学术投稿

pEGFP-PTEN的构建及其在子宫内膜癌细胞HEC-1B中的表达

黄婷婷;王萌;彭小刚;曹青

关键词:子宫内膜肿瘤, pEGFP-PTEN, 质粒构建
摘要:目的:利用分子克隆方法构建增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)与抑癌基因PTEN(phosphatase and tensin homologue)融合表达载体,为研究PTEN对子宫内膜癌细胞生物学作用奠定基础.方法:应用RT-PCR(reversing transcription polymerase chain reaction)方法获得正常人胚肾细胞293T中PTEN片段,先克隆至pMD18-T载体,对其进行测序分析,双酶切后与pEGFP-N2载体连接构建pEGFP-N2-PTEN重组质粒,用琼脂糖凝胶电泳检测.将子宫内膜癌细胞分3组,第一组转染pEGFP-N2空载体,第二组转染pEGFP-N2-PTEN重组质粒,第三组未转染做空白对照,在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白在细胞内的表达情况,采用Western blot法检测PTEN蛋白的表达.结果:pMD18-T-PTEN质粒测序与GenBank中人PTEN编码区(CDS)序列一致,pEGFP-N2-PTEN重组质粒经双酶切后用琼脂糖凝胶电泳检测到两个大小分剐为1.4 kb和4.7 kb的片段,且在子宫内膜癌中表达成功,Western blot检测出质粒转染组中PTEN蛋白质高表达.结论:成功构建了pEGFP-N2-PTEN重组真核表达质粒,在HEC-1B细胞中高表达,为子宫内膜癌的基因治疗研究提供理论基础.
实用医学杂志相关文献
  • 冠心病合并糖尿病患者血清YKL-40水平变化及其与冠脉病变的关系

    目的:探讨冠心痛合并糖尿病患者血清YKL-40(几丁质酶-3样蛋白-1)水平变化及其与冠状动脉病变程度的关系.方法:选取2010年10月至2011年5月在我院心内科住院的患者88例,所有患者均行冠状动脉造影检查,根据冠状动脉造影结果及糖尿病诊断标准分为正常对照组、单纯冠心痛组及冠心痛合并糖尿病组.采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清YKL-40浓度,比较各组问血清YKL-40水平.采用Gensini评分系统测定冠状动脉病变程度,并与血清YKL-40水平进行相关性分析.结果:与对照组相比,冠心病合并糖尿病组及单纯冠心痛组血清YKL-40水平显著升高,差异均有统计学意义(P<0.01).冠心病合并糖尿病组血清YKL-40水平高于单纯冠心病组,差异具有统计学意义(P<0.05).冠心病合并糖尿病组血清YKL-40水平与Gensini评分呈正相关(r=0.655,P<0.01).结论:血清YKL-40水平升高与冠心病合并糖尿病患者冠脉病变严重程度密切相关,YKL-40作为一种炎症因子可能在冠心痛合并糖尿病患者冠状动脉病变的发生发展中起重要作用.

    作者:郭艳歌;张菲斐;邱春光;韩战营;黄振文 刊期: 2011年第24期

  • 晚期肝癌临床试验入组标准探讨

    原发性肝细胞癌(hepatocelluar carcinoma,HCC)是世界上常见、恶性程度高的肿瘤之一.发病率在恶性肿瘤中位居全球第5位,病死率位居第3位[1-2].西方30%~40%的肝癌患者没有根治性局部治疗机会[3],中国有90%的患者没有根治性手术机会[4].同时,原发性肝细胞性肝癌经过根治性局部治疗后有较高的复发率[1,5-6].因此大部分肝癌患者需要接受全身治疗.

    作者:吴祥元;林曲 刊期: 2011年第24期

  • 地塞米松在预防乳腺癌蒽环类化疗致呕吐的效果

    目的:观察地塞米松在预防乳腺癌蒽环类化疗所致消化道反应中的疗效.方法:对129例接受以蒽环类联合化疗的乳腺癌患者,随机分成两组,A组接受化疗前给予格拉司琼针3 mg静推及地塞米松针5 mg静推,B组接受化疗前给予格拉司琼针3mg静推,观察两组48h内消化道反应情况.结果:两组的恶心、呕吐有效控制率分别为84.1%和66.7%(P<0.05).结论:地塞米松联合格拉司琼可以有效减少乳腺癌术后蒽环类化疗所致呕吐发生,是一种疗效高、价格低廉、安全有效的止吐方法.

