集中收回的调查方式.结果(1)在TQC基本知识方面,辅助护士TQC基本知识的得分低于其他层次的护士,责任护士的得分低于区护长、科护长的得分,主管护士的得分低于科护长的得分(P<0.05);3~10年护龄的护士的得分明显低于10年以上护龄护士的得分(P<0.05).(2)在TQC常用方法方面,辅助护士与主管护士、区护长、科护长之间有统计学意义(P<0.05),责任护士与主管护士、区护长、科护长之间有统计学意义(P<0.05),其他层次间两两比较无差异(P<0.05);护龄15年以下的护士TQC常用方法的得分无明显不同,但却明显低于护龄15年以上的护士(P<0.05).(3)不同学历的护士TQC知识的得分没有统计学意义(P>0.05).结论在本研究中,护士对全面质量管理知识的掌握程度因工作层次、护龄的不同而不同.

    作者:徐朝艳;张振路;谢文;陈志群;王思琛;郑志惠 刊期: 2003年第08期

  • 老年脑梗死患者血清胆固醇、高密度脂蛋白及其图谱的变化

    目的观察老年脑梗死患者血清胆固醇、高密度脂蛋白及其图谱的变化.方法采用改良的双梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测118例老年脑梗死患者和60例健康老年人的血清脂蛋白谱(SLPG),同时测定血清总胆固醇(TC)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量.结果与对照组比较,老年脑梗死组血清HDL-C含量[(1.0±0.3)mmol/L]显著降低(P<0.001),TC/HDL-C(5.3±1.4)显著增高(P<0.001),而TC含量](5.0±1.5)rmmo1/L]则无显著统计学差异.老年脑梗死组SLPG异常率为86.4%,不管HDL-C含量降低与否,α脂蛋白在SLPG的表现均显著异常(P<0.001~0.05).结论血清HDL-C水平降低、TC/HDL-C增高以及SLPG异常可能是老年脑梗死发病的危险因素,其中α脂蛋白图谱较HDL-C更具敏感性,而TC水平的预警作用可能不大.

    作者:尹恝;王心宇;张暋 刊期: 2003年第08期

  • 儿童支气管哮喘急性发作时低钾血症相关因素56例临床分析

    目的探讨儿童支气管哮喘急性发作时并发低钾血症的发生率和临床特点.方法对56例支气管哮喘急性发作并发低钾血症患儿的临床资料进行分析.结果并发低钾血症患儿21例,发生率为37.5%.在哮喘急性发作及其治疗过程中,存在多种原因可导致低钾血症,但其临床表现缺乏特异性而易漏诊.结论儿童哮喘急性发作时并发低钾血症的发生率高,具有潜在危险性.尤其对正在使用糖皮质激素,β2受体激动剂的患儿,更应及时补钾.

    作者:王水有;徐庭云 刊期: 2003年第08期

  • 舰船员慢性荨麻疹与马拉色菌相关性研究

    目的研究舰船员慢性荨麻疹发病与马拉色菌的关系.方法对126例舰船员慢性荨麻疹患者及45例健康者进行真菌学比较研究.将马拉色菌阳性的82例慢性荨麻疹患者分为A、B两组,A组单用抗组胺药,B组用抗组胺药联合2%酮康唑洗剂治疗.结果舰船员慢性荨麻疹患者皮肤马拉色菌带菌率高于正常对照组(P<0.01),两治疗观察组于治疗结束时,疗效无显著性差异(P<0.05);治疗结束6~8周后,B组疗效高于A组,有显著性差异(P<0.01),且B组真菌学检查马拉色菌转阴率高于A组(P<0.01).结论舰船员慢性荨麻疹与皮肤马拉色菌有一定相关性,联合抗真菌治疗能提高其远期疗效.

    作者:唐新平;曾抗;陈观华;毕龙远;樊龙中;邵昌发 刊期: 2003年第08期

  • 抗人肺表面活性物质相关蛋白A单克隆抗体的制备及其特性的鉴定

    目的制备抗人肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)单克隆抗体并对其特性进行鉴定.方法以自行制备的SP-A蛋白作为抗原免疫Balb/c小鼠,建立分泌抗人SP-A单抗的杂交瘤细胞株,诱发小鼠产生单抗腹水,用(NH4)2SO4盐析纯化腹水,用间接ELISA法测定单抗效价,用Western blotting测定抗体特异性.结果建立了3株能持续分泌抗SP-A单抗的杂交瘤细胞株,其中2B6杂交瘤细胞株抗体效价高,其染色体数目均大于100条.间接ELISA法测定腹水和细胞培养上清效价,分别为1:50 000和1:10 000.用Western blotting在SP-A蛋白泳道上相对分子质量31 000左右位置出现明显的一条染色条带.结论自行制备的抗人SP-A单抗,其具有特异性强、效价高的特点.

