王季石；方琴；孙等军；陈剑；周鑫莉；林果为；陆华中；费俭
目的：分离正常及慢性缺氧性右心肥厚的心室肌细胞，观察细胞内[Ca2+]i及细胞内pHi对心肌κ-阿片受体激动后的反应.方法：以fura-2和BCECF分别为[Ca2+]i和PHi的指示剂，用光谱荧光法测定电刺激引起的细胞内[Ca2+]i瞬变及pHi.结果：κ阿片受体选择性激动剂U50，488H可降低电刺激引起的[Ca2+]i瞬变和增加pHi，该作用是由蛋白激酶C(PKC)所介导.在肥厚的心室肌细胞，U50，488H的上述作用显著减弱.与此相对应，PKC的激动剂PMA引起的[Ca2+]i瞬变降低和pHi的增加作用在肥厚的心室肌细胞亦消失.用NH4Cl法观察Na+-H+交换器的功能显示其在肥厚的心室肌细胞无明显改变.结论：心肌肥厚时κ-阿片受体介导的信号通路受损，受损部位发生在PKC与效应器之间.
作者：裴建明；王跃民；朱运龙；陈迈；黄德明 刊期： 2001年第10期
目的：探讨经醛脱氢酶基因(ALDH-3)和多药耐药基因(MDRl)遗传学修饰的人外周血造血干/祖细胞能否同时增强活性环磷酰胺(4-HC)和MDRl基因靶药的抗性.方法：构建同时含ALDH-3和MDRl双耐药基因的逆转录病毒表达质粒G1Na-ALDH3-IRES-MDRl，经电穿孔导入PA317包装细胞，将免疫磁珠分离系统(MACS)分离纯化后的人外周血CD34+细胞用含有ALDH-3和MDRl双耐药基因重组病毒的上清感染，用PCR、RT-PCR、Southem blot、Northem blot、ACS和MTT等方法检测外源ALDH-3与MDRl基因在CD34+细胞中的转移和表达.结果：用PCR与酶切分析法鉴定了双顺反子逆转录病毒载体构建的正确性，双耐药基因已整合入转染靶细胞中基因组，并获得有效表达，应用集落计数测定基因转导效率为18％.巢式PCR及补救分析均未检测到辅助病毒存在.经双耐药基因修饰的CD34+造血干/祖细胞对4-HC的IC50较对照组提高4.5倍，对多药耐药基因靶药(长春新碱和柔红霉素)的IC50较未转染细胞分别高6.6和7.8倍.结论：逆转录病毒载体介导双耐药基因转导外周血造血干/祖细胞高效共表达可降低联合化疗骨髓毒性.
作者：王季石；方琴；孙等军；陈剑；周鑫莉；林果为；陆华中；费俭 刊期： 2001年第10期
目的：研究氟西汀对抑郁症大鼠模型的海马神经元树突萎缩的作用.方法：用慢性温和性应激模型作为抑郁症模型，采用尼氏染色观察海马各亚区神经元形态，用NADPH-d组化染色方法测定了海马中一氧化氮合酶阳性神经元的数量.结果：慢性温和性应激对海马神经元有一定的损伤，主要表现在神经元树突的萎缩，而氟西汀可使这些受损神经元恢复正常，这种作用与氟西汀抑制海马区的一氧化氮合酶阳性神经元的数量减少相关.结论：氟西汀可通过抑制海马区一氧化氮合酶的过度表达而阻止或扭转抑郁症模型大鼠海马神经元树突的萎缩.
作者：罗兰；谭仁祥 刊期： 2001年第10期
目的：分析亚大电压、超短时程电场刺激诱发兔离体隐动脉收缩反应的神经共同传递特征.方法：兔离体隐动脉环等长收缩测定法及电场刺激诱发交感神经源性血管收缩法.结果：电场刺激诱发隐动脉交感神经源性血管收缩反应，具有频率依赖性.α1-受体阻断剂哌唑嗪(1mol/L)不影响2 Hz电刺激诱发的血管收缩反应，对8-16 Hz电刺激诱发的血管收缩反应抑制约39.9-53.8％. 另一方面，以α，β-亚甲基ATP(3 μmol/L)脱敏P2X1受体后，完全抑制2 Hz电刺激诱发的血管收缩反应，显著增强16Hz电刺激诱发的血管收缩反应，却不影响外源性NE的累积量效曲线.联合应用哌唑嗪(1 μmol/L)和α，β-亚甲基ATP(3 μmol/L)完全抑制了各频率电刺激诱发的血管收缩反应.结论：2 Hz电刺激亦可诱发兔离体隐动脉神经源性收缩反应，2 Hz电刺激诱发的收缩反应仅与嘌呤能神经递质ATP或相关核苷酸有关.较高频率电刺激诱发的收缩反应则与ATP和NE两种递质有关.此外，α，β-亚甲基ATP使P2X1受体脱敏，并通过突触前机制增强电刺激诱发的血管收缩反应.