    作者:陈彩萍;黄建棋;陆翔;韩文兰;喻其霞;郭文利 刊期: 2011年第24期

  • 原发性胸膜鳞癌误诊为胸膜间皮瘤1例

    患者男,75岁,退休工人,2009年因体检时发现右侧胸膜结节,于温州医学院附属第一医院胸腔镜下行右侧胸膜结节切除术,术后病理示:纤维组织增生伴炎细胞浸润及间皮细胞增生.胸膜间皮瘤首先考虑.术后2年未诉不适.1周前患者因右侧胸痛,伴乏力、咳嗽,咳少量浓痰,于2011年4月14日再次入院就诊.体格检查:T36.8℃,P 72次/min,R 20次/min,BP 110/68 mmHg(1 mmHg=0.133kPa).皮肤、黏膜无黄染,颈软,气管居中,甲状腺无肿大,锁骨上及全身浅表淋巴结未触及肿大.

    作者:朱冠保 刊期: 2011年第24期

  • 绞窄性肠梗阻预测指标的多因素分析

    目的:探索绞窄性肠梗阻的预测指标.方法:采用X2检验及非条件Logistic回归对2000年1月至2010年12月某医院普外科收治的269例肠梗阻手术病例的临床资料进行回顾性分析.结果:绞窄性肠梗阻患者176例,非绞窄性肠梗阻患者93例.CT检查结果中,肠壁不强化或弱强化是绞窄性肠梗阻的主要预测指标(OR=40.950,P<0.001),腹水、条索状脂肪的OR值分别为7.375、5.732(P=0.001);实验室指标WBC数量预测绞窄的OR值为7.423(P=0.002);临床症状及体征中,仅腹膜刺激征OR值为5.426(P=0.002);有腹部手术史患者较易发生非绞窄梗阻(OR=0.046,P<0.001).结论:预测绞窄的主要指标是肠壁不强化或弱强化.但腹水、条索状脂肪、腹膜刺激征、WBC数量以及患者腹部手术史也是判断绞窄的重要参数.

    作者:张昊;高黎黎;武兆忠 刊期: 2011年第24期

  • 颈动脉彩色多普勒检查分析血管因素与认知功能障碍的关联

    目的:利用颈动脉彩色超声检查研究阿尔茨海默病(alzheimet's disease,AD)和轻度认知障碍(mild cognitive impairment,MCI)与颈动脉血管改变的关系.方法:选取AD组36例、MCI组18例和正常对照组20例,全部对象均行颈动脉彩色超声检查,比较各项观察指标.结果:AD组和MCI组双侧颈总动脉及双侧颈内动脉的峰值流速(PSV)和阻力指数(RI)值均数大于正常对照组,其中AD组左颈总动脉PSV和RI值、左颈内动脉RI值与正常对照组比较差异具有显著性(P<0.05).AD组与MCI组双侧颈动脉内膜-中膜厚度(IMT)均数均大于正常对照组,其中AD组与正常对照组双侧颈动脉IMT比较以及MCI组与正常对照组左侧颈动脉IMT比较差异具有显著性(P<0.05).结论:颈动脉的血运情况可能与MCI和AD的发病相关.

    作者:徐书雯;张霞辉;高广生;向绍通;陈伟平;肖敏 刊期: 2011年第24期

  • 截肢术后幻肢痛发生的多因素回归分析

    目的:探讨截肢患者幻肢痛发生的相关因素.方法:设计一份调查问卷,对226例行截肢手术的患者进行电话随访,应用单因素和多因素的分析方法,回顾性分析幻肢痛发生可能的相关因素.结果:单因素分析发现麻醉方式、术前疼痛、术后镇痛、并发症、残肢痛与幻肢痛发生相关(P<0.05),性别、年龄、职业、文化程度、婚姻状态、截肢原因、截肢部位、假肢安装与幻肢痛发生无关(P>0.05),多因素分析进一步证实影响幻肢痛发生的独立因素分别为术前疼痛(OR=2.60),残肢痛(OR=3.70),全身麻醉(OR=2.94)和术后镇痛(OR=0.44)(P<0.05).结论:术前疼痛、残肢痛、全身麻醉是幻肢痛发生的相关危险因素,术后镇痛是幻肢痛发生的保护因素,对于预防幻肢痛的发生具有重要的作用.

