裘艳梅；侯洪涛；王炜；叶秀春；李月梅；马素苓
目的：原核表达并纯化人博卡病毒结构蛋白 VP2，并建立间接酶联免疫法，用于病毒感染的检测。方法：本研究采用PCR法从菌种模板WHL-1扩增出人博卡病毒结构蛋白VP2基因片段，克隆至表达载体pET28a中，转化到菌BL21（DE3），经过诱导产生融合蛋白，使用Western blot 检测，并以该蛋白为包被抗原建立检测血清人博卡病毒的间接酶联免疫法。结果：重组原核表达质粒经双酶切鉴定构建正确，并可与人博卡病毒 IgG阳性血清发生特异性反应，建立的间接酶联免疫法佳抗原包被浓度为2 mg／mL ，血清的佳稀释倍数为1∶200，封闭以1％BSA封闭效果佳，酶标二抗的佳工作稀释度为1∶4000，工作时间佳为1 h，该检测方法有较好的特异性和重复性。建立的间接 ELISA 方法 Cut-off 值为0．1，灵敏度为92％，特异性为98％，与对照试剂检测结果的符合率为97％。结论：原核表达并纯化了人博卡病毒结构蛋白VP2蛋白建立的间接酶联免疫法，为人博卡病毒的血清抗体检测方法提供了依据。
作者：张允奇；何涛君；陆学东；张银辉 刊期： 2016年第17期
目的：探讨应用小腿外侧腓肠神经营养血管逆行岛状皮瓣修复足跟部损伤术后感染创面缺损的临床疗效。方法：回顾性总结2010年7月至2015年10月，应用小腿外侧腓肠神经营养血管逆行岛状皮瓣转移治疗足跟部损伤术后创面反复不愈合，彻底清除坏死组织、VSD 护创促进肉芽组织生长满意后，修复缺损的患者16例，年龄40～75岁，平均60．5岁，皮肤坏死缺损时间3个月～2年，平均10个月，缺损面积4．0 cm ×5．5 cm ～10．5 cm ×5．5 cm，术后1、3、6、12个月随访，观察皮瓣的成活及外观，抗磨抗压性，穿鞋及负重行走及皮瓣的感觉恢复情况。结果：16例患者均获随访，随访内容包括创面愈合情况、皮瓣成活情况、功能活动以及满意度等。所有患者感染有效控制，皮瓣移植全部成活，其中1例皮瓣边缘1个窦道，边缘有点发黑坏死，经换药后痊愈。皮瓣外观良好，色泽正常，随访1～12个月，随访发现均正常穿鞋，无皮瓣磨损、溃烂，抗压良好，行走步态正常，皮瓣两点辨别觉恢复至5～8 mm ，供皮区植皮全部成活，轻度色素沉淀，瘢痕不明显，对行走无任何影响，采用美国足踝外科学会评分系统评价踝关节功能显示优14例，良1例，可1例，优良率为93％，患者满意。结论：应用小腿外侧腓肠神经营养血管逆行岛状皮瓣是修复足跟损伤术后皮肤坏死缺损提供了良好的覆盖，皮瓣外观、血运、质地、弹性佳，踝关节功能恢复良好，操作简便，具有较好的实用性，宜于推广。
作者：刘伟；杨康胜；麦海妙；夏坚祯；杨文娜；区广鹏；黄瑞良；余斌 刊期： 2016年第17期
非霍奇金淋巴瘤（non-Hodgkin′S lymphomas， NHLs）是发于淋巴结及结外淋巴组织的一种发病率、病死率较高的造血系统恶性疾病，其形态学特点、免疫表型、遗传规律、临床表现各不相同，具有高度异质性，发病率与病死率较高，有逐渐上升的趋势，且经典化学疗法的效果及预后差强人意［1］。近年来与氧化应激、自噬相关的靶向治疗研究取得一定成效，本文主要对NHL治疗中二者的作用及相互关系的新近研究进展进行阐述。
作者：赵雅淇；赵建美 刊期： 2016年第17期
