张允奇;何涛君;陆学东;张银辉
目的:原核表达并纯化人博卡病毒结构蛋白 VP2,并建立间接酶联免疫法,用于病毒感染的检测。方法:本研究采用PCR法从菌种模板WHL-1扩增出人博卡病毒结构蛋白VP2基因片段,克隆至表达载体pET28a中,转化到菌BL21(DE3),经过诱导产生融合蛋白,使用Western blot 检测,并以该蛋白为包被抗原建立检测血清人博卡病毒的间接酶联免疫法。结果:重组原核表达质粒经双酶切鉴定构建正确,并可与人博卡病毒 IgG阳性血清发生特异性反应,建立的间接酶联免疫法佳抗原包被浓度为2 mg/mL ,血清的佳稀释倍数为1∶200,封闭以1%BSA封闭效果佳,酶标二抗的佳工作稀释度为1∶4000,工作时间佳为1 h,该检测方法有较好的特异性和重复性。建立的间接 ELISA 方法 Cut-off 值为0.1,灵敏度为92%,特异性为98%,与对照试剂检测结果的符合率为97%。结论:原核表达并纯化了人博卡病毒结构蛋白VP2蛋白建立的间接酶联免疫法,为人博卡病毒的血清抗体检测方法提供了依据。
作者:张允奇;何涛君;陆学东;张银辉 刊期: 2016年第17期
患者女,43岁,因心悸、气促8个月来我院就诊,多在活动后症状明显,偶有咳嗽、咳痰,痰不多,无外伤、感染病史,无心脏和肺部疾病史。心脏体查未闻及心前区有杂音,有肺动脉第二心音亢进。心电图正常,胸片提示肺动脉段明显增粗。超声心动图未提示有明显心脏畸形,但测得肺动脉压力明显增高,达68 mmHg ,左心房也明显扩大。行心脏 CT 检查,CT 提示患者左上肺静脉未回流至左心房,而是通过一条垂直静脉汇入无名静脉。见图1、2。提示患者患有罕见的单纯左上肺静脉异位引流,这也解释了患者存在的肺动脉高压和扩大的左心房。
作者:周立;区景松;刘湘;王治平 刊期: 2016年第17期
目的:探讨动脉血气分析、神经烯醇化酶(NSE)以及血清神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)水平在早产儿脑损伤早期诊断中的价值。方法:选择于我院住院治疗的95例早产儿作为研究对象,45例脑损伤为试验组,50例无脑损伤为对照组,所有早产儿出生后第1、7天查血气,留血检测NSE 和GFAP。结果:两组第1天动脉血气分析PCO2、pH值、BE值及乳酸比较差异有统计学意义(P<0.05),试验组第1、7天PCO2、pH值、BE值及乳酸比较,差异有统计学意义(P <0.05);比较第1、7天两组间NSE和GFAP 水平,差异有统计学意义(P <0.01),试验组NSE 第1、7天比较,差异有统计学意义(P <0.05),试验组第1、7天 GFAP 水平比较,差异有统计学意义(P <0.01)。结论:动脉血气分析、NSE及GFAP水平能较早反映早产儿脑损伤,并为之提供早期诊断依据。
作者:裘艳梅;侯洪涛;王炜;叶秀春;李月梅;马素苓 刊期: 2016年第17期
目的:通过实施三镜联合会师技术经胆囊管入路行球囊鼻胆管引流术治疗细径胆总管结石,观察行胆总管一期缝合术的疗效。方法:在腹腔镜手术中,将自制球囊套扎于鼻胆管,通过胆道镜置入的输尿管导管来引导鼻胆管经腹部置入,再用十二指肠镜将其经口取出,取出过程中,鼻胆管自带球囊对细径胆总管进行取石,然后留置鼻胆管引流,行腹腔镜下细径胆总管一期缝合。结果:59例手术成功,无中转开腹及T管引流,术后造影显示取净结石58例(98.3%),残余小结石1例(1.7%),残余小结石合并胆漏1例、胆漏1例(3.4%),胰腺炎2例(3.4%),术后总并发症发生率为6.8%(4/59),无胆道穿孔、十二指肠出血、肠穿孔、重症胰腺炎及死亡等并发症。结论:三镜联合会师技术及经胆囊管入路行球囊鼻胆管引流术能有效治疗胆囊结石合并细径胆总管结石。
作者:刘进衡;张刚;王妍亭;陈安平;易斌;张胜龙;高原 刊期: 2016年第17期