    作者:朱天琦;蒋宗滨;赵劲民;彭宇;曾金;李锋;蒋奕红 刊期: 2011年第24期

  • 功能定位结合CT定位射频热凝术治疗原发性三叉神经痛疗效评价

    目的:探讨功能定位结合CT定位射频热凝术治疗原发性三叉神经痛疗效.方法:选择127例原发性三叉神经痛患者,随机分为功能定位组和对照组,采用不同定位方法进行定位后实施射频热凝术治疗三叉神经痛,分别与术后7d、术后3个月比较不同组患者治疗效果.结果:功能定位组患者术中一次性穿刺成功比例(100%vs 90.77%)、1h内完成手术比例(100%vs 87.69%)均高于对照组,术中出现心血管反应比例(6.45% vs 21.54%)少于对照组患者,差异均有统计学意义.功能定位组患者术后3个月并发症(3.23%)和复发率(0%)低于对照组(并发症16.92%;复发率12.07%),差异有统计学意义.功能定位组患者术后7d及3个月疼痛缓解度有优于对照组的趋势,但差异尚无统计学意义.结论:功能定位结合CT定位射频热凝术可显著提高三叉神经痛治疗效果、缩短手术时间、提高患者手术耐受性.

    作者:杨鹏;李云;朱军;付爱军;刘清军;张志勇;孙泽林;李群喜;鲁大双 刊期: 2011年第24期

  • 单发及双原发癌食管鳞癌CDH1基因甲基化的研究

    目的:研究单发及双原发癌食管鳞癌组织CDH1基因甲基化变化特征及其与性别、年龄、烟酒史和肿瘤家族史的关系.方法:应用甲基化特异性PCR法,检测62例单发食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)、18例双原发癌食管鳞癌患者癌及癌旁组织CDH1基因甲基化的表达.结果:单发及双原发癌食管鳞癌.CDH1基因甲基化阳性率在癌组织中为51.6%和66.7%,癌旁组织为22.6%和22.2%,正常组织为0%.癌与癌旁组织相比差异均有统计学意义(均P<0<0.05),癌与正常组织差异均有统计学意义(均P<0.05),癌旁与正常组织间差异均无统计学意义(均P>0.05).单发和双原发癌食管鳞癌组织CDH1基因甲基化阳性率比较无统计学差异(P>0.05).CDH1基因甲基化与性别、年龄、烟酒史及上消化道肿瘤家族史均无关.结论:CDH1基因甲基化在单发及双原发癌食管鳞癌中是一常见的表观遗传学事件;CDH1基因甲基化可能是一个独立的危险因素.

    作者:李永丽;张立玮;丁国瑾 刊期: 2011年第24期

  • 急性胆源性胰腺炎的治疗方案及手术时机的选择

    急性胆源性胰腺炎(actue biliary pancreatitis,ABP)系指因胆道梗阻相关因素而引起的急性胰腺炎.ABP占急性胰腺炎的50%~70%[1],其起病急、发展快,病死率高达20%~30%.手术治疗对于ABP的有效性近年来已达成共识,但对手术时机及手术方式的选择仍存在一些争议.现收集我院2005年7月至2010年7月期间收治的急性胆源性胰腺炎96例临床资料,对其不同治疗方案及手术时机的选择分析总结如下.

    作者:秦双伟;艾可为;寸向农;杨开明 刊期: 2011年第24期

  • 腹膜透析液冲洗对继发性腹膜炎休克的作用

    目的:探讨腹膜透析液冲洗在继发性腹膜炎休克治疗中的作用.方法:选择继发性弥漫性腹膜炎感染性休克患者,在处理腹膜炎的原发病灶后,在患者腹腔内均放置2根输入导管和1根引流管,并用腹膜透析液进行冲洗,每12h 1次,并于1、2和4d后检测降钙素原水平,并对结果及预后进行比较.结果:治疗组血压于(38±9)h达到平稳,而对照组需要(58±39)h,P<0.01;降钙素原在治疗组于第4天降到(2.2±1.5)ng/mL,对照组为(10.5±27.1)ng/mL,P<0.01;治疗组除1例结肠癌术后破裂在救治过程中发现存在肝转移而放弃治疗血压均恢复平稳,对照组病死率22.22%,P<0.01.结论:对弥漫性腹膜炎感染性休克患者,腹膜透析液冲洗有着多方面的治疗作用.

    作者:冯伟生;刁井地;冯伟龙 刊期: 2011年第24期

  • 血清胱抑素C水平与冠心病严重程度的关系

    目的:探讨血清胱抑素C水平(Cystatin C,CysC)与冠心痛严重程度的关系.方法:经选择性冠状动脉造影入选150例患者,确诊为冠心病110例(冠心病组),冠脉病变程度用病变血管支数及Gensini积分表示;非冠心病40例(为对照组).测定其血清CysC、超敏C反应蛋白(high-sensitive C-reactive protein,hs-CRP)、血脂等水平,分析血清cysc水平与冠心病、hs-CRP等之间的关系.结果:(1)冠心病组血清CysC 水平(1.26±0.43 mg/L)明显高于非冠心病组(1.01±0.23 mg/L)(P<0.05);随冠脉病变支数的增加,血清CysC、Gensini积分、hs-CRP均明显升高(P<0.05).(2)血清CysC水平与年龄、hs-CRP呈正相关,与血脂水平无明显相关性.(3)血清CysC与Gensini积分之间存在线性正相关(P<0.001).结论:血清CysC水平与冠心病严重程度密切相关,与hs-CRP呈正相关,可能成为冠心病严重程度的预测指标之一.

