学术投稿

不同亚型神经细胞黏附分子重组质粒的构建及鉴定

詹利;王特为;孙广运;杨朝鲜;邓莉;高小青

关键词:质粒, 神经细胞黏附分子, PCR
摘要:目的:构建不同亚型神经细胞黏附分子(NCAM)的重组质粒载体.方法:取成年小鼠大脑皮质提取总RNA,以提取的总RNA为模板,利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增得到NCAM-120cDNA、NCAM-140cDNA和NCAM-180cDNA后用Xba Ⅰ、HindⅢ酶切,在T4DNA连接酶的作用下,将酶切产物定向插入于质粒pcDNA4相应位点中,经PCR、酶切及测序鉴定其序列正确性.结果:PCR、酶切和测序鉴定证实pcDNA4-NCAM-120、pcDNA4-NCAM-140及pcDNA4-NCAM-180构建成功.结论:成功构建pcDNA4-NCAM-120、pcDNA4-NCAM-140和pcDNA4-NCAM-180的重组质粒,有助于进一步研究不同亚型NCAM的作用及其作用的差异性.
实用医学杂志相关文献
  • 胼胝体梗死的诊疗体会

    随着头MRI特别是磁共振弥散加权成像(DWI)的临床应用,越来越多的胼胝体梗死被诊断.因该部位血液供应丰富,及时给予恰当的治疗,大多数患者恢复较好.本文搜集了自2008年3月至2009年3月的14例胼胝体梗死患者资料,现报告如下.

    作者:马颖 刊期: 2010年第06期

  • 常规体外授精短时授精后6 h行卵胞浆内单精子注射治疗受精失败34例

    目的:探讨短时授精后6 h后早期实施卵胞浆内单精子注射(ICSI)治疗受精失败的临床价值.方法:对34例常规体外授精(IVF)短时受精后6 h未出现第二极体的卵子实施早期补救ICSI.结果:34例患者共获353枚MⅡ卵子,受精后6 h观察,均未出现第二极体立即实施ICSI,296枚正常受精,受精率为83.9%,4枚卵子出现3个原核,优质胚胎率56.4%,妊娠率41.2%.结论:通过常规IVF短时授精后6 h早期观察第二极体是否排出确定受精情况并对未排出第二极体的卵子及时实施补救ICSI,可成为治疗受精失败的有效方法.

    作者:马学工 刊期: 2010年第06期

  • 高渗氯化钠羟乙基淀粉在老年患者下肢手术中的应用

    目的:观察预注高渗氯化钠羟乙基淀粉40注射液(以下简称高渗晶胶液)对老年患者硬膜外麻醉下下肢手术的血流动力学、电解质钠(Na+)及凝血功能的影响.方法:选择36例ASA Ⅰ~Ⅱ级老年择期手术患者,随机分为高渗晶胶液组(研究组)和乳酸钠林格注射液组(对照组)两组.研究组于麻醉前30 min输注高渗晶胶液4mL/kg,对照组输注乳酸钠林格注射液8 mL/kg.比较两组患者循环、电解质钠、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)的变化.结果:研究组在麻醉后与麻醉前相比血压无明显下降,而对照组在麻醉后与麻醉前相比血压下降有显著差异(P<0.05).输液4 mL/kg后研究组血Na+与输液前比较有轻微升高,但无统计学意义(P>0.05),60min后基本恢复.两组输液后即刻与术前相比PT、APTT差异无统计学意义(P>0.05).结论:小剂量预注高渗晶胶液可有效预防老年患者硬膜外麻醉发生的低血压,维持血流动力学的稳定,对电解质及凝血功能无影响.

