HPV16 E6与结核杆菌HSP70 N端真核表达载体的构建及表达

徐波；肖伟秋；林红浪；卞度宏

关键词：人乳头状瘤病毒16型 E6基因热休克蛋白70 DNA疫苗

摘要：目的:将HPV16 E6与结核杆菌HSP70 N端进行重组,构建真核表达载体,建立HPV16 E6阳性细胞株,终制备抗宫颈癌的DNA疫苗.方法:用分子重组技术,设计相应的酶切位点,直接将HPV16 E6与结核杆菌HSP70 N端进行尾首连接,使位于同一个阅读框架.以pCDNA3.1(+)为载体,构建真核表达载体pCDNA3.1/E6-HSP70N.用电穿孔的方法转染HeLa细胞,细胞免疫化学及Western blot鉴定转化细胞中HPV16 E6的表达.结果:正确构建了真核表达载体pCDNA3.1/E6-HSP70N,在转化细胞中检测到了HPV16 E6的表达.结论:成功构建了真核表达载体pCDNA3.1/E6-HSP70N,建立了稳定表达HPV16 E6的HeLa细胞株.

实用医学杂志相关文献

脓毒症新病生概念和新疗法--激活C蛋白的应用

在妇产科领域中发生的脓毒症,病情凶险,如并发脏器功能衰竭者,40%～80%患者死亡[1].以往曾应用过人毒素抗体,抗肿瘤坏死因子抗体,可溶介质TNF受体,白介素浸体拮抗剂,血小板激活因子(PAF)拮抗剂,甾体类和前列腺素抑制剂等25种药物,通过封闭式方式来减少炎症过程中对宿主细胞的激活或介导变化,均告失败,原因是对其病生变化的认识不够[2-4].

作者：赵杨；苏春宏刊期： 2004年第02期
脑外伤后脑积水诊治28例

目的:回顾分析脑外伤后脑积水的诊治经验.方法:统计本院6年来收治脑外伤后脑积水患者28例,分析其发病机制、临床特征及治疗效果.结果:急性型脑积水3例,以梗阻性脑积水为主,慢性型脑积水25例,以交通性脑积水为主,均依据头颅CT确诊.全部行侧脑室-腹腔分流术(V-P分流术),26例显效,2例失败.结论:脑外伤后脑积水是脑外伤后可诊治的并发症之一,掌握特征,依据头颅CT影像行V-P分流术可收到满意效果.

作者：石巧玲；黄性敏；杨锋刊期： 2004年第02期
支原体肺炎23例诊断治疗体会

小儿肺炎在儿科发病率普遍较高,如果未找到明确病原,容易延误及时准确的治疗,将给患儿身体健康造成重大威胁,并给家庭经济造成较大损失.现将我科2002年收治的23例支原体肺炎病例的诊治体会总结如下.

作者：周金萍刊期： 2004年第02期
人巨细胞病毒先天性感染的研究现状

人巨细胞病毒(human cytomegolovirus,HCMV)属于疱疹病毒一类,是导致胎儿先天性感染常见的病原体[1].据统计,在所有活产儿中感染率为0.5%～2.5%.约10%的感染儿出生时有临床症状,如小头畸形、脑水肿、颅内或腹腔内钙化[1,2].其余90%出生时虽无临床症状,但10%～15%将会产生后遗症,包括听力障碍、智力发育迟缓等[3].尽管近年来先天性CMV感染的诊断方法有较大进展,但仍缺乏安全有效的治疗和预防措施,对于终止妊娠的指标仍有争论.

作者：闻良珍刊期： 2004年第02期
耻骨上膀胱内前列腺摘除术的治疗体会

良性前列腺增生(BPH)是老年人常见病,耻骨上膀胱内前列腺摘除术手术方法简单,易掌握,不需特殊器械,易推广,适合各种程度增大的前列腺及伴有膀胱内病变者,故仍是基层医院应用较为广泛、易开展的手术方法.我院从2001-2003年收治良性前列腺增生的病人72例,手术治疗的67例,均采用此术式,效果满意,现将手术治疗体会报告如下.

作者：刘龙壮；毕明燕；林昀霞刊期： 2004年第02期
胆囊息肉样病变、胆囊癌临床特征分析

目的:对比分析胆囊胆固醇性息肉、腺瘤性息肉、胆囊癌患者的临床特征.方法:回顾我院自1992年至今因胆囊息肉或胆囊癌手术的患者,总结相关临床资料进行分析.结论:(1)胆囊胆固醇性息肉和腺瘤性息肉在临床上鉴别困难;(2)胆囊腺瘤性息肉癌变不是胆囊癌发病的主要因素;(3)B超是诊断胆囊息肉的可靠手段;(4)胆囊腺瘤性息肉和胆囊癌者存在血型分布特征,提示基因在发病中具有一定作用.

