学术投稿

LAMP结合基因芯片技术在快速检测嗜肺军团菌中的应用

杨俊发;许飞

关键词:环介导等温核酸扩增技术, 基因芯片, 嗜肺军团菌, 检测
摘要:目的:开发一种可以快速、准确检测嗜肺军团菌的检测方法.方法:采用环介导等温核酸扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)对嗜肺军团菌的特异性DNA保守片段和其他对照菌种DNA进行扩增,将扩增的DNA与基因芯片进行杂交,观察是否可在芯片相应的区域出现杂交信号.结果:只有嗜肺军团菌DNA经LAMP反应后出现特异性的扩增条带,与PCR扩增基因的低稀释倍数1 05相比,LAMP低稀释倍数可达107,反应的灵敏度比PCR高100倍左右,同时将经LAMP扩增后的基因与基因芯片杂交,相应的嗜肺军团菌区域可出现杂交信号.结论:LAMP技术结合基因芯片杂交技术具有灵敏度高,特异性好,简便快速等优势,可提高检验鉴定结果的准确性.
实用医学杂志相关文献
  • 曲安奈德对鼻咽癌及放疗相关分泌性中耳炎的疗效

    目的:探讨鼓室注射曲安奈德治疗与鼻咽癌及放疗有关的分泌性中耳炎的时机与疗效.方法:将38例放疗前患分泌性中耳炎(SOM)的鼻咽癌患者分为3组,治疗一组12例18耳,鼻咽癌放疗开始前至第7周每周鼓室注射曲安奈德注射液1次;治疗二组12例20耳,鼻咽癌放疗开始前至第12周每周鼓室注射曲安奈德注射液1次;对照组14例23耳,不采取任何措施.放疗结束后3个月观察三组患者咽鼓管功能及听力的改变情况.结果:治疗一组治愈3耳,占16.67%(3/18),好转8耳,占44.44%(8/18),总有效率61.11%;治疗二组治愈5耳,占25%(5/20),好转11耳,占55%(11/20),总有效率80%,对照组治愈0耳,好转2耳,占8.70%(2/23),总有效率8.70%.放疗后3个月三组患者咽鼓管功能及听力均有改善和提高,治疗二组疗效显著(P<0.01),治疗一组疗效较显著(P<0.05),对照组疗效不明显(P>0.05).结论:鼻咽癌患者放疗前开始行鼓室注射曲安奈德能改善放疗后3个月患耳的听力及咽鼓管功能,且治疗周期越长疗效越显著.

    作者:谢华;孙文忠;郑青平;戴善军;钟忠;韦玉梅;肖毅;陈美球 刊期: 2013年第14期

  • 乌司他丁对哮喘小鼠BALF中细胞因子及EOS的影响

    目的:观察乌司他丁对哮喘小鼠BALF中细胞因子及嗜酸性粒细胞(eosinophil,EOS)的影响.方法:雌性SPF级BALB/c小鼠40只随机分为4组,即对照组、哮喘模型组、乌司他丁治疗组、地塞米松组,每组10只,除对照组外以卵蛋白致敏并吸入激发制备小鼠哮喘模型,治疗组均在每次哮喘激发前30 min腹腔注射给药,激发并给药28 d后处死小鼠.检测BALF中IL-2、IL-4、IL-5、IL-10、IFN-γ水平并计数EOS.结果:与哮喘模型组比较,乌司他丁治疗组小鼠BALF中EOS明显降低;IL-2、IL-10、IFN-γ明显升高(P< 0.01),IL-4、IL-5明显降低(P<0.01).结论:乌司他丁可能通过调节各种细胞因子的分泌及EOS的浸润,抑制哮喘小鼠气道炎症.