    作者:郭瑞霞;张晓;朱记法;陈龙 刊期: 2011年第24期

  • 置管节律冲洗联合早期肠内营养治疗重症急性胰腺炎的效果

    目的:探讨节律冲洗法联合早期肠内营养(EN),简称二联法,对于促进重症急性胰腺炎(SAP)患者早期痊愈的临床可行性.方法:2010年7月至2011年5月入院的64例SAP患者随机分为试验组(n=32)和对照组(n=32),其中对照组采用传统的一般治疗方法,试验组则在此基础上加用二联法治疗,观察两组的临床痊愈时间(d)、同期(7、14 d)营养学指标前白蛋白(PAB)和转铁蛋白(TRF)水平及ARDS、MODS等并发症的发生率(%).结果:试验组患者的平均痊愈时间、营养学指标恢复时间均早于对照组而并发症的发生率则低于对照组(P<0.05),有统计学意义.结论:二联法优于传统的治疗方法.

    作者:于颖剑;崔伟英;高鹏志;底国营;许建多 刊期: 2011年第24期

  • 云南汉族老年人群β2-AR基因Arg16Gly多态性与COPD合并EH的相关性

    目的:探讨β2-肾上腺素能受体(β2-adrenoeeptor,β2-AR)基因编码区16位点基因多态性与云南汉族老年人群慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并原发性高血压(EH)的相关性.方法:用等住基因特异性聚合酶链反应(AS-PCR)技术检测180例研究对象的B2-AR基因编码区第16位点单核苷酸多态性(SNP).结果:β2-AR基因16位点基因型和等位基因频率在COPD合并EH组、COPD未合并EH组和健康对照组间的分布差异无统计学意义(JP>0.05).但16位点GlyGly与ArgGly基因型的COPD,其FEV1%预计值低于ArgArg 基因型的患者.在COPD合并EH组,Gly16等位基因位频率在各级高血压患者中的分布分别为18%、33%和50%,其在各级高血压之间的分布差异均有统计学意义(均P<0.05).结论:在本研究中,β2-AR基因16位点基因多态性与云南汉族老年COPD合并EH的发病无相关性.但β2-AR基因16位点基因多态性与COPD肺通气功能的损害程度有关,携带Gly16等位基因的COPD惠者肺通气功能更易受到损害.β2-AR基因16位点基因多态性与COPD合并EH的血压分级有关,Gly16等位基因是COPD合并EH血压增高的因素.

    作者:王成;谭芳;杨皑岚;李华;毕鸿雁;傅玮萍;戴路明;陈芬;符琴;田陆云 刊期: 2011年第24期

  • 西洛他唑对强噪声所致豚鼠耳蜗血流及听阈偏移的影响

    目的:探讨在强噪声条件下,磷酸二酯-3A(phosphodiasterase-3A,PDE3A)特异性抑制剂西洛他唑(cilostazol)对豚鼠耳蜗血流及听阈偏移的影响.方法:将40只雄性豚鼠随机分为4组(每组10只):对照组、无噪声给药组、强噪声不给药组,强噪声给药组.强噪声组给予4 KHz的倍频窄带噪声(105 dB SPL)处理13 h.处理后立即腹腔注射西洛他唑(10mg/kg),分别测定处理后各组动物的耳蜗血流速度及ABR阈值.结果:与对照组相比较,强噪声不给药组的血流速度在处理后60、90、120 min时均显著性下降(P<0.01):与强噪声不给药组比较,强噪声给药组的血流速度在处理后30、60、90、120 min时均显著性增高(P<0.05).与对照组相比较,强噪声不给药组在处理后ABR阈值显著性高于对照组(P<0.05);与强噪声组不给药组相比较,强噪声组给药组ABR阔值要显著性降低(P<0.01).结论:西洛他唑能有效改善耳蜗的血流状况及恢复强噪声所致豚鼠的听阅偏移

