目的:表达M2AChR-Gilα融合蛋白,检测不同配体或镁离子对M2AChR与Gilα间相互作用的影响.方法:两步PCR建立M2AChR-Gilα融合DNA,并在Sf9细胞内表达.[3H]QNB和[3sS]GTPγs结合实验检测M2AChR-Gilα融合蛋白功能.结果:M2AChR-Gilα的表达水平为(20.12±0.14)nmol@g-1protein.不同配体的存在使融合蛋白中Gilα与GDP的亲和力发生变化.乙酰胆碱,卡巴胆碱,McN-A-343,毛果芸香碱和阿托品存在以及无配体存在时,GDP的IC50值(95%可信区间)分别是178(148-214)μmoL/L,158(126-199)μmol/L,66(56-78)μmol/L,62(55-72)μmol/L,5.0(4.6-5.5)μmol/L和15.9(14.3-17.6)μmol/L.在卡巴胆碱的作用下,Gilα随Mg2+浓度增加而减小对GDP的亲和力,而阿托品使Gilα不受Mg2+浓度的影响,始终保持对GDP的高亲和性.结论:杆状病毒-Sf9细胞系统表达的M2AChR-Gilα具备M受体配体结合特性和组分间的偶联功能.M2AChR-Gilα对GDP的亲和性决定于M2受体配体的性质,分析GDP亲和力的大小有利于筛选和鉴别M2亚型特异性药物.Mg2+离子是M2AChR-Gilα与低亲和性GDP结合必需的阳离子.
作者：王昊；郭政东；李智；刘洪瑞 刊期： 2002年第03期
目的:观察胍丁胺(Agm)对大鼠心室肌细胞L-型钙通道电流(Ica-L)的影响.方法:以酶解法制备单个心室肌细胞.应用全细胞膜片箝技术记录大鼠单个心室肌细胞钙通道电流.结果:(1)Agm(0.5,l,2mmol/L)可浓度依赖性地降低电压依赖性激活ICa-L(pA)峰值,其值从1451±236(对照组)到937±105(n=8,P＜0.05),585±74(n=8,P＜0.01),和301±156(n=8,P＜0.01).(2)Agm 1 mmol/L使用依赖性地阻滞ICa-L.1 Hz时抑制率为53%±12%(P＜0.05),3 Hz时为69%±ll%(P＜0.01).(3)Agm使I-V曲线上移,但对ICa-L的电压依赖特征、大激活电压以及ICa-L稳态激活无明显影响.在Agm 1 mmol/L作用下,半数激活电压(%5)和斜率参数(k)与对照组相比均无显著性差异.%5分别为(-20.2±2.5)mV和(-20.5±2.7)mV,k分别为(3.2±0.4)mV和(3.0±0.5)mV.(4)Agm l mmol/L可明显使钙电流稳态失活曲线左移,加速钙通道电压依赖性稳态失活.V0.5分别为(-32±6)mV和(-40±5)mV,k分别为(7.6±0.9)mV和(12.5±1.1)mV(P＜0.05).(5)Agm lmmol/L还使Ica从失活状态下恢复明显减慢.结论:Agm抑制ICa-L,并主要作用于L-型钙通道的失活状态,表现为钙通道失活加速和从失活状态下恢复减慢.
作者：李清；尹京湘；何瑞荣 刊期： 2002年第03期
目的:评价环孢素A气雾给药对豚鼠哮喘模型的药效.方法:用乙酰胆碱(ACh)或组胺诱导抗原攻击后的致敏豚鼠气道阻力PC200、支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织切片中的嗜酸性粒细胞(EOS)变化观察环孢素A气雾给药后的抗气道高反应性和炎症作用.结果:环孢素A 10 g@L-1、20g@L-1气雾给药和地塞米松(0.5 mg@kg-1,ip)增加PC200值,能预防ACh或组胺引起的气道高反应性,环孢素A 5 g@L-1对组胺引起的气道高反应性也有作用,对ACh不显著.环孢素A 10 g@L-1、20g@L-1气雾给药能明显减少BALF中的EOS浸润.与溶媒组比较,地塞米松0.5 mg@kg-1增加了BALF中的中性粒细胞数目,与三组环孢素A比较有显著差异.在肺组织学研究中,环孢素A20g@L-1和地塞米松0.5 mg@kg-1可抑制支气管和细支气管上皮和上皮表面结缔组织的EOS浸润.结论:环孢素A气雾吸入给药能明显对抗致敏豚鼠气道高反应性和炎症反应,为其治疗哮喘提供了一个可选择的给药途径.
