兔骨髓基质干细胞诱导分化为软骨细胞的体外实验研究

朱伟南；陈鸿辉；李爱国；金海燕

关键词：骨髓细胞, 干细胞, 组织工程, 软骨细胞, 转化生长因子

摘要：目的:在体外分离获得兔骨髓基质干细胞 (bone marrow derived mesenchymal stem cells, BMSCs )的基础上探索诱导该细胞向软骨细胞方向分化的转化生长因子-β 1( transforming growth factor β 1, TGF β 1)的适宜浓度.方法:第 3 代 BMSCs分别用 TGF β 1 5 ng/mL、 10 ng/mL和 20 ng/mL诱导 2周,通过倒置相差显微镜、 MTT法、甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫细胞化学等方法,观察细胞的生物学特性.结果:骨髓中分离获得的 BMSCs在体外增殖旺盛, TGF β 1诱导后细胞生长明显减缓.与对照组相比,经过诱导 2周后的 BMSCs在 48 h时 5 ng/mL TGF β 1组的 MTT 光密度值差异无显著性( P >0.05),而 10 ng/mL组和 20 ng/mL组差异有显著性( P< 0.05),但在 72 h时 3个诱导组与对照组比较差异均有显著性( P< 0.05),而 3个诱导组间差异无显著性( P >0.05). 5 ng/mL TGF β 1体外诱导 BMSCs 2周后,细胞甲苯胺蓝异染明显,Ⅱ型胶原免疫组织化学染色阳性,表现为软骨细胞生物学特性.结论: 5 ng/mL TGF β 1诱导 BMSCs向软骨细胞方向分化是比较经济和可行的方法.

实用医学杂志相关文献

婴儿法洛四联症的围术期处理

目的:总结婴儿法洛四联症围术期处理经验.方法:全组 56例中男 39例,女 17例,年龄 3～ 12( 9.36± 2.80)个月,体重 3.5～ 11.0( 8.83± 1.25) kg.血红蛋白 84～ 276(164.6± 34.0) g/L.全麻低温体外循环下行心内畸形一期根治手术. 36例采用传统心肌保护, 20例采用改良心肌保护.术后严密监测血流动力学指标,常规应用正性肌力药物及降低肺血管阻力药物 ,合理调整血容量.结果 : 手术早期死亡 10例 , 死亡率 17.9% ,其中传统心肌保护 9例 , 改良心肌保护 1例. 46例( 82.1%)术后随访 3个月～ 5年,心功能恢复 I级 34例、Ⅱ级 10例、Ⅲ级 2例.结论 : 充分的术前准备 ,合理的手术方法和心肌保护 , 及早发现和正确处理并发症 ,可有效地降低婴儿法洛四联症围术期的死亡率.

作者：韩宏光；张南滨；汪曾炜；朱洪玉；王辉山刊期： 2005年第22期
胸腔镜治疗自发性气胸127例

1998年 3月至 2005年 3月,我们用胸腔镜治疗自发性气胸 127例,治疗效果好,现报告如下.

作者：严振球；贺端清；袁延才；周卫健；蒋海容；周明伟；梅阳九刊期： 2005年第22期
血清CEA、ProGRP、CYFRA21-1及β2-MG联合检测在肺癌诊断中的意义

目的:探讨肿瘤标志物癌胚抗原( CEA)、胃泌素释放肽前体( Pro GRP)、细胞角蛋白 19( CYFRA21 1)及β 2微球蛋白(β 2 MG)水平的联合检测对肺癌临床诊断的价值.方法:分别采用电化学发光法、 ELISA法和免疫浊度法测定 115例肺癌、 41例良性肺病患者和 50例健康献血员的血清 CEA、 Pro GRP 、 CYFRA21 1及β 2 MG水平并作对比分析.结果:肺癌组血清 CEA、 Pro GRP、 CYFRA21 1 及β 2 MG的阳性检出率分别为 53.9%、 47.0%、 61.7%、 43.5%,明显高于良性肺病组( 7.3%、 2.4%、 9.8%、 12.2%)和健康对照组( 4.0%、 2.0%、 6.0%、 12.0%)( P< 0.01);患者血清中的 CEA、 Pro GRP 、 CYFRA21 1及β 2 MG水平和阳性率随着临床分期升高而呈上升趋势,但差异无显著性( P >0.05);肺癌患者血清肿瘤标志物的阳性检出率, CEA以腺型高( 69.7%), Pro GRP以小细胞型高( 76.9%), CYFRA21 1以鳞型高( 80.5%),β 2 MG以鳞型高( 51.2%);四项联检对肺癌诊断的敏感性和准确性可提高到 94.8%和 90.3%.结论:血清 CEA、 Pro GRP、 CYFRA21 1 及β 2 MG水平的联合检测可提高肺癌的诊断效率,并为判断肺癌的病理类型、了解病情进展及治疗提供有力的依据.