    作者:蔡兴俊;黄奕江;付姣;莫濡冰 刊期: 2013年第14期

  • 大剂量乌司他丁对直肠癌患者术中凝血状态的影响

    目的:观察大剂量乌司他丁对直肠癌患者术中凝血状态的影响.方法:选择拟行直肠癌根治性手术40例(Dixon),随机均分为乌司他丁组(U组)和生理盐水组(N组),分别在入室后20 min内滴注乌司他丁10000U/kg或生理盐水各100 mL.分别于给药前(T0)、给药后1 h(T1),用SONOCLOT凝血仪测定ACT,CR,PF;2 h(T2)后测定D二聚体,术毕记录失血量.结果:与T0时比较,U组ACT,CR,PF在T1时明显升高(P< 0.01或P<0.05).D-二聚体U组和N组均升高(P<0.05),D-二聚体U组比N组显著低(P<0.01),U组比N组出血量明显减少(P<0.05).结论:乌司他丁可升高直肠癌手术患者的ACT,CR,PF,抑制纤维蛋白的分解,减少手术出血量.

    作者:吴群林;屠伟峰;施冲 刊期: 2013年第14期

  • 微创经皮肾取石术治疗鹿角形肾结石对肾内血流动力学影响

    目的:观察微创经皮肾镜取石术治疗鹿角形肾结石对肾血流动力学的影响.方法:应用彩色多普勒血流显像(CDFI)观察分析45例鹿角形肾结石患者行单通道Mini-PCNL术前及术后1d、1周、1个月肾主动脉、段间动脉、叶间动脉、弓形动脉的收缩期间峰值流速(V max)、收缩期峰值(S)与舒张期末流速(D)的比值(S/D)、阻力指数(RI)及肾皮质部位的血流灌注状况.结果:术后1d各级动脉的Vmax、S/D、RI值与术前比较,差异均有统计学意义(P<0.05);术后1周各级动脉的Vmax、S/D、RI值与术前比较差异均无统计学意义(P>0.05);术后1个月各级动脉的RI值与术前比较差异均有统计学意义(P< 0.05).结论:Mini-PCNL治疗鹿角形肾结石对肾脏血流灌注有短暂的影响,在术后1周左右可恢复,术后1个月左右肾血流灌注有所改善,其临床应用安全、可行,值得推广.

    作者:高伟;刘建平;王永忠;王俊;梁胜军;殷振超;蔡泳仪;周红艳 刊期: 2013年第14期

  • 水中分娩324例优势探讨

    目的:回顾性研究水中分娩的初产妇,探讨水中分娩的优势.方法:选择2008-2012年单胎、足月、头位,无产科高危因素,自愿行水中分娩的初产妇324例作为水中分娩组,将同期、低危、正常阴道分娩的初产妇324例作为对照组,比较两组产程、会阴裂伤、水中镇痛的情况.结果:水中分娩组第一及第二产程时间较对照组缩短,差异无统计学意义(P>0.05);水中分娩组均未行会阴切开,对照组会阴切开率93.3%,两组比较差异有高度统计学意义(P< 0.01),水中分娩组下水后疼痛明显缓解率80%,差异有高度统计学意义(P<0.01).结论:水中分娩的优势体现在减轻分娩疼痛,降低会阴侧切率.

    作者:彭军;缪士霞;李志彬 刊期: 2013年第14期

  • 不同血浆靶控浓度舒芬太尼清醒气管插管对血流动力学和镇静深度的影响

    目的:对比不同血浆靶控浓度舒芬太尼对困难气道患者经鼻纤维支气管镜插管(FOB)时对血流动力学和镇静深度影响.方法:术前评估属困难气道患者45例,ASAⅡ~Ⅲ级,麻醉行清醒纤支镜经鼻插管,随机分三组,每组15例.Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别为舒芬太尼血浆靶控浓度0.3、0.5、0.8 ng/mL.记录基础值To,达预设靶浓度T1,插管即刻窥视会厌T3,插管后1 min T3,插管后3 min T4时的HR,MAP,PI (perfusion index灌注指数),行Ramsay镇静评分,评价插管条件和插管反应.结果:HR:Ⅱ、Ⅲ组T1比To显著下降;Ⅰ组T2、T3比To显著升高,Ⅱ、Ⅲ组与Ⅰ组比较T2、T3显著降低(P<0.05);MAP:Ⅱ、Ⅲ组T1比To显著下降;Ⅰ组T2与T0比较显著升高,Ⅲ组与Ⅰ组T2、T3、T4比较差异显著(P< 0.05); SpO2:Ⅲ组T1显著低于To,且与Ⅰ、Ⅱ组T1比较显著降低(P<0.05);PⅠ:Ⅱ、Ⅲ组T1-4与T0比较均显著增高,Ⅱ、Ⅲ组T1-3与Ⅰ组比较差异显著(P< 0.05);Ramsay镇静评分:Ⅱ,Ⅲ组T1-4时刻均显著高于To(P< 0.05),组间两两组比较均有显著差异(P<0.05).插管条件比较:Ⅱ、Ⅲ组与Ⅰ组比较差异显著(P< 0.05).结论:舒芬太尼血浆靶控浓度0.5 ng/mL可有效抑制清醒经鼻纤支镜插管的循环应激反应,且无呼吸抑制.

