学术投稿

小鼠微小RNA miR-21真核表达载体构建及其在293细胞的活性表达

龙爽;粟永萍;任泂;孙慧勤;王涛

关键词:miRNAs, miR-21, 真核表达载体, 293细胞
摘要:目的:构建小鼠微小RNA miR-21的真核表达载体,在人胚肾293细胞中验证其活性表达,为进一步以此载体研究miR-21的功能打下基础。方法根据小鼠miR-21的成熟序列及其上下游约170 bp的序列设计引物,利用PCR技术从小鼠基因组DNA扩增含有miR-21前体的片段382 bp,克隆到质粒pRc/CMV,对重组质粒经双酶切及测序分析,鉴定完全正确后转染人胚肾293细胞,G418(1000 mg/L)筛选后获得miR-21稳定表达细胞系, Northern blot验证其在293细胞的过表达;同时构建pmiR-21-Luc reporter荧光素酶报告质粒,与miR-21重组质粒共转染293细胞进行荧光素酶活性分析,验证其调控活性。结果成功构建小鼠miR-21的真核表达载体,其可以在293细胞中稳定高效表达,荧光素酶活性实验证实其有生物活性。结论成功构建小鼠miR-21的真核表达载体,为进一步探讨miR-21的生物学功能奠定了实验基础。
局解手术学杂志相关文献
  • 经口入路寰枢椎脱位围手术期的护理干预

    枢椎脱位是常见的上颈椎疾患,由于寰枢椎正对口咽后方,手术入路仅能通过经口方式来进行[1]。口腔为有菌环境,为Ⅱ类手术切口。因此,围手术期的护理尤其重要,我科对采用经口入路行寰枢椎脱位的患者进行围手术期的护理干预,取得了满意疗效,现将护理体会总结如下。

    作者:吴新军;侯天勇;徐耀琴;方青 刊期: 2014年第02期

  • 子宫动脉栓塞术治疗早期宫角妊娠的临床疗效观察

    宫角妊娠( cornual pregnancy,CP)是指受精卵在靠近子宫与输卵管开口交界处的宫角部着床并生长发育,因孕囊周围血运非常丰富且包绕的肌层较薄,一旦发生破裂,易引起失血性休克[1]。宫角妊娠采用保守治疗效果并不确切,而手术治疗风险较高,甚至使患者丧失生育能力,不易被患者接受[2]。子宫动脉栓塞术(uterine artery embolization,UAE)因可有效阻止产科出血而被越来越多地应用于治疗宫角妊娠。本文回顾性分析22例行子宫动脉栓塞术并灌注甲氨喋呤治疗未破裂的早期宫角妊娠患者病例疗效,现报告如下。

    作者:刘建梅;朱静;程湘;杨鹰 刊期: 2014年第02期

  • 超声引导置管灌洗引流在重症胰腺炎手术中的应用

    目的:探讨超声引导置管灌洗引流在重症胰腺炎手术中的应用效果。方法2009年1月至2013年3月我院收治60例重症胰腺炎患者,按治疗方法分为实验组30例和对照组30例,对照组采用常规方法对患者进行治疗,实验组在常规治疗的基础上加用超声引导置管灌洗引流。对比分析2组患者住院时间、临床检查指标及治疗效果。结果实验组患者住院时间明显短于对照组(P<0.05),实验组患者体温、心率明显明显低于对照组(P<0.05),实验组患者白细胞量、血淀粉酶及尿淀粉酶量明显低于对照组(P <0.01),2组比较有显著性差异。实验组治疗总有效率为93.3%,对照组为66.7%,2组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论超声引导置管灌洗引流在重症胰腺炎手术患者中应用效果良好,值得临床应用。

    作者:杨超;刘海华;沙娜 刊期: 2014年第02期

  • 血液细胞形态学检查对提高临床诊断的意义

    细胞形态学是临床检验中技术较高的一门科学,与病理学检查相同,具有很高的诊断价值,尤其对血液疾病的诊断是不可缺少的重要检查方法。本文回顾性分析我院2012年1月至2013年5月收治的28例血液病患者的血液和骨髓涂片的血液细胞形态学检验结果,探讨血液细胞形态学检查对提高临床诊断的意义,现报告如下。