作者：谢强敏；陈季强；沈文会；杨秋火；卞如濂 刊期： 2002年第03期
目的:研究糖皮质激素皮质酮对PCl2细胞烟碱受体的非基因组作用.方法:采用全细胞膜片箝技术记录神经生长因子分化的PC12细胞上的乙酰胆碱(ACh)诱发电流(IACh).结果:PC12细胞上IACh是由烟碱受体引起的.同时给予ACh(30μmol/L)和皮质酮(0.1-10 μmol/L)加速IACh的衰减且轻微抑制IACh峰值.用相同浓度的皮质酮预处理细胞可加强对IACh峰值的抑制率而不影响受体失敏速率.牛血清白蛋白耦联的皮质酮(0.1-10μmol/L)对IACh有类似于皮质酮的快速抑制作用.此快速抑制作用呈可逆性、浓度依赖性和非电压依赖性.结论:皮质酮可快速抑制PC12细胞IACh,且是由非基因组机制介导的.皮质酮结合于膜外的特异结合位点,很可能直接作用于神经元烟碱受体,以一种非竞争方式抑制IACh,从而调控交感神经元的儿茶酚胺释放.
作者：石丽君；刘玲爱；程晓红；王春安 刊期： 2002年第03期
作者： 刊期： 2002年第03期
目的：深入研究力达霉素对人肝癌BEL-7402细胞基因组DNA的影响.方法:琼脂糖凝胶电泳检测DNA泳带;Southem杂交检测对基因的损伤;中性凝胶电泳检测DNA断裂修复;超螺旋GEM质粒检测断裂DNA位点.结果:力达霉素l μmol/L处理BEL-7402细胞15、30、60 min,可检测到明显的DNA梯带.低浓度的力达霉素对活跃基因N-ras的外显子和内含子均有明显的损伤作用,但对沉默IL-2基因没有影响.力达霉素断裂DNA后,DNA损伤难以修复.力达霉素断裂GEM质粒DNA的位点是-OH Ho-.结论:力达霉素明显地损伤人肝癌BEL-7402细胞的基因组DNA.该结果有助于解释其高活性地杀伤肿瘤细胞的分子机制.
作者：何琪杨；姜兵；李电东 刊期： 2002年第03期
目的:探讨活性氧自由基对膀胱癌患者淋巴因子激活的杀伤(LAK)细胞的增殖和抗膀胱癌细胞系活性的作用.方法:分别用细胞计数和MTT法测定LAK细胞的增殖和细胞毒作用.结果:羟自由基浓度依赖性地抑制IL-2所诱导的LAK细胞增殖.用抗坏血酸400 μmol@L-1和硫酸亚铁40μmol@L-1培养细胞96h,细胞增殖被抑制34.5%.这种抑制可被一定浓度的甘露醇和依地酸(edetic acid)扭转.一定浓度的超氧阴离子或一氧化氮释放剂硝普钠可刺激由IL-2所诱导的LAK细胞的增殖.超氧化物歧化酶(SOD)可抵消超氧阴离子的刺激作用.外源性超氧阴离子可加强LAK细胞对BIU-87和EJ细胞的杀伤.羟自由基和SOD对LAK细胞杀伤作用则影响不明显.结论:超氧阴离子和一氧化氮可增强膀胱癌患者LAK细胞的增殖、激活和抗肿瘤的细胞毒,而羟自由基对此起抑制作用.这两种活性氧自由基对IL-2诱导的LAK细胞增殖的作用是不同的.