    作者:刘咏梅;封志纯;杜江;吴秉义;谭月儿;王鲜艳 刊期: 2003年第08期

  • 舌癌术前MRI分期与手术病理对照研究

    目的研究舌癌MRI表现及MRI对舌癌术前分期的价值,以指导临床分期,制定佳治疗方案.方法前瞻性分析39例舌癌患者,行MRI检查;分析其MRI征象,术前MRI分期,并与病理结果进行对照研究.结果MRI对肿瘤的累及部位、深度和范围有较好显示,但对小淋巴结的检测和鉴别淋巴结的性质存在困难.MRI对原发灶T1~T4TNM分期敏感性分别为100%、83.3%、90.9%和82.6%,特异性为63.5%、83.5%、63.6%和82.6%;判断淋巴结转移的敏感性为60.8%.特异性为75.0%,准确性为66.7%,阳性预测值为77.8%,阴性预测值为76.2%;术前AJCC分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期敏感性分别为100%、85.7%、92.3%和88.9%,特异性分别为66.7%、76.3%、76.9%和77.8%.舌癌浸润深度小于3、3~6、6~9和大于9 mm 4组的淋巴结转移有明显差异(P<0.05),6~9 mm组与大于9 mm组之间无明显差异(P<0.05).结论MRI可作为舌癌TNM分期、AJCC分期的重要依据,MRI征象、临床表现结合舌癌浸润深度可提高舌癌术前分期准确性.

    作者:曾辉;梁长虹;周正根;郑君惠;曾琼新 刊期: 2003年第08期

  • 除皱术中防止面神经颧支损伤的解剖学研究

    目的为除皱术中防止面神经颧支损伤提供解剖学依据.方法10例防腐固定标本和5例新鲜标本,解剖观察面神经颧支的走行、分布及毗邻,分析颧支的分布特点及预防其损伤的手术操作方法.结果(1)颧支从腮腺上缘或前缘穿出.发出2~3支,分为上、下部分支.(2)上部颧支细小、表浅,由颧弓内1/3处斜行跨越颧弓或走行在颧弓下缘,穿经颧骨韧带基部;下部颧支略粗,位置深,位于上部分支下方(1.0±0.3)cm.(3)颧支上、下部分支在颧大肌表面和深面相互吻合.结论经浅表肌肉腱膜系统(SMAS)下平面分离到颧大肌外缘时,或在骨膜下分离颧骨韧带时,是颧支易损伤部位,操作中避开神经分布的组织层次,勿使用锐性分离及过度牵拉等,可预防神经损伤.

    作者:雷涛;徐达传;高建华 刊期: 2003年第08期

  • 手部重度热压伤皮瓣修复疗效分析

    目的探讨应用不同皮瓣修复手部重度热压伤的疗效.方法1990年1月~2000年12月,对39例各种原因所致手部重度热压伤采用不同皮瓣修复,术后尽早给予综合性康复治疗,比较其疗效.结果术后随访6~12个月,不同皮瓣修复术后手部外形和功能恢复有显著性差异(P<0.05).结论小腿内侧皮瓣和前臂掌侧逆行皮瓣优于腹部带蒂皮瓣,可大限度地恢复手的外形和功能.

