李黎波；罗荣城
目的采用SMART(switching mechanism at 5'end of RNA transcript)技术,快速构建高质量的人脑胶质瘤组织全长cDNA文库.方法提取多份人脑胶质瘤组织标本的总RNA,混合后处理得到纯化的mRNA,利用CDSⅢ/3'PCR引物(含SfiⅠB酶切位点)反转录,用SMARTⅣOligo(dT)(含SfiⅠA酶切位点)作为mRNA5'端延伸出去的模板,合成多出一段SMARTⅣOligo(dT)互补序列的cDNA第一链,进而以此序列为引物合成全长的双链cDNA.双链cDNA经SliⅠ(A＆B)酶切后克隆入经SfiⅠ酶切的λTriplEx2载体,再经噬菌体包装蛋白包装成为cDNA文库.结果获得2.4×106个重组子,重组率达100%,文库扩增后,滴度达4.5×109pfu/ml,插入cDNA平均长度为1.2kb.结论成功构建高质量的人脑胶质瘤组织全长cDNA文库,为进一步筛选、克隆人脑胶质瘤抑癌基因及特异性表达基因奠定基础.
作者：涂艳阳；徐如祥；杨志林；姜晓丹；吴曙光；陈一招；蔡颖谦；杜谋选；高杨 刊期： 2003年第09期
目的构建正、反义hTERT基因真核表达载体,为进一步研究端粒酶的活性调节与恶性肿瘤基因治疗作准备.方法根据已发表在Genebank的hTERT cDNA序列,设计并合成了1对两端带特定限制性酶切位点引物,提取子宫颈癌HeLa细胞株总RNA,进行RT-PCR,并将扩增产物TA首先克隆至pGEMR-T载体,然后双酶切pGEM-T载体回收目的片段再克隆至真核表达质粒pcDNA3.1(±)中,并对重组体进行酶切鉴定和测序分析.结果 PCR扩增片段与预期结果相符,双酶切证实构建的正、反义hTERT基因真核表达载体克隆成功,插入片段测序结果与Genebank的hTERTcDNA的部分序列完全一致.结论成功地构建了正、反义hTERT基因真核表达载体,为下一步研究端粒酶的活性调节与恶性肿瘤基因治疗打下了实验基础.
作者：孙来保；李成荣；文剑明；张萌 刊期： 2003年第09期
目的反复多次化疗的晚期肿瘤患者的癌性贫血是临床上治疗的难点,通过分析这些患者的血清促红细胞生成素(EPO)的水平,指导临床治疗以提高患者的生存质量.方法对38例癌性贫血患者用ELISA进行血浆EPO的检测.结果24例患者血浆EPO高于正常值,仅1例低于正常值.讨论 EPO是调节哺乳动物红细胞生成的主要因子,晚期癌性贫血患者的EPO血清水平正常或高于正常,说明机体的自身调整功能强大,对于临床治疗上EPO的应用有重要的指导意义.
作者：李黎波；罗荣城 刊期： 2003年第09期
目的比较川芎嗪注射液及复方丹参注射液在辅助治疗妊娠高血压综合征(PIH)中的作用,探讨两药在改善微循环及胎儿宫内缺氧方面的差异,进一步指导临床用药.方法选取2001年6月～2002年6月在我院住院治疗的60例PIH患者,平均分为2组,在有效镇静、解痉、降压、低流量吸氧等治疗的基础上,分别给予静脉滴注川芎嗪注射液及复方丹参注射液治疗1个疗程.结果川芎嗪组抑制纤溶、改善微循环的效果显著;复方丹参组主要降低血液粘稠度、降低胆固醇及血酯.结论川芎嗪及复方丹参对PIH有肯定的治疗作用,由于两药的临床作用不同,需有针对性用药.
