学术投稿

男性不育患者精浆中差异表达蛋白的筛选与鉴定

潘春琴;刘池波;梁勇;牟思华

关键词:不育, 男(雄)性, 蛋白质组学, 双向凝胶电泳
摘要:目的:初步探讨蛋白质组技术在精浆研究中的应用,建立男性少精、无精症患者及健康者精浆双向凝胶电泳图谱;筛查并鉴定三者间的差异表达蛋白质.方法:采用双向凝胶电泳(2-DE)分离少精症、无精症患者和健康者精浆总蛋白,银染显色,ImageMaster 2D Elite软件分析,从中选取差异表达蛋白质,通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定差异表达的蛋白质.结果:获得分辨率较好的精浆双向凝胶电泳图谱;得到5个在少精症、无精症忠者与健康者精浆中差异有显著性的蛋白质斑点,进行鉴定.结果表明这些特异蛋白分别为Serpin B6(Placental tlrlrorllbJ in inhibitor)(Cytoplasmic antiproteinase)(CAP)(P~otease inhibitor6)(PI-6)、Septin-1(LARP)(SeFOlogicauy defined breast cancer antigen NY-BR-24)、Kallikrein·6 precursor(Protease M)(Neur08in)(zyme) (SP59)、Hemoglobin beta chain、Beta-defensin 108 precursor(Beta-defenain 8)(DEFB-8).结论:在少精症、无精症患者与健康者精浆中存在差异表达蛋白质,利用蛋白质组学这一高通量的筛查技术可望从中发现与少精、无精相关的精浆标志物.
实用医学杂志相关文献
  • 男性不育患者精浆中差异表达蛋白的筛选与鉴定

    目的:初步探讨蛋白质组技术在精浆研究中的应用,建立男性少精、无精症患者及健康者精浆双向凝胶电泳图谱;筛查并鉴定三者间的差异表达蛋白质.方法:采用双向凝胶电泳(2-DE)分离少精症、无精症患者和健康者精浆总蛋白,银染显色,ImageMaster 2D Elite软件分析,从中选取差异表达蛋白质,通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定差异表达的蛋白质.结果:获得分辨率较好的精浆双向凝胶电泳图谱;得到5个在少精症、无精症忠者与健康者精浆中差异有显著性的蛋白质斑点,进行鉴定.结果表明这些特异蛋白分别为Serpin B6(Placental tlrlrorllbJ in inhibitor)(Cytoplasmic antiproteinase)(CAP)(P~otease inhibitor6)(PI-6)、Septin-1(LARP)(SeFOlogicauy defined breast cancer antigen NY-BR-24)、Kallikrein·6 precursor(Protease M)(Neur08in)(zyme) (SP59)、Hemoglobin beta chain、Beta-defensin 108 precursor(Beta-defenain 8)(DEFB-8).结论:在少精症、无精症患者与健康者精浆中存在差异表达蛋白质,利用蛋白质组学这一高通量的筛查技术可望从中发现与少精、无精相关的精浆标志物.

    作者:潘春琴;刘池波;梁勇;牟思华 刊期: 2009年第01期

  • 关节腔内不同剂量吗啡对膝关节镜术后疼痛的影响

    目的:评价膝关节镜术后关节腔内注射不同荆量吗啡术后镇痛的效果.方法:选择硬膜外腔麻醉下实施膝关节镜手术的患者,分为4组,术后分别向关节腔内注入吗啡.C组:生理盐水;M1组:1 mg吗啡;M2组:2mg吗啡:M5组:5mg吗啡.注药后1、4、8、12及24 h对患者的疼痛程度进行视觉模拟评分(VAS),记录镇痛时间,24 h内患者需追加镇痛药的例数以及恶心、呕吐、皮肤瘙痒及尿潴留等并发症.结果:术后镇痛时间,M5组M2组M1组C组.吗啡组明显长于对照组(P<0.01);VAS评分各吗啡组均呈下降趋势,M5组VAS评分值在各个观察点小;术后需追加哌替啶的例数随吗啡剂量的增加而减少;并发症发生率M5组M2组M1组≈C组.结论:膝关节镜术后关节腔内注射吗啡的镇痛效果随吗啡剂量的增加而增强;并发症发生率随吗啡剂量的增加而升高:关节腔内注入2 mg吗啡因其镇痛时间较长、并发症较少适合在临床推广应用.