作者：王志平；陈一戎；郑荣梁；卢建中；王家吉 刊期： 2002年第03期
The potential toxicants in food are derived fromNatural or industrial sources. Compounds like lectins andglycoalkaloids that are toxic to man are naturally presentin some vegetables like potatoes or legumes. A widevariety of marine toxins mostly produced by dinoflagel-lates occuring secondarily in molluscs and mussels areusually ingested by human beings causing poisoning. Onthe other hand, toxic ~ds find their way into foodduring manufacture, storage, or transportation. Theseinclude largely the industrial contaminants, persistentorganic pollutants (POP), pesticides, heavy metals, andtoxins of fungal and bacterial origin. Further, toxiccompounds like higher alcohols may be produced asbyproducts during processing. Migration of compoundsfrom packaging materials into packaged food likecontamination with lead from solder in certain metal cansis well known. Additives (emulsifiers, preservatives,and antioxidants ) could also influence the quality offoods. Solvent residues may find their way into food asa result of their use in extraction processes like the use oftrichloroethylene and methylene chloride in decaffeinationof coffee. In addition, poor hygiene, storage, andreparafion may also lead to food contamination byvarious microbes and ova or cysts of nematodes. Theproblem of food contamination can be overcome to a greatextent by regular surveillance and monitoring programmesand strict implementation of food and adulteration act.In the present review some of these aspects of foodcontamination have been discussed in detail.``
作者： 刊期： 2002年第03期
目的:探讨黄芪皂苷Ⅳ(ASI)对小鼠T、B淋巴细胞增殖和腹腔巨噬细胞分泌的细胞因子的影响.方法:采用MTT法检测T、B淋巴细胞的增殖;采用分光光度计测定法检测抗体活性;IL-1活性用胸腺细胞增殖法测定;TNF-α活性用L929细胞杀伤法测定.结果:1)ASI50-200 mg/kg ig7天能够促进T淋巴细胞增殖和抗体生成,而ASI50-100 mg/kg能够促进B淋巴细胞增殖,但是200 mg/kg对B淋巴细胞增殖无影响;2)ASI体外仅在100 nmol/L对T、B淋巴细胞有促进作用;3)ASI l nmol/L可以促进腹腔巨噬细胞分泌IL-1,而100-1000 nmol/L则抑制腹腔巨噬细胞分泌IL-1;4)ASI体外可以抑制LPS刺激或无LPS刺激下的腹腔巨噬细胞分泌TNF-α.结论:ASI能够促进小鼠T、B淋巴细胞的增殖和抗体生成,同时可以抑制腹腔巨噬细胞体外分泌IL-1和TNF-α.
作者：王燕平；李晓玉；宋纯青；胡之璧 刊期： 2002年第03期
目的:研究犬败血症急性呼吸窘迫综合征时吸入一氧化氮(NO)的药效和药代动力学特点.方法:12只成年犬静脉注射内毒素导致败血症性急性呼吸窘迫综合征,表现为PaO2/Fio2由基线水平(62.5±2.8)kPa下降为(26±4)kPa,动态顺应性(Cdyn)由(14.8±0.7)下降为(8.6±0.6)mL@kPa-1@kg-1.气道死腔由(0.14±0.06)增加到(0.58±0.05),肺内分流由4.7%±1.7%增加到39%±7%,肺血管阻力指数由(16±4)增加至(51±8)kPa@s@L-1@m-2(P＜0.05),并伴随大量白细胞肺内集聚和外周循环白细胞减少.动物随机分组给予单纯机械通气或机械通气加吸入NO0.4-3.2 μmol@L-1(10-80ppm)治疗10 h.结果:NO治疗组比对照组生存率高(4/6比0/6,P＜0.05).吸入NO迅速提高血氧分压,降低肺血管阻力,以0.8μmol@L-1(20 ppm)为理想浓度.吸入NO可降低细胞促炎症介质(rNFα,IL-8,CDllb)基因表达,且不对肺表面活性物质和肺液吸收产生不良影响.结论:吸入NO对于犬感染性急性肺损伤具有调节肺血管张力和抑制细胞炎症介质表达的双重作用,吸入高浓度NO可导致高铁血红蛋白血症.
作者：缪长虹；孙波；蒋豪；薛张纲；Robert LINDWALL 刊期： 2002年第03期
目的:研究一类高活性消旋化的雌激素受体调节剂与其受体间的相互作用机制.方法:分子力学优化的方法获得这类刚性的raloxifene类似物的活性构象,受体与配基间的相互作用能用分子对接程序计算.结果:化合物的R和S构型均可进入雌激素受体的结合腔.其羟基直接与受体氨基酸形成氢键,其酚环相当于雌激素的A环.活性好的配基带有两个羟基,并且模拟雌激素A环为含16位羟基的酚环的S构型化合物.结论:消旋化对该类化合物的活性影响不大.羟基对于化合物在活性口袋中的取向及与受体的结合有着重要意义.``
作者：郭宗儒；易翔；徐志斌 刊期： 2002年第03期
目的:研究P-糖蛋白(P-gp)抑制剂环胞素A(CsA)是否加强尼莫地平(NMD)对脑损害的保护作用.方法:(1)小鼠ip NMD或合用CsA后,分别记录断头小鼠的喘气持续时间和ip NaNO2后的小鼠生存时间;(2)大鼠ip NMD或合用CsA后,用双侧颈总动脉结扎加低血压模型造成前脑缺血20 min,再灌l h后,测定皮层中丙二醛(MDA)、乳酸(LA)浓度和乳酸脱氢酸(LDH)活性.(3)测定单用NMD和合用CsA后,脑内NMD的浓度.结果:NMD对三种药理模型均显示一定的药理活性.与单用NMD比较,合用CsA,使断头小鼠和ip NaNO2后小鼠生存时间显著延长.在脑缺血/再灌损伤模型大鼠中,与单用NMD比较,合用CsA后,皮层中MDA、LA和LDH水平显著改善.合用CsA使脑内NMD浓度显著增加.结论:P-gp抑制剂CsA可加强NMD对脑损害的保护作用.