作者：王晶桐；杜红艳；刘玉兰刊期： 2004年第02期
胃大部切除术后早期大出血再手术10例临床分析

目的:总结和探讨胃大部切除术后早期大出血的原因和再手术方法.方法:总结分析我院1990年8月至2002年8月收治的10例胃大部切除术后早期大出血再手术病人的临床资料.结果:吻合口出血4例,旷置十二指肠溃疡出血2例,遗漏病灶出血1例,残胃黏膜损伤出血1例,残胃应激性溃疡出血2例.结论:预防出血是关键,特别是胃肠开放性吻合能有效预防胃大部切除术后出血,正确掌握再手术指征和手术方法.

作者：黄坚雄；张育兴；郭伟洪刊期： 2004年第02期
牙周病的正畸治疗

目的:探讨正畸治疗对牙周病的治疗作用.方法:通过对28例患有牙周病的错(牙合)畸形患者采取正畸及牙周联合治疗并对患牙牙周、牙槽骨情况进行对比观察以了解正畸治疗对患有牙周病的错(牙合)畸形患者的治疗作用.探讨治疗成功的关键因素.结果:28例患者的错(牙合)畸形得到矫正达到个别正常(牙合).矫治结束时牙周情况较矫治前明显改善,治疗时间18～30个月.结论:口腔正畸治疗可去除不利因素、改善患者的牙周情况.

作者：黄妙琼；冯航刊期： 2004年第02期
综合性治疗面神经炎102例

我院自1986年至2003年3月以来,对102例而神经炎采用综合性治疗并随访性门诊治疗,效果满意,现报告如下.1临床资料1.1一般情况102例中,男性54例,女性48例,年龄9～62岁,平均32.7岁,首次发病96例,复发6例,病程均为3个月以内.

作者：周同；董长龙刊期： 2004年第02期
新生儿外周穿刺中心静脉导管置入术的术前护理

目的:探讨新生儿施行外周穿刺中心静脉导管置入术(PICC)术前护理注意事项.方法:采用美国BD公司生产1.9 Fr规格PICC包,对84例高危新生儿施行90次PICC,经肘部静脉穿刺置管87例次、大隐静脉2例、前臂静脉1例.结果:72例患儿于出生1～16 d内施行PICC;12例于生后4～18 h施行PICC.90例次患儿导管留置时间3～68 d.术前护理主要内容包括:(1)操作人员的培训.(2)掌握适应证和禁忌证.(3)场地消毒.(4)有关器械与物品的准备.结论:PICC的操作相对其他中心静脉置管法简单实用,重要组织器官损伤发生率极低.术前应对患儿家属进行心理护理;做好操作人员培训;置管宜在生后2～3 d进行,必要时也可适当提前;术前应掌握患儿病情,应先洗胃后再注入口服镇静药;做好场地消毒及按无菌要求操作;生命体征监护及急救物品准备不可缺少.

作者：陈丽萍；崔其亮；林冰清；李于凡；陈玉清刊期： 2004年第02期
女婴双侧腹股沟疝1例

病人女,4岁,双侧腹股沟可复性肿物1年入院.体检:双侧腹股沟梨形肿物,约鹅蛋大小,质软,哭闹时可降至大阴唇.平卧位可回纳入腹腔.外环口松弛,可容成人食指.咳嗽冲击实验(+).入院诊断:双侧腹股沟斜疝.

作者：刘锋；张宏刊期： 2004年第02期
SARS患者和普通肺炎患者体液免疫调查

目的:调查SARS患者和普通肺炎患者体液免疫的差别.方法:采用速率散射免疫比浊法检测52例SARS患者(抗SARS病毒抗体阳性34例,阴性18例)和26例普通肺炎患者血清免疫球蛋白IgG、IgM、IgA,补体C3、C4和C反应蛋白(CRP)的含量.结果:SARS患者的血清免疫球蛋白IgG、IgM、IgA、补体C3、C4和CRP的含量都高于普通肺炎患者,P＞0.05.抗SARS病毒抗体阳性组的血清免疫球蛋白IgG、IgM含量显著高于普通肺炎患者(P＜0.01);IgA、补体C4和CRP含量也显著高于普通肺炎患者(P＜0.05);C3含量略高于普通肺炎患者(P＞0.05).抗SARS病毒抗体阴性组血清免疫球蛋白IgG、IgM、IgA、补体C3、C4和CRP含量与普通肺炎患者组差异无显著性.结论:抗SARS病毒抗体阳性患者组与普通肺炎患者组非特异性体液免疫反应存在显著差别.

作者：梁艳；匡铁吉；雷红；何菊芳；董梅；刘军；肖漓；孟祥红刊期： 2004年第02期
双侧肾透明细胞癌先后10年发生1例

患者男,75岁.1993年6月因反复右肾绞痛,B超及CT检查示右肾实性占位性病变,1993年7月9日行右肾肿瘤根治术.术中见右肾上极被膜下一4 cm×4 cm×2 cm肿瘤.病理诊断:右肾上极被膜下透明细胞癌,与周围肾组织界限清楚,输尿管切缘未见癌,肾周围脂肪囊及输尿管周围未查见淋巴结.术后未行化疗、放疗治疗.术后多次复查腹部B超、CT、MRI检查均未见病灶复发或扩散.

