宗利丽;李亚里;哈小琴
目的快速制备炭疽杆菌保护性抗原基因芯片探针.方法根据PubMed上公布的炭疽杆菌保护性抗原的DNA序列设计引物,扩增保护性抗原基因.利用酶切、AT克隆方法快速分析筛选出保护性抗原基因片段的重组子,从而制备成芯片探针.DNA自动分析仪对克隆片段进行序列测定,生物信息学软件对其基因序列进行分析.结果根据炭疽杆菌保护性抗原设计的引物,可以扩增出长2 205bp的保护性抗原基因,经酶切、AT克隆方法筛选出约7个长度不一的片段,对其片段进行序列测定并进行Blast序列比对得知这些片段均属于炭疽杆菌保护性抗原基因.结论利用PCR扩增产物并结合酶切、AT克隆方法可以快速、简便地制备基因芯片探针.
作者:马晓冬;马文丽;吕梁;肖维威;孙朝晖;郑文岭 刊期: 2003年第08期
目的研究血清组织多肽特异性抗原(TPS)在乳腺癌患者血清中的表达水平及其对乳腺癌的临床应用价值.方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定30例健康体检者、40例乳腺良性病变患者和90例乳腺癌患者的血清TPS和CA153水平.结果乳腺癌患者的血清TPS和CA153水平及检测阳性率均明显高于乳腺良性疾病和正常对照组(P<0.01).TPS和CA153阳性率和浓度均随着临床分期的进展而升高,而TPS在临床期也有高水平表达.TPS对乳腺癌骨转移为敏感,远处淋巴结的乳腺癌患者水平高(P<0.05).乳腺癌患者治疗有效后血清TPS和CA153水平均明显下降(P<0.05),尤其以TPS下降幅度较为显著(P<0.05).结论TPS是诊断乳腺癌的一项敏感性强的肿瘤标志物,尤其是骨转移患者,对乳腺癌诊断、病情判断和疗效评价等均有重要价值.
作者:郑航;何本夫;罗荣城;尤长宣;麦国丰;卢惠芳 刊期: 2003年第08期
目的制备抗人肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)单克隆抗体并对其特性进行鉴定.方法以自行制备的SP-A蛋白作为抗原免疫Balb/c小鼠,建立分泌抗人SP-A单抗的杂交瘤细胞株,诱发小鼠产生单抗腹水,用(NH4)2SO4盐析纯化腹水,用间接ELISA法测定单抗效价,用Western blotting测定抗体特异性.结果建立了3株能持续分泌抗SP-A单抗的杂交瘤细胞株,其中2B6杂交瘤细胞株抗体效价高,其染色体数目均大于100条.间接ELISA法测定腹水和细胞培养上清效价,分别为1:50 000和1:10 000.用Western blotting在SP-A蛋白泳道上相对分子质量31 000左右位置出现明显的一条染色条带.结论自行制备的抗人SP-A单抗,其具有特异性强、效价高的特点.
作者:刘咏梅;封志纯;杜江;吴秉义;谭月儿;王鲜艳 刊期: 2003年第08期
目的探讨群体反应性抗体检测(PRA)对于肾移植的意义.方法采用ELISA方法对641例肾移植患者进行PRA检测:术前570例、术后71例.结果570例术前检测PRA,阴性490例,术后发生急性排斥反应35例;弱阳性68例,术后发生急性排斥反应36例;12例阳性术后检测仍为阳性,发生急性排斥反应10例.71例术后检测PRA,阴性59例,发生急性排斥反应3例;阳性12例,发生急性排斥反应7例.结论肾移植患者术前检测PRA有助于减少排斥反应的发生.
作者:张泓;赵小兵;武大林 刊期: 2003年第08期
目的探讨应用不同皮瓣修复手部重度热压伤的疗效.方法1990年1月~2000年12月,对39例各种原因所致手部重度热压伤采用不同皮瓣修复,术后尽早给予综合性康复治疗,比较其疗效.结果术后随访6~12个月,不同皮瓣修复术后手部外形和功能恢复有显著性差异(P<0.05).结论小腿内侧皮瓣和前臂掌侧逆行皮瓣优于腹部带蒂皮瓣,可大限度地恢复手的外形和功能.
作者:何炳根;林联择;张普国;黄明光;曾秋涛 刊期: 2003年第08期
目的制备镫骨高度测量器和活塞型人工镫骨,用于人工镫骨手术治疗耳硬化症.方法用细不锈钢丝和特氟隆制作活塞型人工镫骨,用7号长注射针头和银针制作镫骨高度测量器.结果经手术中实际应用,效果十分满意.结论本方法制备的镫骨高度测量器和活塞型人工镫骨简便实用.