作者：刘晓东；潘国宇；谢林；后媛媛；兰文；苏勍；刘国卿 刊期： 2002年第03期
目的:研究小剂量茶碱抗哮喘炎症的可能机制.方法:19名哮喘患者口服茶碱缓释片(200mg,bid)治疗4周,观察治疗前后症状积分和肺功能变化,并分别采用直接免疫荧光技术、瑞氏染色和ELISA法检测治疗前后高渗盐水诱导痰中CD4+T细胞、嗜酸性粒细胞(Eos)及IL-5和IFN-γ的变化.结果:茶碱治疗可使哮喘患者诱导痰中IL-5水平和Eos数量显著下降(P＜0.01),但CD4+T细胞数量和IFN-y水平无明显变化(P＞0.05);患者症状及肺功能明显改善,FEV1 0和FEV1 0%增加(P＜0.05).平均血浆茶碱浓度为7.9 mg/L(3.9-12.9 mg/L).结论:小剂量茶碱通过减少哮喘患者气道IL-5的产生而发挥抗炎作用.
作者：聂汉祥；杨炯；胡苏萍；吴小军 刊期： 2002年第03期
目的:研究雌二醇(17β-estradiol,E2)对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导牛主动脉内皮细胞(BAEC)凋亡的影响及机制.方法:BAEC培养并传代于DMEM.BAEC经Hoechst 33258染色后用荧光显微镜观察形态学变化及计数凋亡细胞;用MTT法测定细胞活性;用琼脂糖凝胶电泳分析DNA降解;用Westernblot法检测磷酸化p38和p44/42 CCDPK表达.结果:TNF-α诱导BAEC产生典型的凋亡细胞形态学变化(核浓染,核碎裂)和DNA断片.E2(0.1 pmol/L-100 nmol/L)能增强TNF-α诱导的磷酸化p44/42表达,同时抑制p38 CCDPK的活化而浓度依赖性阻止TNF-o诱导的BAEC凋亡;E2 1 nmol/L明显减弱TNF-α所致DNA断裂;p44/42 CCDPK抑制剂U0126可拮抗E2的作用.结论:雌激素通过激活p44/42CCDPK,同时抑制p38 CCDPK而产生的抗凋亡效应,是其使内皮细胞存活的重要机制.
作者：刘文兰；郭迅；郭兆贵 刊期： 2002年第03期
目的:测定人血浆中多潘立酮的浓度,并研究在中国志愿者中单剂量口服20 mg后的药物动力学过程.方法:用液-液萃取法提取血浆中药物.采用液相色谱-质谱联用分析手段,建立测定人血浆中多潘立酮浓度的分析方法.结果:多潘立酮在0.52-154.5μ/L浓度范围内线性良好(r=0.9999),其在人血浆中的回收率大于75%,低浓度(0.52 μg/L)的日内、日间差异分别为9.4%和7.6%.多潘立酮的血药浓度-经时曲线符合二房室模型,其主要药物动力学参数为:Tmax=(0.8±0.7)h,Cmax=(50±32)μ/L T1/2=(7.8±1.6)h.结论:本方法专属性强,灵敏度高,可准确测定多潘立酮在人血浆中的浓度.