    作者:李妮 刊期: 2014年第02期

  • 不同手术方法治疗腋臭临床疗效分析

    目的:观察不同手术术式治疗腋臭的临床疗效,探讨和寻求疗效佳的手术方法。方法对我院2011年1月至2013年7月收治的200例腋臭患者的临床资料进行回顾性分析,观察不同手术方法的远期疗效。手术方法分为传统腋臭切除术、微创刮除术、射频笔触式电针烧灼术和改良式切刮术,对观察数据进行统计学分析。结果传统切除术80例,手术切口平均愈合时间为18.7 d,远期疗效治愈78例(97.5%),显效2例(2.5%)。微创刮除术60例中,切口平均愈合时间为8.6 d;远期疗效治愈3例(5.0%),显效8例(13.3%),好转16例(26.7%),弱效4例(6.7%),无效29例(48.3%)。射频笔触式电针烧灼术30例,显效5例(16.7%),好转8例(26.7%),无效17例(56.6%)。改良式切刮术30例,伤口平均愈合时间为9.8 d,远期疗效治愈28例(93.3%),显效2例(6.7%)。结论传统切除术疗效好,但是伤口瘢痕大,恢复期长;微创刮除术和射频笔触式电针烧灼术恢复快,但是复发率高;改良式刮除术吸收了传统和微创手术的优点,恢复快,疗效肯定,缺点是伤口瘢痕较大,但是总体疗效令人满意,可以作为治疗腋臭的首选手术方法。

    作者:张丽康;孟镔;王立宇;孟迪生;陆军;范华贵;樊佳慧;高陆碧柔;朱江锋 刊期: 2014年第02期

  • 选择性开窗减压术对高龄患者多节段腰椎管狭窄症的疗效研究

    目的:对选择性开窗减压手术治疗80岁以上高龄患者多节段腰椎管狭窄症的疗效进行评价。方法手术采用后正中入路,术前根据患者症状、查体与影像学检查准确定位病灶,进行选择性开窗减压手术治疗;采用JOA评分法评价手术疗效。结果于术后近期(6个月内)对患者进行随访,随访患者52名,应答率100%。于术后中期(24~36个月)对患者进行随访,随访患者47名,应答率90.4%,平均随访时间30.4个月。 JOA术前评分为(6.93±0.52)分,术后近期JOA评分为(11.98±0.72)分,其中40例(76.9%)达到优,10例(19.2%)达到良,2例(3.9%)达到可,优良比例达到96.1%。术后中期JOA评分(12.06±0.46)分,其中36例(76.6%)达到优,10例(21.3%)良,1例(2.1%)可,优良比例达到97.9%。术后近、中期JOA评分与治疗前JOA评分比较,差异具有统计学意义(P<0.01),术后近、中期JOA评分之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论选择性开窗减压术具有创伤小、恢复时间短等特点,在LSS高龄患病者这一群体中的疗效满意,是适合这一群体的治疗方法。

    作者:全必春;余建民;肖启平;欧军 刊期: 2014年第02期

  • 有晶体眼后房型人工晶体植入术早期并发症观察及其处理

    目的:观察有晶体眼后房型人工晶体( ICL)植入治疗高度近视早期的并发症及处理情况,并探讨其原因。方法观察在我院行ICL/TICL植入术的患者46例(92眼),在虹膜周切手术和ICL植入手术中及术后半年出现的并发症,记录并发症处理方法以及处理后的情况。结果无1例瞳孔阻滞性青光眼发生,术前虹膜周切后有8眼眼压升高,ICL植入术后有7眼眼压升高,均未超过28 mmHg,未做特殊处理;术前 YAG 激光虹膜周切组虹膜出血及色素播散的发生率明显高于手术虹膜周切组(P<0.05),术中晶体损伤2眼,1眼行透明晶体摘除及人工晶体植入;术后TICL旋转2眼,术后视觉干扰主要表现阴影及眩光各1例,术后视觉心理改变1例。结论 ICL植入治疗高度近视早期并发症少,基本可预防和控制,术后患者满意度极高,该手术方式值得大力推广。