作者：张炜；任雷鸣 刊期： 2001年第10期
目的：研究反式曲马朵(trans-T)及其活性代谢产物反式氧去甲基曲马朵(Ml)对映体的中枢神经系统分布.方法：大鼠ip单剂量的盐酸trans-T或Ml后，采用高效毛细管电泳(HPCE)法测定血清和不同脑组织中trans-T及Ml对映体的浓度，脑组织包括脑脊液、大脑皮层、纹状体、下丘脑、小脑、延髓.结果：大鼠ip盐酸trans-T后，在血清及所有测试脑组织中，(+)-trans-T的浓度均高于(-)-trans-T的浓度；在所有测试脑组织中，(+)-Ml的浓度均低于(-)-Ml的浓度；trans-T和(+)-Ml对映体的浓度以大脑皮层中高，脑脊液中低.大鼠ip Ml后，在血清及所有测试脑组织中，(+)-Ml的浓度均高于(-)-Ml的浓度；Ml对映体的浓度以大脑皮层中高，脑脊液中低.结论：在血清和不同脑组织中，trans-T及Ml对映体的浓度是有区别的；trans-T及Ml在中枢神经系统的分布具有立体选择性；大鼠ip Ml与trans-T后，Ml在中枢神经系统分布的立体选择性是不同的.
作者：刘会臣；王娜；刘长锁；胡玉钦；刘建芳；侯艳宁 刊期： 2001年第10期
目的：研究B9和B10位氨基酸残基在胰岛素分子中的重要性.方法：在分离的大鼠脂肪细胞中测定[B9Glu，B10Asp]胰岛素的受体结合活性、葡萄糖吸收活性和脂生成活性. 用Western印迹法检测[B9Glu，B10Asp]胰岛素对葡萄糖转运蛋白-4(Glut4)转位和胰岛素受体自磷酸化的刺激活性.结果：[B9Glu，B10Asp]胰岛素的受体结合活性和刺激葡萄糖吸收、脂生成、Glut4转位和胰岛素自磷酸化活性分别是天然胰岛素的31％、45％、40％、58％和46％.结论：B9位丝氨酸残基是胰岛素的葡萄糖代谢作用所必需的.
作者：廖志勇；唐月华；叙明华；冯佑民；朱尚权 刊期： 2001年第10期
目的：观察角叉菜炎症时，5-羟色胺2A(5-HrT2A)受体mRNA在中缝大核(NRM)表达的水平及其与5-羟色胺(5-HT)免疫阳性神经元的共存.方法：实验采用原位杂交和荧光原位杂交结合荧光免疫组织化学双标技术.结果：正常大鼠NRM内有中等水平的5-HTaA受体mRNA表达；角叉菜致炎后，5-HT2A受体mRNA在双侧NRM内的表达明显增加，3-8 h达峰值，24 h后显著降低.在正常大鼠的NRM内，仅有少量5-HT2A受体mRNA和5-HT免疫阳性双标神经元，双标神经元的数量在角叉菜致炎后无明显变化.结论：NRM内5-HT2A受体主要分布在非5-HT神经元，且随外周炎症的发展，5-HT2A受体的合成增加.
作者：张玉秋；高秀；姬广臣；黄娅林；吴根诚 刊期： 2001年第10期
普罗帕酮；药代动力学；模型；目的：采用药动-药效结合模型观察普罗帕酮血浆浓度与心电图指标PR间期延长百分率的数量关系，并求算药效学参数.方法：选择健康汉族受试者10名，其中CYP2D6表型的快代谢型(EM)和中速代谢型(IM)各5名.受试者口服普罗帕酮片剂400 mg，于给药后15 h内抽取静脉血，并同步测定受试者PR间期.普罗帕酮浓度采用高效液相色谱分析法测定.采用CAPP软件对普罗帕酮血药浓度及PR间期延长百分率进行药动-药效结合模型计算.结果：10例健康志愿者的普罗帕酮血浆浓度与效应之间存在着滞后现象.经采用CAPP软件拟合数据，发现效应与浓度之间符合SigmoidEmax模型.IM组的AUC(μg·h·L-1)明显高于EM组(5126±1030vs2948±1230，P＜0.05)；相对应药效参数Ce50 IM组也比EM组大(P＜0.05).另外，效应曲线S线程度的参数γEM组大于IM组(P＜0.05). 结论：CYP2D6遗传多态性不但对普罗帕酮的药动学有影响，而且对其药效学参数可能也有明显的影响.