作者：劳明；潘弘；张其进；黄文成；韦礼斌；朱波刊期： 2005年第22期
COX-2mRNA在重症急性胰腺炎内分泌功能变化中的作用

目的:研究重症急性胰腺炎大鼠胰腺内分泌功能的变化,探讨胰腺内分泌功能损伤中 COX 2 mRNA的作用.方法:使用 3.5%牛磺胆酸钠制作大鼠重症急性胰腺炎动物模型,对胰腺病理损伤评分;检测脂肪酶,血糖水平;分离胰岛细胞,进行葡萄糖刺激胰岛素分泌试验;应用逆转录聚合酶链反应技术,检测胰岛细胞 COX 2 mRNA的表达情况.结果:重症急性胰腺炎大鼠造模后 1 h,病理学评分、血糖、血清脂肪酶升高.胰岛葡萄糖刺激胰岛素分泌试验显示,胰岛素分泌量较正常对照组明显减少,差异有显著意义;逆转录聚合酶链反应提示重症急性胰腺炎组胰岛的 COX 2 mRNA表达增强,差异有显著意义.结论: 3.5%牛磺胆酸钠诱导的重症急性胰腺炎对胰腺内分泌有较大影响.胰岛 COX 2 mRNA表达明显增强,在重症急性胰腺炎对胰腺内分泌功能影响中发挥作用.

作者：刘东斌；孙家邦；李非；张淑文；孙海晨；崔叶青；刘爽；刘大川刊期： 2005年第22期
正畸压膜保持器的临床疗效观察

错齬畸形矫治后牙齿的位置经常发生不稳定现象,为了防止复发常常需要保持.保持是指保持矫治治疗时被移动的牙齿及颌骨的位置,它是矫治治疗中一个重要的阶段,如矫治后的牙位不能达到自然保持状态,则需要采用机械保持装置进行保持.

作者：李瑰琦；姜传前；罗正芳刊期： 2005年第22期
去分化软骨肉瘤1例并文献复习

目的:探讨去分化软骨肉瘤的临床和病理特点,提高对其诊治水平.方法:通过形态学和免疫组化对 1例去分化软骨肉瘤进行分析并复习相关文献.结果:肿块位于右颧骨根部、颞颌关节窝及右侧咽扁桃体上.肿瘤无包膜,切面灰白灰红、质地韧,部分质软.镜下肿瘤细胞部分呈软骨肉瘤,部分呈纤维肉瘤,向周围组织浸润性生长.免疫组化 EMA(- ) Vimentin(+ ), 软骨肉瘤部分 S 100呈阳性反应.纤维肉瘤部分散在的梭形细胞 S 100呈阳性反应,Ⅰ型胶原蛋白(+)以及α 1 ACT(+).结论:软骨肉瘤多次复发,易导致去分化,预后差,诊断依据病史及组织病理学.

作者：张守成；高子芬刊期： 2005年第22期
胰岛素抵抗大鼠葡萄糖-6-磷酸酶的活性及基因表达变化

目的:探讨高脂饮食致胰岛素抵抗动物模型中,葡萄糖 6 磷酸酶( G 6 Pase)的活性和基因表达改变与胰岛素抵抗的关系.方法: Wistar大鼠 16只,随机分为 2组,分别给予普通饲料和高脂饲料喂养,制作胰岛素抵抗模型. 6周后测定各组体重、血糖、血脂、胰岛素变化,并利用高胰岛素-正常葡萄糖钳夹术评价胰岛素敏感性.测定肝脏微粒体 G 6 Pase的活性和基因表达.结果:高脂饲料组大鼠体重、甘油三酯、游离脂肪酸和胰岛素水平显著增高, G 6 Pase活性增高 [(0.51± 0.11) vs ( 0.32± 0.11)μ mol/(min· mg prot), P< 0.05],两组间的 G 6 Pase基因表达无差异.结论 :G 6 Pase参与了肝胰岛素抵抗的发病机制.