作者:谢南屏 刊期: 2003年第08期
作者: 刊期: 2003年第08期
目的研究细胞内p38 MAPK信号传导通路在人绒癌JAR细胞体外侵袭中的作用.方法用ELISA法测定JAR细胞中p38 MAPK的活性变化;用Transwell细胞侵入系统检测细胞的侵袭作用;用MTT法评价细胞生长状况.结果佛波酯(PMA)呈浓度依赖性地激活JAR细胞中p38 MAPK.PMA能促进人绒癌JAR细胞的体外侵袭作用,而p38特异性抑制剂SB203580抑制了JAR细胞的侵袭能力.结论p38MAPK通路在人滋养细胞的侵袭行为以及人绒癌的形成中具有重要作用.p38 MAPK抑制剂可能会为人绒癌的防治提供新的途径.
作者:张曦倩;赵晓山;庞战军;李红;陈思梅;罗仁;陈士岭;邢福祺 刊期: 2003年第08期
扩散因子(肝细胞生长因子)(SF/HGF)是一种多功能的生长因子,与肿瘤细胞的增生、血管生成、侵袭性密切相关.本研究的目的是探索HGF在子宫内膜异位症发病机制中的作用及HGF与子宫内膜异位症发生发展的关联.本研究应用酶联免疫吸附反应技术检测了126位妇女(其中72位为子宫内膜异位症患者,54为正常对照)血清及腹水中HGF浓度.与对照组比较,Ⅰ/Ⅱ和Ⅲ/Ⅳ子宫内膜异位症患者血清和腹水中的HGF浓度升高,3组妇女腹水中HGF浓度分别为(0.337±0.065)、(0.458±0.160)、(0.915±0.113)ng/ml.血清中HGF浓度分别为(0.335±0.663)、(0.456±0.151)、(0.907±0.17)ng/ml.Ⅲ/Ⅳ子宫内膜异位症患者血清和腹水中HGF浓度与Ⅰ/Ⅱ期患者和对照组比较,差异有统计学意义.王组妇女血清与腹水的HGF浓度均呈正相关.HGF浓度与月经周期无明显相关.处于同一月经周期的患者与正常妇女血清及腹水HGF浓度比较,显示HGF浓度的升高主要是子宫内膜异位症的发生和发展相关,与月经周期无明显相关.
作者:宗利丽;李亚里;哈小琴 刊期: 2003年第08期
目的观察并探讨免疫细胞标志物及其活化抗原在严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome,SARS)病变组织中的表达及其在SARS发病中的作用.方法采用14种免疫细胞标志物及其活化抗原,用免疫组化DAB及碱性磷酸酶(AP)双重染色法检测3例SARS尸检病变肺、脾、淋巴结免疫细胞及其活性表达情况.结果(1)病变肺、脾、淋巴结内均可见大量增生的单核巨噬细胞,部分经CD25标记显示阳性(活化单核巨噬细胞).(2)肺组织炎症灶内可见散在的CD45RO阳性T淋巴细胞,而KI67阳性的T淋巴细胞(活化T淋巴细胞)则很少表达.(3)淋巴结内经KI67及CD45RO双染标记的T淋巴细胞(活化的T淋巴细胞)呈散在阳性;T淋巴细胞亚群数量均明显减少,CD4+、CD8+T淋巴细胞及NK细胞减少则更为严重.结论单核巨噬细胞在SARS发病过程中活性显著增加,为主要反应细胞,而T淋巴细胞亚群则显著减少.单核细胞及T淋巴细胞可能在SARS发病机制中起着重要作用.
作者:贺莉;丁彦青;王蔚;张庆玲;张进华;耿舰;蔡俊杰;王慧君 刊期: 2003年第08期
目的研究舌癌MRI表现及MRI对舌癌术前分期的价值,以指导临床分期,制定佳治疗方案.方法前瞻性分析39例舌癌患者,行MRI检查;分析其MRI征象,术前MRI分期,并与病理结果进行对照研究.结果MRI对肿瘤的累及部位、深度和范围有较好显示,但对小淋巴结的检测和鉴别淋巴结的性质存在困难.MRI对原发灶T1~T4TNM分期敏感性分别为100%、83.3%、90.9%和82.6%,特异性为63.5%、83.5%、63.6%和82.6%;判断淋巴结转移的敏感性为60.8%.特异性为75.0%,准确性为66.7%,阳性预测值为77.8%,阴性预测值为76.2%;术前AJCC分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期敏感性分别为100%、85.7%、92.3%和88.9%,特异性分别为66.7%、76.3%、76.9%和77.8%.舌癌浸润深度小于3、3~6、6~9和大于9 mm 4组的淋巴结转移有明显差异(P<0.05),6~9 mm组与大于9 mm组之间无明显差异(P<0.05).结论MRI可作为舌癌TNM分期、AJCC分期的重要依据,MRI征象、临床表现结合舌癌浸润深度可提高舌癌术前分期准确性.