    作者:徐雪;董秋月;贾建丽;高璐超 刊期: 2013年第14期

  • 术中前房注射曲安奈德预防青白联合术后前葡萄膜炎的短期临床观察

    目的:观察比较开角型青光眼和闭角型青光眼联合白内障手术中前房注射曲安奈德抑制术后葡萄膜炎症反应的临床疗效.方法:设计前瞻性对照研究方法患者74例(74眼)按房角结构分为A、B两组,其中分A组为原发性开角型青光眼合并白内障的患者36例(36眼),B组为原发性闭角型青光眼合并白内障的患者共38例(38眼).A、B组用简单随机方法分别分为前房注射和未注射曲安奈德的实验组和对照组.其中A组实验组A 17例、B 17例;对照组A 19例、B组实验组17、对照组21例.观察术后第1天的前房炎性反应和术后7d眼压情况.结果:术后第1天前房炎性反应,B组实验组明显轻于对照组,且差异有统计学意义;对照组B组明显重于A组,差异有统计学意义.其他各组差异无统计学意义.A组实验组轻于对照组,但差异无统计学意义;B组实验组明显轻于对照组,且差异有统计学意义;实验组A组与B组无明显差异;术后第1、3、7天,A组和B组的试验组与对照组之间眼压比较,差异均无统计学意义.结论:曲安奈德可以抑制闭角型青光眼联合白内障手术后前葡萄膜炎症反应,但对于开角型青光眼联合白内障手术意义不大.

    作者:刘晶;肖林;董宁 刊期: 2013年第14期

  • LAMP结合基因芯片技术在快速检测嗜肺军团菌中的应用

    目的:开发一种可以快速、准确检测嗜肺军团菌的检测方法.方法:采用环介导等温核酸扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)对嗜肺军团菌的特异性DNA保守片段和其他对照菌种DNA进行扩增,将扩增的DNA与基因芯片进行杂交,观察是否可在芯片相应的区域出现杂交信号.结果:只有嗜肺军团菌DNA经LAMP反应后出现特异性的扩增条带,与PCR扩增基因的低稀释倍数1 05相比,LAMP低稀释倍数可达107,反应的灵敏度比PCR高100倍左右,同时将经LAMP扩增后的基因与基因芯片杂交,相应的嗜肺军团菌区域可出现杂交信号.结论:LAMP技术结合基因芯片杂交技术具有灵敏度高,特异性好,简便快速等优势,可提高检验鉴定结果的准确性.

    作者:杨俊发;许飞 刊期: 2013年第14期

  • 甲氨蝶呤联合免疫吸附治疗类风湿关节炎疗效分析

    目的:探讨甲氨蝶呤联(MTx)联合免疫吸附治疗类风湿关节炎(RA)的临床效果.方法:将确诊的60例RA患者,随机分为对照组和治疗组,各30例,对照组单纯使用MTX治疗,而实验组在对照组的基础上加用HA280免疫吸附柱,比较12周的临床疗效和安全性.结果:治疗组的晨僵时间、压痛关节数、肿胀关节数、ESR、CRP均明显少于对照组(P<0.05);治疗组的总有效率为93.3%,明显高于对照组的73.3%(P<0.05);治疗组的不良反应率为26.6%,与对照组的36.6%比较无统计学差异(P>0.05).结论:MTX联合免疫吸附治疗RA可以提高RA的治疗疗效,同时又未明显增加不良反应,值得临床推广使用.