    作者:黄敏齐;张建国 刊期: 2011年第24期

  • 慢性阻塞性肺疾病患者诱导痰中β-防御素2水平及其与NF-κB的相关性

    目的:测定慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)及治疗后稳定期患者诱导痰中人β-防御素2(hBD-2)的水平及痰巨噬细胞中细胞核因子κB(NF-κBp65)的表达和它们相关性,探讨hBD-2在COPD发病机制中的作用.方法:选择2009年5月至2010年10月我院呼吸内科住院AECOPD及治疗后稳定期患者50例和50例健康受试者(健康对照组).检测COPD患者治疗前及稳定期和健康对照组的肺功能,测定诱导痰中hBD-2的水平及痰巨噬细胞中NF-κBp65的表达,并分析hBD-2与NF-κBp65及肺功能之间的相关性.结果:COPD组急性加重期与稳定期痰液hBD-2水平及痰巨噬细胞中NF-κBp65的表达均高于正常对照组,且急性加重期高于稳定期(P<0.01),相关分析显示,痰巨噬细胞中NF-κBp65的表达与hBD-2的水平呈正相关(r=0.862,P<0.01),诱导痰中B-防御素2水平与FEVI占预计值%呈负相关(r=-0.475,P<0.01).结论:hBD-2及NF-κB参与COPD的炎症过程;痰中hBD-2水平可作为COPD严重程度的指标;NF-κB可能通过上调hBD-2的表达而在COPD气道炎症中起关键作用.

    作者:高蔚;翁婷;孟文书 刊期: 2011年第24期

  • 继发性甲状旁腺功能亢进症的药物治疗进展

    继发性甲状旁腺功能亢进症(SHPT)是慢性肾功能衰竭(CKD)的常见并发症,在CKD早期[CFR<80 mL/(min·1.73 m2)3个月以上]即可出现.并随着肾功能的恶化而加重,可引起代谢性骨病、血管钙化及软组织的钙化使心血管疾病的发病率和病死率增加.SHPT的传统药物治疗包括补钙、磷结合剂、活性维生素D等,但这些手段并不能完全改善SHPT症状,且可引起高钙血症、高磷血症、钙磷乘积升高等副作用.随着研究的深入,对SHPT的药物治疗有了新的进展,本文予以综述.

    作者:周燕;周玉坤 刊期: 2011年第24期

  • 室间隔缺损术后合并急性肾功能不全患儿腹膜透析的意义

    目的:探讨腹膜透析对先天性室间隔缺损合并急性肾功能衰竭治疗价值和实验室指标.方法:2007年6月至2011年5月,540例先天性心脏病病儿进行心内直视手术,12例术后因急性肾功能衰竭在ICU接受腹膜透析治疗,其中7例患儿在少尿2h和血钾持续升高后早期行腹膜透析(实验组):5例患儿在血尿素氮和肌酐达到透析指标做腹膜透析(对照组).结果:实验组患儿生存5例,病亡2例:对照组患儿生存0例,病亡5例.同时,18h测定肌钙蛋白I(cTnI)、腹膜透析后动脉pH值、碱剩余(BE)、乳酸(Lact)、胶体渗透压(COP)、正性肌力药物评分(InS)、气道峰压(PIP)等指标,在实验组和对照组差异有统计学意义.结论:结合cTnI、pH、PIP、COP指标,早期行腹膜透析有助于先心病室缺术后急性肾功能不全恢复.

    作者:易立文;刘平波;曾德斌 刊期: 2011年第24期

  • TFPI-2基因CpG岛甲基化与胰腺癌的关系

    目的:检测胰腺癌组织组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)基因CpG岛甲基化的状态,并分析甲基化改变与胰腺癌的关系.方法:应用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测45例胰腺癌组织、相应癌旁组织中TFPI-2基因的甲基化状态.结果:胰腺癌组织中TFPI-2基因的甲基化阳性率为71.1%(32/45),明显高于癌旁组织的31.1%(14/45)(P<0.01).8例正常胰腺组织中均未发生甲基化.TFPI-2基因甲基化阳性率还与胰腺癌的-临床分期、组织分化程度、肿瘤直径有相关性(P<0.05).结论:TFPI-2基因在胰腺癌组织中出现异常甲基化,可能与胰腺癌的发生发展关系密切.

    作者:郑浩;汤志刚;黄强;陈炯 刊期: 2011年第24期

  • 婴儿痉挛症与促肾上腺皮质激素释放激素假说

    婴儿痉挛症是一个高度年龄特异性的癫痫综合征,主要特征为特殊的痉挛发作、脑电图晕高峰节律紊乱,常伴智力低下.目前发病机制仍不明确.本文就促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin releasing hormone,CRH)假说作一综述.CRH具有促癫痫作用,增加未成熟脑的兴奋性并在应激下过度表达,这被认为是婴儿痉挛症发病的CRH增高假说.

    作者:王雅洁 刊期: 2011年第24期

实用医学杂志

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