作者：蔡卫民；张银娣；罗建平；陈冰；蔡明虹；凌树森 刊期： 2001年第10期
目的：探讨重组人碱性成纤维细胞生长因子(rh-bFGF)对经皮冠状动脉腔内成形术后再狭窄的预防效果.方法：用2F球囊导管造成大鼠左颈总动脉内皮损伤.治疗组每天im rh-bFGF 10 kU/kg.分别于术后7天和14天，每组各处死大鼠10只，取左颈总动脉进行[3H]胸腺嘧啶掺入测定和病理形态学检查.结果：在第7天和第14天时，与模型对照组相比，rh-bFGF治疗组颈总动脉平均新生内膜厚度明显变薄；平均中膜面积缩小；平滑肌细胞和弹力板层数减少；胶原含量及[3H]胸腺嘧啶掺入量也比模型对照组明显降低.结论：适当应用rh-bFGF有抑制气囊损伤后动脉新生内膜增厚，降低再狭窄发生的作用.
作者：常林；张潮；吴勇杰；朱任之 刊期： 2001年第10期
目的：探讨白细胞磷脂酶D(PLD)在心肺转流术(CPB)致全身性炎症反应过程中的作用及甲泼尼龙和抑肽酶对PLD活性的影响.方法：42例接受CPB心脏直视手术病人，分为对照组、甲泼尼龙组和抑肽酶组，患者于术前、心肺转流术中及术后8个不同时点采集动脉血，测定白细胞PLD活性，并检测髓过氧化物酶活性、CD11b表达及血浆IL-6、IL-8和C-反应蛋白的含量.结果：在升主动脉开放时点，对照组白细胞PLD活性为(18±8)nmol choline·h-1·mg-1，明显高于术前；甲泼尼龙组为(10±6)nmol choline·h-1·mg-1，明显低于对照组，但与术前相比差别无显著意义；甲泼尼龙组白细胞PLD活性升高时点后移至停CPB即刻点；抑肽酶组PLD活性与对照组相比差别无显著意义；但两药均不同程度降低CPB围术期血浆中IL-6、IL-8和C-反应蛋白水平及MPO活性、白细胞CD11b表达.结论：CPB致全身炎症反应过程中白细胞的PLD活性持续升高；甲泼尼龙部分抑制CPB引起的炎症反应，其抗炎机制与抑制PLD有关.
作者：吴明；徐世伟；陈如坤；卢韵碧；江波；周汉良 刊期： 2001年第10期
目的：活体内外观察更昔洛韦(ganciclovir，GCV)对转染HSV1-TK基因的人肺腺癌细胞A549杀伤效应.方法：构建一个包含TK基因的逆转录病毒表达载体，用电穿孔法转化人肺腺癌细胞A549，MTT法测转基因细胞对GCV敏感性和观察旁观者效应；流式细胞仪、扫描电镜检测GCV诱导转染细胞凋亡，PCR和原位杂交分别检测转染细胞TK基因整合和表达，活体比较GCV对转染细胞、亲代细胞接种裸鼠皮下肿瘤治疗效果. 结果：转染细胞对GCV IC50比亲代细胞提高46倍，旁观者效应在高细胞密度较低细胞密度明显.FCM发现转染细胞经GCV作用3天后DNA直方图呈现亚G0G1峰，亲代细胞无该峰形成.细胞周期分析表明亚G0G1细胞在A549-TK和A549分别为(12.2±1.7)％和(1.3±0.3)％(P＜0.01).扫描电镜发现转染细胞有明显的凋亡特征如核浓缩、凋亡小体和核呈半月征等，对照细胞无这些变化.PCR、原位杂交表明转染细胞有TK基因整合和表达，体内实验表明转染细胞接种肿瘤受GCV治疗抑制生长，亲代细胞接种肿瘤不受抑制.结论：转TK基因细胞获得GCV的敏感性，旁观者效应杀灭肿瘤细胞与细胞间密切接触有关，TK/GCV杀灭肿瘤与诱导凋亡有关，GCV活体内抑制转TK基因细胞接种肿瘤生长.