目的：探讨人主动脉血管平滑肌细胞（T／G HA-VSMC）在缺血缺氧时内质网应激蛋白 CHOP-10的表达与细胞迁移的关系。方法：将传代培养的T／G HA-VSMC分为正常对照组及缺血缺氧组。缺血缺氧组又分为 CHOP-10基因沉默组以及阿托伐他汀干预组；24 h 后采用 RT-PCR 和 Western blot 法检测细胞中CHOP-10的表达；ELISA 法检测细胞培养液中 MMP-9及 MMP-2的浓度；Transwell 趋化小室测试细胞迁移情况。结果：与正常对照组相比，缺血缺氧组 CHOP-10表达明显升高（P ＜0．01），细胞培养液中 MMP-9及MMP-2的浓度明显增加（P ＜0．01），且细胞迁移率也显著增加（P ＜0．01）。而CHOP-10基因沉默或用阿托伐他汀干预后，MMP-9及MMP-2的分泌减少，且显著抑制细胞的迁移率（P ＜0．01）。结论：缺血缺氧可引起人VSMC内质网应激，通过上调CHOP-10的表达及基质金属蛋白酶的分泌促进细胞迁移；而下调CHOP-10或阿托伐他汀干预可能影响通过CHOP-10的表达减轻内质网应激抑制细胞迁移。
作者：滕林；周飞；杨伟；姜玉蓉；曹春雨；杨简；王雅琴；陈勇；李松；丁家望；杨俊 刊期： 2016年第17期
目的：检测白癜风患者外周血Th17和Treg 细胞的转录因子RORγt与Foxp3 mRNA的表达，探讨其在白癜风发病机制中的作用。方法：选取白癜风患者85例，采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（QRT-PCR）方法，检测外周血单一核细胞中RORγt和Foxp3 mRNA水平。结果：进展期和稳定期白癜风患者外周血中RORγt mRNA的表达量均显著高于正常对照组，进展期和稳定期白癜风患者外周血中 Foxp3 mRNA的表达量显著低于正常对照组。同时进展期外周血中RORγt mRNA的表达量及RORγt／Foxp3的比值显著高于稳定期，而进展期Foxp3 mRNA的表达量则显著低于稳定期。结论：白癜风患者外周血转录因子RORγt及Foxp3的异常表达可能与其发病密切相关。
作者：邱会芬；王雯；王忠永；胡海友；孙其乐 刊期： 2016年第17期
T淋巴细胞在抗肿瘤免疫中发挥重要作用。根据细胞表面CD 分子的不同，T 细胞可分为CD4＋T 细胞和CD8＋T 细胞。 CD4＋T 细胞活化后的主要效应细胞为辅助性 T 细胞（help T lymphocyte， Th），CD8＋T 细胞活化后的主要效应细胞为细胞毒性T细胞（cytotoxic T lymphocyte， CTL）。CTL对肿瘤细胞起直接杀伤作用，Th对CTL的免疫活性起调节和促进作用。
作者：杨秋玉；陈俊辉 刊期： 2016年第17期
目的：研究射频消融及手术治疗不同大小小肝癌的无瘤生存率及复发转移率。方法：回顾性分析我院2008年10月至2010年10月64例肝癌患者的临床资料，均为单发肿瘤且肿瘤大小≤5 cm，根据首次治疗方法分组，射频消融29例（射频组），手术切除35例（手术组），再根据肿瘤大小将两组分为＜3 cm组及3～5 cm组，观察两组手术清除率、并发症发生率，随访比较两组治疗后不同大小肝癌的复发转移率及1、3、5年无瘤生存率，同时对两组1、3、5年累积生存率进行比较。结果：射频组肿瘤清除率、并发症发生率分别为89．66％、6．9％与手术组（100％、14．29％）比较差异无统计学意义（P＞0．05）。对于＜3 cm肝癌患者，射频组复发转移率及1、3、5年无瘤生存率分别为60．00％、80．00％、40．00％、30．00％与手术组（38．46％、84．