    作者:何炳根;林联择;张普国;黄明光;曾秋涛 刊期: 2003年第08期

  • 子宫内膜异位症患者腹水与血清中肝细胞生长因子的检测

    扩散因子(肝细胞生长因子)(SF/HGF)是一种多功能的生长因子,与肿瘤细胞的增生、血管生成、侵袭性密切相关.本研究的目的是探索HGF在子宫内膜异位症发病机制中的作用及HGF与子宫内膜异位症发生发展的关联.本研究应用酶联免疫吸附反应技术检测了126位妇女(其中72位为子宫内膜异位症患者,54为正常对照)血清及腹水中HGF浓度.与对照组比较,Ⅰ/Ⅱ和Ⅲ/Ⅳ子宫内膜异位症患者血清和腹水中的HGF浓度升高,3组妇女腹水中HGF浓度分别为(0.337±0.065)、(0.458±0.160)、(0.915±0.113)ng/ml.血清中HGF浓度分别为(0.335±0.663)、(0.456±0.151)、(0.907±0.17)ng/ml.Ⅲ/Ⅳ子宫内膜异位症患者血清和腹水中HGF浓度与Ⅰ/Ⅱ期患者和对照组比较,差异有统计学意义.王组妇女血清与腹水的HGF浓度均呈正相关.HGF浓度与月经周期无明显相关.处于同一月经周期的患者与正常妇女血清及腹水HGF浓度比较,显示HGF浓度的升高主要是子宫内膜异位症的发生和发展相关,与月经周期无明显相关.

    作者:宗利丽;李亚里;哈小琴 刊期: 2003年第08期

  • 冠心病患者Macruz指数变化及其意义的探讨

    目的探讨冠心病患者Macruz指数变化与左室舒张功能的关系.方法应用常规12导联心电图技术,测定90例冠心病患者P/P-R段比值(即Macruz指数值),同时应用多普勒超声心动图测定二尖瓣血流频谱E/A比值,并与85例非冠心病患者作比较.结果1支和3支病变E/A比值均<1,2支病变E/A比值>1.3组冠心病患者P/P-R段比值均>1.6.结论Macruz指数有助于评价冠心病患者的左室舒张功能,某种程度上比E/A比值更优越.

    作者:夏兴凤;张凤如 刊期: 2003年第08期

  • α5β1整合素在大肠癌中的表达与大肠癌细胞生物行为学的关系

    目的研究整合素α5β1在大肠癌及癌旁组织中的表达与肿瘤细胞分化、转移等生物学行为的关系.方法用免疫组化Ev二步法检测81例大肠癌及相应癌旁组织石蜡标本整合素α5β1的表达情况.结果在81例大肠癌组织中整合素α5β1表达量与相应的癌旁组织相比差异有显著性(P<0.05),癌旁组织中整合素α5β1的表达量明显降低.低分化大肠癌组织中整合素α5β1的表达量高于高分化大肠癌,有显著性差异(P<0.05).整合素α5β1在大肠癌的表达与是否有淋巴结转移无相关性(P>0.05).结论整合素α5β1的表达与大肠癌癌变及癌细胞的分化关系较密切,与癌组织发生淋巴结转移的关系不明显.整合素α5β1的表达量可作为大肠癌发生、发展过程中的一种较有价值的病理学指标.

    作者:周军;丁彦青;杨红军;张进华;陈艾保 刊期: 2003年第08期

  • 单核细胞活化与终末期肾病炎症反应状态的关系

    目的研究终末期肾病(ESRD)炎症反应状态及其与单核细胞活化之间的关系.方法166例ESRD病人分为慢性肾功能不全非透析组(CRF,n=63)、持续性不卧床腹膜透析组(CAPD,n=16)和血液透析组(HD,n=87);测定各组以及血液透析前后血浆单核细胞活化指标,包括新喋呤、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β),以及血浆急性时相蛋白(APP)水平,包括C反应蛋白(CRP)和血清淀粉样A物质(SAA).结果3组ESRD病人血浆单核细胞活化指标及APP水平均比正常对照组升高(P均<0.05),HD组血浆CRP和SAA含量高于CRF组(P均<0.05),且SAA水平高于CAPD组(P<0.05);CRF组血浆TNFα、IL-1β、新喋呤以及CRP和SAA含量与血清肌酐水平呈正相关(P<0.05),与肌酐清除率(Ccr)呈负相关(P均<0.05);在以Ccr矫正后进行相关分析,血浆CRP含量与新喋呤、TNF-α和IL-1β浓度呈正相关(r值分别为0.287、0.314、0.262,P<0.05),血浆SAA含量与新喋呤浓度呈正相关(r=0.306,P<0.05);糖尿病与非糖尿病患者相比上述指标均无显著性差异(P>0.05);单次透析后血浆TNFα、IL-1β以及CRP和SAA含量比透析前显著升高(P<0.05),新喋呤浓度无显著性变化(P>0.05).结论ESRD时存在以APP升高为特点的慢性炎症反应,血液透析具有进一步的促进作用,这种异常宿主反应可能与单核细胞活化有关.