    作者:陶敏;王文伟;王华庆 刊期: 2010年第06期

  • 非小细胞肺癌中Survivin和Rb2/p130的表达及意义

    目的:检测Survivin和Rb2/p130在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达,探讨表达水平与预后的关系.方法:采用原位杂交和免疫组化法检测100份NSCLC石蜡标本中两者的表达.结果:(1)Survivin mRNA及蛋白随TNM分期增高,阳性表达率增高(P<0.01),淋巴结转移者较无转移者阳性表达率增高(P<0.01).(2)Rb2/p130mRNA及蛋白随TNM分期增高.阳性表达率降低(P<0.05),有淋巴结转移者较无转移者阳性表达率降低(P<0.05).(3)Survivin mRNA和蛋白的表达与Rb2/p130 mRNA和蛋白的表达均呈负相关.(4)Survivin蛋白阳性组患者术后5年存活率(6.9%)显著低于阴性组(17.9%)(P<0.05),Rb2/p130蛋白阳性组术后5年存活率(16.7%)显著高于阴性组(7.1%)(P<0.01).结论:Survivin与Rb2/p130的表达水平可能与NSCLC的进展和患者预后相关.

    作者:常延河;郑素玲;伊雪;王俊然;王文雅;郑素琴 刊期: 2010年第06期

  • 沙利度胺联合表柔比星抗SMMC7721增殖作用机制研究

    目的:通过细胞培养研究沙利度胺(Tha)联合表柔比星(EPI)抗SMMC7721作用机制.方法:用不同浓度Tha单药及其联合EPI作用于SMMC7721一定时间,检测细胞抑制率、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达、细胞凋亡率,对结果进行统计分析.结果:不同浓度、不同时间Tha、Tha+EPI组组内、组间细胞抑制率比较,差异有统计学意义(P=0.000).不同浓度Tha与SMMC7721细胞作用48 h后,随着浓度升高,VEGF蛋白表达相应降低,联合EPI后,VEGF蛋白表达进一步降低:不同浓度Tha、Tha+EPI与SMMC7721作用48 h后,其组内、组间凋亡率比较,差异有统计学意义(P<0.05),Tha联合EPI后,细胞凋亡率进一步升高.结论:Tha具有抑制SMMC7721细胞增殖、抗VEGF蛋白表达和诱导细胞凋亡作用,联合EPI可以显著提高抗SMMC7721效果.

    作者:鲁光平;潘骥群;于志坚;周雪峰;袁洪新 刊期: 2010年第06期

  • 两种不同胸腔引流管在食管癌贲门癌术中的应用研究

    目的:食管癌贲门癌术中置入负压球引流管,并与置入传统胸管相对照,评价其疗效及安全性.方法:572例食管癌贲门癌患者随机分为两组.A组术后使用负压球细管引流,B组术后使用传统粗胶管水封瓶闭式引流.结果:A组在胸腔积液、脓胸、镇痛剂应用,引流口感染、术后住院时间及管腔堵塞等方面与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05).结论:食管癌、贲门癌术后应用负压球细管引流,创伤小,效果确切满意,易被患者所接受.

    作者:冯彩婷;熊云田;李俊鹏;任杰;郭建英 刊期: 2010年第06期

  • 间歇性预激综合征并发室性早搏1例

    患者男,58岁,因心悸、胸闷、心前区不适来我院检查.既往无高血压、糖尿病等病史.查体:BP 120/80 mmHg,神清,双肺呼吸音清,无十湿哕音.心率约80次/min,心律小齐.无病理性杂音,双下肢无水肿,余无特殊体征.

    作者:狄美凤 刊期: 2010年第06期

  • 无创检查在女性冠心病中的应用

    近年来,男性冠心病的病死率不断下降,女性反有所增加,且女性患者相对预后更差.造成这种性别差异的原因,以往的观点认为是对女性的健康状况关注不够、女性缺乏就诊意识、院前拖延、治疗不及时等非疾病性因素.现在逐渐认识到男女患者不仅在病理生理、临床表现上存在差异,而且女性患者发生冠脉非阻塞性病变的比例高于男性,同时评价女性患者心肌缺血的检查手段亦缺乏敏感性和特异性.