    作者:杨奕;刘重阳;刁建萍;何光桥 刊期: 2013年第14期

  • 多重血栓预防方案在髋关节置换中的应用

    目的:评价多重血栓预防方案在髋关节置换运用的有效性和安全性.方法:收集从2006年1月到2010年5月在纽约特种外科医院(Hospital for Special Surgery,HSS)行全髋关节置换手术患者共993例,其中男473例,女529例.通过针对血栓形成的各种原因和不同时相,采用多重血栓预防方案.结果:13例发生血栓性疾病(VTE),发生率1.3%.确诊为DVT的10例,发生率为1%.诊断为PE的有3例,发生率为0.3%.没有一个为致命性的PE.接受阿司匹林的患者中7例发生VTE,占接受阿司匹林治疗患者的0.9%,其中下肢深静脉血栓4例,有症状的肺栓塞3例;接受华法林的患者中6个发生VTE,占接受华法林治疗患者的2%,其中下肢深静脉血栓5,有症状肺栓塞1例.结论:人工髋关节置换患者采用此多重血栓预防方案,血栓(包括深静脉血栓和肺栓塞)的发生率很低,安全可靠,抗凝药口服与此相关的并发症也很低.

    作者:鲁宁;杨阳;Alejandro González Della Valle;Eduardo A.Salvati 刊期: 2013年第14期

  • 经皮肝穿胆道引流术治疗急性梗阻性化脓性胆管炎46例

    目的:探讨经皮肝穿胆道引流术(PTCD)治疗急性梗阻性化脓性胆管炎(AOSC)的疗效.方法:回顾性分析PTCD治疗AOSC患者46例,通过对比术前、术后血常规、肝功、胆红素及临床症状改善情况评价疗效.结果:46例患者均成功置入胆道引流管,大部分患者术后24h内临床症状不同程度改善,1例患者出现多器官功能衰竭死亡.32例患者术后1周行外科手术治疗后拔管,1例拔出胆道外引流管后出现消化道出血,行介入治疗后病情好转.7例患者1周后胆道造影示胆管结石消失,带管1个月后拔出胆道外引流管.6例患者诊断胆管癌,行胆道支架置入术.结论:PTCD引流术创伤小、安全、并发症少,有效引流胆汁,降低胆道内压力,可作为抢救AOSC的重要措施,为择期手术创造条件.

    作者:赵开飞;李昌燕;利峰;蒋国军;石荣书 刊期: 2013年第14期

  • 对HNPCC家系中MMR基因突变携带者结肠镜随访监测的临床意义

    目的:探讨对遗传性非息肉病性结直肠癌(HNPCC)家系中错配修复(MMR)基因突变携带者进行结肠镜随访监测的临床意义.方法:回顾性分析2002年1月至2008年10月对43个HNPCC家系中的97例突变携带者进行结肠镜的随访监测的结果,并对结果进行统计分析和总结.结果:(1)随访组中健康携带者的结直肠癌的发生率为0%(0/28),明显低于未随访组的35.5%(11/31).(2)随访组中已患癌成员的结直肠癌再发生率为14.5%(10/69),明显低于未随访组的43.8%(7/16).(3)随访组的五年生存率(96.9%)明显高于未随访组(61.7%).结论:进行规律的结肠镜随访监测,对降低HNPCC家系中健康突变携带者结直肠癌的发生率及已患癌携带者再发癌的发生,降低患者的死亡率,提高5年生存率等具有重要的临床意义.

    作者:李晓鸥;李成林;张宏文;刘景欣;崔彦 刊期: 2013年第14期

  • 宫腔镜下电切术与宫腔镜下刮宫术治疗异常子宫出血的疗效比较

    目的:比较宫腔镜下电切术与宫腔镜下刮宫术诊治异常子宫出血的临床效果.方法:100例异常子宫出血的患者根据入院顺序单双号被随机均分为两组,分别采用宫腔镜下电切术与宫腔镜下刮宫术两种方法进行诊治.比较两组患者手术情况、病因检出率及术后3个月的疗效满意率.结果:电切组患者手术时间比刮宫组患者稍长,两组患者间比较具有统计学差异[电切组(26.7±8.0)min vs刮宫组(21.1±7.9)min,P< 0.05],两组患者间住院时间[电切组(3.2±1.3)d vs刮宫组(3.0±1.2)d]和手术并发症发生率(两组患者均为4.0%)的比较均无统计学差异(P>0.05).患者异常子宫出血的主要原因为子宫内膜单纯型增生、子宫内膜复杂型增生、子宫内膜息肉,也有因不典型增生及癌变引起,两组患者病因及检出率的比较,无统计学差异(电切组90.0%vs刮宫组84.0%,P>0.05).电切组的疗效满意率明显高于刮宫组,两组患者间比较有统计学差异(电切组85.4%vs刮宫组66.0%,P<0.05).结论:采用宫腔镜下电切术的方法诊治异常子宫出血,病因检出率与采用宫腔镜下刮宫术的方法相似,但临床治疗效果更为理想.