    作者:吴燕;罗涛;蒋炜;邱敏 刊期: 2014年第02期

  • 循证医学与外科手术学教学

    循证医学(evidence based medicine,EBM)提倡将临床医师个人的临床实践和经验与客观的科学研究证据结合起来,将正确的诊断、安全有效的治疗和精确的预后估计服务于每位具体患者[1]。外科手术学教学是培养外科医学的重要基础课程,在外科学教学中引入循证医学理念,时时刻刻以患者的身心健康为本,选择佳的手术方式,是现代外科学发展的必然趋势。

    作者:马翔宇;许斌;熊鸿燕;李亚斐 刊期: 2014年第02期

  • 影响小儿脊髓栓系综合征手术疗效的相关因素分析

    目的:探讨影响小儿脊髓栓系综合征手术疗效的相关因素。方法回顾性分析2007年1月1日至2009年12月31日我院43例脊髓栓系综合征患儿术前及术后的症状程度,对患儿的手术疗效做出评估。并通过Cox比例风险模型对影响小儿脊髓栓系综合征手术疗效的相关因素进行分析。结果43例脊髓栓系综合征患儿28例手术治疗有效,手术总有效率为65.12%。Cox回归模型分析显示有无终丝紧张(P<0.05)、手术方式(P<0.05)及发病时间(P<0.05)是影响小儿脊髓栓系综合征手术疗效的的独立危险因素(P<0.05)。结论小儿脊髓栓系综合征手术疗效受到有无终丝紧张、手术方式及发病时间的影响。

    作者:符松;王苏明;刘兴存;廖霓;张第 刊期: 2014年第02期

  • 改良法治疗心上型完全性肺静脉异位引流

    目的:总结心上径路吻合法的经验,探讨治疗心上型完全性肺静脉异位引流( TAPVC)的佳手术方法。方法2000年1月至2008年4月四川大学华西医学中心共收治完全性肺静脉异位引流(心上型)52例,其中男35例,女17例,年龄1个月至41岁,体质量3.1~77 kg,全部采用心上径路吻合法进行手术。结果1例死亡,51例痊愈出院,术后无出现吻合口狭窄和心律失常的发生,45例患者参加随访,随访时间3个月至12年,心功能均正常。结论采用心上径路吻合法治疗心上型TAPVD可减少心律失常的发生,是治疗TAPVC(心上型)较好的手术方法。

    作者:李炜;周艳荣;陈柏成;陈林;肖颖彬;安琪 刊期: 2014年第02期

  • 运动训练治疗大鼠脊髓损伤的Meta分析

    目的:采用Meta分析评价运动训练对脊髓损伤大鼠的康复疗效。方法计算机检索PubMed(~2013),中国期刊全文数据库(CNKI,1989~2013)、万方数据知识服务平台、维普中文科技期刊全文数据库( VIP,1989~2013),全面收集有关脊髓损伤大鼠运动训练的相关文献。按照Jadad量表评价纳入研究文献质量,提取有效数据。采用RevMan 5.0软件进行Meta分析。结果共检索国内外文献287篇,经过排查,纳入文献11篇。 BBB评分Meta分析结果显示:运动训练组的恢复情况明显优于不训练组, BBB评分[加权均数差(WMD)=1.87,95%CI(1.50,2.33),Z=10.02,P<0.00],2组比较差异显著。结论对脊髓损伤的大鼠进行康复训练有助于大鼠运动功能的恢复。

    作者:黄志翾;饶莹;曾茜;周旭旭;林晓莹;梁楠;张晓 刊期: 2014年第02期

  • 醋酸曲安奈德局部注射联合手术切除治疗耳部瘢痕疙瘩

    目的:总结注射醋酸曲安奈德控制瘢痕疙瘩生长后联合手术切除耳垂瘢痕疙瘩的临床经验。方法采用耳垂瘢痕疙瘩局部注射醋酸曲安奈德治疗3~4次后,手术切除耳垂瘢痕疙瘩,术中保留部分瘢痕疙瘩边缘皮肤并行无张力缝合,术后观察6~24个月。结果本组31只耳手术切口全部一期愈合,随访6~24个月,26只耳治愈,4只耳有效,1只耳无效,有效治愈率约96.8%。结论醋酸曲安奈德局部注射后手术切除能有效治疗耳部瘢痕疙瘩。