目的:探讨人主动脉血管平滑肌细胞(T/G HA-VSMC)在缺血缺氧时内质网应激蛋白 CHOP-10的表达与细胞迁移的关系。方法:将传代培养的T/G HA-VSMC分为正常对照组及缺血缺氧组。缺血缺氧组又分为 CHOP-10基因沉默组以及阿托伐他汀干预组;24 h 后采用 RT-PCR 和 Western blot 法检测细胞中CHOP-10的表达;ELISA 法检测细胞培养液中 MMP-9及 MMP-2的浓度;Transwell 趋化小室测试细胞迁移情况。结果:与正常对照组相比,缺血缺氧组 CHOP-10表达明显升高(P <0.01),细胞培养液中 MMP-9及MMP-2的浓度明显增加(P <0.01),且细胞迁移率也显著增加(P <0.01)。而CHOP-10基因沉默或用阿托伐他汀干预后,MMP-9及MMP-2的分泌减少,且显著抑制细胞的迁移率(P <0.01)。结论:缺血缺氧可引起人VSMC内质网应激,通过上调CHOP-10的表达及基质金属蛋白酶的分泌促进细胞迁移;而下调CHOP-10或阿托伐他汀干预可能影响通过CHOP-10的表达减轻内质网应激抑制细胞迁移。
作者:滕林;周飞;杨伟;姜玉蓉;曹春雨;杨简;王雅琴;陈勇;李松;丁家望;杨俊 刊期: 2016年第17期
目的:探讨雄激素受体(androgen receptor,AR)在人类表皮生长因子受体-2(human epidermal growth factor receptor-2,Her-2)过表达型乳腺癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:免疫组化检测 AR在102例Her-2过表达型乳腺癌的表达情况,并分析其与Her-2过表达型乳腺癌临床病理特征的相关性。结果:AR 在Her-2过表达型乳腺癌阳性率为75.5%;AR阳性Her-2过表达型乳腺癌患者的淋巴结转移率及Ki-67阳性率较低(P<0.05);AR 表达在年龄、绝经状态、肿瘤大小、组织学分级、脉管癌栓、p53及 PCNA 是否阳性差异均无统计学意义(P >0.05)。结论:AR在Her-2过表达型乳腺癌中的表达率高;AR可能是Her-2过表达型乳腺癌潜在治疗靶点。
作者:尼杰;沈立杰;霍俊杰;李曼;姜溪;要雪品;只向成 刊期: 2016年第17期
目的:比较七氟醚与异丙酚对老年糖尿病腹部手术患者早期术后认知功能影响。方法:择期行腹部手术的糖尿病患者70例,年龄60~75岁,ASA分级Ⅰ或Ⅱ级,采用随机数字表法,将糖尿病患者分为两组(n =35):七氟醚组(DS组)和异丙酚组(DP组)。于术前(T1)、术后24 h(T2)、48 h(T3)及1周(T4)进行以下测试:MMSE 评分;连线测验;词语记忆试验;Stroop色词测验。记录各项评分和数据。结果:与T1比较, T2时点两组患者及T3时点的糖尿病患者MMSE评分下降,T2-3时点两组患者连线测试A、B时间延长,T2时点两组患者Stroop 色词测验一、二、三时间延长和错误数增加,T3时点两组患者 Stroop 色词测验二、三时间方面延长,T2-3时点糖尿病患者词语记忆试验各项词语数减少,差异有统计学意义(P <0.05)。两组药物组之间认知功能障碍发生率则差异无统计学意义(P >0.05)。结论:七氟醚与异丙酚均可导致老年糖尿病患者术后48 h内短暂的认知功能障碍,两者的影响无差异。
作者:周桥灵;刘洪珍;廖美娟;杨承祥;王汉兵;梁桦;赖晓红;贺俭 刊期: 2016年第17期
目的:采用慢病毒抑制炎症因子TNF-α的表达,观察凋亡相关因子Caspase-3和Bcl-2、Bax 在脊髓损伤大鼠损伤段的表达变化,探究在脊髓损伤中TNF-α与Caspase-3、Bcl-2、Bax 的相互关系。方法:采用Allen 法制备脊髓钝挫伤模型;GeneMANIA 生物信息学方法预测TNF-α与Bcl-2的关系。用慢病毒包装的RNA ,构建 TNF-α的 RNA 干扰模型;TNF-α的表达被抑制后,用 QRT-PCR 检测 Caspase-3和 Bcl-2 mRNA的表达,用免疫组织化学技术检测Caspase-3和Bcl-2、Bax 蛋白质的定位分布,用SPSS 17.0进行统计分析。结果:脊髓钝挫伤后SD 大鼠双后肢截瘫,无法自行排便排尿。慢病毒干扰 TNF-α后 QRT-PCR 结果显示, Caspase-3表达显著减少(P <0.05),Bcl-2表达下降,但是没有显著变化(P >0.05)。免疫组织化学实验结果显示在脊髓白质和灰质的神经元和神经胶质细胞中观察到 Caspase-3、Bcl-2、Bax 的免疫阳性反应细胞,并与QRT-PCR变化结果相同。结论:在脊髓损伤后的大鼠体内TNF-α能有效调控Bcl-2和Bax 的比值,进而调节Caspase-3的表达,终可能影响凋亡而作用于脊髓损伤后的功能恢复。