作者:曾辉;梁长虹;周正根;郑君惠;曾琼新 刊期: 2003年第08期
目的检测SARS病变组织标本中的细胞凋亡情况和凋亡细胞类型,探讨细胞凋亡在SARS发病过程中的作用及可能机制.方法DNA片段原位末端检测和免疫组化碱性磷酸酶法单染和双染检测正常组织和SARS病变组织中的细胞凋亡以及白细胞分化相关抗原CD3、CD4、CD8、CD45RA、CD20、CD68的表达情况.结果与正常组织相比,SARS病人的脾脏、肺组织和淋巴结细胞凋亡明显增多,凋亡细胞包括肺泡上皮细胞、淋巴细胞和单核/巨噬细胞等;各病变组织内均有大量CD68+单核/臣噬细胞;病变肺组织基本没有CD45RA+/CD20+B细胞和CD44+/CD8+T细胞浸润,淋巴结和脾脏的CD4+/CD8+/T细胞、CD45RA+/CD20+B细胞也明显减少,现存的具有上述抗原特性的T细胞和B细胞较少凋亡.结论(1)细胞凋亡现象在SARS病变组织中普遍存在,提示细胞凋亡在SARS发病过程中起一定作用;(2)病变组织内浸润的炎细胞主要为单核细胞,说明单核细胞可能在SARS发病中起重要作用;(3)淋巴结和脾脏的细胞凋亡现象和CD4+/CD8+T细胞及CD45RA+/CD20+B细胞减少提示SARS病毒可能对免疫细胞有一定的杀伤效应.
作者:张庆玲;丁彦青;贺莉;王蔚;张进华;王慧君;蔡俊杰;耿舰;陆药丹;罗元龙 刊期: 2003年第08期
目的探讨儿童支气管哮喘急性发作时并发低钾血症的发生率和临床特点.方法对56例支气管哮喘急性发作并发低钾血症患儿的临床资料进行分析.结果并发低钾血症患儿21例,发生率为37.5%.在哮喘急性发作及其治疗过程中,存在多种原因可导致低钾血症,但其临床表现缺乏特异性而易漏诊.结论儿童哮喘急性发作时并发低钾血症的发生率高,具有潜在危险性.尤其对正在使用糖皮质激素,β2受体激动剂的患儿,更应及时补钾.
作者:王水有;徐庭云 刊期: 2003年第08期
目的探讨肾外伤的影像学诊断方法的选择和临床意义.方法回顾我院74例肾外伤的影像学检查方法,评价静脉尿路造影、B超、CT对肾外伤的诊断价值.结果静脉尿路造影、B超、CT诊断阳性率分别为89%(43/49)、80%(55/68)和100%(51/51).结论静脉尿路造影方法快捷,B超无创且廉价,CT检查准确.
作者:张鹏;郑少斌;谭万龙;刘成山;周海宽;陈彤;齐桓;姜耀东;杜跃军;吴芃 刊期: 2003年第08期
目的探讨2型糖尿病血糖与胰岛素释放的关系,以及血糖水平对由血糖刺激的胰岛素释放的影响.方法124例2型糖尿病在停用口服降糖药或胰岛素24h后行75 g口服葡萄糖耐量试验(OGTT)和胰岛素释放试验(IRT),对血糖和胰岛素结果进行相关分析,并分析空腹和餐后血糖的高低、峰值血糖的时相、血糖峰基比等对基础和刺激后胰岛素释放的影响.结果空腹血糖与IRT 5个时间点胰岛素水平以及胰岛素峰值水平(Imax)和峰基比(M/Bi)都有明显负相关;OGTT负荷后血糖与IRT的刺激后胰岛素有不同程度的负相关,特别是所有5点血糖及峰值血糖与1、2 h、峰值胰岛素水平和M/Bi呈负相关.但血糖峰基比(M/Bg)和5点胰岛素和Imax呈显著正相关.空腹血糖大于11.1 mmo1/L者,其IRT的高胰岛素浓度及峰基比仅为小于11.1 mmo1/L的1/3(P<0.01);峰值血糖大于16.7 mmol/L者的Imax和M/Bi不足小于16.7 mmo1/L者的1/2(P<0.01~0.05);血糖峰基比大于两者Imax和M/Bi明显高于较小者(P<0.01);峰值血糖时相越延迟,Imax和M/Bi就越低.结论2型糖尿病高血糖(基础血糖或负荷后血糖)对由葡萄糖刺激的胰岛素释放具有明显的抑制作用.