    作者:卢昊;雷泽源;刘婷;毛彤春;陈宇;李翔;樊东力 刊期: 2014年第02期

  • 智能手机应用于外科手术学基础教学的体会

    个人电脑和手机成为现代人获取资讯及沟通交流必不可少的工具,近年来有关厂商将掌上电脑的功能整合到手机中,出现了智能手机( Smart Phone)的概念。智能手机是指“像个人电脑一样,具有独立的操作系统,可以由用户自行安装软件、游戏等第三方服务商提供的程序,通过此类程序来不断对手机的功能进行扩充,并可以通过移动通讯网络来实现无线网络接入的这样一类手机的总称”[1]。智能手机在高校学生中有着很高的普及率,以带教的小班为例,17名学生中有16名使用智能手机,其中绝大多数学生经常使用QQ、微信、拍照、录像等功能。智能手机正在深刻地改变着人们的生活,如何将智能手机带来的便利应用于教学实践,是非常值得高校教师关注的问题。

    作者:郭洪峰;杨波;李香凝;文灿 刊期: 2014年第02期

  • 介入治疗布加综合征32例临床分析

    目的:探讨介入治疗在布加综合征患者中的应用效果。方法采用彩色多普勒超声与DSA联合引导下介入治疗布加综合征患者32例,探讨其临床效果。结果手术成功率为90.6%(29/32),其中置入下腔静脉支架11枚。术中均未发生肺动脉栓塞等严重并发症,无术中死亡病例。术后并发症发生率为12.5%(4/32),其中急性肾功能衰竭1例,经治疗无效死亡;急性心功能衰竭2例,经抗心力衰竭治疗后症状明显好转;另有1例患者于肝静脉破膜、扩张后当天出现血性腹水,予止血、抗感染治疗后好转。随访期间复发率为9.7%(3/31)。结论介入治疗在布加综合征患者中能够以较小的创伤、较快的恢复速度取得较为理想的治疗效果,目前已逐渐成为该病治疗的首选方法。

    作者:崔健 刊期: 2014年第02期

  • 可吸收螺钉治疗四肢骨关节骨折临床疗效观察

    目的:探讨可吸收螺钉治疗四肢骨关节骨折的临床疗效。方法2009年5月至2011年5月我院收治86例四肢骨关节骨折患者,按手术方式分为观察组和对照组,观察组采用可吸收螺钉手术治疗,对照组使用传统方法治疗,观察2组患者治疗后临床疗效、二次手术比例、不良反应等相关情况。结果对照组治疗的优良率为56.3%,观察组治疗的优良率为96.3%,观察组明显好于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组骨折愈合时间、二次手术比例和不良反应均明显低于对照组(P<0.05)。结论可吸收螺钉治疗四肢骨关节骨折临床疗效显著,安全性较高,提高了患者生活质量。

    作者:颜端国;李茂贵;楼杨勇;冯江;胡炜炜 刊期: 2014年第02期

  • 青少年颈椎钩突-横突孔间距的增龄变化及临床意义

    目的:通过对6~20岁青少年颈椎钩突的影像学扫描和三维重建,探讨钩突-横突孔间距的发育规律和增龄特征,为青少年颈椎病的诊治和预防提供影像解剖学依据。方法选取无外伤、神经症状和体征的青少年66例,行多排螺旋CT薄层扫描(0.625~1.25 mm),范围C1~T1,将原始数据以DICOM格式导入三维重建软件进行相关指标测量,并按性别、年龄分组进行统计分析。结果颈椎钩突-横突孔间距在性别与侧别间均无显著性差异,发育总体随着年龄和椎序的增长呈递增趋势,且存在显著统计学差异。结论颈椎钩突-横突孔间距与椎动脉型、神经根型等颈椎病的发病率有着密切相关。