作者:王一枝;胡析;周秀雅;向虹雨;林娅;唐冰怡;唐婷婷;曾茜;张晓 刊期: 2016年第17期
T淋巴细胞在抗肿瘤免疫中发挥重要作用。根据细胞表面CD 分子的不同,T 细胞可分为CD4+T 细胞和CD8+T 细胞。 CD4+T 细胞活化后的主要效应细胞为辅助性 T 细胞(help T lymphocyte, Th),CD8+T 细胞活化后的主要效应细胞为细胞毒性T细胞(cytotoxic T lymphocyte, CTL)。CTL对肿瘤细胞起直接杀伤作用,Th对CTL的免疫活性起调节和促进作用。
作者:杨秋玉;陈俊辉 刊期: 2016年第17期
目的:探讨血清可溶性髓样细胞触发性受体1(sTREM-1)、降钙素原(PCT)、C-反应蛋白(CRP)在脓毒症中的临床价值。方法:采用前瞻性研究方法收集相关患者的临床资料,并采用ELISA检测39例脓毒症患者、15例全身炎症反应综合征(SIRS)患者和12例正常对照组。通过分析3种因子对判断脓毒症患者预后的价值。结果:脓毒症组与SIRS组中血清sTREM-1及PCT水平明显高于对照组(P<0.05),而CRP只在脓毒症组与对照组中差异有统计学意义(P <0.05);脓毒症组中 sTREM-1、PCT 及 CRP 均明显高于 SIRS 组(P <0.05)。根据ROC 曲线分析,sTREM-1、PCT 及 CRP 对SIRS 和非 SIRS 进行诊断的曲线下面积分别为0.914、0.887和0.831。结论:血清sTREM-1是脓毒症早期诊断的较好指标,同时具有较高的灵敏度和特异度。
作者:罗运山;刘易林;邓霞梅;张健;李莉 刊期: 2016年第17期
目的:通过监测剖宫产术中不同时点产妇血浆中热休克蛋白70(HSP70)的浓度及胎儿娩出后胎盘组织中 HSP70的表达,评估七氟醚或异丙酚全身麻醉下围术期应激反应的变化,为安全有效地施行产科全身麻醉提供思路与依据。方法:选择足月产妇60例,拟在全麻下行择期剖宫产手术,采用随机数字表法分为异丙酚组(P 组)与七氟醚组(S 组),每组30例。记录产妇各时点血中 HSP70浓度及胎儿娩出后胎盘组织的 HSP70的表达情况。结果:P 组术毕时的 HSP70浓度水平明显高于术前,差异有统计学意义(P <0.05);与S 组同时点比较,差异有统计学意义(P <0.05);胎盘娩出后,P 组胎盘组织 HSP70表达明显高于S 组(P <0.05)。结论:七氟醚用于剖宫产术全身麻醉安全有效,能减少母血 HSP70的浓度及胎盘组织HSP70的表达。
作者:李屹;贾杰;孙艺娟;苏丹晨;孙维国;李海洋 刊期: 2016年第17期
目的:研究miR-124对鼻咽癌细胞株上皮间充质转化(epithelial- mesenchymal transitions, EMT)和放疗敏感性的影响。方法:转染miR-124 mimic 或inhibitor入鼻咽癌细胞株,划痕实验检测miR-124对鼻咽癌EMT 影响;细胞转染成功24 h 后 X 线照射,检测细胞株中 Caspase-3活性及凋亡细胞比例;EdU 方法检测放疗后细胞增殖能力;Western blot检测信号通路蛋白。结果:划痕实验结果显示 miR-124能抑制鼻咽癌细胞株EMT。 Caspase-3活性检测结果提示,miR-124过表达细胞株接受放疗后 Caspase-3活性显著上升(P <0.01)。流式细胞仪结果显示,miR-124能增加细胞株放疗后凋亡。EdU结果显示,miR-124能抑制放疗后细胞的增殖。 Western blot 结果表明过表达 miR-124的细胞株接受放疗后,p-Akt 含量显著下降。结论:miR-124可能通过Akt信号通路抑制鼻咽癌细胞株EMT,增加其放疗敏感性。这为鼻咽放疗增敏提供了新的可行的研究方向。