62％、61．54％、38．46％）比较差异无统计学意义（P ＞0．05）；对于3～5 cm的肝癌患者，射频组及手术组以上指标比较差异也无统计学意义（P＞0．05）。射频组及手术组组内比较，＜3 cm与3～5 cm患者无瘤生存率无明显差异（P＞0．05），但复发转移率以＜3 cm 显著较低（P ＜0．05）。射频组1、3、5年累积生存率分别为100．00％、62．07％、37．93％与手术组（100．00％、62．86％、48．57％）比较差异无统计学意义（P＞0．05）。结论：当肝癌患者肿瘤大小≤5 cm时，射频消融、局部手术有基本一致的中远期疗效，肿瘤体积越大的小肝癌患者术后复发及转移率更高，同时射频消融因微创性可避免手术所致一系列并发症，故将射频消融术作为≤5 cm小肝癌外科手术的替代疗法具有可行性。
作者：王军；彭磊；崔海宁；俞炜 刊期： 2016年第17期
目的：探讨丹参注射液对人胚肺成纤维细胞增殖、凋亡及羟脯氨酸表达的影响。方法：转化生长因子β1（TGF-β1）诱导人胚肺成纤维细胞增殖；四甲基偶氮唑蓝法检测丹参注射液对人胚肺成纤维细胞数的影响；免疫细胞化学法检测增殖细胞核抗原表达；流式细胞仪检测细胞凋亡；比色法观察羟脯氨酸表达。结果：（1）TGF-β1（0、2．5、5、10、20、40μg／L）可剂量依赖性地上调人胚肺成纤维细胞的细胞数。丹参注射液可剂量依赖性下调人胚肺成纤维细胞光密度值。（2）TGF-β1（10μg／L）干预人胚肺成纤维细胞24、48 h时，增殖细胞核抗原表达明显上调，与同时间点对照组相比差异有统计学意义（P ＜0．01）。但丹参注射液预处理后，未发现增殖细胞核抗原表达下调。（3）流式细胞仪检测结果显示，丹参注射液预处理后，与TGF-β1组相比，细胞凋亡率增加（P ＜0．05）。（4）丹参注射液可下调人胚肺成纤维细胞羟脯氨酸表达，与TGF-β1组相比差异有统计学意义（P ＜0．01）。结论：丹参注射液可靶向人胚肺成纤维细胞，通过促进其凋亡、下调羟脯氨酸表达影响气道重塑。
作者：屈飞；刘海云；崔艳茹 刊期： 2016年第17期
目的：探讨应用低剂量CT定位穿刺法建立经皮肾通道治疗复杂性肾结石的临床疗效。方法：选择来泌尿外科就诊且确诊为上尿路复杂性结石需行微创经皮肾镜取石术（ PCNL ）进行治疗的患者60例为研究对象，将患者随机分成实验组和对照组，每组30例。实验组通过低剂量CT实时定位进行术前评估，引导肾穿刺，设计穿刺路径，进而对患者进行PCNL手术。对照组则通过常规剂量 CT 实时定位指导 PCNL手术对目标肾盏的穿刺。观察并比较实验组和对照组的手术及住院时间、术中出血量、术后结石清除率、并发症发生率、扫描范围、DLP、CT有效辐射量等指标。结果：PCNL治疗后实验组在手术时间、住院时间和术后下床时间及手术出血量与对照组比较，差异不具有统计学意义（P ＞0．05）；实验组并发症发生率与对照组比较，差异不具有统计学意义（P ＞0．05）；两组的肾结石清除率比较，实验组的清除率与对照组差异不具有统计学意义（P ＞0．05）；低剂量实验组的 CT 有效辐射量明显低于标准剂量对照组，差异具有统计学意义（P ＜0．05）。结论：低剂量CT实时定位技术能够与标准剂量CT实时定位在结石分布、毗邻脏器位置关系以及穿刺深度和角度等的确定上具有相同的敏感性和准确度，而且还能够明显降低患者及医生的CT辐射量，可以作为常规首选的实时定位方法。
作者：陈友华；高吴阳；张永学 刊期： 2016年第17期