作者：何祥梁；何雪花；郭先健；钱桂生；黄桂君；陈维中；李淑萍 刊期： 2001年第10期
目的：研究肿瘤坏死因子(TNFα)对单个内皮细胞胞内游离Ca2+浓度([Ca2+]i)的影响及维拉帕米(Ver)、噻庚啶(Cyp)和山莨菪碱(Ani)对TNFα诱导[Ca2+]i变化的影响，以探讨TNFα介导休克和Cyp、Ani的抗休克的机制. 方法：人脐静脉内皮细胞株(ECV304)接种于35 mm含有2 mL DMEM培养基的组织培养盘中培养.Fluo-3/AM负载细胞，激光扫描共聚焦显微技术测定单个内皮细胞[Ca2+]i.结果：TNFα使单个内皮细胞[Ca2+]i呈剂量依赖性升高，在60 s内达到峰值，然后下降并保持在基础水平之上.共聚焦扫描图像显示细胞核区[Ca2+]；升高比胞浆区明显，下降比胞浆区慢.维拉帕米1和2，噻庚啶30和60或山莨菪碱20和40 μmol/L均能显著抑制由TNFα 1.2 nmol/L诱导的单个内皮细胞[Ca2+]i升高. 结论：TNFα显著诱导内皮细胞[Ca2+]i升高，可能是TNFα介导休克的重要机制；维拉帕米、噻庚啶和山莨菪碱对TNFα诱导的[Ca2+]i升高有拮抗作用，可能是噻庚啶和山莨菪碱抗休克作用的机制之一.
作者：王立赞；胡修周；朱凡河；张庆柱；论宁 刊期： 2001年第10期
目的：探讨吗啡戒断反应对血管反应性及其细胞内信号转导的影响.方法：大鼠注射递增剂量的吗啡两周后iv纳洛酮催瘾，记录乙酰胆碱(Ach)的降压效应.用含不同药物的Kreb's液灌流大鼠离体肠系膜血管床.AR-CM-MIC阳离子测定系统检测培养牛胸主动脉内皮细胞(aec)和血管平滑肌细胞(smc)胞浆内游离钙([Ca2+]i).计算smc呈磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(Phospho-CREB)免疫阳性反应的比例.结果：纳洛酮iv 2 mg/kg催瘾后钝化的Ach降压效应同催瘾前一致.以纳洛酮25μmol/L取代灌流液所含吗啡20μmol/L使成瘾大鼠肠系膜血管的去甲肾上腺素(NE)升压效应的EC50(μmol/L)从2.06±0.38降至1.14±0.21(n=8，P＜0.01)，而吗啡40 μmol/L完全预防NE的作用.即时加入吗啡后对照组血管平滑肌细胞内[Ca2+]j反应不一.纳洛酮使2/3的吗啡预处理组的血管平滑肌细胞内[Ca2+]i显著升高，呈Phospho-CREB免疫阳性反应的比例也因之增加.部分内皮细胞的[Ca2+]i明显下降.结论：纳洛酮增加慢性吗啡处理大鼠血管的反应性可能与血管平滑肌细胞内钙增加有关，并伴有cAMP反应元件结合蛋白的磷酸化增强.
作者：王瑜；汪红仪；姜波；李小煜；徐建国；于颖群 刊期： 2001年第10期
目的：研究普罗帕酮(PPF)经人肝CYP3A4代谢的立体选择性.方法：以转人肝CYP3A4基因中国仓鼠肺细胞CHL的S9为酶源，考察了PPF消旋体及单个对映体在高、低底物浓度时的经时孵育代谢.对映体抑制试验用于考察对映体之间的相互作用.并进行了单个对映体的酶动力学试验.结果：PPF消旋体高底物浓度(400 mg/L)时的代谢无立体选择性，低底物浓度(10 mg/L)时R(-)-体代谢快于S(+)-体(R＞S)；单个对映体孵育时在高底物浓度(200mg/L)时的代谢呈现对S(+)-体的立体选择性(S＞R)，低底物浓度(5 mg/L)时呈现对R(-)-体的立体选择性(R＞S).S(+)-PPF的Vmax(μmol·mg-1·min-1)大于R(-)-体(2.66±0.32vs1.71±0.19，P＜0.01). R(-)-PPF的Km(μmol·L-1)小于S(+)-体(73±11vs 185±17，P＜0.001).R(-)-PPF对S(+)-体有代谢抑制作用(IC50=125μmol·L-1).结论：PPF经人肝CYP3A4的代谢有底物浓度依赖性的立体选择性.高底物浓度时两对映体有相互作用，相互作用的结果导致立体选择性丧失.而低底物浓度时两对映体无相互作用，结果仍表现出R体代谢优先的立体选择性.