作者：刘骏；江亚文；张璧刊期： 2004年第02期
先天性心脏病合并肺动脉高压程度的评估

肺动脉高压是左向右分流型先心病常见且严重的并发症.肺小动脉病变早期,及时手术矫治心内畸形,可阻止病变继续发展,已有病变可于术后逐渐消退.如果发展到不可逆阶段,即使手术矫正了心内畸形,肺动脉高压仍持续存在并进一步发展,失去外科治疗的意义.因此,判断肺小动脉病变是否可逆是先心病合并肺动脉高压诊治中的关键问题.现对肺动脉高压程度的评估手段综述如下.

作者：李斌；曹学文；张建华刊期： 2004年第02期
RANKL/OPG体系与骨髓瘤骨病

骨髓瘤骨病(MBD)是多发性骨髓瘤(MM)的显著特点,包括骨质溶解、病理性骨折、高钙血症.产生的主要原因是破骨细胞(OC)的大量生成和激活,导致骨的再吸收增加.人骨髓瘤细胞培养可以产生几种破骨细胞刺激因子,如IL-1β、PTHrP、TNFα、胰岛素生长因子结合蛋白4等,但在活体实验中,没有一种可以导致骨的破坏.RANKL是近发现的一个破骨细胞刺激因子,它从属于TNF配体家族,于1997年由Anderson等[1]发现,由美国骨矿协会命名.OPG是其天然抑制剂[3],下面就此体系的结构分布、基本功能及在MBD中的作用进行综述.

作者：李世辉；魏影非；任丽丽；王素云刊期： 2004年第02期
原发性结外淋巴瘤83例临床分析

恶性淋巴瘤一般首发于淋巴结,也可原发于胃、乳腺、睾丸等无淋巴组织的器官.当淋巴瘤局限于1个结外器官、组织,伴或不伴区域淋巴结浸润,称为原发性结外淋巴瘤(PENL)[1].我院自1993年1月至2001年12月共诊治经病理确诊的恶性淋巴瘤共302例,其中PENL占83例,现分析如下.

作者：郭煜；潘学谊刊期： 2004年第02期
交锁髓内钉治疗股骨干骨折53例

目的:探讨交锁髓内钉治疗股骨骨折的临床效果.方法:回顾性分析53例股骨骨折应用带锁髓内钉治疗的结果,其中男38例,女15例,平均年龄31岁.闭合性骨折35例,开放性骨折15例,陈旧性骨折3例.开放性骨折15例采用不扩髓固定,陈旧性骨折3例和闭合性骨折35例扩髓固定.结果:平均随访1年2个月,骨折全部愈合,无延迟愈合或不愈合;无感染病例;1例发生远端锁定螺钉折断.全部患者术后邻近关节的功能均恢复正常.结论:应用带锁髓内钉治疗股骨骨折具有稳定性高,疗效确切和并发症少等优点,是一种治疗股骨干骨折的较理想方法.

作者：程继武；肖德明刊期： 2004年第02期
成人动脉导管未闭合并心内畸形34例外科治疗

目的:探讨成人动脉导管未闭(PDA)合并心内畸形的外科治疗经验.方法:回顾分析了1993年1月至2003年6月间外科治疗的34例成人PDA合并心内畸形的临床资料.结果:32例痊愈,1例死于术后低心排综合征,1例死于出血,死亡率5.9%;随访复查心脏B超,导管无再通,房室间隔无残余分流.结论:体外循环下经肺动脉切口缝闭PDA,同期行心内畸形矫治术,加强术后处理,可取得良好的手术效果.

作者：杜巍；胡建国；尹帮良刊期： 2004年第02期
肠黏膜屏障研究进展

肠道黏膜是机体自身与外环境接触的大界面,具有选择性渗透吸收营养物质和防御肠道内微生物及致炎因子入侵等屏障功能.肠黏膜通透性受多种因子高度精密调节,它们共同构成黏膜屏障而发挥生理作用.

作者：段建华；晏春根刊期： 2004年第02期
α-黑素细胞刺激素对缺血再灌注损伤大鼠肠黏膜免疫功能的影响

目的:探讨α-黑素细胞刺激素(α-MSH)对缺血再灌注(I/R)损伤大鼠肠黏膜免疫屏障的保护作用及机制.方法:采用大鼠小肠缺血45 min再灌注模型,治疗组于再灌注5 min内尾静脉注射α-MSH.于再灌注后2 h用免疫放射法测定血清、肠黏膜组织中分泌型免疫球蛋白A(sIgA)的含量;四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)测定Peyer's淋巴结(PP)、上皮内淋巴细胞(IEL)和固有层淋巴细胞(LPL)增殖活力.结果:肠I/R后血清和肠黏膜中sIgA含量下降,淋巴细胞增殖活性下降(P＜0.01);不同剂量的α-MSH治疗组均能逆转I/R后sIgA含量下降和淋巴细胞增殖活力下降,差异有显著意义(P＜0.01),而不同剂量α-MSH治疗组间各指标无显著性差异(P＞0.05).结论:外源性α-MSH可参与调节肠道相关淋巴组织免疫功能,对缺血再灌注损伤肠道免疫屏障具有保护作用.

作者：李斌；文亮；刘明华刊期： 2004年第02期