作者:田允鸿;曾星;邱慧芝;史建军;谢国丰;黄东兰;王红梅;郑荣辉;张伟军 刊期: 2016年第17期
目的:探讨长期小剂量阿奇霉素联合布地奈德/福莫特罗对Ⅲ、Ⅳ级慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期患者的安全性与疗效分析。方法:采用前瞻性随机对照的研究方法,选择我院87例Ⅲ、Ⅳ级COPD稳定期患者作为研究对象,随机分为对照组(布地奈德/福莫特罗160μg/4.5μg 每吸,1吸/次,2次/d),联合治疗组(布地奈德/福莫特罗160μg/4.5μg每吸,1吸/次,2次/d +阿奇霉素250 mg,1次/d。观察两组治疗3、6个月后 PEF、FEV1、FEV1/FVC、mMRC、6MWT,急性加重次数。结果:联合治疗组在3、6个月后的PEF、FEV1、FEV1/FVC改善较对照组显著(P <0.05);两组在3个月后的 mMRC、6MWT、急性加重次数改善程度相仿(P >0.05),6个月后联合治疗组较对照组改善显著(P <0.05)。结论:长期小剂量阿奇霉素联合布地奈德/福莫特罗治疗较单一吸入布地奈德/福莫特罗能明显改善患者相关的肺功能指标,且随着用药时间延长,联合治疗较单一治疗更能显著改善相关临床症状,并降低急性加重次数。
作者:韩利;张筠;张铁栓 刊期: 2016年第17期
目的:研究伴放线放线杆菌对人骨髓间充质干细胞增殖和成骨分化的影响。方法:采用细胞计数法分析伴放线放线杆菌对干细胞增殖的影响。应用免疫细胞化学法检测干细胞表面标记物和骨桥蛋白的表达,RT-PCR法检测C-myc、Klf4、Col1和Runx2 mRNA的表达,利用试剂盒检测干细胞碱性磷酸酶的变化,分析伴放线放线杆菌对干细胞干性和成骨分化的影响。结果:伴放线放线杆菌与干细胞按照1克隆:1细胞比例共培养后,细胞增殖明显增加;两者共培养后,干细胞CD44、CD166和骨桥蛋白均呈阳性表达,C-myc、Klf4、Runx2和Col1 mRNA表达明显增加,碱性磷酸酶活性仍较强。结论:伴放线放线杆菌在体外促进人骨髓间充质干细胞增殖,增强干细胞干性,但却不影响干细胞的成骨分化潜能。
作者:于丽娜;张文轩;于洋;秦文光;罗刚 刊期: 2016年第17期
目的:分析希特林蛋白患儿血Met、Phe 、Tyr、Arg、Cit、Orn、Ser、Thr、C0、C2、C3、C14、C14∶1、C16、C16∶1、C18、C18∶1及尿气相质谱4-羟基苯乳酸、4-羟基苯丙酮酸的水平分布,探讨各指标在新生儿肝内胆汁淤积症(NICCD)患者诊断中的应用价值。方法:2011年5月至2015年5月期间,本筛查中心共确诊21例患儿,将其作为观察组,同时随机抽取100例正常儿童为对照组,分析两组血串联质谱Met、Phe、Tyr 等指标及尿气相质谱4-羟基苯乳酸、4-羟基苯丙酮酸的水平,比较其差异性。结果:较正常对照组,观察组血Met、Phe、Tyr等多种指标及尿气相质谱4-羟基苯乳酸、4-羟基苯丙酮酸检测结果偏高,Orn/Cit 结果偏低,差异均有统计学意义,而C2和Cit/Arg检测结果有升高趋势,但差异无统计学意义。结论:NICCD患儿存在生化指标代谢异常,血串联质谱及尿气相质谱检测对患儿的诊断具有重要意义。
作者:李旺;罗超;耿国兴;范歆;罗静思;玉晋武;陈少科 刊期: 2016年第17期
脓毒症(sepsis)仍然是重症医学病死率居首的疾病,发病机制复杂[1]。它是指机体由于感染而引发的炎症反应综合征(SIRS),常累及多个脏器,其中胃肠道尤为特殊,一方面它是脓毒症首先累及的器官,常引起胃肠道黏膜及上皮病变,甚至坏死,导致胃肠道功能受损[2];另一方面,又有学者认为,肠道病变本身亦可加重或诱发脓毒症,甚至诱发多脏器功能障碍综合征(MODS),故胃肠道在脓毒症发生发展过程中的作用特殊[3]。本文就脓毒症以及胃肠功能损伤之间的关系以及相关机制的研究进展进行综述。