    作者:王娟 刊期: 2013年第14期

  • 洛伐他汀联合厄贝沙坦对慢性肾小管间质纤维化大鼠HIF-1α的影响

    目的:探讨HIF-1α与CTGF在慢性肾小管间质纤维化中的表达及药物干预的影响.方法:建立UUO模型,将SD大鼠分4组:假手术组、模型组、ARB组、他汀联合ARB组.观察各组大鼠第2周肾功能、24 h尿蛋白和肾组织病理学改变,检测HIF-1α、CTGF的表达.结果:模型组肾功能及尿蛋白定量均显著增高(P<0.05),应用他汀联合ARB治疗后肾功能较模型组显著降低,肾小管间质病变面积减少,肾小管间质细胞HIF-1α mRNA和CTGFmRNA表达显著减少(P<0.05).模型组肾组织有高水平HIF-1 αmRNA、CTGFmRNA,且两者的表达呈正相关(r=0.697,P< 0.01),结论:低氧上调了HIF-1α及相关因子的表达;他汀联合ARB治疗可能降低HIF-1α和CTGF在肾小管间质中的表达而发挥肾脏保护作用.

    作者:袁静;杨霞;沈燕;胡英;林鑫;何平红;黄戎赛;查艳 刊期: 2013年第14期

  • 三种来源CIK细胞对人食管癌裸鼠皮下移植肿瘤的抑制作用

    目的:探讨三种来源的细胞因子诱导的杀伤细胞对人食管癌裸鼠皮下移植肿瘤的抑制作用.方法:建立人食管癌裸鼠皮下移植模型.取32只荷瘤裸鼠平分为4组,食管癌患者自体外周血CIK细胞组、健康人外周血CIK细胞组、脐血CIK细胞组及生理盐水对照组.给予20 d对应的注射治疗并观察各组移植瘤生长情况,停药4d后处死裸鼠,称量瘤重,计算抑瘤率,观察肿瘤病理特点.结果:CIK细胞治疗组的肿瘤生长明显受到抑制;瘤重分别为(1.01±0.24)g、(0.95±0.16)g、(0.64±0.22)g、(1.89±0.33)g;抑瘤率分别为46.6%、49.7%、66.2%、0%.各组的肿瘤病理特点均与患者原发肿瘤组织形态一致.治疗组与对照组相比,切片下可见较多淋巴细胞浸润及坏死区.结论:三种来源CIK细胞对人食管癌裸鼠皮下移植肿瘤有明显抑制作用,且脐血来源的CIK细胞抗瘤作用强.CIK细胞可能成为食管癌治疗的有效免疫效应细胞.

    作者:姚文健;白玉;赵宝生 刊期: 2013年第14期

  • 锁定加压接骨板内固定与早期功能训练对桡骨远端骨折术后腕关节功能康复的影响

    目的:探讨应用锁定加压接骨板(locking compression plate,LCP)内固定与早期功能训练对桡骨远端骨折术后腕关节功能康复的影响.方法:对48例桡骨远端骨折患者进行LCP内固定治疗,并给予个体化早期功能康复训练,通过对患肢肿胀、疼痛、骨折愈合的X线指标和腕关节功能情况进行综合评定,判断腕关节的康复功能.结果:术后随访5~24个月,采用Gartland-Wreley腕关节评分系统对腕关节功能进行评定,功能评定为优29例,良16例,差3例,优良率达93.8%,腕关节的疼痛缓解、肿胀消退和骨折愈合时间均缩短,腕关节功能康复良好.结论:锁定加压接骨板内固定与早期功能康复训练治疗桡骨远端骨折患者,具有创伤小,降低并发症,促进腕关节功能的康复的优点.