作者：李全民；张素华；任伟；吴静；倪银星刊期： 2005年第22期
慢性前列腺炎伴性功能障碍的康复治疗观察

目的:探讨综合治疗方法对慢性前列腺炎 (CP)伴性功能障碍的疗效及对性功能改善的作用.方法:采用综合治疗方法对 159例慢性前列腺炎伴性功能障碍的患者进行临床康复治疗.结果: 159例慢性前列腺炎伴性功能障碍患者经过治疗后,治愈率为 38.99%,显效率为 42.14%,有效率为 17.61%,无效率为 1.26%,性功能改善明显.结论:慢性前列腺炎伴性功能障碍的临床康复治疗应采取综合治疗手段,性功能障碍的治疗应以心理治疗为主,辅以其它手段,可达到满意疗效.

作者：马建军；保庭毅；姜雪刊期： 2005年第22期
螺内酯对急性心肌梗死患者心率变异的影响

目的:观察口服醛固酮受体阻断剂螺内酯对急性心肌梗死患者心率变异的影响.方法:急性心肌梗死患者分为对照组和螺内酯治疗组,对照组给予常规治疗,螺内酯组加用螺内酯 40 mg 1次 /d口服, 4周后患者行 24 h动态心电图检查,利用心率变异软件求得其时域、频域指标.结果:螺内酯组患者时域指标 SDNN、 SDANN、 rMSSD、 PNN50均显著大于对照组( P< 0.01);频域指标中低频功率( LF)两组差异无显著性( P >0.05),但螺内酯组高频功率( HF)显著大于对照组,低频功率与高频功率比值( LF/HF)显著低于对照组( P< 0.05).结论:螺内酯对急性心肌梗死患者心率变异存在影响,可保护急性心肌梗死患者受损的自主神经功能.

作者：鲁爱娟；孙晓建；张传焕刊期： 2005年第22期
VEGF-A与卵巢癌淋巴管生成及淋巴结转移的关系研究

目的:探讨上皮性卵巢癌组织中血管内皮生长因子 A(VEGF A)与肿瘤内淋巴管生成及淋巴结转移的关系.方法 : 采用 RT PCR的方法检测 VEGF A mRNA在卵巢癌中的表达,用免疫组化的方法检测 VEGF A蛋白在卵巢癌中的表达.用 VEGFR 3标记淋巴管行免疫组化染色,人工计数淋巴管密度( LVD),统计分析 VEGF A mRNA及 VEGF A蛋白与 LVD及淋巴结转移的关系.结果: VEGF A mRNA及 VEGF A蛋白的表达与 LVD及淋巴结转移显著相关.结论 : VEGF A的高表达与卵巢癌淋巴管生成及淋巴结转移有关.

作者：邱敏；梁志清；王玲刊期： 2005年第22期
抗生素的应用与失血性休克肠源性释放的关系

目的:探讨失血性休克时使用抗生素是否会增加肠源性内毒素释放及其意义.方法:制作大鼠失血性休克模型,分别通过静脉注射给予罗氏芬、环丙沙星及庆大霉素,休克复苏后 6 h活杀动物,取门静脉血,动态观察门静脉血浆中内毒素的变化.结果:大鼠失血性休克后,对照组、庆大霉素组和环丙沙星组门静脉血内毒素水平明显升高,后两组内毒素水平高于对照组( P< 0.01),两组间差异无显著性 (P >0.05);罗氏芬组内毒素低于庆大霉素组、环丙沙星组和对照组 (P< 0.01).结果:应激状态下不同抗生素的使用导致了不同的内毒素释放水平,合理选择抗生素,减少内毒素释放对临床具有重要意义.

作者：常建星；傅玉如；陈双；王酶；张智铭刊期： 2005年第22期
超声乳化折叠人工晶状体植入联合小梁切除术的临床观察

目的:探讨超声乳化折叠人工晶状体植入联合小梁切除术的方法,评价其疗效.方法:对 38例 45只青光眼合并白内障行超声乳化折叠人工晶状体植入联合小梁切除术.结果:术后视力恢复迅速, 30眼 >0.5(66.7% ),术后眼压控制好, 40眼眼压 < 16 mmHg(88.9% ),术后有角膜水肿等并发症.结论:超声乳化折叠人工晶状体植入联合小梁切除术安全有效.