作者：吴民淑；高凌；蔡晓辉；王广基 刊期： 2002年第03期
目的:研究雌二醇对离体和在体气管平滑肌收缩的作用.方法:(1)将家兔离体气管平滑肌条置于装有Krebs液的肌槽中温育,并通95%O2和5%CO2的混合气体.二导记录仪记录肌条的等长张力.(2)测量肌注雌二醇(1 mg/kg)前后乙酰胆碱和组胺引发豚鼠哮喘的潜伏期.结果:(1)雌二醇(100μmol/L)对乙酰胆碱和氯化钾诱发的收缩有明显的舒张作用(舒张百分比分别为39%±5%和45%±19%).其作用可被吲哚美辛和亚甲蓝部分阻断(26%±8%和28%±13%),但不能被L-NNA、心得安和去除上皮所影响(舒张百分比分别为38%±10%,40%±15%,37%±8%).雌二醇能使乙酰胆碱及氯化钙的量效曲线明显右移(pD2＇值分别为3.98和4.75).另外,雌二醇可明显抑制乙酰胆碱引起的第Ⅰ时相性收缩,对氯化钙引起的第Ⅱ时相性的收缩无明显影响.(2)肌注雌二醇(1 m/kg)可使豚鼠的引喘潜伏期明显延长.结论:(1)雌二醇对兔离体气管平滑肌的作用是非上皮依赖性的,与抑制电压依赖性钙通道和细胞内钙从内质网的释放有关,还部分与cGMP介导的松弛途径及刺激气道平滑肌释放前列腺素类物质有关,但与β-肾上腺素能受体介导的舒张无关.(2)雌二醇可明显舒张豚鼠在体气管平滑肌.
作者：庞锦江；徐向斌；李红芳；张小郁；郑天珍；瞿颂义 刊期： 2002年第03期
目的:探讨致敏大鼠抗原攻击后脑皮层和肺气道中干扰素-γ(IFN-γ)和白介素-4(IL-4)出现的相关性变化.方法:观察致敏大鼠吸入抗原诱导的支气管肺灌洗液(BALF)和肺组织切片炎症变化,用ELISA法测定BALF和脑皮层IFN-γ和IL-4水平变化.结果:抗原攻击组BALF中的炎症细胞数目明显高于对照未攻击组(P＜0.05).地塞米松(DXM,0.5mg/kg,ip)明显减少BALF中的白细胞总数,几乎完全抑制嗜酸性粒细胞(EOS)和淋巴细胞的聚集,但增加中性粒细胞数目.抗原攻击组的组织学检查积分(EOS浸润、粘膜水肿和上皮损伤)也明显高于对照未攻击组(P＜0.05).DXM(0.5 m/kg,ip)减少支气管和细支气管的EOS数目,改善粘膜水肿和上皮损伤.致敏大鼠抗原攻击后,BALF中的IFN-γ水平降低伴随IL-4升高导致了IFN-y/IL-4比例下降.与此同时,脑皮层匀浆中也出现相似的改变.DXM(0.5 mg/kg,ip)能反转BALF和脑皮层匀浆中的IFN-γ/IL-4比例下降.结论:致敏大鼠抗原攻击后脑皮层和肺气道中的IFN-γ和IL-4出现相关性变化.
作者：谢强敏；陈季强；沈文会；卞如濂 刊期： 2002年第03期
AIM: The present study examined whether or not theresistance to degradation of bradykinin analogs affects thekinin-potentiating action of the inhibitor of convertingenzyme, perindoprilat. METHODS: Hydrolysis of[ Hyp3, Tyr( Me)8 ]-bradykinin by ACE present in isolatedcanine coronary arteries was assessed by determination ofpeptide metabolites using electrospray mass spectrometry,and compared to that of bradykinin. Contractions andrelaxations of isolated rings of coronary arteries, with andwithout endothelium, were recorded as changes inisometric force. RESULTS: After a 30 min incuba-tion, most of the bradykinin was degraded by thearteries, while less than 10 % of [ Hyp3, Tyr ( Me)8 ]-bradykinin was hydrolysed. In organ chambers, [ Hyp3,Tyr(Me)8 ]-bradykinin like bradykinin caused relaxationsof isolated canine coronary arteries with endothelium thatcould be attributed to both NO and endothelium-derivedhyperppoladzing factor (EDHF). Perindoprilat caused acomparable leftward shift in the concentration-relaxationcurves for bradykinin and [ Hyp3, Tyr(Me )8 ]-bradykinin.CONCLUSION: Impairment of the degradation ofbradykinin is not an essential mechanism by whichperindoprilat potentiates the actions of kinins.``
作者： 刊期： 2002年第03期
中国药理学报（英文版）杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国药理学会和中科院上海药物研究所