    作者:彭亮;张立贤;曹阳;王爱群;梁冰;梁伟国 刊期: 2009年第01期

  • 二甲双胍联合罗格列酮对2型糖尿病患者可溶性细胞黏附分子的影响

    目的:探讨二甲双胍联合罗格列酮对2型糖尿病患者可溶性细胞黏附分子表达的影响.方法:60例2型糖尿病患者分为二甲双胍组(A组)和二甲双胍加罗格列酮组(B组),每组各30例,治疗24周.分别检测治疗前及治疗后12、24周空腹血糖、血脂、血清可溶性细胞闻黏附分子-1(sICAM-1)和可溶性血管细胞间黏附分子-1(sVCAM-1)的水平.结果:两组患者经治疗12周后血糖均不同程度改善,24周后B组血糖降低水平优于A组,差异有统计学意义(P<0.05).两组患者血清甘油三酯、胆固醇均较治疗前下降,仅B组高密度脂蛋白胆固醇升高,差异有统计学意义(P<0.05).治疗24周后,B组血清sICAM-1和sVCAM-1表达水平低于A组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:二甲双胍联合罗格列酮治疗可持续稳定改善糖尿病惠者的代谢综合征,同时减少患者血浆黏附分子的表达,有助于改善或延缓糖尿病合并动脉粥样硬化的发生.

    作者:胡桂芳;武革;杨璐 刊期: 2009年第01期

  • 门诊患者胃食管反流病的流行病学调查

    目的:探讨胃食管反流病(GERD)与呼吸道、口咽部疾患的关系,明确GERD发病的危险因素.方法:20cr7年10月至2008年1月,采用随机抽取本院内科门诊患者的方法,并采用近衍生的中文版反流疾病问卷(RDQ)对18岁以上的人群进行调查.对调查中收集到的胃食管反流症状人群进行伴发口咽部、呼吸道疾患及其危险因素的分析.结果:共1 265例完成调查,其中GERD症状人群111例(RDQ评分12分).男性患病率略低于女性,分别为8.50%和8.98%,但两者差异无统计学意义.GERD组伴发咽炎、支气管炎、哮喘及打鼾的比例明显高于非GERD组,两组比较差异有显著性.多因素Logistic回归分析显示,经常进食过饱(OR=2.78),油腻饮食(OR=4.36),便秘(OR=2.06)及精神紧张(OR=2.11)对GERD患病具有显著影响.结论:胃食管反流病与咽炎、支气管炎、哮喘及打鼾关系密切,在治疗这类疾病时应注意除外GERD.进食过饱、油腻饮食、便秘及精神紧张增加了GERD患病的风险性,是GERD患病的独立危险因素.

    作者:胡水清;张玫;牛小羽;周俊 刊期: 2009年第01期

  • CYP1182-344T/C基因多态性与2型糖尿病肾病的关系

    目的:研究2型糖尿病(T2DM)患者CYPlIB2.344T/C基因多态性与糖尿病肾病(DN)的相关性以及与DN不同分期的关系.方法:将145例12DM患者分为DN组73例和糖尿病非肾病组(NDN组)72例,另选择52例门诊体验健康人为正常对照组(NC组).应用聚合酶链反应一限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)对以上197例观察对象进行基因型分析.结果:(1)DN患者存在CYPllB2-344T/C多态性.本研究197例观察对象中CYP11B2-344T/C多态性存在CC、CT、TT3种基因型,频率分别为12.7%、50.3%、37.1%;C、T等位基因频率分别为31.2%、68.8%.(2)DN组CYPllB2.344T/C T等位基因频率明显高于NC组(P<0.05).(3)DN组CYP11B2-344T/C多态性CC、CT、TT3种基因型各临床指标均数比较差异无显著性(均P0.05).(4)DN组内微量白蛋白尿期、临床白蛋白尿期和肾功能不全期CC、TT、CT基因型频率和C、T等位基因频率差异均无显著性(均P0.05).(5)CYP11B2-344T/C基因型与DN无相关性(P0.05).(6)DN患者TT基因型血浆醛固酮水平高.结论:CYP1182-344T/C多态性与2型糖尿病肾病无显著相关性.