    作者:付明;周颖玲;玲谭虹 刊期: 2010年第06期

  • 脓毒症大鼠心肌内皮素-1、肿瘤坏死因子-α表达与心肌损伤的关系

    目的:研究脓毒症时心肌损伤与心肌内皮素-1(ET-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的关系.方法:24只雄性SD大鼠随机均分为3组,正常对照组、假手术组、脓毒症组,每组8只.采取盲肠结扎穿刺术(CLP)建立脓毒症模型,24 h后动脉采血及分离左心室心肌,检测大鼠血清心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn Ⅰ)、心肌匀浆上清液中TNF-α、ET-1浓度.并分别观察心肌显微及超微结构改变.结果:脓毒症组大鼠血清cTn Ⅰ较正常时照组及假手术组明显升高(P<0.01),心肌出现典型变性及超微结构损伤;心肌TNF-α、ET-1较正常对照组及假手术组明显升高(P<0.01).脓毒症组血清cTn Ⅰ与心肌TNF-α、ET-1水平正相关(γ值分别为0.967和0.958,P<0.001).结论:脓毒症时心肌损伤与心肌TNF-α、ET-1水平上调有关.

    作者:彭娜;向定成;苏磊;张亚松 刊期: 2010年第06期

  • 肝门胆管癌肝移植治疗现状

    肝门胆管癌指原发于胆囊管开口以上,主要侵犯肝总管和其分义部以上左右肝管的胆管癌,约占胆管癌的60%.因常常累及门静脉、肝动脉或沿肝管向肝内侵犯,其外科处理较困难.虽术式不断改进,达到R0切除(即切缘镜下无残余肿瘤细胞)的比例不断提高,但其预后仍差,5年生存率约30%.

    作者:潘龙;杜成友 刊期: 2010年第06期

  • 依达拉奉对脑梗死患者IL-6、IL-1 3及ET-1表达的影响

    目的:探讨依达拉奉对脑梗死患者血清中白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素13(IL-13)及内皮素-1(ET-1)表达的影响,以探讨其临床意义.方法:选取120例脑梗死患者,随机分为观察组(60例)与对照组(60例),观察组在常规治疗基础上加用依达拉奉治疗,对照组应用常规治疗.于治疗前、治疗后观察血清中IL-6、IL-13和ET-1的变化,比较其差异.结果:观察组疗效明显优于对照组.观察组与对照组在治疗后血清IL-6和ET-1的表达均较治疗前明显降低,但观察组治疗后的下降值明显高于对照组.而两组治疗后血清IL-13的表达较治疗前明显升高,但观察组上升值明显低于对照组.结论:依达拉奉对脑梗死患者的疗效明显,对血清中IL-6、IL-13和ET-1有重要的调节作用.因此,临床中对脑梗死患者应积极应用依达拉奉治疗,以更好地保护脑细胞.

    作者:何国美;戴薇 刊期: 2010年第06期

  • 肺孢子菌肺炎诊断方法的研究进展

    肺孢子菌是一种机会性致病真菌,可引起严重的肺孢子菌肺炎(pneumocystis pneumonia,PCP),尤其是免疫功能低下的艾滋病患者,致死率为10%~20%[1].然而,近年一些非艾滋病如风湿性关节炎、血液病、肿瘤等并发感染PCP数量增多,致死率高达50%[2].

    作者:张辉;张进顺 刊期: 2010年第06期

  • 联合应用胰管占据法和针形刀技术在经内镜逆行胰胆管造影中的作用

    目的:探讨胰管占据法和针形刀联合应用在困难经内镜逆行胰胆管造影(ERCP)中的作用.方法:对于在ERCP中导丝反复进入胰管而难以进入胆管的病例,我们先采用胰管占据法技术(胰管留置导丝或支架),可使其中部分病例选择性胆管插管成功.但仍有部分病例导丝仍不能进入胆管,接着采用针形刀进行十二指肠乳头切开术.以进一步提高ERCP的成功率.结果:从2007年10月至2009年7月联合应用胰管占据法和针形刀切开技术共38例,成功进入胆管35例,成功率为92.1%,发生轻型胰腺炎1例.结论:对于较困难的ERCP病例,联合应用胰管占据法和针形刀切开术,可进一步提高ERCP的成功率,还可明显降低ERCP术后胰腺炎的发生率.