作者：邵卫星；覃淑华；朱峰刊期： 2005年第22期
颈胸联合部肿瘤16例手术治疗体会

目的:探讨颈胸联合部肿瘤手术治疗的有关技术问题.方法: 16例颈胸联合部肿瘤施行手术.颈正中加胸骨正中切口 4例,颈正中、胸骨次全劈开(第 3前肋间平面以上)和胸部前外侧联合切口( hemi shell incision,半蛤壳状切口) 12例.结果:全组无手术死亡,声音嘶哑 3例,术后 3～ 6个月恢复,无永久性声带麻痹. 1例原始神经外胚层瘤术后 18个月发生右肺尖转移,行右上肺楔形切除,术后 26个月再发心包转移,行心包及局部壁层胸膜切除.随访 4～ 72个月,晚期死亡 3例,均属恶性肿瘤.出血、喉返神经损伤及呼吸道受阻为术后主要并发症.结论:颈胸联合部肿瘤组织来源呈多样化,以神经源性肿瘤多见;一经确诊应争取手术治疗;半蛤壳切口创伤稍大,但术野清晰,利于防止副损伤;肿瘤切除时要防止大血管的损伤.术中注意气管的悬吊复位,利于保持气管通畅.

作者：魏来；殷桂林；张殿堂；胡建才；朱水波；张晓明；王荣平；谭焱；董永强；刘勇；元东刊期： 2005年第22期
术中局部应用抗生素对穿孔性阑尾炎患者术后切口感染的预防

穿孔性阑尾炎容易并发术后切口感染 [1],甚至可造成切口裂开.预防切口感染是一个重要的临床课题,也是一个基本的临床问题.本文通过回顾分析本院1999- 2004年对 174例穿孔性阑尾炎患者的治疗,探讨了术中局部应用抗生素对穿孔性阑尾炎患者术后切口感染的预防作用.

作者：代劲松；颜登高；刘绍训刊期： 2005年第22期
外科治疗高龄乳腺癌48例分析

目的:探讨老年乳腺癌的外科治疗方法.方法:对 2003年 4月至 2004年 10月收治的 48例老年乳腺癌的外科治疗进行回顾性分析.结果: 48例 65岁以上老年乳腺癌患者,其中 45例在全麻下进行了乳腺癌改良根治术, 3例行单纯乳房切除术.术后出现皮下积液 18例,切口感染 3例,皮瓣坏死 2例.无一例因合并症死亡. 结论:老年乳腺癌在处理好合并症的基础上,临床治疗应以外科手术为主 ,并应多选择改良根治的手术方式.

作者：邱献华刊期： 2005年第22期
肝癌隐匿性破裂出血的诊断与治疗探讨

目的:探讨肝癌隐匿破裂 (LSR)出血的诊断与有效的治疗方法.方法:对 11例肝癌 LSR出血患者的临床表现、影像学特征、处理方法与效果进行总结与分析.结果:主要临床表现为突发的肝区疼痛,其中剧烈疼痛 73% (8/11),隐胀痛 27% (3/11),肝区叩痛 100% (11/11),腹穿无不凝血;影像学检查主要有肿瘤内出血、血肿型( 8例)、肝包膜下血肿型( 1例)和混合型( 2例).处理采用超选择肿瘤血管栓塞及缩小后切除. 7例( 64%)获得切除. 1年生存率 100% (8/8), 2年生存率 71% (5/7).结论:提高对肝癌 LSR的认识,采用肝动脉栓塞和二期切除,是肝癌 LSR出血治疗的有效方法.

作者：詹世林；陈建雄刊期： 2005年第22期
不育和生育妇女与抗精子抗体和抗子宫内膜抗体的关系观察

为了解抗精子抗体 (ASAB)阳性和子宫内膜抗精抗体 (EMAB)阳性对女性不育的影响程度,本文通过 68例不育女性进行 ASAB和 EMAB检测,同期对 57例孕 40～ 65 d的孕妇在接受人工流产前后分别行 ASAB和 EMAB检测作对照研究观察.