    作者:张晓梅;孙卫华;徐浣白;周纯先;石建华 刊期: 2009年第01期

  • 银杏达莫注射液辅助治疗不稳定型心绞痛的疗效

    目的:评价银杏达莫注射液辅助治疗不稳定型心绞痛的疗效.方法:269例不稳定型心绞痛患者分为两组.对照组121例,予冠心病常规治疗(硝酸酯类、β受体阻滞剂、钙离子拮抗剂,、抗血小板药).治疗组148例,除给予冠心病常规治疗外,加用银杏达莫注射液20 mL,每天1次,连用15 d为1个疗程.分别观察两组治疗前、后心电图改变、心绞痛症状改善情况和控制心绞痛发作时间.结果:加用银杏达莫注射液治疗后,心电图心肌缺血改变,心绞痛症状改善及控制心绞痛发作时间均优于对照组(P<0.05).结论:银杏达莫注射液辅助治疗不稳定型心绞痛有确切疗效.

    作者:李元忠;李志操 刊期: 2009年第01期

  • 盐酸戊乙奎醚在门诊早孕人工流产中的应用

    目的:探讨盐酸戊乙奎醚(PHC)在门诊早孕人工流产中的作用.方法:将早期妊娠自愿要求终止的妇女分为两组,两组术中都使用安慰剂,观察组术前15~30 min肌注PHC 1 mg,对照组术前不用药.结果:观察组宫颈充分扩张的总有效率84.17%.镇痛总有效率50.83%,均明显优于对照组(P<0.05).观察组人工流产综合征的发生率明显降低(P<0.005).结论:PHC肌注用于人工流产,能有效扩张宫颈,减轻术时、术后疼痛,能够减少人工流产综合征的发生,无明显的不良反应,具有较好的推广前景.

    作者:王丽梅;杨军霞;王丹虹;温凯辉 刊期: 2009年第01期

  • 急性迟缓性麻痹30例病因分析

    多种疾病可以表现为急性弛缓性麻痹(AFP)[1-2].我们对30例AFP患儿进行临床分析,结合现代的检查手段,试图对其中的临床表现为AFP的疾病做出早期诊断,以便及时治疗.现分析报告如下.

    作者:李岩;巩淑飞;李招娣 刊期: 2009年第01期

  • 致心律失常性右室心肌病20例临床分析

    目的:探讨致心律失常性右室心肌病(ARVC)的临床和心电图特点.方法:收集、查阅2002-2005年20例诊断为ARVC患者入院病例资料.常规行临床资料、心电图、超声心动图、X线胸片、24 h动态心电图及心内电生理检查的资料分析.结果:20例ARVC患者中有晕厥发作(65%)、心悸(100%)、频发室性早搏(100%)、右心室源性短阵室速(85%).20例患者常规心电图检查中15例(75%)有右束支传导阻滞(RBBB),12例(60%)电轴右偏,7例(35%)出现Epsilon波,17例(85%)胸前导联V1~V3 T波倒置,13例(65%)V1导联QRS波时限≥110 mg,12例(60%)(V1+V2+V3导联QRS波时限之和)/(V4+V5+V6导联QRS波时限之和)比值1.2.在无RBBB时,18例(90%)胸前导联V1~V3均可见延长的s波升支≥55 ms.超声心动图示右心房内径为(48.00±8.81)mm,右心室内径为(50.90±10.30)mm.右心功能减退.射血分数为0.301±0.090.结论:ARVC多有发作性晕厥,心电图上可出现频发室早及呈左束支传导阻滞型室速,窦性心律时伴RBBB型或电轴右偏,Epsilon波和右胸导联QRS间期延长,长时间V1~V3T波倒置且无动态变化.超声心动图可发现右心室、右心房增大,右室与左室舒张末期内径之比增大,室壁变薄,右室肌小梁消失或紊乱,右室功能减退.

    作者:赵健;邹建刚;刘平 刊期: 2009年第01期

  • 青藏高原地区鼻出血162例临床分析

    目的:探讨青藏高原地区鼻出血的发生特点及治疗对策.方法:总结我院2001年2月至2006年12月间162例鼻出血患者的临床资料.结果:高血压、动脉硬化,鼻中隔偏曲、棘突及上呼吸道感染疾病仍是鼻出血发生的常见原因,高原干燥、缺氧的气候特点是本地区鼻出血发生又一重要原因.治疗可根据病因,采取局部及全身治疗相结合的原则,结合本地区环境特点,增加湿度、改善缺氧对治疗有一定帮助.结论:青藏高原地区因低温、低氧及低气压、低湿度因素的影响,鼻出血的发生率较低海拔地区明显增高,针对地区环境特点进行局部及全身治疗能够取得较满意结果.