作者：王雪峰；赵苗青 刊期： 2003年第09期
目的比较两种麦管系统对小鼠囊胚的玻璃化冷冻比较,以期建立一种有效的囊胚冷冻方法.方法分别应用开放麦管系统和传统麦管系统对小鼠扩张囊胚进行玻璃化冷冻,比较冷冻复苏以后囊胚的存活率和孵出率.结果应用开放麦管系统冷冻的小鼠囊胚复苏后的存活率(82.3%)显著高于应用传统麦管系统者(68.6%,P＜0.01).前者冷冻的小鼠囊胚复苏后的囊胚孵出率(70.3%),也明显高于应用传统麦管系统者(57.1%,P＜0.05).结论应用开放性麦管系统进行小鼠囊胚的玻璃化冷冻是一种行之有效的冷冻方法.
作者：朱亮；罗琛；黄敏珍；李红；邢福祺 刊期： 2003年第09期
目的观察胰淀素对体外培养的大鼠胰岛细胞功能的影响,探讨胰淀素在2型糖尿病发病过程中的作用.方法应用体外单层培养大鼠胰岛细胞,检测不同浓度胰淀素对细胞胰岛素分泌、细胞内DNA及胰岛素含量的影响.结果 10μmol/L以上胰淀素作用2 h后,可抑制高糖(16.7 mmol/L)刺激下的胰岛素分泌(P＜0.01),并呈剂量依赖性.10μmol/胰淀素作用后,胰岛β细胞内DNA、胰岛素含量升高,与对照组相比有显著性差(P＜0.01).结论 10 μmol/L以上胰淀素可显著抑制高糖刺激下大鼠胰岛素的分泌与释放.
作者：周琳；薛耀明 刊期： 2003年第09期
目的探讨老年人十二指肠乳头旁憩室与胆胰疾病的关系.方法经内镜逆行胰胆管造影确诊的60岁以上十二指肠乳头旁憩室患者102例,对所有病例行B超及/或CT扫描并做实验室检查以确定其所患胆胰疾病,分析憩室与胆胰疾病的关系.结果全组并发胆系结石75例,占73.53%.各种胰腺炎共21例占20.6%.34例胆囊切除患者中29例继发胆总管结石,占85.29%.结论老年人十二指肠乳头旁憩室与胆胰疾病有关,特别与胆系结石及胆囊切除术后继发胆总管结石关系密切.
作者：张卫中；许明策；史志红；杨亚莉 刊期： 2003年第09期
目的探讨抗氧化维生素(维生素E和维生素C)对提高大鼠运动能力的作用.方法雄性SD大鼠50只,随机分为5组,即安静对照组(C)、力竭对照组(E)、维生素E组(M1)、维生素C组(M2)、维生素E和维生素C联合组(M3),除C组外均进行4周的反复力竭跑台训练.测定大鼠运动总距离、体质量、股四头肌湿质量、股四头肌线粒体丙二醛(MDA)、游离钙、超氧化物歧化酶(SOD)等指标.结果 M1组和M3组大鼠运动能力显著强于E组,体质量、总运动距离和单侧股四头肌湿质量显著大于E组,单侧股四头肌湿质量显著大于C组,M3组大鼠体质量显著大于A组,M1组和M3组线粒体游离钙、MDA值显著低于E组,SOD活性显著高于力竭对照组;M2组体质量、运动总距离、单侧股四头肌湿质量与E组无显著差异,但骨骼肌MDA、游离钙、SOD等指标与E组相比有显著差异.结论单独应用维生素E对反复力竭运动大鼠机体有保护作用,可提高反复力竭运动大鼠的线粒体功能和运动能力,联合应用维生素C可加强这种作用.单独应用维生素C显示了一定的保护反复力竭运动骨骼肌的作用,但不足于提高运动能力.