作者:许斯华;金文胜;林延德 刊期: 2003年第08期
目的研究乙型肝炎病毒多表位治疗性疫苗基因的合成、表达及其产物的抗原性.方法设计、并合成乙型肝炎病毒多表位抗原基因BPT,克隆入融合表达载体pWR450-1,构建重组质粒PWR/BPT.在大肠杆菌中表达乙型肝炎多表位抗原蛋白并纯化该蛋白,并用Westem-blotting方法初步检测该抗原蛋白的抗原性.结果成功构建了融合表达载体PWR/BPT,在大肠杆菌中表达出乙型肝炎多表位抗原蛋白,Western-blotting检测显示该蛋白具有良好抗原性.结论HBV多表位治疗性抗原基因的设计是成功的,其在大肠杆菌中表达的重组融合蛋白具有良好的抗原性,可能是较理想的HBV治疗性疫苗候选物.
作者:骆利敏;李明;夏虎;黄建生;陈百虹;王萍 刊期: 2003年第08期
目的研究整合素α5β1在大肠癌及癌旁组织中的表达与肿瘤细胞分化、转移等生物学行为的关系.方法用免疫组化Ev二步法检测81例大肠癌及相应癌旁组织石蜡标本整合素α5β1的表达情况.结果在81例大肠癌组织中整合素α5β1表达量与相应的癌旁组织相比差异有显著性(P<0.05),癌旁组织中整合素α5β1的表达量明显降低.低分化大肠癌组织中整合素α5β1的表达量高于高分化大肠癌,有显著性差异(P<0.05).整合素α5β1在大肠癌的表达与是否有淋巴结转移无相关性(P>0.05).结论整合素α5β1的表达与大肠癌癌变及癌细胞的分化关系较密切,与癌组织发生淋巴结转移的关系不明显.整合素α5β1的表达量可作为大肠癌发生、发展过程中的一种较有价值的病理学指标.
作者:周军;丁彦青;杨红军;张进华;陈艾保 刊期: 2003年第08期
目的探讨一种获得足量、纯度高和功能良好的大鼠胰岛细胞的体外培养方法.方法采用胶原酶对胰腺组织进行分次短时间消化;细胞接种18 h时,倒置显微镜下观察细胞生长情况;将细胞转入新的培养板培养,定期收集培养液上清.分别检测胰岛素、淀粉酶含量及葡萄糖刺激下的胰岛素分泌水平.结果SD大鼠乳鼠原代培养的胰岛细胞中成纤维细胞明显减少,双硫腙可染率85%~90%,锥虫兰染色细胞活力90%以上,培养7~11d的细胞分泌功能正常.结论用胶原酶反复短时间消化胰腺组织,细胞接种后及时转板的方法可获得纯度较高、生长良好、适合实验研究的胰岛单层细胞.
作者:姜一真;薛耀明;程宝鸾;朱姿英;沈洁;周琳 刊期: 2003年第08期
目的探讨谷氨酸脱羧酶抗体(GAD-Ab)检测在2型糖尿病患者早期诊断中的意义.方法比较2型糖尿病患者GAD-Ab阳性组12例与阴性组86例的临床特征、体重指数、C肽、糖化血红蛋白等指标.结果GAD-Ab阳性组发病年龄低于阴性组,空腹及餐后2 hC肽值较低,使用胰岛素者比例较高,酮症酸中毒发生率高.结论检测2型糖尿病患者的GAD-Ab可帮助临床上早期发现迟发自身免疫糖尿病病人,尽早采用胰岛素治疗,对保护残存的胰岛功能有重要意义.
作者:黄玉宇;黄萍;楼慧玲 刊期: 2003年第08期
目的探讨广州市城市成年居民体质指数(BMI)、腰围(WC)对于预测和诊断高血压的实用价值和建议值,为确定肥胖和腹部肥胖的诊断指标及其界值提供科学依据.方法多阶段随机抽取广州市越秀区1 265名居民,进行问卷调查及身高、体质量、腰围和血压的测量.进行多元线性回归分析及logistic多因素分析.结果成年人体质指数、腰围分布存在明显的性别、年龄差异;平均收缩压和舒张压随着体质指数和腰围的增加而呈逐渐上升趋势,多元线形回归分析表明体质指数、腰围和血压值有明显的线形相关关系;控制年龄、性别、教育程度等混杂因素后,1ogistic回归分析显示发生高血压的危险性随着体质指数和腰围的增加而升高.结论建议以BMI为肥胖指标,BMI≥23诊断为超重、BMI≥29诊断为肥胖;以腰围为腹部肥胖指标,WC≥80为诊断界值.
作者:方芳;聂军 刊期: 2003年第08期