    作者:梁敏;王力;侯凡凡;刘俊;刘志强;田建伟 刊期: 2003年第08期

  • SD大鼠乳鼠胰岛细胞体外培养方法探讨

    目的探讨一种获得足量、纯度高和功能良好的大鼠胰岛细胞的体外培养方法.方法采用胶原酶对胰腺组织进行分次短时间消化;细胞接种18 h时,倒置显微镜下观察细胞生长情况;将细胞转入新的培养板培养,定期收集培养液上清.分别检测胰岛素、淀粉酶含量及葡萄糖刺激下的胰岛素分泌水平.结果SD大鼠乳鼠原代培养的胰岛细胞中成纤维细胞明显减少,双硫腙可染率85%~90%,锥虫兰染色细胞活力90%以上,培养7~11d的细胞分泌功能正常.结论用胶原酶反复短时间消化胰腺组织,细胞接种后及时转板的方法可获得纯度较高、生长良好、适合实验研究的胰岛单层细胞.

    作者:姜一真;薛耀明;程宝鸾;朱姿英;沈洁;周琳 刊期: 2003年第08期

  • 免疫细胞在SARS病变组织中的表达及其作用

    目的观察并探讨免疫细胞标志物及其活化抗原在严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome,SARS)病变组织中的表达及其在SARS发病中的作用.方法采用14种免疫细胞标志物及其活化抗原,用免疫组化DAB及碱性磷酸酶(AP)双重染色法检测3例SARS尸检病变肺、脾、淋巴结免疫细胞及其活性表达情况.结果(1)病变肺、脾、淋巴结内均可见大量增生的单核巨噬细胞,部分经CD25标记显示阳性(活化单核巨噬细胞).(2)肺组织炎症灶内可见散在的CD45RO阳性T淋巴细胞,而KI67阳性的T淋巴细胞(活化T淋巴细胞)则很少表达.(3)淋巴结内经KI67及CD45RO双染标记的T淋巴细胞(活化的T淋巴细胞)呈散在阳性;T淋巴细胞亚群数量均明显减少,CD4+、CD8+T淋巴细胞及NK细胞减少则更为严重.结论单核巨噬细胞在SARS发病过程中活性显著增加,为主要反应细胞,而T淋巴细胞亚群则显著减少.单核细胞及T淋巴细胞可能在SARS发病机制中起着重要作用.

    作者:贺莉;丁彦青;王蔚;张庆玲;张进华;耿舰;蔡俊杰;王慧君 刊期: 2003年第08期

  • 新兵心理健康状况及人格与训练伤的关系

    目的了解新兵心理健康状况、人格与训练伤的关系.方法应用症状自评量表(SCL-90)和艾森克个性问卷(EPQ)对某部参加2002年度基础训练的新兵进行测试.结果本年度军训伤累积发生率为9.6%.受伤组(n=58)与未受伤组(n=559)之间训练前各指标未见显著性差异(P>0.05).训练后受伤组精神病性因子分高于未受伤组(P<0.01).训练前受伤组因子分≥2的因子主要为强迫症状(13.79%)、人际关系(10.34%)和抑郁(10 34%),训练后主要为人际关系(13.79%)、强迫症状(12.07%)和精神病性(12.07%).两组之间总分≥160的人数分布、人格类型分布未见显著性差异(P>0.05).结论实施新大纲后训练伤发生率下降,未发现新兵中有心理问题者、人格类型与训练伤有明显的关系.

    作者:栗文彬;王波;吴秀华;徐德忠;骆军强;李辉 刊期: 2003年第08期

  • 已烯雌酚对去卵巢大鼠骨骼生长及代谢的影响

    目的探讨己烯雌酚对去卵巢大鼠骨组织形态学及代谢的影响.方法3月龄雌性SD大鼠27只,分对照组、去卵巢未治疗组和去卵巢治疗组3组.去卵巢治疗组在去卵巢术后,给予己烯雌酚0.022 5 mg/d@kg@b.w.灌胃,每周6 d,持续90d.用图像分析仪观测各组大鼠胫骨近端骨计量学参数,并在扫描电镜下观察大鼠股骨的结构改变.检测血中胆固醇浓度及主要内脏的质量.结果与对照组比较,去卵巢未治疗组大鼠胫骨骨小梁面积减少65%,骨小梁间隙增加189%,骨形成率增加92%;股骨的骨小梁几乎消失,骨组织的三维构筑受到破坏.与去卵巢未治疗组比较,治疗组骨小梁面积增加128%,骨小梁间隙减少63%,骨形成率减少49%;股骨的骨小梁排列整齐,连接紧密.去卵巢治疗组大鼠无血中胆固醇增高及内分泌改变,子宫质量增加.结论己烯雌酚能有效地预防骨质疏松症,但具有导致生殖器官癌变的危险性.