目的：通过观察 OLETF 大鼠肝脏组织过氧化物酶增殖体激活受体-γ辅助激活因子1（ PGC-1）表达的变化，初步探讨其在2型糖尿病肝糖代谢中的作用。方法：OLETF 大鼠为实验组，同龄 LETO 大鼠为对照。在8、18和28周龄行 OGTT 试验，测血糖、胰岛素和血脂， Western blot 方法测定肝组织中PGC-1、PEPCK、UCP2的蛋白水平。结果：（1） OLETF 大鼠从8周起体重明显高于对照组，18、28周龄时OGTT 2hBG 和 TG 水平均明显升高，28周龄时空腹胰岛素水平升高，胰岛素敏感指数降低。（2） OLETF大鼠肝脏组织中 PGC-1蛋白表达18、28周时低于对照组，28周时 PEPCK 表达高于对照组，而 UCP2表达低于对照，差异有统计学意义。结论：OLETF18周龄后表现出2型糖尿病病理特点， OLETF 大鼠肝脏 PGC-1、PEPCK 及 UCP2蛋白表达水平的变化，提示 PGC-1可能在2型糖尿病的肝糖代谢中起重要作用。
作者：王念鸿；张俊清；刘林；武一鸣；刘佳；郭晓蕙 刊期： 2016年第17期
患者女，43岁，因心悸、气促8个月来我院就诊，多在活动后症状明显，偶有咳嗽、咳痰，痰不多，无外伤、感染病史，无心脏和肺部疾病史。心脏体查未闻及心前区有杂音，有肺动脉第二心音亢进。心电图正常，胸片提示肺动脉段明显增粗。超声心动图未提示有明显心脏畸形，但测得肺动脉压力明显增高，达68 mmHg ，左心房也明显扩大。行心脏 CT 检查，CT 提示患者左上肺静脉未回流至左心房，而是通过一条垂直静脉汇入无名静脉。见图1、2。提示患者患有罕见的单纯左上肺静脉异位引流，这也解释了患者存在的肺动脉高压和扩大的左心房。
作者：周立；区景松；刘湘；王治平 刊期： 2016年第17期
肝脏是人体重要的生命器官之一，它承担着糖类、脂类、蛋白质、各种维生素以及激素等多种物质的代谢，同时兼顾解毒、防御、免疫、凝血等重要功能，其所承担的重要而复杂的功能决定了它是一个极易受到内外病因侵害的器官［1］。自从1991年妇科医生REICH等［2］报道运用腹腔镜技术成功切除1例肝脏边缘的良性肿瘤，揭开了腹腔镜肝切除（ laparoscopic hepatectomy ， LH）的序幕，经过二十多年的发展，LH已经以传统开腹手术无可比拟的优势被广泛应用于临床。“肝切除术”一直都是肝脏外科领域主要的治疗手段，这在腹腔镜技术逐渐成熟的今天尤显突出，但是肝脏复杂的管道分布和极其丰富的血液供应，使得肝切除术对术者的肝脏解剖技能和腔镜操作技术要求颇高。因此，本文试图寻找一种安全、简单、实用性强的腹腔镜肝切除技术，以满足一般二级医院的临床需要，以期全面推广腹腔镜肝切除术，造福广大肝病患者。近几年来，笔者所在手术小组学习和实践“七步断肝法”行腹腔镜肝左外叶切除术，现报告如下。
作者：夏志超；曾仲；黄汉飞；段键；徐王刚；林杰 刊期： 2016年第17期
作者：本刊编辑部 刊期： 2016年第17期
目的：研究Aurora-A 激酶抑制剂 VX-680对未分化甲状腺癌8305C 细胞增殖的影响，并探讨其相关机制。方法：采用MTT法检测VX-680对8305C细胞增殖活性的影响；利用免疫荧光化学方法检测甲状腺癌细胞在药物作用下Aurora-A、Bax和Bcl-2的表达变化。结果：随药物浓度增加甲状腺癌细胞生长受到明显抑制（P ＜0．05）；随作用时间延长，药物的抑制作用也增强（P ＜0．05）。48 h 细胞免疫荧光结果显示400 nmoL浓度处理的8305C 细胞，Aurora-A激酶和Bcl-2蛋白表达明显降低（P ＜0．05），Bax 蛋白量变化不明显（P ＞0．05）。结论：VX-680通过抑制Aurora-A 表达，抑制细胞有丝分裂，同时通过抑制Bcl-2表达，导致Bcl-2／Bax比例失衡，诱发细胞凋亡。 VX-680是未分化甲状腺癌的一种非常有潜力的靶向抑制剂。