作者:张俊亮;曾其毅 刊期: 2016年第17期
目的:研究Aurora-A 激酶抑制剂 VX-680对未分化甲状腺癌8305C 细胞增殖的影响,并探讨其相关机制。方法:采用MTT法检测VX-680对8305C细胞增殖活性的影响;利用免疫荧光化学方法检测甲状腺癌细胞在药物作用下Aurora-A、Bax和Bcl-2的表达变化。结果:随药物浓度增加甲状腺癌细胞生长受到明显抑制(P <0.05);随作用时间延长,药物的抑制作用也增强(P <0.05)。48 h 细胞免疫荧光结果显示400 nmoL浓度处理的8305C 细胞,Aurora-A激酶和Bcl-2蛋白表达明显降低(P <0.05),Bax 蛋白量变化不明显(P >0.05)。结论:VX-680通过抑制Aurora-A 表达,抑制细胞有丝分裂,同时通过抑制Bcl-2表达,导致Bcl-2/Bax比例失衡,诱发细胞凋亡。 VX-680是未分化甲状腺癌的一种非常有潜力的靶向抑制剂。
作者:何源哈达;陈霖;杨勇;杨宏新 刊期: 2016年第17期
目的:讨论FQ-PCR检测前列腺液HPV6/11 DNA在无症状男性生殖道尖锐湿疣诊断与治疗中应用价值。方法:自2012年1月至2013年6月,符合条件的患者72例患者入选该研究,对照组患者22例,均病检确诊尖锐湿疣。所有患者均积极治疗。在治疗前、后两组患者均行醋酸白实验,行前列腺液中HPV6/11 DNA FQ-PCR定量分析,获得的结果进行统计学分析。结果:在诊断无症状的男性生殖道尖锐湿疣隐匿性感染中,FQ-PCR 方法优于醋酸白试验(P <0.05)。实验组和对照组在治疗前后各自前列腺液 HPV6/11病毒量差异有统计学意义(P <0.05),治疗后两组之间差异不明显(P >0.05)。在治疗后3个月末HPV完全清除患者人数在实验组和对照组中无统计学差异(P >0.05)。结论:采用 FQ-PCR 法检测前列腺液中的HPV ,能早期发现男性生殖道无症状尖锐湿疣潜伏期或亚临床期感染,为尖锐湿疣的早期诊断、治疗提供依据,也能评估治疗效果。
作者:王黎;钟文俊 刊期: 2016年第17期
左心房(left atrium, LA)在协调心脏整体功能方面发挥着重要作用,其功能在心动周期的不同阶段分别表现为储存功能、管道功能以及辅助泵功能[1-2]。实时三维超声心动图( real-time three-dimensional echocardiography , RT-3DE )可重建心脏三维立体结构,近年来应用其评价 LA 功能成为研究热点。冠心病患者左室舒张功能不全的早期就已出现LA大小和功能的改变[3],有效及准确地评价冠心病 LA 功能的改变对于早期制定临床干预措施、评价治疗效果及估测预后等方面具有重要的临床意义。本文就RT-3DE 评价冠心病LA容量及功能的应用及研究现状作一综述。
作者:杨灵洁;穆玉明 刊期: 2016年第17期
肺纤维化是病因各异肺间质疾病的共同结局,以肺泡持续性损伤、成纤维细胞(fibroblast,FB)增殖及大量细胞外基质(extracellular matrix, ECM)沉积,肺组织反复破坏、修复、终造成肺组织中大量胶原沉积为病理特点的一类疾病。特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis, IPF)是特发性间质性肺炎常见的类型,发病率、患病率逐年增加[1],死亡率高,确诊后的平均生存时间3~5年,并且至今病因仍未明确,并缺乏有效治疗药物,所以被世界卫生组织称为肺系疑难疾病。过氧化物酶增殖物激活受体(peroxisome proliferater activated receptorγ, PPARγ)是一种核激素受体,既往在炎症、动脉粥样硬化、胰岛素抵抗和糖代谢的调节、肿瘤等的研究中发现起重要调节作用;而现在越来越多的研究表明PPARγ抗肺纤维化中同样具有重要作用,在这里本文就PPARγ的抗肺纤维化研究进展作一综述。
作者:唐洪波;吴凯峰;王茜;唐洪焱;刘代顺 刊期: 2016年第17期