    作者:黄雪萍;刘洁珍;谢青梅;张成娟;张光明 刊期: 2013年第14期

  • 双相障碍住院患者的社会支持状况及应对方式调查

    目的:探讨双相障碍住院患者的社会支持状况及应对方式,为制定相应的护理干预措施提供依据.方法:采用社会支持评定量表、简易应对方式问卷对在精神专科医院住院的双相障碍患者随机选取47例进行现况调查,同时随机抽取47名身体健康的医护人员作为正常对照组,采用社会支持评定量表,并分析双相障碍患者的社会支持状况及应对方式与住院次数的相关性.结果:双相研究组40例患者及正常对照组42名医护人员完成有效问卷调查,双相研究组的社会支持总分、客观支持分、主观支持分及对支持的利用度得分均低于正常对照组(P<0.05),双相研究组的积极及消极应对维度平均分分别为1.40±0.56,1.13±0.57,得分均低于样本的参考值,差异有统计学意义(t=-4.29,-5.04,P<0.05).Pearson相关分析结果显示双相研究组社会支持总分及3个维度分、应对方式积极及消极2个维度平均分均与住院次数无直线相关关系.结论:临床医护人员应重视双相障碍患者的社会支持及应对方式状况,采取有针对性的护理干预措施.

    作者:陈红红;李春阳;陈超;刘俊贤;曹淑华;刘青梅;杨光;韦源清;唐立岩 刊期: 2013年第14期

  • 颈动脉体瘤的诊断和治疗12例

    目的:总结颈动脉体瘤(CBT)诊断和治疗方面的初步经验.方法:回顾性研究我院从2006-2012年收治的共12例CBT患者,单侧肿瘤有10例,双侧肿瘤为2例.共14例CBT通过手术切除并病理确诊.其中于动脉外膜平面上单纯切除肿瘤的有7例,切除颈外动脉和肿瘤的有4例,切除部分颈内动脉,并进行动脉重建的有3例.结果:14例手术均完整切除肿瘤,未出现手术相关的重大并发症和死亡,随访10个月至6年不等,未发现肿瘤复发和转移.结论:CBT术前CT或MRI的特殊征象诊断率高,术前栓塞并非必须的术前准备.对于ShamblinⅢ型的患者,颈动脉重建技术的应用,可以达到良好的手术效果.

    作者:罗小宁;张思毅;宋新汉;陈良嗣;卢仲明;詹建东 刊期: 2013年第14期

  • 腋路臂丛神经阻滞两种方法的临床效果比较

    腋路臂丛神经阻滞由于操作简便、安全及可靠而广泛在临床上应用,其适合前臂和手部手术,也有成功用于肘部手术.从定位方法上分为血管旁法、异感法、电刺激法、透动脉法等,但传统定位方法有一定缺陷,如不易固定针头、损伤神经、使患者感觉到不适和刺破血管等缺点.我们期望采用简便易行的操作方法以减少腋路臂丛神经阻滞并发症,提高麻醉成功率.本研究采用头皮静脉针改良法与血管旁法腋路臂丛神经阻滞进行麻醉效果比较,以评价头皮静脉针改良法的临床实用价值.

    作者:王长明;关占颖;李清梅;栾秀红 刊期: 2013年第14期

  • 屈螺酮炔雌醇片对青春期功能失调性子宫出血的疗效

    目的:探讨屈螺酮炔雌醇片治疗青春期功能失调性子宫出血的疗效和安全性.方法:青春期功能失调性子宫出血患者共58例随机分两组治疗,分别使用屈螺酮炔雌醇片、炔雌醇环丙孕酮片治疗后评估疗效和不良反应.结果:两种药物治疗前后血清黄体生成素、总睾酮差值显著降低,痤疮症状明显改善,两组间差异无显著性.两组均未发现严重不良反应,屈螺酮炔雌醇片所致体重增加较小,两者之间差异无显著性.结论:屈螺酮炔雌醇片治疗青春期功能失调性子宫出血疗效确定,副作用少.

    作者:彭刚;丁明;杨方华 刊期: 2013年第14期

实用医学杂志

实用医学杂志

主管:广东省卫生厅

主办:广东省医学情报研究所