作者：余斌；覃承诃；罗吉伟；杨建成；林文弢；翁锡源；黄丽英 刊期： 2003年第09期
目的探讨中医药对放射性肺损伤的防治方法.方法根据放射性肺损伤的发生发展规律、临床症状、辅助检查、病理特点等对其进行归纳分类,分为隐匿期、急性期、发展期3期,分别予以益气养阴、润肺止咳,清热解毒、宣肺化痰,益气活血、补肾纳肺等对症治疗.结果分期后临床中、西医师均能比较容易掌握放射性肺损伤中医药防治的时机和方法,能及时、适当地给予中医药辅助治疗;配合中药治疗急性放射性肺炎、放射性食管炎、白细胞减少、半年复发转移的发生率降低,患者精神、食欲、睡眠等均优于对照组,患者生活质量提高.结论本方法简单、实用,打破了西医不能辨证论治的惯例,适合于在临床推广.
作者：蔡红兵；罗荣城 刊期： 2003年第09期
C型皮瓣是目前修复手指末节脱套伤的一种较为先进的方法.我院1999年5月～2002年9月应用中指、环指中节逆行C型皮瓣修复拇指、食指末节脱套伤9例,所有皮瓣均成活,外形满意.此方法易行、简便,术后断蒂早.但范围局限,感觉较差,对供指外观有一定影响.
作者：张兴阳；王甲汉 刊期： 2003年第09期
目的探讨颈部深度烧伤后预防瘢痕增生挛缩畸形、避免多次整复手术的较佳治疗方法.方法颈部深度烧伤早期,采用保守削痂保留少量无生机组织.削痂后分创面给予保护,全身抗感染治疗,并予混有溶痂及促进上皮生长和局部抗炎药物的纱布覆盖创面.延期采用大张自体中厚皮片或全厚皮片修复创面,术后予热塑夹板(颈托)固定.结果本组13例患者伤后3周内创面愈合,随诊未发现明显瘢痕增生挛缩畸形,颈部活动自如,无颏、颈、胸粘连情况出现.结论 本方法可促进颈部创面修复,减少瘢痕增生挛缩畸形的发生,无需整复手术纠正颈部再次瘢痕增生挛缩畸形.
作者：柳晖；张显文；陈武鹏 刊期： 2003年第09期
目的观察深度烧伤和瘢痕切除创面进行猪脱细胞真皮与自体刃厚皮一步法与两步法复合移植的临床效果.方法 2000年4月～2002年12月间用猪脱细胞真皮与自体刃厚皮复合移植修复深度烧伤创面或瘢痕切除创面16例,对一步移植法和两步移植法进行比较.结果一步移植法中,4例植皮完全成活,3例植皮95%以上成活,1例植皮80%成活;两步移植法中,5例植皮完全成活,3例植皮95%以上成活.均无1例补植皮.随访6个月～2年,一步和两步移植法中的复合移植皮肤外观、质地基本接近正常皮肤,瘢痕增生不明显.结论猪脱细胞真皮与自体刃厚皮复合移植是深度烧伤创面、瘢痕切除创面的良好修复材料,一步移植法可行、简便、实用.
作者：何国；林新华；钟泉 刊期： 2003年第09期
目的研究人发角蛋白(HHK)神经导管诱导兔胫神经缺损再生修复时神经生长因子(NGF)及其低亲和受体p75的表达及分布.方法取正常胫神经、缝线连接的胫神经和HHK导管桥接的胫神经术后不同时期的切口部位及相邻组织制作石蜡切片,用免疫组化法对切片进行染色.结果正常胫神经组织中无NGF阳性染色.术后76d,HHK周围的新生组织中NGF免疫组化染色表现为强阳性,而缝线周围的组织中无阳性着色.术后100d,与正常胫神经组织无显著差异.正常胫神经组织中无p75阳性染色.术后76 d,导管组HHK周围较成熟的神经组织中p75免疫组化染色为弱阳性,而新生组织中为强阳性.术后100d,导管组的p75免疫组化染色与正常神经组织无显著差别.结论 HHK及其降解产物能诱导NGF和p75的产生,为神经再生创造良好的微环境;而缝线无此诱导作用.在新生神经组织中NGF和p75含量多,较成熟的神经组织中含量少.