    作者:王星;王威;史君;张少杰;张志峰;李志军;张元智 刊期: 2014年第02期

  • 胃癌根治术后患者疼痛的护理干预

    胃癌根治术是治疗进展期胃癌的主要方法,该手术创伤大,术后胃肠道功能恢复慢,术后疼痛严重影响着患者的生理和心理健康。科学合理的护理有助于缓解患者的疼痛,减少并发症的发生,提高患者的生活质量[1-4]。2011年6月至2013年5月我们对本院128例胃癌根治术后患者进行了个体化疼痛护理干预,效果显著,现报告如下。

    作者:易秋岑;周骏;黄海英 刊期: 2014年第02期

  • 小剂量长托宁在无痛肠镜中的应用

    目的:探讨在无痛肠镜检查麻醉前给予小剂量长托宁(盐酸戊乙奎醚)治疗的应用价值。方法我院2012年7月至2013年1月接受无痛肠镜检查患者90例,将其随机分为3组,每组30例,分别于麻醉前给予小剂量长托宁静注(小剂量组)、常规剂量长托宁静注(常规剂量组)及阿托品静脉注射(阿托品组),观察3组患者的下镜顺利程度、检查前后心率和平均动脉压及术后不良反应情况。结果3组患者的总下镜顺利率和血氧饱和度比较未见明显差异,小剂量组在检查前后心率及平均动脉压方面作用明显优于常规剂量组及阿托品组,且小剂量组术后不良反应发生率明显低于常规剂量组及阿托品组。结论无痛肠镜检查麻醉前给予小剂量长托宁可明显提高检查效果,且可降低术后不良反应发生率。

    作者:林承雄;李少波 刊期: 2014年第02期

  • 脂质体紫杉醇联合顺铂对晚期宫颈癌术前化疗的疗效观察

    目的:探讨脂质体紫杉醇联合顺铂用于治疗局部晚期宫颈癌患者的临床疗效和不良反应。方法选择2005年5月至2009年5月我院收治的局部晚期宫颈癌患者78例,按就诊顺序将患者分为顺铂联合5-氟尿嘧啶组( PF组,39例)和脂质体紫杉醇联合顺铂组( Taoxl组,39例)。 PF组患者采用顺铂联合5-氟尿嘧啶化疗方案,Taxol组患者采用脂质体紫杉醇联合顺铂化疗方案。2组患者化疗后均全麻下行广泛子宫切除术和盆腔淋巴结清扫术,评价并比较2组患者的临床疗效、不良反应和术后3年生存率。结果 PF组患者不良反应主要为消化道反应、口腔黏膜炎和骨髓抑制,Taxol组患者的不良反应主要有骨髓抑制、口腔黏膜炎和肾脏毒性。 Taxol组患者的化疗后完全缓解率30.77%,高于PF组的10.26%(χ2=5.032,P=0.025)。 Taxol组和PF组患者平均生存时间分别是33.5个月和34.7个月,3年生存率分别为59.6%和70.2%,差异无统计学意义(χ2=1.859,P=0.173)。结论2种化疗方案患者不良反应差别较大,脂质体紫杉醇联合顺铂化疗方案临床疗效优于顺铂联合5-Fu化疗方案。

    作者:肖正华;张晓静;林英;罗堂淑 刊期: 2014年第02期

  • 从结肠镜双人操作法到单人操作法技术转变的培训

    在结肠镜检查中,掌握一种快速、安全的结肠镜检查方法,是完善和发展大肠疾病诊疗工作的基本前提。目前,结肠镜检查的插入方法分为双人操作法和单人操作法,其中单人操作法在国际上已成为结肠镜插入法的主流趋势[1-2]。我院在国内开展单人操作法已十余年,并在西部地区多家医院通过进修医师培训进行了技术推广,培训中的一个难点是从结肠镜双人操作法到单人操作法的技术转变,现就相关问题报告如下。

    作者:甘涛;吴俊超;杨锦林;王一平 刊期: 2014年第02期

局解手术学杂志

局解手术学杂志

主管:重庆市科学技术协会

主办:重庆市解剖学会,第三军医大学