    作者:刘全权;李强益;白建伟;杨永德 刊期: 2009年第01期

  • 雾化吸入盐酸戊乙奎醚对稳定期慢性阻塞性肺疾病患者肺通气功能及炎性细胞因子的影响

    目的:探讨国产新型长效胆碱能受体拮抗剂盐酸戊乙奎醚(penequinine hydmchlordie,PHC)雾化吸入对稳定期慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺功能及炎性细胞因子的影响.方法:45例稳定期COPD患者分为两组,治疗组(23例)以PHC 0.5 mg+生理盐水15 mL雾化吸入,每日2次;对照组(22例)给予喘定0.25 g+生理盐水15 mL,雾化吸入,每日2次.1周后,观察肺通气功能及痰血IL-13、TNF-α改变.结果:两组治疗前肺通气功能及痰、血炎性细胞因子IL-13、TNF-α指标对比.差异无统计学意义(P0.05).雾化吸入PHC在治疗后较治疗前及对照组治疗后FEV1和PEF均明显改善.痰炎性细胞因子IL-13、TNF-α明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组血IL-13、TNF-α治疗前后无明显改变.差异无统计学意义(P0.05).对照组治疗前后FEVl、PEF以及痰、血炎性细胞因子IL-13、TNF-α无明显变化,差异无统计学意义(P0.05).结论:雾化吸入PHC可改善稳定期COPD患者肺通气功能,减轻肺气道炎症.

    作者:谢战忠 刊期: 2009年第01期

  • 门静脉高压症动物模型的研制进展

    门静脉高压症动物模型的应用非常广泛,常用的动物是大鼠和大耳白兔.而研究大鼠和兔血流动力学变化的各种方法也开始尝试应用于小鼠,这将有助于基因敲除小鼠和转基因小鼠在门静脉高压症领域的应用,极大地推动门静脉高压症分子生物学和基因水平的研究.大动物模型,如犬或猪,它们的优势在于能够更清晰地解剖门静脉系统的结构,并且由于与人具有相对较好的同源性,因而更有助于门静脉高压症外科治疗手段的研究.本文就目前门静脉高压症模#型的文献资料做一综述.

    作者:陈云志;张启瑜 刊期: 2009年第01期

  • 托吡酯多中心开放性治疗2岁以下小儿癫痫的临床观察

    目的:评价托吡酯(topiramate,TPM)对2岁以下癫痫惠儿的疗效及安全性.方法:采用多中心开放性试验的方法对全国186家医院的493例2岁以下患儿进行TPM单用和添加治疗.研究包括8周回顾性基础期、8周加量期及12周稳定观察期.在加量期,TPM开始量为0.5~1 mg/(kg·d),随后每周增加0.5~1 mg/(kg·d),直到目标剂量达到4~9 mg/(kg·d),维持此剂量12周为稳定观察期.结果:在493例惠儿中,TPM单一用药302例(61.3%),添加治疗191例(38.7%).癫痫发作频率减少≥50%者为438例(88.8%),发作频率增加25%有16例(3.2%).按发作类型统计,发作减少≥50%的患者中,简单部分性发作34例(94.4%),复杂部分性作33例(86.8%),部分继发全身发作163例(91.1%),全身强直一阵挛发作30例(93.8%).West综合征112例(84.2%).无论单药或添加治疗,经统计学分析,TPM对各类型癫痫发作的疗效无明显差异(P0.05).不良事件发生者189例(38.3%),绝大多数为轻至中度损害,需住院治疗的仅2例(0.4%).结论:TPM对2岁以下癫痫患儿各类型的癫痫发作有效,耐受性良好.

    作者:于辛;黄远桂 刊期: 2009年第01期

  • 肝豆状核变性1例

    患者男,19岁,因无明显诱因发热3d后,出现疲乏,尿黄,全身皮肤、巩膜迅速深度黄染5 d在外院治疗.当时查体:体温38℃左右.伴有咽痛.

    作者:戴琳;冯筱榕 刊期: 2009年第01期

  • 腹腔镜胆囊切除术后一过性黄疸15例的护理

    我科自2001年1月至2005年12月以来,共出现腹腔镜胆囊切除术(以下简称LC)后一过性黄疸15例.均经临床治疗、观察3~5 d后,黄疸自行消退,治愈出院.现就本组患者临床治疗、观察及护理做回顾性分析,报告如下.