作者：何源哈达；陈霖；杨勇；杨宏新 刊期： 2016年第17期
目的：探讨细胞分裂周期蛋白6（CDC6）在食管鳞癌组织中的表达及其与临床病理学特征和预后的相关性。方法：采用免疫组化SP法检测51例食管鳞癌组织、33例食管不典型增生组织和27例正常食管黏膜组织中CDC6蛋白的表达情况，研究食管鳞癌组织中 CDC6与临床病理特征及术后随访资料的相关性。结果：CDC6在食管鳞癌组织、不典型增生组织及正常食管黏膜组织中的阳性表达率分别为66．7％、51．5％、18．5％，差异有统计学意义（P ＜0．05）；CDC6蛋白在食管鳞癌中的表达与细胞分化程度和肿瘤 TNM分期有关（P ＜0．05）；与患者的年龄、性别及淋巴结转移无相关性（P ＞0．05）。CDC6的表达与食管鳞状细胞癌患者的累计无病生存时间无相关性（P ＞0．05）。结论：CDC6蛋白在食管鳞癌中高表达，且与肿瘤的TNM分期及组织分化程度密切相关，提示CDC6与食管鳞癌的发生、发展密切相关。
作者：樊丽娟；张健；林凡忠；李洪运 刊期： 2016年第17期
目的：探讨复杂性胎盘植入的临床特点、围术期处理，有效降低母婴的不良围产期结局。方法：回顾分析2013年1月至2015年12月广州医科大学附属第三医院收治的复杂性胎盘植入25例的临床特点，并按围术期处理分组为术前行输尿管置管组9例及无置管组16例；常规子宫切除组17例与经后路子宫切除组8例，比较其手术时间、产后出血、输血量、膀胱损伤或输尿管损伤率、转入ICU 率和住院时间。结果：出现孕期反复的无痛性阴道流血者占76％，分娩前出血者占56％。产前诊断17例（占68％）。术前行膀胱镜检查＋双侧输尿管逆行置管或经后路子宫切除，手术时间较短、产后出血较少、减少输血量、无泌尿系损伤率、转入ICU率低，差异有统计学意义（P ＜0．05）。结论：复杂性胎盘植入要重视孕期的反复的无痛性阴道流血，提高产前诊断率。围术期处理是综合、有效、规范的多科参与，术前输尿管置管及经后路子宫切除术能有效降低母婴的不良围产期结局。
作者：钟柳英；陈敦金；苏春宏；贺芳；余琳；钟梅 刊期： 2016年第17期
目的：观察蟾毒灵对人食管癌 ECA109细胞生长的影响，探讨蟾毒灵抑制食管癌细胞抗肿瘤作用的可能机制。方法：CCK-8法测定蟾毒灵对人食管癌ECA109细胞增殖的影响；流式细胞术检测蟾毒灵对细胞凋亡的影响；Western blot法检测蟾毒灵作用于人食管癌ECA109后，NF-κBp65，ERK，P-ERK1／2及Caspase-3、Cleaved Caspase-3，PARP、Cleaved PARP蛋白表达的变化情况。结果：蟾毒灵对人食管癌ECAl09细胞有明显抑制增殖的作用，并呈现出时间和浓度依赖性；蟾毒灵能诱导ECA109细胞凋亡；蟾毒灵能使 ECA109细胞中凋亡相关蛋白Cleaved Caspas-3及 Cleaved PARP 蛋白表达随着药物浓度的增加而明显增加，p-ERK1／2，NF-κBp65蛋白的表达随着药物浓度的增加而减少。结论：蟾毒灵可显著抑制人食管癌ECA109细胞的增殖，促使肿瘤细胞凋亡，其作用机制可能与抑制ERK／NF-κB通路有关。