作者：胡庆柳；朴英杰；邹飞 刊期： 2003年第09期
目的利用反义RNA抑制靶基因表达的策略,下调EGFR的表达而探讨对人类低分化鼻咽癌CNE-2细胞的恶性表型的抑制性效应.方法将人EGFR的N-端1.35kb片段反向构建入逆转录病毒表达载体pLXSN中,并用脂质体介导转染人鼻咽癌CNE-2细胞,G418筛选并分离阳性克隆,将两个EGFR反义cDNA转染的克隆细胞命名为CNE-2/AS4和CNE-2/AS8,而空载体转染的细胞命名为CNE-2/pLXSN.125I-EGF配体结合分析细胞膜上EGFR的表达,台盼蓝染色法测定细胞生长的改变,并用软琼脂集落形成实验检测细胞转化,后,将筛选的各组阳性克隆细胞分别注射入裸鼠皮下,不同时间观察肿瘤生长的抑制改变及肿瘤的转移状况.结果配体结合实验结果显示,两个选择的克隆CNE-2/AS4和CNE-2/AS8细胞表面EGFR的数量分别较未转染细胞CNE-2下降18%、45%,表明EGFR反义RNA的表达下调了细胞膜上EGFR的表达;同时,EGFR反义RNA表达的CNE-2细胞生长速率和软琼脂生长能力也较对照组细胞明显降低.注射入裸鼠皮下后,EGFR反义RNA表达的阳性克隆细胞表现出肿瘤生长减慢,淋巴结和肺转移能力也明显降低.结论这些实验结果提示EGFR反义cDNA转染的CNE-2细胞能下调EGFR的过量表达并部分抑制鼻咽癌的恶性表型,这为进一步阐明EGFR在鼻咽癌的发生、演化中的功能作用提供了有用的工具.
作者：邓凡；王瑜；曾方银；邹志鹏；白晓春；陆地；柯志勇；罗深秋 刊期： 2003年第09期
目的分析难治性急性髓系白血病(AML)的预后因素,为难治性AML治疗方案的选择提供理论基础.方法选取接受了2个标准DA方案诱导治疗的48例复发性难治性AML患者,分析患者年龄、性别、对标准诱导治疗的反应,遗传学异常、骨髓中白血病细胞比例、外周血情况、髓外浸润以及乳酸脱氢酶(LDH)等因素对患者生存期的影响.结果 经Cox回归分析显示,患者在标准诱导治疗后达到完全缓解、缓解期大于6个月、有较好预后的细胞遗传学异常、骨髓白血病细胞比例小于50%、无严重贫血、无肝脾肿大和中枢神经系统白血病、血清LDH小于360 U/L者预后较好;而年龄、性别、外周血白细胞总数以及淋巴结肿大对患者生存期无明显影响.结论对于有较好预后因素的AML患者应给予积极的治疗,争取较长的持续缓解期;对于预后差的病例应尽快予以异基因骨髓移植.
作者：张青；冯茹；刘启发；刘晓力；徐冰；郑维扬；孟凡义；周淑芸 刊期： 2003年第09期
目的研究人体膝关节股骨-胫骨复合体模型在人体体重冲击下的运动力学响应特点及膝关节软骨关节面在载荷传导中的缓冲作用.方法通过中国数字化虚拟人体男l号膝关节部位的计算机三维重建图像,建立股骨-胫骨复合体的有限元模型,模拟人体行走中单腿着地情况对模型施加自身体重冲击载荷,分析关节面软骨在载荷传导中的缓冲作用.结果 (1)在模拟人体单腿着地情况下,股骨-胫骨复合体模型在压缩过程中伴随前伸运动;(2)载荷传导集中于关节面接触部位,应力传导至关节面软骨层时发生分散衰减现象.结论 (1)股骨-胫骨复合体在纵向冲击载荷下运动不稳明显表现为前伸;(2)软骨关节面有缓冲载荷冲击的作用.