    作者:魏俊;冯晶 刊期: 2009年第01期

  • 膀胱黏膜下注射5-氟尿嘧啶加电切术后灌注吡柔比星治疗膀胱肿瘤285例

    目的:评价低剂量5-氟尿嘧啶(5-Fu)术中膀胱黏膜下注射加电切术后膀胱内灌注吡柔比星(THP)预防膀胱肿瘤术后复发的效果.方法:将285例膀胱肿瘤术后患者分成两组:A组138例.用500 mg 5-Fu稀释到80~100 mL盐水行术中膀胱黏膜下注射,术后用吡柔比星30 mg加5%葡萄糖水40 mL行定期膀胱内灌注;B组147例,仅用吡柔比星30 mg加5%葡萄糖水40 mL术后定期膀胱内灌注.结果:随访12~60个月,A组复发14例,复发率11.5%((14/122),进展率为7.4%;B组复发48例,复发率36.4%(48/132).进展率为10.6%.两组复发率比较差异有显著性(P<0.05),进展率比较差异无显著性(P0.05).结论:低剂量5-Fu术中膀胱黏膜下注射加术后定期膀胱内灌注THP预防膀胱肿瘤复发疗效明显优于单用THP膀胱内灌注,尤其对低分期(T1-2)和低分级(G Ⅰ~Ⅱ)膀胱肿瘤效果较佳.

    作者:庞一雄;张孝斌;郑轶群 刊期: 2009年第01期

  • 人端粒酶逆转录酶基因沉默对肺腺癌细胞侵袭、增殖、凋亡的影响

    目的:探讨靶向人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的小干扰RNA(siRNA)转粢对肺腺癌细胞株A549生物学行为的影响.方法:构建靶向hTERT的siRNA表达质粒转染A549细胞,通过Western blot检测蛋白的表达水平,确定有效后,通过Transwell小室检测细胞体外侵袭能力,MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术测定转染后肿瘤细胞的细胞周期和凋亡率.结果:成功构建靶向hTERT的siRNA表达质粒.实验组siRNA转染后的细胞侵袭能力较对照组减弱(P<0.01),生长抑制率明显高于阴性对照组(P<0.01),且表现出时间依赖性.流式细胞术测定显示,实验组siRNA转染48 h后,肿瘤细胞凋亡率显著增加(P<0.01).结论:靶向hTERT的siRNA转染后可以显著降低A549细胞侵袭能力,抑制增殖,诱导细胞凋亡的发生.

    作者:周雪峰;王建军;王家顺;潘永成;李劲松;汪文东;赵峰 刊期: 2009年第01期

  • 高频心电图对隐匿型冠心病患者的诊断价值

    目的:探讨高频心电图诊断隐匿型冠心痛的临床价值.方法:对隐匿型冠心病组(60例)及对照组(40例)分别进行常规心电图、高频心电图及选择性冠状动脉造影检查.以至少1支冠状动脉直径狭窄≥50%作为诊断冠心痛的标准.结果:常规心电图、高频心电图诊断隐匿型冠心痛的敏感度分别为55%、87%,特异度分别为63%、65%,准确度分别为58%、78%.高频心电图诊断隐匿型冠心病的敏感度与准确度均显著高于常规心电图(P<0.01),心电图与高频心电图诊断隐匿型冠心病的特异度差异无显著性(P0.05).结论:高频心电图能显著提高诊断隐匿型冠心痛的敏感度和准确度,但特异度不高.

    作者:张焕鑫;张宏考;袁良俊;李东升 刊期: 2009年第01期

  • 密钙息治疗骨质疏松症的疗效

    原发性骨质疏松症是老年人的一种常见病,是一种全身性骨病.主要表现为骨量低下和骨微细结构的破坏,导致骨的脆性增加,容易发生骨折.如何防治骨质疏松症,减少骨折的发生率将成为全社会面临的重要课题,我们对76例原发性骨质疏松症患者,用密钙息治疗疗效满意,现报告如下.

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  • 大量心包积液、胸痛、胸腔积液、发热

    1病例介绍患者女,61岁,既往身体健康.因胸闷气急半个月,伴发热、胸痛于2005年4月2日入院.2005年3月17日21时坐在沙发上看电视起身后突发胸骨后闷痛,程度中等,后症状自行缓解.

    作者:黄奕娟;傅晓清;任自力;付骞;石亚杰;管彩虹 刊期: 2009年第01期

实用医学杂志

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