作者：王晶晶；王巍东；康小红；寇小格 刊期： 2016年第17期
目的：观察大光斑低能量Q开关Nd：YAG激光联合重组牛碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）治疗寻常型痤疮的临床效果及不良反应。方法：86例痤疮患者随机分为两组，采用Q开关Nd：YAG激光治疗，1次／2周，6～8次为1个疗程。治疗组术后给予重组牛bFGF凝胶外用，1次／d；对照组仅给予激光治疗。治疗10周后观察粉刺、炎性皮损、皮肤油脂分泌情况及不良反应，并随访3～6个月。结果：治疗组总有效率为89．13％，对照组有效率为72．50％，差异有统计学意义（P ＜0．05），其中炎性皮损的疗效治疗组明显优于对照组，差异有统计学意义（t ＝2．169，P ＜0．05）。结论：大光斑低能量Q开关Nd：YAG激光联合重组牛bFGF对寻常型痤疮治疗有效，对炎性皮损疗效更佳，且无明显不良反应。
作者：王燕；马琼；段静娴；孙素姣；陈丽华 刊期： 2016年第17期
本刊对符合以下条件的论文给予优先审稿、发表：（1）受国家或部、省级以上基金资助的论文；（2）重点攻关项目的论文；（3）报道的内容属国内外领先水平的论文；（4）有重要指导意义或发表后具有广泛应用价值的论文；（5）针对本刊以往发表论文的学术观点进行延续讨论（即引用了本刊近两年刊出论文）的论文。其中第（1）、（2）项需及时补寄基金批文的复印件、单位介绍信，同时稿件需在首页左下方脚注中注明项目名称及编号，且论文内容应与课题研究内容基本相符。第（3）、（4）项需提供省级及以上图书馆或医学信息研究所等单位出具的＂查新报告＂，或提供2位高级职称的同行知名专家（作者所在单位的专家和作者的导师应回避）书面推荐意见。
作者：本刊编辑部 刊期： 2016年第17期
目的：采用慢病毒抑制炎症因子TNF-α的表达，观察凋亡相关因子Caspase-3和Bcl-2、Bax 在脊髓损伤大鼠损伤段的表达变化，探究在脊髓损伤中TNF-α与Caspase-3、Bcl-2、Bax 的相互关系。方法：采用Allen 法制备脊髓钝挫伤模型；GeneMANIA 生物信息学方法预测TNF-α与Bcl-2的关系。用慢病毒包装的RNA ，构建 TNF-α的 RNA 干扰模型；TNF-α的表达被抑制后，用 QRT-PCR 检测 Caspase-3和 Bcl-2 mRNA的表达，用免疫组织化学技术检测Caspase-3和Bcl-2、Bax 蛋白质的定位分布，用SPSS 17．0进行统计分析。结果：脊髓钝挫伤后SD 大鼠双后肢截瘫，无法自行排便排尿。慢病毒干扰 TNF-α后 QRT-PCR 结果显示， Caspase-3表达显著减少（P ＜0．05），Bcl-2表达下降，但是没有显著变化（P ＞0．05）。免疫组织化学实验结果显示在脊髓白质和灰质的神经元和神经胶质细胞中观察到 Caspase-3、Bcl-2、Bax 的免疫阳性反应细胞，并与QRT-PCR变化结果相同。结论：在脊髓损伤后的大鼠体内TNF-α能有效调控Bcl-2和Bax 的比值，进而调节Caspase-3的表达，终可能影响凋亡而作用于脊髓损伤后的功能恢复。
作者：王一枝；胡析；周秀雅；向虹雨；林娅；唐冰怡；唐婷婷；曾茜；张晓 刊期： 2016年第17期
实用医学杂志
主管:广东省卫生厅
主办：广东省医学情报研究所