作者：张美超；张余；黄华扬；黄文华；赵卫东 刊期： 2003年第09期
目的探讨肝肾联合移植的手术技术、围手术期处理、感染及排斥等并发症的防治措施.方法对1例66岁酒精性肝硬化终末期并慢性肾功能不全尿毒症患者施行一期肝肾联合移植.供体器官采用UW液联合原位灌洗、整块切取,肝移植采用原位非转流移植技术,肾移植采用常规方法置于右髂窝.术后免疫抑制剂采用普乐可复、霉酚酸酯、抗胸腺淋巴细胞球蛋白和皮质类固醇激素联合应用,行免疫指标及移植肝、肾多普勒超声监测.结果移植后肝、肾立即发挥作用,术后24 h胆汁380 ml,尿量8 500 ml,第3天肝、肾功化验指标正常,术后第10天移植肝发生急性排斥反应,经调整普乐可复浓度并行甲基强地松龙冲击治疗后控制.术后第29天康复出院.随访1年肝肾功能正常,日常生活自理.结论肝肾联合移植是治疗肝、肾同时衰竭的有效方法,良好的组织配型、娴熟的技术、免疫抑制剂的合理应用、术后并发症的正确处理是成功的关键.
作者：于立新；徐健；邓文锋；李川江；叶桂荣；付绍杰；杜传福；马俊杰；王亦斌；刘小友；姚冰 刊期： 2003年第09期
目的探讨慢性肾炎患者血清金属蛋白酶组织抑制因子-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)浓度的变化及意义,并观察氯沙坦治疗对TIMP-1浓度的影响.方法以酶联免疫吸附试验检测45例慢性肾炎患者及10例健康志愿者血清TIMP-1浓度,分析其与肾组织纤维化程度的相关性;并将慢性肾炎患者分为2组,治疗组25例,在常规治疗的基础上加用氯沙坦,对照组20例,单用常规治疗,观察治疗前后血清TIMP-1浓度的变化,进行对照分析.结果 慢性肾炎患者血清TIMP-1浓度较正常显著增高;血清TIM-1浓度与肾组织纤维化程度呈正相关.氯沙坦治疗组在改善肾功能、降低尿蛋白及血清TIMP-1浓度方面明显好于对照组.结论血清TIMP-1浓度可反映慢性肾炎患者肾脏纤维化程度,氯沙坦治疗能显著降低慢性肾炎患者血清TIMP-1浓度,提示氯沙坦可通过调节金属蛋白酶活性,从而减缓肾脏纤维化.
作者：汤珣 刊期： 2003年第09期
目的观察缬沙坦对慢性肾病继发性高血压的治疗作用.方法对64例肾性高血压患者应用缬沙坦治疗8周,观测治疗前后的血压及血钾、钠、氯、24h尿蛋白定量、血尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)、血促红细胞生成素(Epo)等的变化.结果应用缬沙坦8周后,血钾、钠、氯、24 h时尿蛋白定量、BUN、SCr、Epo无明显变化(P＞0.05);24 h尿蛋白定量减少(P＜0.05).结论缬沙坦在治疗慢性肾病继发性高血压的过程中对血钾、钠、氯、BUN、SCr及Epo无明显影响,使24 h尿蛋白定量明显减少.
作者：何淑贤；孙升云；凌汉新 刊期： 2003年第09期
目的在一种高效外源基因表达系统--毕赤酵母系统表达重组人内皮抑素,评价纯化的内皮抑素对人肺腺癌Astc-a-1细胞生长抑制的作用,为临床研究做进一步的探讨.方法和结果在酵母系统成功表达了重组人内皮抑素(re-combinant human endostatin),经肝素亲和层析得到了较高纯度的内皮抑素,经过筛选的人内皮抑素能够有效抑制ECV-304细胞的增殖,并与对照组有非常显著性差异(P＜0.01);动物实验表明其能够有效抑制裸鼠肺腺癌Astc-a-1细胞的生长,统计学分析有非常显著性差异(P＜0.01).结论酵母系统内能够大量表达具有生物学活性的重组人内皮抑素,能在人体外有效抑制裸鼠肺腺癌Astc-a-1的生长,对其应用于临床具有重要意义.
作者：张琳；宋安乔；文金序 刊期： 2003年第09期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