    作者:张玉柱;董金良;夏红兵;梁金荣 刊期: 2010年第06期

  • 合并重度肺动脉高压的成人先天性心脏病手术回顾及中期随访

    目的:总结成人先天性心脏病(CHD)合并重度肺动脉高压(PH)手术经验及中期随访结果.方法:CHD合并重度PH 32例,平均年龄(32.3±7.2)岁.以下列指标为手术适应证:(1)心脏超声多普勒,左向右分流的峰值流速、分流时间比值均不低于右向左分流:左向右分流与右向左分流频谱速度-时间积分比值大于1.85;(2)超声测压Pp/P8值≤1.0;(3)股动脉血气分析,PaO2≥60 mmHg,SaO2≥0.90;(4)无静息紫绀.手术均在体外循环下完成.随访日期定为术后3个月和12个月.此后每12个月1次.结果全组无手术死亡.完成有效随访28例,随访率87.5%.随访时间3~86个月.术后46个月死亡1例,死因为斗殴引发的意外.随访数据经单因素方差分析,SPAP、Pp/Ps值术后各组与术前比较,均有显著下降(P<0.01).LVEF值于24个月及36个月后与术前比较,有显著上升(O<0.05).术后心功能Ⅰ、Ⅱ级者占85.7%,均已参加一般劳动.心功能Ⅲ、Ⅳ级者现仍口服西地那非.结论:成人CHD合并重度PH手术治疗及中期随访结果较满意.准确掌握手术适应证及合理的围术期处理可降低手术死亡率.重视随访并积极后续治疗,可望进一步改善远期预后.

    作者:游昕;梁勇;钱维源;陈若为;马游;周建国 刊期: 2010年第06期

  • 剖宫产子宫切口部妊娠4例诊治分析

    剖宫产子宫切口部妊娠(全称子宫下段剖宫产切口瘢痕处妊娠,cesarean sear pregnancy,CSP)是剖宫产的远期并发症之一,是一种罕见的异位妊娠.目前对其诊断、治疗尚尤统一标准.随着剖宫产率增高此病发生率也有所增加.如果误诊,易发生大出血及子宫切除风险.

    作者:唐孟华 刊期: 2010年第06期

  • 两种股静脉采血法在小儿先天性髋关节疾病中的应用体会

    目的:比较股静脉垂直穿刺采血法与股静脉斜刺采血法在小儿先天性髋关节疾病中的应用效果.方法:选择小儿先天性髋关节疾病患儿226例,采用随机分类法分成两组(观察组和对照组),其中观察组患儿(113例)采用股静脉斜刺采血法,对照组(113例)患儿采用股静脉垂直穿刺采血法,比较并记录一次采血成功率、新手成功率、穿刺部位血肿发生率及肥胖儿一次成功率.结果:股静脉斜刺采血法成功率为90.3%,股静脉垂直穿刺采血法成功率为76.1%.结论:股静脉斜刺采血法更适合在小儿先天性髋关节疾病中应用.