作者：叶利服；朱震震；藤霞；章微微；赖黛黛；藤银花；周明雅；刘高川；周惠耕刊期： 2005年第22期
一氧化氮对腹腔感染脓毒症大鼠心肌细胞第二信使的调节作用

目的:观察大鼠腹腔感染脓毒症时血清一氧化氮 (NO)与心肌环磷酸腺苷 (cAMP)、环磷酸鸟苷 (cGMP)的关系,探讨 NO在地塞米松 (Dex)治疗脓毒症中对心肌细胞第二信使的介导作用.方法:健康成熟 Wistar大鼠 144只,随机取 9只为实验前基础值组 (0h),余 135只随机分成正常对照组、脓毒症组及 Dex治疗组.各组于实验后 2、 4、 8、 24和 48 h分别取 9只断头取血测定血清 NO变化,并取心脏组织,用放射免疫法测定心肌 cAMP及 cGMP浓度.结果:( 1)与对照组比较,脓毒症组血清 NO于 2 h开始显著升高( P< 0.01), 24 h达到高峰,浓度约为 0时的 12倍; Dex组血清 NO于 4 h开始升高( P< 0.05), 24 h达到高峰( P< 0.01),但升高程度低于脓毒症组( P< 0.01).( 2)与对照组比较,脓毒症组心肌 cAMP、 cGMP 2 h开始升高 (P均 < 0.05),随时间延长逐渐增高,于 24 h浓度高( P均 < 0.01); Dex组心肌 cAMP、 cGMP于 2 h显著升高,显著高于脓毒症组 (P均 < 0.01),为基础值的 2倍( P均 < 0.01),此后逐渐下降,至 48 h接近对照组.结论:腹腔感染脓毒症时大鼠血清 NO与心肌 cAMP、 cGMP浓度随时间而逐渐升高,而在 Dex组明显降低,说明 Dex通过调节此信号系统,稳定肌体内环境,对心肌起部分保护作用.

作者：王涛；熊建琼；文亮刊期： 2005年第22期
全凭吸入紧闭循环麻醉在婴儿唇裂修复术中的应用

目的:观察全凭吸入麻醉用于婴儿唇裂修复术的安全性及有效性.方法: 98例拟行唇裂修复术的婴儿, 60 d～ 1岁, ASA评级Ⅰ级,体重 4.6～ 9 kg.入室前均不行基础麻醉,用七氟醚面罩吸入诱导插管,机械通气,维持 PETCO2在正常范围,麻醉维持用 1.8～ 2.0 MAC的异氟醚.切口用 2%利多卡因浸润.结果:全凭吸入麻醉诱导平稳,麻醉效果良好,术中 HR、 SPO2、气道压、 PETCO2均在正常范围,苏醒迅速,无喉头水肿、喉痉挛、误吸等并发症.结论:全凭吸入麻醉用于婴儿唇裂修复术具有麻醉平稳易控、苏醒完全迅速、并发症少的特点,值得推广应用.

作者：吴少伟；潘永英；王寿平；彭书崚刊期： 2005年第22期
米非司酮在异位妊娠保守治疗中的价值

目的:观察米非司酮在异位妊娠保守治疗中的价值.方法:采用前瞻性随机双盲方法对 189例异位妊娠患者分别给予米非司酮联合氨甲蝶呤 (MTX)和安慰剂联合 MTX治疗,比较其疗效.结果:米非司酮联合 MTX治疗异位妊娠成功率为 81.1% (77/95),安慰剂联合 MTX治疗异位妊娠成功率为 72.3%( 68/94),差异无显著性( P >0.05);两组病人β HCG降至 < 10 MIU/mL所需时间分别为 (22.85± 6.31)d和 (24.35± 7.81)d,差异无显著性( P >0.05);然而,当患者血清孕酮浓度 >10 ng/mL时 ,米非司酮联合 MTX治疗成功率为 81.0% (17/21),安慰剂联合 MTX治疗成功率为 35.7%( 5/14),差异有显著性( P< 0.05).结论:米非司酮联合 MTX治疗高血清孕酮浓度的异位妊娠是有效的.

作者：何善阳；李小毛；游泽山；张彩；林小慧刊期： 2005年第22期