作者：周权；周权；姚彤炜；曾苏；余应年 刊期： 2001年第10期
目的：研究莨菪亭对人前列腺癌细胞PC3增殖的作用和莨菪亭是否能引起PC3细胞的凋亡.方法：用细胞生长曲线，MTT试验和酸性磷酸酶(ACP)活性来测定细胞增殖，考马斯亮蓝法测细胞内蛋白质的含量，光镜、透射电镜和荧光显微镜观察莨菪亭引起的形态学变化.用荧光显微镜和流式细胞仪确定凋亡率和细胞的周期分布.结果：莨菪亭对PC3，PAA和Hela细胞的IC50分别为(157±25)，(154±51)和(294±100)mg/L，莨菪亭时间和浓度依赖性地抑制PC3细胞的增殖，并引起细胞内蛋白质含量减少和ACP活性降低.经莨菪亭处理后，在光镜、透射电镜和荧光显微镜下可观察到莨菪亭引起的典型的凋亡形态学变化，流式细胞仪测定显示经莨菪亭0，100，200和400 mg/L处理后PC3细胞的凋亡率分别为0.3％，2.1％，9.3％和35％，G2期细胞显著减少.结论：莨菪亭抑制PC3细胞增殖且可引起PC3细胞的凋亡.
作者：刘雪莉；张亮；付新录；陈凯；钱伯初 刊期： 2001年第10期
观察大黄酸对TGFβ1诱导的肾近端小管上皮细胞肥大及细胞外基质的影响.方法：在体外以TGFβ1(2μg/L)刺激LLC-PK1细胞，诱导细胞肥大和细胞外基质合成的增加.同时，以不同浓度的大黄酸处理细胞，检测细胞体积、蛋白质含量以及[3H]亮氨酸掺入以观察细胞肥大的变化.此外，检测细胞培养上清液中的纤维素增生(FN)含量.[3H]脯氨酸掺入以及细胞胶原Ⅳ及FN mRNA的表达以观察大黄酸对细胞外基质的影响. 结果：TGFβ1(2μg/L)刺激可以导致LLC-PK1细胞出现细胞肥大，表现为细胞体积、细胞内蛋白量及[3H]亮氨酸掺入量明显增加.大黄酸治疗后细胞体积及细胞内蛋白量降低.TGFβ1也能明显增加LLC-PK1细胞[3H]脯氨酸掺入量，培养上清液中FN含量，以及细胞内胶原Ⅳ和FN mRNA的表达.大黄酸则能抑制上述细胞外基质合成的增加，明显降低细胞内胶原Ⅳ和FN mRNA表达水平.结论：大黄酸可以逆转TGFβ1诱导的近端肾小管上皮细胞肥大，抑制TGFβ1刺激的细胞外基质合成.这可能是大黄酸预防或改善糖尿病肾脏病变、延缓糖尿病肾病进展的作用机制之一.
作者：郭啸华；刘志红；戴春笋；李恒；刘栋；黎磊石 刊期： 2001年第10期
目的：研究不同剂量内皮素受体A拮抗剂FR139317对大鼠心力衰竭模型的作用. 方法：结扎雄性Wistar大鼠左冠状动脉致心肌梗死并充血性心力衰竭，给予FR139317 1和5 mg·kg-1·d-1两种剂量治疗6周，观察内皮素受体A拮抗剂对心衰大鼠血液动力学、血浆内皮素水平及死亡率的作用，并比较不同剂量间的差异.结果：二种不同剂量FR139317治疗均改善心衰大鼠的血液动力学，降低血浆内皮素水平，并降低死亡率.较高剂量FR139317明显降低心衰大鼠的平均动脉压，并使血浆内皮素的浓度降至更接近于心功能正常大鼠的水平.结论：选择性内皮素受体A拮抗剂FR139317可有效地治疗心力衰竭.
作者：陈筱潮；张旭明；罗年桑；方昶；刘英梅；伍卫 刊期： 2001年第10期
中国药理学报（英文版）杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国药理学会和中科院上海药物研究所