    作者:唐道鹤;谢华;吴铁;黄连芳;屈菊兰;原林 刊期: 2003年第08期

  • 有关相对数的误用

    作者: 刊期: 2003年第08期

  • 平阳霉素对血管内皮细胞的生长抑制作用和细胞周期的影响

    目的观察平阳霉素(PYM)对体外培养的人脐静脉血管内皮细胞株(ECV304)增殖和细胞周期的影响.方法采用MTT法检测不同浓度PYM(10-2~103μg/m1)作用不同时间(24、48、72 h)后对ECV304细胞的生长抑制率.利用流式细胞仪检测一定浓度PYM刺激下细胞周期分布.结果10μg/ml浓度PYM作用24、48、72 h后的细胞生长抑制率分别为44.7%、59.7%、74.4%,药物抑制效应表现为剂量依赖性和时间依赖性.药物作用24、48、72 h的半数抑制浓度(IC50)分别为32.94、2.56、0.75μg/ml.1μg/ml浓度PYM作用ECV304细胞24 h,实验组S期细胞比例较对照组明显下降,G2-M期细胞比例明显增加(P<0.01),细胞被阻滞在G2-M期.结论PYM对ECV304细胞的增殖具有较强抑制作用,其机制与细胞周期阻滞作用有关.

    作者:孔伟东;李彦豪;曾庆乐;陈勇;何晓峰 刊期: 2003年第08期

  • 乙型肝炎病毒多表位治疗性抗原基因的合成、表达及抗原性研究

    目的研究乙型肝炎病毒多表位治疗性疫苗基因的合成、表达及其产物的抗原性.方法设计、并合成乙型肝炎病毒多表位抗原基因BPT,克隆入融合表达载体pWR450-1,构建重组质粒PWR/BPT.在大肠杆菌中表达乙型肝炎多表位抗原蛋白并纯化该蛋白,并用Westem-blotting方法初步检测该抗原蛋白的抗原性.结果成功构建了融合表达载体PWR/BPT,在大肠杆菌中表达出乙型肝炎多表位抗原蛋白,Western-blotting检测显示该蛋白具有良好抗原性.结论HBV多表位治疗性抗原基因的设计是成功的,其在大肠杆菌中表达的重组融合蛋白具有良好的抗原性,可能是较理想的HBV治疗性疫苗候选物.

    作者:骆利敏;李明;夏虎;黄建生;陈百虹;王萍 刊期: 2003年第08期

  • 肾小球系膜细胞的分离和培养

    目的分离、培养和鉴定正常人肾小球系膜细胞.方法筛网滤过分离正常人肾小球系膜细胞,同时采用免疫荧光技术,利用异硫氰酸荧光素(FITC)间接标记单克隆抗体:抗Ⅷ因子相关抗原抗体、抗结蛋白抗体、抗角蛋白抗体、抗细胞角蛋白抗体、抗Ⅳ型胶原抗体、抗纤维连接蛋白抗体、抗层粘连蛋白抗体对系膜细胞特有的中间微丝进行鉴定.并采用同期培养的同一来源的肾小球内皮细胞作对照.结果抗Ⅷ因子相关抗原、抗角蛋白和抗细胞角蛋白抗体表达均为阴性,而抗结蛋白抗体、抗Ⅳ型胶原抗体、抗纤维连接蛋白抗体、抗层粘连蛋白抗体为阳性,说明培养的细胞为系膜细胞.结论该种方法分离培养的细胞经过免疫荧光染色鉴定为肾小球系膜细胞.

    作者:孙晓艳;安靓;傅博;李进 刊期: 2003年第08期

南方医科大学学报杂志

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主管:广东省教育厅

主办:南方医科大学