    作者:祝崇雪;李若;金平湖 刊期: 2010年第06期

  • CpG寡聚脱氧核苷酸抑制人膀胱癌细胞在裸鼠体内的生长

    目的:观察不同剂量的CpG ODN 1668对裸鼠皮下接种人膀胱移行细胞癌T24细胞生长的抑制作用,并与卡介苗的作用进行比较.方法:通过皮下接种T24细胞,建立裸鼠皮下接种人膀胱癌细胞的动物模型.将裸鼠随机分为5组,(1)对照组;(2)BCG组;(3)小剂量CpG ODN 1668组;(4)中等剂量CpG ODN 1668组;(5)大剂量CpG ODN 1668组.自肿瘤细胞接种后第1天起给药,共4次(第1、8、15、22天),在肿瘤周围多点注射相应药物(早期给药);同样方式另设5组动物,自肿瘤细胞接种后第7天起(第7、14、21、28天)于肿瘤周围多点注射相应药物(延迟给药).观察肿瘤体积和裸鼠的生存率.结果:早期给药时,在CpG ODN 1668各剂量组和BCG组,肿瘤生长均被抑制,裸鼠的生存期得到延长.中等剂量和大剂量CpG ODN 1668组对肿瘤细胞生长的抑制作用强于BCG组.延迟给药时,CpG ODN 1668各剂量组肿瘤体积和裸鼠的生存率,与对照组和BCG组的差异无显著统计学意义.结论:CpGODN 1668的早期应用,可抑制人膀胱癌细胞T24在裸鼠体内的生长,并表现为剂量依赖性;其抗肿瘤效应是非T细胞依赖的.当加大使用剂量时,CpG ODN 1668对膀胱癌细胞生长的抑制作用强于BCG.而当肿瘤负荷较大时,CpG ODN 1668和BCG的延迟使用对膀胱肿瘤细胞在裸鼠体内的生长无抑制作用.

    作者:何威;周佩军;沈周俊;马斌斌 刊期: 2010年第06期

  • 腺病毒介导的人低氧诱导因子-1α治疗兔后肢缺血的安全性研究

    目的:对腺病毒介导的人低氧诱导因子-1α(Ad-HIF-1α)治疗兔急性后肢缺血的安全性进行探讨.方法:(1)Ad-HIF-1α及腺病毒空载体(Ad-Blank)扩增、滴度测定.(2)建立兔急性后肢缺血模型,随机分为3组,每组6只,分别以Ad-HIF-1α2.0 ×1010PFU)、Ad-Blank(2.0×1010PFU)和NS(0.5 mL)肌注离断股动脉肌群,观察兔一般反应,术前及术后7、28 d检查心电图和血常规、肝肾功能,术后28 d处死动物行病理学检查.结果:(1)Ad-HIF-1α及Ad-Blank滴度分别达2.0×1013、1.5×1013 Pfu/mL.(2)受试期兔一般情况好;3组兔血常规、肝肾功能指标在正常值范围,组间对比无显著差异(P>0.05);心电图正常;病理学检查未见癌细胞.结论:兔急性后肢缺血模型局部一次性转染2.0×1010PFU的Ad-HIF-1α,未见明显毒副反应;Ad-HIF-1α应用于兔是相对安全的.

    作者:陈建威;李明琰;陈冬冬;裴静娴;王月刚;吴平生 刊期: 2010年第06期

  • 胶质瘤的CT灌注成像研究

    目的:探讨CT灌注成像对胶质瘤术前分级的价值.方法:30例胶质瘤患者,低级别组11例,高级别组19例.在常规CT扫描的基础上行CT灌注成像检查.分析灌注图像.测量肿瘤实质部分的脑血流量(CBF)、脑血容量(CBV)、对比剂平均通过时间(MTT)及表面通透性(PS)的绝对值和相对值,并对两组进行比较.结果:低级别胶质瘤的r CBF、r CBV、r MTT、r PS均值分别为1.41±0.16、2.31±0.28、1.69±0.83、6.67±2.28;高级别胶质瘤的r CBF、r CBV、r MTT、r PS均值分别为4.96±2.17、4.69±1.65、1.29±0.55、19.19±8.65.两组r CBF、r CBV、r PS间差异具有显著意义.结论:CT灌注成像对胶质瘤术前分级具有临床实用价值.

    作者:黄劲柏;任伯绪;雷红卫;蔡新宇;熊浩;胡新杰 刊期: 2010年第06期

  • 化疗药物渗漏性损伤护理的新进展

    静脉化疗足治疗恶性肿瘤的主要手段之一,化疗药物渗漏性损伤是化疗过程中的一个潜在的并发症.外渗一旦发生,轻者引起局郎红肿、疼痛,患侧静脉通道不能继续使用,重者皮肤组织坏死.甚至损伤神经、肌腱,造成肢体功能障碍[1-2].

    作者:杨青 刊期: 2010年第06期

实用医学杂志

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主管:广东省卫生厅

主办:广东省医学情报研究所